大鼠心肌细胞内游离钙的Fura-2荧光测定

Fura-2的化学名为2-[6-双乙酸基-5-（2-双乙酸氨基）-5-甲苯氧乙氧基]-2-苯骈呋喃基-5-恶唑羧酸五钾盐。属于第二代荧光指示剂,是测定细胞内游离钙的重要试剂。用Ca^2＋荧光指示剂Fura-2检测活细胞胞浆中[Ca^2＋]i是十几年来兴起的一门技术,已广泛应用于细胞生理、病理的研究,已有文献报道应用于测定细胞、组织块等内的游离钙。     

钙指示剂Fura－2／AM对血小板功能及细胞内游离钙测定结果的影响

本实验结果表明，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载家兔洗脱血小板，当Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的浓度低于２μｍｏｌ／Ｌ时，３μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ花生四稀酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集（透光度增加：７２．５±７．８４％）及释放反应（ＡＴＰ释放：１．１２±０．２１μｍｏｌ／４×１０５血小板）不受影响，但随Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度增加，ＡＡ的聚集和释放反应明显减弱（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度对单一血小板内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的静息水平无影响，但Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为２μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＡ诱导的［Ｃａ２＋］ｉ动员最明显。另外，标本中血小板的数量也明显影响［Ｃａ２＋］ｉ的测定结果（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度过高，很可能导致过多的钙离子被螯合，降低了血小板的功能，同时，细胞内游离钙与Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的结合过程存在着饱和性。     

用Fura-2测定周围血单个核细胞内游离钙浓度

本文用Fura-2测定了周围血单个核细胞内游离钙浓度，并对有关实验条件进行了探讨。对比研究表明，血标本在4℃保存4小时对测定结果无显著影响，测定标本中单个核细胞数以10~5～10~6/ml为宜。认为测定单个核细胞内游离钙浓度对判断单个核细胞的功能状况有一定帮助。     

安定对胎鼠脑细胞内钙的影响

目的研究安定在中枢神经系统的钙拮抗作用.方法采用钙敏感的荧光探针Fura-2技术测定细胞内钙及变化.结果在不同外钙(0 mmol/L,0.01 mmol/L,0.10 mmol/L,1.00mmol/L,1.30 mmol/L)条件下,细胞内钙离子浓度(简写[Ca2+]i)分别为(41±6)mmol/L,(59±6.85)mmol/L,(85±2)mmol/L,(104±8)mmol/L,(126±5)mmol/.安定0.4 mmol/L对细胞内钙没有显著影响.但安定(0.1 mmol/L～1.0 mmol/L)能浓度依赖性地抑制高钾及L-谷氨酸诱发的[Ca2+]i增高的作用(外钙1.3 mmol/L).其50%抑制率(IC50)分别为0.649 mmol/L(95%可信度为0.224 mmol/L～2.152 mmo[/L)及0.440 mmol/L(95%可信度为0.305 mmol/L～0.635 mmol/L).结论安定通过阻滞电压依从性钙通道及受体操纵性钙通道,在中枢神经系统具有较强的钙拮抗作用.     

应用Fura-2/AM作血小板胞浆游离钙浓度检测的方法学探讨

本文对应用荧光染料Fura－2／AM（国产）测定血小板胞浆游离钙浓度的某些实验条件进行了探讨，结果表明；实验最适pH范围为7．35－7．45。实验不受溶血、黄疸及高酯血样品的干扰。批内C．V；4．98％，批间CV：5．6％。正常成人参考值为167．75±20．66nmol／L。与使用进口Fura－2／AM（Sigrna公司生产）检测结果比较，结果无统计学差异，相关系数：r－0．98。     

家兔急性完全性脑缺血及再灌注后山莨菪碱对脑组织[Ca2+]i和超微结构变化的影响

采用家兔急性完全性脑缺血及再灌注损伤模型,观察山莨菪碱对脑组织[Ca2+]i和超微结构变化的影响.结果发现缺血组及缺血再灌注组脑组织[Ca2+]i明显升高(P＜0.01),而且缺血再灌注组明显高于缺血组(P＜0.01),脑组织超微结构损伤明显加重;山莨菪碱治疗组脑组织[Ca2+]i较缺血组及缺血再灌注组明显降低(P＜0.01),脑组织超微结构损伤亦明显减轻.提示山莨菪碱可能通过Ca2+拮抗及膜稳定作用对全脑缺血及再灌注损伤有保护作用.