产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药基因分析

目的 了解邢台地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的分子流行病学特点,为临床感染预防和治疗提供依据.方法 采用最小抑菌浓度(MIC)法检测产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性,选取13种特异性引物采用聚合酶链反应(PCR)的方法检测产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因类型.结果 2013年1月至2014年3月从邢台人民医院分离出的125株非重复的产ESBLs肺炎克雷伯菌菌株,耐药基因以blaCTX-M的阳性率最高,为92.0％,blaSHV和blaTEM次之,为82.9％和73.2％.所有菌株均携带1种或1种以上的耐药基因.结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌多重耐药现象严重,耐药基因以blaCTX-M、blaSHV和blaTEM为主.医院应加强对ESBLs的监测,降低ESBLs的感染率以及耐药基因的突变,提高治疗感染的效率,防止医院感染的发生.     

儿科产超广谱β-内酰胺酶志贺菌的基因型和耐药性研究

目的 探讨儿科临床分离志贺菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型及其耐药特点.方法 收集2004年1月至2008年12月北京儿童医院细菌性痢疾住院患儿粪便标本中分离出志贺菌共59株,按照美国临床和实验室标准协会推荐的表型确证试验检测ESBLs,用琼脂稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)测定,对产ESBLs菌株进行PCR扩增明确其基因型,对扩增产物进行DNA序列分析确定基因亚型.结果 59株志贺菌中共检出产ESBLs者21株,占35.6%.21株产ESBLs志贺菌PCR均扩增到CTX-M型ESBLs,包括CTX-M-1型6株,CTX-M-9型15株,其中有4株同时伴有TEM型酶,6株伴有OXA型酶.DNA序列分析证实6株CTX-M-1型分别为CTX-M-3亚型(1株)、CTX-M-15亚型(2株)、CTX-M-57亚型(3株),15株CTX-M-9型均为CTX-M-14亚型,伴随存在的TEM型及OXA型耐药基因分别为TEM-1型广谱酶、OXA-1型广谱酶.药敏结果显示对产ESBLs菌株敏感性较好的抗生素有亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和头孢西丁,其耐药率均小于15%.产不同CTX-M基因亚型的菌株对头孢他啶的耐药性不同.结论 本地区儿科分离志贺菌产ESBLs阳性率高,均为CTX-M型,其中以CTX-M-14亚型为主,少部分为CTX-M-3、CTX-M-15和CTX-M-57亚型.大部分产ESBLs菌株呈多重耐药,碳青霉烯类抗生素应作为治疗产ESBLs志贺菌的首选.     

浙江省产超广谱β-内酰胺酶菌株SHV型β-内酰胺酶分布

随着三代头孢菌素如头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松和单环酰胺类抗生素在临床上的广泛使用 ,超广谱 β 内酰胺酶 (ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ β ｌａｃｔａｍａｓｅｓ ,ＥＳＢＬｓ)在革兰阴性杆菌中产生率不断增加 ,ＥＳＢＬｓ种类也不断增加 ,至 2 0 0 0年 6月 ,已发现近 10 0种ＥＳＢＬｓ亚型〔1〕,其中ＴＥＭ型有 6 7种 ,ＳＨＶ型有 2 4种 ,非ＴＥＭ非ＳＨＶ型有 2 0多种。ＴＥＭ和ＳＨＶ型分别由广谱酶ＴＥＭ 1、ＴＥＭ 2和ＳＨＶ 1编码基因中 1～ 5个位点发生点突变而来。各国各地区流行的ＥＳＢＬｓ亚型各不相同〔2〕。我们对…     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的研究

目的 :了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌中CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。方法 :对 2 0 0 1年 1 0月～ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 30株产ESBLs大肠埃希菌采用琼脂平皿对倍稀释法和PCR方法进行耐药表型和 β 内酰胺酶基因型分析 ;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ;用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌同源性。结果 :1 3株菌携带CTX M基因 ,CTX M酶亚型为CTX M 3和CTX M 1 4。产CTX M酶菌株对第三代头孢菌素耐药率高 ,对头孢噻肟…     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌药物敏感性和基因型研究

【摘要】 目的 研究产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌基因型和药敏特征。方法 对2003年12月～2004年12月哈尔滨地区临床分离的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌，测定菌株对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性，并采用SHV型和TEM型特异性引物检测ESBLs的基因型别。结果 产ESBLs细菌对头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的敏感率依次71.6%、20.3%、54.1%、31.1%，对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率为54.1%，69株（93.2%）对亚氨培南敏感。74株产ESBLs细菌中携带blaSHV和blaTEM基因的阳性例数分别是45（60.8%）和23（31.1%）。结论 本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性降低，临床上需慎用酶抑制剂复合物及第四代头孢菌素，亚氨培南仍是治疗产ESBLs菌感染的首选药物。产ESBLs肺炎克雷伯菌blaSHV的流行频率高于blaTEM。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性分析

目的:探讨产ESBLs菌的发生率、耐药特点,为临床治疗提供参考。方法:采用微量肉汤稀释法对139株大肠埃希菌、64株肺炎克雷伯菌和17株产酸克雷伯菌做药敏试验,同时用纸片扩散法确证产ESBLs菌。结果:产ESBLs菌的检出率分别为:大肠埃希菌41.7%(2007年)和46.8%(2008年);肺炎克雷伯菌25%(2007年)和52.3%(2008年);产酸克雷伯菌66.7%(2007年)和50%(2008年),产ESBLs菌耐药率普遍高于非产ESBLs菌(P<0.01或P<0.05)。结论:常规检测和监测产ESBLs菌十分必要,这对指导临床合理用药、有效控制感染的传播意义重大。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的分析

对我院 2 0 0 1年 10月～ 2 0 0 2年 5月临床分离的 30株非重复的产ESBLs大肠埃希菌进行检测 ,了解CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。采用琼脂平皿对倍稀释法进行耐药表型检测 ,抗菌药物为头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢哌酮 舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星和阿米卡星。采用PCR方法进行 β 内酰胺酶基因型分析 ,对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ,用PFGE分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌的同源性。琼脂糖电泳结果表明 30株产ESBLs大肠埃希菌中有 13株携带CTX M基…     

检测产超广谱β-内酰胺酶菌株方法的探讨

目的 寻找一种敏感、特异、简单和经济的检测超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）方法。方法 采用抑制剂增强的肉汤稀释法（IPBDT）检测68株临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和10株标准产酶大肠埃希菌,并以此检测结果为标准,比较双纸片法（DDT）、浓度梯度法（E－test）和Vitek法的检测结果。对DDT和IPBDT检测结果不符合细菌进行β－内酰胺酶基因分型。结果 与IPBDT结果相比,DDT、E－test、Vitek法的特异度均较高,而灵敏度分别为96.4%、70.4%和75.9%。5株不符合细菌中,3株产TEM－1型β－内酰胺酶,另2株细菌产非TEM、SHV型β－内酰胺酶。结论 双纸片法是一种较好的超广谱β－内酰胺酶检测方法,可在临床实验室中推广使用。     

肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性研究进展

肠杆菌科细菌是临床感染,尤其是医院内感染的常见致病菌,产生β-内酰胺酶是其耐β-内酰胺类抗菌药物的主要机制。近十余年该科细菌中不同种属、特别是克雷伯菌属,大肠埃希菌产生的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),能水解第三代头孢菌素及氨曲南,且常为多重耐药株,已引起临床注意。 根据ESBLs对β-内酰胺酶抑制剂的稳定性分为对β-内酰胺酶抑制剂敏感的ESBL和对其耐药的IRESB两大类,根据其衍生来源分为TEM、SHV型及非TEM、SHV型,ESBLs酶蛋白表型已近70种,几乎都由耐药质粒介导,耐药性极易传播。通过NCCLs推     

产超广谱β-内酰胺酶细菌感染及耐药率的分析

目的提高医务人员对超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌感染的认识,指导临床合理使用抗菌用药。方法对本院2004～2006年间分离出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和不动杆菌进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测,比较每年发生率并对其做药物敏感试验。结果产ESBLs大肠埃希菌每年发生率分别为18.2%、23.5%、27.7%,产ESBLs肺炎克雷伯菌每年发生率为15.8%、20.3%、26.9%,产ESBLs不动杆菌每年发生率为14.6%、20.1%、28.1%。三种细菌对氨苄西林、哌拉西林及头孢菌素类耐药率约为72～100%。结论产ESBLs菌的发生率与耐药率呈逐年上升趋势,这与临床大量使用三代头孢类抗生素及不合理使用抗菌药物有关,同时ESBLs细菌对一些抗菌药物耐药率也不断提高,应引起临床治疗方面的足够重视。     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的　了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的情况及其耐药特点 .方法　对 2 0 2株肺炎克雷伯菌和 134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定 ,纸片扩散法进行常规药敏试验 ,按照NCCLS的标准判读结果 .结果　对 336株儿童患者感染菌株试验 ,共检测出 81株ES BLs菌株 ,ESBLs总产生率为 2 4 .1% ;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为 2 9.7% ,大肠埃希菌产ESBLs率为 15 .7% .产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株 (t=6 .6 0 3,p <0 .0 1) ,对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药 ,对复方新诺明、氨苄西林 /舒巴坦的耐药率也较高 (耐药率高于 6 0 % ) ,且多为多重耐药株 ,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦敏感率较高 (耐药率低于 30 % ) ;所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为 0 .结论　儿童感染细菌ESBLs发生率相当高 ,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌 ,耐药高且多重耐药情况严重 ,治疗较困难 ,需加强ESBLs检测 ,以合理使用抗生素 ,延缓和防止ESBLs的发生和播散     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点.方法对202株肺炎克雷伯菌和134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定,纸片扩散法进行常规药敏试验,按照NCCLS的标准判读结果.结果对336株儿童患者感染菌株试验,共检测出81株ESBLs菌株,ESBLs总产生率为24.1%;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为29.7%,大肠埃希菌产ESBLs率为15.7%.产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株(t＝6.603,p<0.01),对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药,对复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率也较高(耐药率高于60%),且多为多重耐药株,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高(耐药率低于30%);所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为0.结论儿童感染细菌ESBLs发生率相当高,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌,耐药高且多重耐药情况严重,治疗较困难,需加强ESBLs检测,以合理使用抗生素,延缓和防止ESBLs的发生和播散.     

大肠埃希菌的耐药特性及其产超广谱β-内酰胺酶的分析

观察大肠埃希菌的耐药特性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况，为临床正确选择抗生素提供药敏依据。用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，用ESBLs表型确证试验检测出产ESBLs的大肠埃希菌。共检出314株大肠埃希菌。对其中298株大肠埃希菌进行了ESBLs检验，检出产ESBLs菌81株，检出率为27．2％；81株产ESBLs菌对多种药物耐药率较高，除亚胺培南、头孢哌酮，舒巴坦、庆大霉素和阿米卡星外，大肠埃希菌产ESBLs株对其他9种抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs株。大肠埃希菌产ESBLs率高，应引起临床高度重视，对检测出的大肠埃希菌均应进行ESBLs检测，产ESBLs细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性，对亚胺培南和头孢哌酮，舒巴坦的敏感性好。     

产超广谱β—内酰胺酶菌表型和TEM基因型配对检测的研究

对临床分离的13株产超广谱β-内酰胺酶菌进行表型和TEM基因型配对检测的研究。结果发现该13株菌对氨苄西林,头孢噻吩,头孢唑啉,头孢呋新均表现为耐药;部分菌对头孢他啶,头孢噻肟和氨基糖苷类,环丙沙星表现为耐药,但该13株菌对亚胺培南均表现为敏感。13株菌经TEM基因套式PCR检测均呈阳性,表明该13株菌至少存在TEM型质粒,该13株菌TEM亚型分型和是否同时存在SHV型质粒等仍在研究中。     

超广谱β-内酰胺酶基因分型的初步研究

按质粒所携带编码基因同源性的不同 ,将超广谱 β 内酰胺酶 (Ｅｘｔｅｎｄｅｄｓｐｅｃ ｔｒｕｍ β ｌａｃｔａｍａｓｅｓ,ＥＳＢＬｓ)分为 4类 ,即ＴＥＭ型、ＳＨＶ型、ＴＥＭ ＳＨＶ混合型和非ＴＥＭ 非ＳＨＶ型 (包括ＰＥＲ、ＴＯＨＯ、ＣＴＸ Ｍ、ＯＸＡ型等 )。本文报告绍兴地区产ＥＳＢＬｓ细菌基因分型的初步结果。临床标本分离、并经纸片扩散法确证为产ＥＳＢＬｓ的细菌 42株 (其中大肠埃希菌 2 6株 ,肺炎克雷伯菌 16株 )。用ＰＣＲ进行酶基因分型。ＰＣＲ扩增引物 ,根据ＴＥＭ 1和ＳＨＶ 1编码基因序列设计 ,ＴＥＭ引物序列分别为…     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌临床分离株药敏分析

目的了解郑州地区临床分离大肠埃希氏菌产超广谱β-内酰胺酶情况和耐药特征。方法双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),琼脂二倍稀释法对大肠埃希氏菌进行MIC检测。结果产ESBLs大肠埃希氏菌检出率为57.4%,产ESBLs菌株多数呈多重耐药,仅亚胺培南的耐药率在10%以下。结论本地区临床分离大肠埃希氏菌具有较高的产ESBLs流行率,对于产ESBLs大肠埃希氏菌应以亚胺培南为首选药物。     

多重耐药铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶分析

目的 对多重耐药铜绿假单胞菌产β－内酰胺酶进行分析。方法 用E－试验和三相水解试验分析46株常规药敏试验全部耐药的铜绿假单胞菌的耐药表型，并用PCR扩增和产物测序方法检测其中可能产β－内酰胺酶的情况。结果 46株中8株产超广谱β－内酰胺酶，经分子生物学方法证实有blaVEB-1基因，同时还有D类酶blaOXA-10基因；46株中5株为持续高产AmpC酶；1株产生1种既能水解亚胺培南，又能被氯唑西林抑制的酶。结论 我院多重耐药铜绿假单胞菌所产β－内酰胺酶以超广谱β－内酰胺酶（8／46同时有blaVEB-1基因和blaOXA-10基因）和持续高产AmpC酶（5／46）为主。     

头孢美唑和头孢西丁对产与不产超广谱β-内酰胺酶菌株体外抗菌活性比较

目的：测定头孢羡唑和头孢西丁对产与不产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的体外抗菌活性。方法：收集2004年1月到2004年12月从华西医院各临床科室分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌520株,采用Kirby-Bauer琼脂扩散法进行体外药敏试验并用表型确证试验检测ESBLs。结果：筛选出产ESBLs菌226株,ESBLs阳性检出率为43．5％,其中大肠埃希菌的ESBLs检出率为45．8％．肺炎克雷伯菌的ESBLs检出率为39．6％。头孢美唑对我院ESBLs阳性菌株体外抗菌活性优于头孢西丁。结论：头霉素类抗生素可作为治疗ESBLs菌株引起的重症感染的可选药物,且对我院分离的产ESBLS犬肠杆菌和肺炎克雷伯菌,头孢美唑体外活性略优于头孢西丁。     

神经外科医院感染及产超广谱β-内酰胺酶菌株感染分析

目的 研究神经外科医院感染的主要病原菌分布及其耐药情况，以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株感染特点，为临床治疗提供依据。方法 通过对患者病历及细菌培养和药敏试验结果的统计分析，计算各种病原菌的构成比和各种抗菌药物的耐药率，不同年份比例的变化趋势采用趋势检验。结果 2003～2005年神经外科281倒患者分离菌株共408株，其中革兰阴性菌占77．2％，革兰阳性菌22．8％。G^-菌对常用的大多数头孢类抗生素耐药率极高，对亚胺硫霉素的敏感率93．7％。G^＋菌对青霉素类抗生素已基本耐药，对万古霉素的敏感率80．6％。分离产ESBLs菌株36株，各年产ESBLs菌占各年总菌株数的比例呈逐年上升趋势。36株产ESBLs菌株对临床常用抗生素耐药率普遍较高，对亚胺硫霉素无耐药。结论 G^- 菌是神经外科医院感染的主要病原菌；病原菌耐药性普遍较高；产ESBLs菌株引起的感染率逐年升高；预防细菌耐药．必须积极采取综合措施，建立细菌耐药监测系统，合理使用抗菌素，以求达到控制或延缓细菌耐药。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌遗传标记和耐药基因的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因（整合子qacE△1、转座子tnpU）、氨基糖苷类修饰酶编码aac（6′）-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac（6′）-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。