神经干细胞移植对颅脑损伤大鼠脑皮层的神经保护作用

目的研究神经干细胞(neural stem cells,NSCs)在颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)大鼠脑皮层中的转归,及NSCs移植对TBI引起的免疫反应的作用。方法将NSCs移植入TBI大鼠脑皮层,2周后评价NSCs的存活、迁移及分化,并检测脑皮层促炎症因子水平及脑组织炎症反应。结果移植后2周,NSCs在TBI脑皮层中存活,并向病变迁移,TBI组中的迁移细胞是脑组织(1246±92)个/mm2细胞,多数迁移细胞(51.3%±7.5%)具有神经元表型,NSCs移植明显提高TBI大鼠神经运动功能评分,降低急性期促炎症因子水平,并且降低CD3+T细胞及Mac3+细胞数目,从而减轻炎症反应。结论 TBI大鼠脑组织影响NSCs的存活、迁移及分化,NSCs移植的神经保护作用与减轻脑组织炎症反应有一定关系。     

加强神经干细胞移植治疗研究

脑内移植是指选择供体神经组织或细胞植入宿主的脑内，以代替受损或变性的神经元，重建神经环路或分泌神经递质，达到调控神经功能和改善症状的目的。动物实验已证实，未成熟的神经细胞移植到宿主脑内不仅可存活，而且可以保持其原有神经功能的特性。90年代初期神经干细胞(neural stem cell，     

神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的 研究神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的可行性。方法 取孕龄为12－16天的母鼠，从胎脑中分离神经细胞，进行培养、鉴定。用出生7天的SD大鼠的新生鼠制作缺氧缺血性脑损伤的动物模型，7天后接受神经干细胞移植（移植组，n＝16只），同时设置对照组，只注射磷酸缓冲液（对照组，n=8只），8－10周后，作Y迷宫实验检测大鼠的学习能力和记忆能力。取脑组织作免疫组织化学检查。结果 从大鼠胎脑中成功培养出神经干细胞，培养条件下呈悬浮状态生长，形成神经球，绝大多数的细胞表达神经干细胞的标志物神经巢蛋白（nestin）。接爱神经干细胞移植组大鼠的学习能力、记忆能力和对照组相比，有明显提高，差异具有显著性（P＜0.05）。接受神经干细胞移植大鼠组织中可见存活的移植细胞，并和宿主脑组织融合在一起。结论 在体外培养条件下，可从胎脑组织中培养出神经干细胞，移植到缺氧缺血性脑损伤大鼠脑内后，细胞与宿主的脑组织融合在一起，动物的学习、记忆能力有改善。移植神经干细胞是治疗缺氧缺知性脑损伤的有效方法之一。     

不同时间移植神经干细胞治疗颅脑损伤的对比研究

目的通过观察不同时间颅脑损伤后遗症患者接受神经干细胞移植治疗后的临床疗效,探讨颅脑损伤后进行干细胞移植的最佳时机。方法将我院治疗过的30例颅脑损伤患者根据不同的移植时间分为3组:A组:神经干细胞移植时间在损伤后6个月以内;B组:移植时间在损伤后6个月到1年;C组:移植时间在损伤后1年以上,分别进行腰椎穿刺蛛网膜下腔注入神经干细胞,并于第1次术前和第4次术后3个月进行功能独立性评定(FIM)。结果神经干细胞移植后患者的各项指标较移植前均有改善,颅脑损伤6个月以内患者的功能改善情况更为明显。结论颅脑损伤6个月以内是进行神经干细胞移植的适宜时间,随着损伤时间的延长,患者的神经功能恢复能力减弱。     

人类神经干细胞的长期培养和传代

目的 探讨人类神经干细胞的体外培养条件及其传代的方法。方法 采用机械方法从胎脑中分离神经细胞，应用N2培养基进行培养，bFGF和EGF刺激细胞扩增；传统方法和对神经球切割的方法进行传代培养；应用免疫组织化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定。结果 从胎脑当中成功培养出人类的神经干细胞，培养条件下呈悬浮状态生长，形成神经球，绝大多数的细胞表达波形蛋白和Musashil两种神经干细胞的标志物；这种细胞可分化为神经元和星型胶质细胞，早期的培养有少量的少突胶质细胞；在这种培养条件下，神经干细胞生长速度较慢，而采用切割神经球的方法保持了细胞间的，神经干细胞可获得较大的扩增速度。结论 在体外的培养条件下，可从胎脑组织中培养出神经干细胞，它可做为中枢神经系统疾病移植治疗的潜在细胞来源。     

经枕大池移植神经干细胞治疗重型颅脑损伤大鼠的实验研究

目的探讨胎脑皮质来源的神经干细胞(NSC)用于重型颅脑损伤模型大鼠的治疗作用。方法用电子颅脑损伤仪制备重型颅脑损伤大鼠模型(n=46),随即分为神经干细胞治疗组(NSC组,n=23)和对照组(DMEM/F12组,n=23)。将胎鼠皮质来源的NSC经体外培养、扩增后用BrdU标记,经枕大池移植到模型大鼠的脑脊液中,于移植后24h,3d,7d,14d,21d,28d对大鼠进行改良神经功能缺损评分(mNSS)的评估。对照组用相同体积的DMEM/F12代替NSC,mNSS评估时间和方法同NSC组。4w后NSC组取5只大鼠脑组织行免疫组化法染色检测BrdU表达。结果 NSC组大鼠在移植后第7d、14d、21d和24d,其mNSS评分与DMEM/F12组相比,均有显著性差异。对脑组织行BrdU免疫荧光染色,发现移植后第4w脑损伤灶及周围脑组织中有BrdU阳性细胞的表达。结论经枕大池移植后,NSC可在大鼠脑组织内存活、增殖,并能促进脑损伤大鼠神经功能的恢复。     

神经干细胞对创伤性颅脑损伤治疗的研究进展

神经干细胞(neural stem cell,NSCs)是一类具有分裂潜能和自我更新能力的母细胞,在不同的诱导情况下可以分化成不同的神经细胞,其中包括神经元细胞、胶质细胞、少突胶质细胞等,神经干细胞在颅脑损伤的研究中有了很大的进展,但是还有很多问题亟待解决,本文主要介绍神经干细胞对外伤性颅脑损伤治疗的研究进展,探讨神经干细胞在治疗脑外伤存在的问题。     

神经干细胞移植在脊髓损伤修复中的作用

近年来神经干细胞的发现及其相关研究,为脊髓损伤的治疗提供了一种新的策略.目前多通过应用单纯的神经干细胞移植、携带外源性基因的神经干细胞移植以及联合生物材料的神经干细胞移植等方法来治疗实验性脊髓损伤,取得了可喜的成绩.这些移植方式各有优缺点,为治疗和修复脊髓损伤开拓了思路,带来了希望.     

骨髓源性干细胞:神经修复的新热点

中枢神经损伤或发生不可逆病变后，临床治疗主要是促进神经再生和神经移植，但治疗效果不满意，功能很难得到恢复，致使神经生物学家在神经修复的基础研究领域不断努力，试图找到更有效的疗法。1989年Temple对大鼠胚胎脑组织进行培养，证实这些组织细胞可以发育成为神经元和神经胶质细胞。1992年Reynolds和Weiss首次从成年小鼠纹状体中分离出神经干细胞。     

脑组织移植和神经干细胞研究进展

综述了近年来广泛开展的神经组织和细胞移植的各种主要方法及其进展。着重对神经干细胞这一神经科学的前沿课题进行了详细的复习。并对神经干细胞的研究方法,神经营养因子和神经干细胞的关系,神经干细胞的分化诱导及共临床方面的应用前景作了阐述。     

挫伤脑组织对人胚神经干细胞影响的体外研究

目的 建立人胚胎来源的神经干细胞体外培养方法，初步研究挫伤脑组织提取液(TBITE)对人胚神经干细胞(HNSCs)存活、增殖能力和分化的影响。方法 10周龄左右的胎儿大脑皮层细胞体外培养，神经干细胞增殖2～3代后，剔除生长因子，分别加入不同浓度的脑外伤病人的挫伤脑组织提取液，培养2～3周后，免疫细胞化学方法鉴定细胞分化后的类型。用Laemrnli凝胶电泳法分析培养液上清。结果成功获得以神经球形式生长的人胚神经干细胞，Nestin表达阳性；与空白对照相比，TBITE组中的神经干细胞有明显的增殖，并分化为神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞。随着TBITE含量的增加，星形胶质细胞的比例增加。结论 脑外伤的局部微环境可促进神经干细胞增殖和分化。     

大鼠脑损伤后经枕大池及立体定向脑内移植神经干细胞的对比研究

目的 探讨大鼠脑损伤后,将神经干细胞（neural stem cells,NSCs）经枕大池移植到蛛网膜下腔及立体定向移植到脑内,观察神经功能恢复情况。方法 体外培养的NSCs取自胎鼠皮层,采用Feeney自由落体脑创伤模型制成大鼠脑损伤模型,伤后24小时将NSCs经枕大池移植到蛛网膜下腔及经立体定向移植到脑内。伤前24小时、伤后24小时及1、2周行动物运动神经功能评分。结果 接受NSCs移植的两组大鼠神经运动功能评分均较损伤对照组明显提高（P〈0．05）,两移植组大鼠神经运动功能评分无明显差别。结论 经枕大池移植的NSCs具有远距离迁移能力,并能像脑内移植一样明显有助于大鼠神经运动功能的恢复。     

骨髓间质干细胞移植对大鼠颅脑损伤后氧化应激的影响

目的观察骨髓间质干细胞移植对大鼠外伤性脑损伤的治疗效应和对大鼠颅脑损伤后氧化应激的影响。方法体外分离培养MSCs;建立大鼠TBI模型;经颈内动脉移植MSCs,观察大鼠神经功能的改善状况和两组大鼠脑组织内氧化应激指标的差异。结果MSCs在体外可长期培养扩增,生物学特性稳定;经颈动脉移植4周后,移植治疗的大鼠其神经功能状况改善较好。与对照组相比较,实验组大鼠脑组织内SOD的活性较高,羟自由基的含量较低。结论移植MSCs对TBI所造成的大鼠神经功能缺损有一定的治疗效应。而移植MSCs后能上调脑组织的抗氧化能力,这可能是产生治疗效应的机制之一。     

Transplantation of primed human fetal neural stem cells improves cognitive function in rats after traumatic brain injury

Traumatic brain injury (TBI) often produces cognitive impairments by primary or secondary neuronal loss. Stem cells are a potential tool to treat TBI. However, most previous studies using rodent stem or progenitor cells failed to correlate cell grafting and cognitive improvement. Furthermore, the efficacy of fetal human neural stem cells (hNSCs) for ameliorating TBI cognitive dysfunction is undetermined. This study therefore characterized phenotypic differentiation, neurotrophic factor expression and release and functional outcome of grafting hNSCs into TBI rat brains. Adult Sprague-Dawley rats underwent a moderate parasagittal fluid percussion TBI followed by ipsilateral hippocampal transplantation of hNSCs or vehicle 1 day post-injury. Prior to grafting, hNSCs were treated in vitro for 7 days with our previously developed priming procedure. Significant spatial learning and memory improvements were detected by the Morris water maze (MWM) test in rats 10 days after receiving hNSC grafts. Morphological analyses revealed that hNSCs survived and differentiated mainly into neurons in the injured hippocampus at 2 weeks after grafting. Furthermore, hNSCs expressed and released glial-cell-line-derived neurotrophic factor (GDNF) in vitro and when grafted in vivo, as detected by RT-PCR, immunostaining, microdialysis and ELISA. This is the first direct demonstration of the release of a neurotrophic factor in conjunction with stem cell grafting. In conclusion, human fetal neural stem cell grafts improved cognitive function of rats with acute TBI. Grafted cells survived and differentiated into neurons and expressed and released GNDF in vivo, which may help protect host cells from secondary damage and aid host regeneration.     

科学基金对颅脑创伤研究的促进作用

颅脑创伤,又称创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI),是由外伤引起的脑组织损害.在世界范围内,TBI已成为继心脏病、恶性肿瘤、脑血管意外之后的第4位死因[1].美国TBI发生率约为538/10万,其中,约有32％是因为坠落造成的,19％是交通意外,18％归咎于斗殴或运动伤害[2].值得注意的是,交通意外是造成青壮年重型TBI的首要原因,而绝大部分的跌落伤是发生在5岁以下的儿童或者75岁以上的老年人[3].中国每年大约有100多万人发生TBI,死亡10万余人,20多万人遗留长期昏迷(植物人)、瘫痪、痴呆、语言功能丧失、记忆功能减退等各种神经功能残疾.重型TBI存活的患者脑神经功能残疾发生率高达54％～84％,每年造成的直接和间接经济损失数达百亿元.     

Neural correlates of self-evaluative accuracy after traumatic brain injury

Individuals who have sustained a traumatic brain injury (TBI) often exhibit an array of cognitive deficits, yet perhaps most maladaptive of these sequelae is the frequent occurrence of reduced insight into one's own condition. In such cases, TBI individuals may overestimate their post-injury level of socio-cognitive functioning, leading to disparities between how they perceive themselves and what others observe. This functional MRI (fMRI) investigation examined the relationship between level of insight into one's post-injury condition (i.e. trait/ability status) and neural activation evoked during an fMRI task involving self-appraisal of one's traits and abilities. Twenty TBI patients (8-12 weeks post-injury, ER Glasgow Coma Scale Average = 10.9+/-2.8) were selected on the criterion that they overestimate their current trait/abilities (as detected on the patient competency rating scale, PCRS). fMRI activation on the self-appraisal task was compared between the TBI patients and 20 matched controls. For both groups, the fMRI task evoked activation at mid-line prefrontal and retrosplenial cortices. TBI patients exhibited greater signal change in the anterior cingulate, precuneus and right temporal pole. Subsequently, a linear regression analysis was conducted for the TBI group, with the PCRS and a measure of cognitive speed entered as predictor variables to determine the selective effect of insight on self-evaluative brain activation. A more accurate level of trait/ability-based insight was related to increased signal change in the right anterior dorsal prefrontal cortex (PFC). The results suggest that one's post-injury level of self-referential insight is related to a network inclusive of the medial and right dorsal PFC.     

Moderate traumatic brain injury promotes proliferation of quiescent neural progenitors in the adult hippocampus

Recent evidence shows that traumatic brain injury (TBI) regulates proliferation of neural stem/progenitor cells in the dentate gyrus (DG) of adult hippocampus. There are distinct classes of neural stem/progenitor cells in the adult DG, including quiescent neural progenitors (QNPs), which carry stem cell properties, and their progeny, amplifying neural progenitors (ANPs). The response of each class of progenitors to TBI is not clear. We here used a transgenic reporter Nestin-GFP mouse line, in which QNP and ANP cells are easily visualized and quantified, to determine the targets of the TBI in the DG. We examined changes in proliferation of QNPs and ANPs in the acute phase following TBI and found that QNPs were induced by TBI insult to enter the cell cycle whereas proliferation of ANPs was not significantly affected. These results indicate that different subtypes of neural stem/progenitor cells respond differently to TBI insult. Stem cell activation by the TBI may reflect the induction of innate repair and plasticity mechanisms by the injured brain.     

神经干细胞移植促进鼠脊髓损伤后髓鞘结构的修复

目的 观察神经干细胞移植治疗对鼠脊髓损伤后髓鞘结构修复的作用并探讨其作用机制。方法 制备鼠T10脊髓损伤模型,体外培养、诱导鼠神经干细胞,定量评价神经干细胞移植对脊髓损伤后髓鞘结构修复的影响。结果 与对照组相比,神经干细胞移植组明显地增强了蛋白前脂蛋白信使核糖核酸(PLP mRNA)的表达,促进了髓鞘碱性蛋白(MBP)性的髓鞘再生和髓鞘结构的修复。结论 神经干细胞移植通过增强髓鞘的再生而促进了脊髓损伤后髓鞘结构的修复,是急性脊髓损伤一种有效的治疗方案。