实时定量聚合酶链反应在异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的诊断和治疗中的应用

 【摘要】　目的　探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后应用实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）技术检测巨细胞病毒（CMV）DNA拷贝数,以指导对CMV感染的临床诊断及治疗。方法　回顾分析接受allo-HSCT的23例患者,按移植方式分为同胞全相合HSCT 11例,亲缘间单倍体HSCT 12例。移植后均采用RQ-PCR技术检测CMV-DNA,＞1000拷贝数／ml为CMV阳性。全部患者在预处理阶段-9天至-2天应用更昔洛韦预防CMV感染。抢先治疗首选更昔洛韦,血常规低于正常者选用缬更昔洛韦或膦甲酸钠。结果　23例allo-HSCT患者中共13例发生14例次（56.5 %）CMV感染,2例发生CMV病（8.7 %）。同胞全相合的11例患者发生CMV感染2例（18.2 %）,亲缘间单倍体的12例患者发生CMV感染11例12例次（91.7 %）。发病中位时间为+41天（+30～+62天）。经治疗12例患者13例次CMV-DNA转阴（92.3 %）,1例死亡（7.7 %）。结论　RQ-PCR技术检测血浆CMV-DNA是监测CMV感染的可靠手段,有利于指导临床抗CMV治疗,减少CMV病的发生。     

异基因造血干细胞移植后人类疱疹病毒7型病毒性脑炎三例并文献复习

目的:探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后人类疱疹病毒7型（HHV-7）病毒性脑炎患者的临床特征、诊断、治疗和转归。方法:回顾性分析河北燕达陆道培医院2018年至2020年收治的3例接受allo-HSCT后发生HHV-7病毒性脑炎患者的临床表现、实验室特征、诊治经过及转归，并复习相关文献。结果:3例接受allo-HSCT后发生HHV-7病毒性脑炎患者的临床表现包括发热、头痛、呕吐、神志淡漠等，无特异性症状和体征。脑脊液常规白细胞计数可正常或稍高，以淋巴细胞为主，脑脊液蛋白可正常或轻度增高，脑脊液HHV-7病毒DNA阳性，应用更昔洛韦或膦甲酸钠治疗有效。2例轻症患者预后好，1例合并脑出血患者死亡。结论:HHV-7病毒性脑炎是allo-HSCT后的一种少见感染，因缺乏典型症状和常规实验室检查指征而易被漏诊，脑脊液中检测出HHV-7 DNA可帮助确诊，目前尚无标准治疗方案，更昔洛韦、膦甲酸钠治疗有效。     

美司钠联合水化、强迫利尿、碱化预防造血干细胞移植后出血性膀胱炎

 目的　分析美司钠联合水化、强迫利尿、碱化对造血干细胞移植（HSCT）出血性膀胱炎（HC）的预防效果。方法　32例接受HSCT的患者,2例重型再生障碍性贫血（SAA）采用全身照射+环磷酰胺（TBI-CTX）预处理方案,其余30例均采用经典的白消安+CTX（BU-CTX）预处理方案,所有患者均采用美司钠联合水化、强迫利尿、碱化预防HC,并给予更昔洛韦和阿昔洛韦预防巨细胞病毒（CMV）和其他病毒感染,监测移植前后血CMV-IgM水平。鼓励患者每小时排尿,检测尿pH值并计算尿量,每6 h复查一次尿常规并测中心静脉压（CVP）,每8 h检测血电解质。结果　仅1例患者移植后6个月出现迟发型Ⅱ级HC,经过水化、碱化、利尿、止血、抗移植物抗宿主病（GVHD）及更昔洛韦抗病毒治疗,35 d后患者HC治愈,其余31例均未出现HC。患者均未出现循环负荷过重造成的不良后果,未出现明显的水电解质及酸碱平衡紊乱。结论　美司钠联合水化、强迫利尿、碱化预防HC是安全、有效的。     

异基因造血干细胞移植术后迟发性非感染性肺部并发症三例

目的通过3例异基因造血干细胞移植术后迟发性非感染肺部并发症（LONIPC）的诊断与治疗并文献复习,提高血液病临床工作者对该病的认识。方法病历分析和文献复习。结果3例患者经早期诊断、早期治疗,疾病均得到有效根治。结论LONIPC的早期诊断、早期治疗可大大改善其预后。     

儿童异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的危险因素分析

目的:分析儿童异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后患者巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染的发生率及其危险因素,为 CMV 感染的监测及治疗提供参考。方法:通过回顾性分析 2018年01月至 2020 年01月在郑州大学附属儿童医院血液肿瘤科、广州市妇女儿童医疗中心血液肿瘤科行异基因造血干细胞移植患者81例,应用χ2 检验及 Logistics 回归模型,分析 CMV 感染的发生率及其发生的危险因素。结果:81例患者中49例发生 CMV 感染,累计发生率为 60.4%,首次发生CMV感染的时间为移植后 37天（13~135天）,所有患者经抗病毒后转为阴性,转阴中位时间为14天（７~51天）。单因素分析提示,CMV感染的发生与性别、疾病类型、供体来源、Ⅰ-Ⅱ度急性移植物抗宿主病（acute graft versus host disease,aGVHD）无明显相关性（P＞0.05）,与Ⅲ-Ⅳ度aGVHD的发生呈明显相关性（P＜0.05）;多因素分析提示aGVHD的发生是CMV感染的危险因素。结论:Allo-HSCT后aGVHD的发生增加了CMV感染的发生率,是CMV感染的危险因素。     

异基因造血干细胞移植治疗晚期胸部肿瘤

异基因外周血造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）已成为治疗恶性疾病的有效手段之一。但既往干细胞移植多用于血液系统疾病的治疗。晚期胸部恶性肿瘤常规治疗效果极差,为了寻找新的有效的治疗方法对3例晚期胸部恶性肿瘤患者成功进行了非清髓异基因外周血造血干细胞移植（allo—NST）治疗，其中1例患者移植后生存19个月。     

卡泊芬净治疗47例恶性血液病患者侵袭性真菌感染

 目的　评价卡泊芬净治疗恶性血液病合并侵袭性真菌感染（IFI）的疗效与安全性。方法　采用回顾性分析法统计山西医科大学第二医院2007年8月至2009年9月47例恶性血液病住院患者的临床资料,其中男28例,女19例,中位年龄42（17～76）岁。47例患者中急性髓细胞白血病（AML）28例、急性淋巴细胞白血病（ALL）11例、重型再生障碍性贫血（SAA）2例、骨髓增生异常综合征（MDS）3例、非霍奇金淋巴瘤（NHL）自体造血干细胞移植术后1例、慢性粒细胞白血病（CML）异基因造血干细胞移植术后2例,所有恶性血液病患者处于化疗后骨髓抑制期或造血干细胞移植术后,使用卡泊芬净的疗效和不良事件（卡泊芬净首日70 mg／d,之后50 mg／d静脉输注,输注时间不得少于1 h,疗程依患者病情而定）。结果　47例病例分析中显示卡泊芬净总有效例数为25例（58.1 %）,药物相关的不良反应发生率低且较轻。结论　卡泊芬净抗菌谱广,疗效确切,安全性好,是血液病患者抗真菌经验治疗的较为理想的药物。     

伏立康唑治疗异基因造血干细胞移植术后中枢神经系统真菌感染一例并文献复习

 【摘要】　目的　提高对异基因造血干细胞移植术后中枢神经系统（CNS）真菌感染患者诊断、治疗的认识。方法　回顾性分析1例异基因造血干细胞移植术后CNS真菌感染患者的临床诊断及治疗过程并文献复习。结果　该患者在出现临床症状后未行病原学检查的情况下,结合其宿主因素、临床表现及头颅影像学检查得到及时诊断,在给予伏立康唑治疗后疾病得到迅速缓解,但在后期伏立康唑序贯治疗中出现疾病复燃。结论　CNS真菌感染临床表现无特异性,容易误诊,治疗效果差,预后差。新型三唑类抗真菌药伏立康唑可作为CNS真菌感染治疗的首选药品。     

造血干细胞移植治疗恶性血液病临床研究

 目的 探讨造血干细胞移植（HSCT）治疗恶性血液病的临床疗效及并发症的防治。方法51例急慢性白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤患者中,36例选择自体造血干细胞移植（auto-HSCT）,15例接受异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）,包括HLA不全相合3例及非血缘关系移植4例,混合移植2例;预处理自体移植主要选用CBV,BEAC方案,异基因移植采用BU／CY2及改良的BU／CY方案;移植物抗宿主病（GVHD）的预防采用CsA+MTX或CsA+MTX＋MMF方案。结果 51例患者中49例获得造血重建,在auto-HSCT和allo-HSCT后WBC≥1.0×109／L的中位时间分别为13 d和17 d,血小板≥20×109／L的中位时间分别为21和25 d;40 ％出现aGVHD,26.7 ％出现cGVHD;3.9 %出现HVOD;出血性膀胱炎发生率5.9 ％;CMV感染发生率33.3 ％;62.7 ％出现黏膜炎;54.9 ％出现不同部位的感染;移植相关死亡率3.5 %,随访3～95个月,移植后复发11例,其中auto-HSCT 9例,allo-HSCT 2例。结论 HSCT是目前治疗恶性血液病的最佳方法,但移植期间需要进一步探索如何减少其相关并发症,以提高血液肿瘤的治愈率及延长患者的无病生存时间。     

单倍体异基因造血干细胞移植术后合并可逆性后部脑病综合征一例并文献复习

目的 探讨单倍体异基因造血干细胞移植术后可逆性后部脑病综合征(RPES)的临床表现、诊治及预后情况.方法 回顾性分析1例单倍体异基因造血干细胞移植术后合并RPES患者的临床及影像学资料.结果 该患者诊断为急性淋巴细胞白血病(前B细胞型,WT1阳性),给予诱导化疗、强化治疗后获得完全缓解(CR),后原发病复发,再次完全缓解(CR2)后行单倍体异基因造血干细胞移植.移植后先后出现移植物抗宿主病、血压增高及神经系统症状,结合影像学检查诊断为RPES,经积极治疗后完全恢复,影像学表现迅速改善.结论 RPES是造血干细胞移植后少见的严重并发症,可由多种病因产生,临床表现及影像学检查具有鲜明的特征,一般预后较好,早发现、早治疗可有效减少中枢神经系统损害.     

中华医学会《白血病·淋巴瘤》杂志稿约

目的 探讨非血缘脐血造血干细胞移植(UCBT)术后肠道小穿孔的早期诊断、鉴别诊断及治疗措施.方法 1例23岁复发未缓解急性淋巴细胞白血病患者在清髓性预处理全身照射+环磷酰胺+阿糖胞苷治疗后,行HLA高分辨6/10位点相合UCBT,预防移植物抗宿主病(GVHD)方案为环孢素A联合吗替麦考酚酯.结果 患者移植后5个月发生肠道小穿孔及腹腔内感染,美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分3～4分,无法耐受手术,给予抗感染、小剂量激素维持治疗GVHD及输注间充质干细胞等内科综合保守治疗后,病情好转.结论 肠穿孔是造血干细胞移植后的罕见但致命的并发症,在早期明确诊断小穿孔,鉴别诊断其他并发症,处理穿孔并发症的基础上,根据血培养结果选择有效抗菌药物治疗血流感染和腹膜炎、小剂量激素维持治疗GVHD及有效的营养支持对症治疗等综合处理是救治成功的关键.对于异基因造血干细胞移植后合并GVHD及肠穿孔的难以耐受手术的重症患者,内科综合治疗值得尝试.     

抗CD20单克隆抗体联合自体外周血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤的临床研究

 目的　探讨抗CD20单克隆抗体（利妥昔单抗,商品名：美罗华）联合自体外周血干细胞移植（APBSCT）治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤（NHL）的疗效。方法　21例CD20阳性的NHL患者,经过前期治疗,5例达完全缓解（CR）,难治性病例为16例,包括11例部分缓解（PR）和5例疾病进展（PD）。在自体造血干细胞动员的第1、8天及预处理的-1、＋7天每天应用利妥昔单抗375 mg／m2。结果　移植前疾病达到CR的5例患者,无一例复发;移植前处于PR的11例患者,仅1例在移植后6个月疾病复发,其余均无病生存;移植前处于PD的5例患者,2例无病生存。21例患者中位随访24（1～68）个月,复发、死亡4例（19 %）,其余17例均无病生存,2年无病生存（EFS）和总生存（OS）率均为81.0 %。未观察到利妥昔单抗对采集所得干细胞的质量和数量以及移植后造血恢复有不良影响。结论　APBSCT联合利妥昔单抗做体内净化治疗B细胞NHL疗效与移植前状态有关,作为巩固治疗,能使移植前达CR的患者获得长期生存,提高治愈率;作为强化治疗,可提高缓解率,延长PR患者的EFS及OS。利妥昔单抗的加入不影响造血干细胞采集和移植后造血重建。     

非清髓性异基因外周造血干细胞移植治疗加速期慢性粒细胞白血病

目的：探讨非清髓性异基因外周造血干细胞移植对慢性粒细胞白血病加速期的治疗效果,以扩大其适用范围。方法：对2例慢性粒细胞白血病加速期患者进行了相关的非清髓性的异基因外周造血干细胞移植术,采用包括氟达拉滨、阿糖胞苷、OKT3、环磷酰胺、马利兰为主的预处理方案。结果：2例患者均移植成功,1例已健康生存9个月,另1例发生了慢性GVHD及间质性肺炎,最终于移植后近1a时死于并发症。结论：非清髓性异基因外周造血干细胞移植是一种可行的治疗慢性粒细胞加速期患者的有效方法。     

利妥昔单抗体内净化造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤

 目的 探讨利妥昔单抗（商品名：美罗华）体内净化造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤（NHL）的疗效。方法 自体造血干细胞移植（AHSCT）-1、+8天运用利妥昔单抗375 mg／m2的体内净化。结果 7例患者移植后造血功能恢复,未观察到利妥昔单抗的严重毒副反应,移植后随访1～28个月（中位随访时间15个月）,均未见疾病进展或复发。结论 利妥昔单抗净化造血干细胞移植能提高CD+20 NHL的疗效,有助于清除微小残留病灶,延长NHL的生存期。     

异基因造血干细胞移植后腺病毒脑炎1例并文献复习

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后腺病毒脑炎的诊断、鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析2020年11月湖北医药学院附属人民医院收治的1例allo-HSCT后继发腺病毒脑炎患者的临床资料,并结合文献复习。结果患者,女性,49岁,诊断为T淋巴母细胞淋巴瘤。给予单倍体造血干细胞移植后出现不明原因的低热、精神症状。脑脊液病原微生物二代基因测序检查发现有腺病毒感染的证据,在排除其他相关疾病后诊断腺病毒脑炎。给予更昔洛韦和膦甲酸钠抗病毒、丙种球蛋白冲击治疗后效果差。结论腺病毒脑炎是allo-HSCT后中枢神经系统的一种严重并发症,临床表现缺乏特异性,若患者allo-HSCT后出现发热伴精神症状,经抗感染治疗无效需考虑合并腺病毒脑炎可能。一旦怀疑腺病毒脑炎应尽早行脑脊液腺病毒聚合酶链反应或病原微生物二代测序等明确腺病毒感染的证据,并尽早使用西多福韦或Brincidofovir、腺病毒特异性的细胞毒性T淋巴细胞来改善患者的预后。     

更昔洛韦对转染TK基因的人骨髓瘤细胞的生长抑制作用及旁观者效应

目的：探讨更昔洛韦对转染TK基因的骨髓瘤细胞生长的抑制作用。方法：应用缺陷型反转录病毒介导的TK基因系统(RV-HSV-TK)转染骨髓瘤细胞，采用细胞增生实验(MTT法)，研究更昔洛韦对转染TK基因的骨髓瘤细胞株的抑制作用。结果：转染了TK基因的骨髓瘤细胞的生长曲线与未转染TK基因的细胞无差异。0.1 μg／mL50μg／mL的更昔洛韦对转染TK基因的骨髓瘤细胞有明显的抑制作用，且与更昔洛韦的作用时间成正比。将转染阳性细胞与未转染细胞共孵育，加入10μg／mL的更昔洛韦作用96 h，可见旁观者效应。结论：采用RV-HSV-TK系统转染骨髓瘤细胞，有较高的转染率，转染了TK基因的骨髓瘤细胞对更昔洛韦敏感。     

非骨髓清除性预处理方案加异基因外周血干细胞移植治疗复发性淋巴瘤4例

目的：探讨非骨髓清除预处理方案（nonmyeloabative conditionning regimen,NACR)加异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗血液系恶性肿瘤的可行性及其效果。方法：本报告用Fludarabine 180mg/m^2,ATG 40mg/kg，马利兰8mg/kg加异基因外周血干细胞移植治疗复发性难治性淋巴瘤4例。4例供者均系患者亲属，其中1例供受者HLA有一个位点不合，其余3例供受者HLA完全相合。结果：4例患者对预处理方案耐受良好，移植后无1例发生移植物排斥。迄今4例患者已完全缓解8～15个月。结论：用非骨髓清除性方案作造血干细胞移植预处理，安全有效，毒性低，可应用于年老体弱或有实质内脏损伤者。     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植后单纯红细胞再生障碍性贫血二例并文献复习

 【摘要】　目的　分析ABO血型不合异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后发生单纯红细胞再生障碍性贫血（PRCA）造血功能紊乱的发病机制,了解造血干细胞移植过程中特殊的免疫功能状态。方法　回顾性分析2例急性髓系白血病（AML）行allo-HSCT后发生PRCA患者的临床资料并复习相关文献。结果　停用环孢素A（CsA）、加用糖皮质激素、丙种球蛋白等治疗该患者后血型转化,造血恢复。结论　ABO血型不合allo-HSCT易出现红系造血延迟及PRCA,应用糖皮质激素、丙种球蛋白治疗有效。     

异基因造血干细胞移植治疗自体造血干细胞移植后复发的霍奇金淋巴瘤四例

目的 观察异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗自体造血干细胞移植（auto-HSCT）后复发的霍奇金淋巴瘤（HL）的临床疗效及安全性.方法 选取auto-HSCT后复发的HL患者4例,采用FBC预处理方案,实施allo-HSCT.结果 4例患者全部获得造血重建,发生急性移植物抗宿主病2例,发生慢性移植物抗宿主病2例,2例患者分别于移植后11个月、19个月疾病复发,另外2例尚健康生存.结论allo-HSCT对于auto-HSCT后复发的HL患者仍然是有效的.     

膦甲酸钠预防及抢先治疗造血干细胞移植中巨细胞病毒感染的临床研究

目的 观察膦甲酸钠用于异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)预防及抢先治疗巨细胞病毒(CMV)感染的疗效及安全性.方法 回顾性分析2014年10月至2016年12月96例接受allo-HSCT患者临床资料.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)监测患者血浆巨细胞病毒(CMV)-DNA情况至移植后6个月,预防及抢先治疗分别采用膦甲酸钠每天60 mg/kg和每天120 mg/kg.观察CMV血症、CMV病发生情况,分析CMV感染的影响因素,分析膦甲酸钠治疗效果和安全性,评估患者生存情况.结果96例患者中42例(43.8%)移植后发生CMV感染,中位感染时间42 d.膦甲酸钠治疗的42例CMV感染患者中,疗效显著36例(85.7%),进展为CMV病6例(14.3%),其中CMV转阴5例,因CMV间质性肺炎死亡1例.半相合移植及Ⅱ~Ⅳ度移植物抗宿主病(GVHD)患者CMV血症发病率升高(χ2=3.834,P<0.05;χ2=16.807,P<0.001).膦甲酸钠不良反应轻微,无明显中性粒细胞减少.发生CMV血症42例中,死亡12例(28.6%),未发生CMV血症54例中,死亡6例(11.1%),两组总生存率差异无统计学意义(χ2=3.546,P=0.06).结论 应用膦甲酸钠对allo-HSCT患者预防及抢先治疗CMV感染的疗效确切,耐受性良好,尤其适用于造血未完全恢复的患者.