NF-κB在小鼠感染性早产发生中作用的研究

目的通过研究NF-κB与感染性早产的关系,探索感染性早产的发病机制.方法将45只孕15 d的小鼠分为LPS组、LPS PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate)组、生理盐水组3组,每组15只,分别注药后观察它们的分娩时间,另外同样分组孕鼠,每组5只,共15只,在给予上述同样药物16 h后处死,以免疫组化技术检测其胎盘TNF-α、IL-8水平.结果 LPS PDTC组孕鼠的妊娠时间较LPS组明显延长,另3组孕鼠检测TNF-α、IL-8水平,发现在LPS PDTC组中,其表达较LPS组明显降低.结论 NF-κB活化可能是通过调控某些细胞因子的表达,参与感染性早产的发生.     

姜黄素对宫内感染性小鼠早产的防治作用

目的研究活化的激活蛋白1（Activator protein-1,AP-1）和单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractantprotein-1,MCP-1）在感染性早产孕鼠中的表达,从而探讨抑制AP-1的药物姜黄素（Curcumin,CUR）对感染性早产的预防和治疗作用。方法大肠杆菌腹腔注射建立感染性早产动物模型。将100只C57BL/6孕鼠随机分为模型组（E组）、对照组（NS组）、姜黄素组（CUR组）、治疗组（E＋CUR）、预防组（CUR＋E组）,每组20只。其中每组分8只观察潜伏期（菌液注射至分娩第一胎儿的时间）和活产率。于干预后3、6、12、24h各时间点处死3只孕鼠,免疫组化检测孕鼠子宫AP-1及MCP-1蛋白表达分布;Western blotting检测孕鼠子宫AP-1表达;ELISA检测孕鼠血清MCP-1蛋白分泌量。结果 CUR预防及治疗组能显著降低AP-1,MCP-1mRNA及蛋白的表达（P〈0.001）。CUR治疗感染性早产小鼠潜伏期延长为34.5h（对照15.1h）,CUR预防性给药则延长为45.3h;CUR作用于感染性早产小鼠可使妊娠时间延长。活产率提高（87.5%vs39.2%）。结论 CUR对大肠杆菌诱发的小鼠早产有预防和治疗作用,可能是通过抑制妊娠组织AP-1/MCP-1的活化。     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激人子宫平滑肌细胞白细胞介素8表达的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激离体培养的人晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8表达和核转录因子(NF-κB)活性的影响。方法原代培养足月未临产的子宫平滑肌细胞,10μg/mL LPS与经浓度分别为0(生理盐水对照,NS)、5、10、15 mmol/L的NAC预处理的子宫平滑肌细胞作用8 h,以及10 mmol/L的NAC或NS预处理的子宫平滑肌细胞经LPS干预0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h,收集细胞免疫印迹检测NF-κB P65合成情况、RT-PCR检测IL-8 mRNA表达及上清液ELISA检测IL-8浓度。结果1NAC在5~15 mmol/L呈剂量依赖性抑制LPS刺激IL-8蛋白合成和mRNA表达。2随着NAC浓度由低至高,NF-κB P65合成由强到弱,差异有统计学意义(P<0.01),其变化趋势与IL-8 mRNA一致。结论NAC能抑制LPS刺激晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8蛋白合成和基因表达,可能与其抑制NF-κB激活有关。     

核转录因子-κB在急性肺损伤小鼠中的动态表达

目的 研究核转录因子-κB(NF-κB)在脂多糖诱发的急性肺损伤小鼠中的动态表达情况.方法 健康纯种昆明鼠25只,随机分为5组,包括正常对照组(腹腔注射等量生理盐水),4组LPS组(腹腔注射LPS).LPS组在腹腔注射脂多糖后的不同时间点(1、3、9、12h)处死小鼠,检测相关指标.通过动脉血氧分压(PaO2)检测肺功能;普通光镜观察HE染色肺组织的病理变化;Western blotting和免疫组化法检测NF-κB p65在蛋白水平上的表达差异.结果 LPS注射后1h,PaO2明显下降并有炎症反应的病理变化;小鼠肺组织中的NF-κB p65呈双峰表达,峰值分别为1h和9h. 结论 NF-κB在脂多糖所致急性肺损伤的炎症反应中发挥着重要作用.     

银杏苦内酯B对急性肺损伤小鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的 研究银杏苦内酯B(BN52021)对脂多糖(LPS)诱发的急性肺损伤小鼠肺组织中核转录因子κB(NF-κB)蛋白质表达的影响.方法 健康昆明小鼠50只,随机分为2组:LPS组和BN52021预处理组.每组又根据不同的观察时间点(0、1、3、9 h和12 h)随机分为5个业组,每组5只小鼠.通过检测肺湿质量/干质量值(W/D)初步判断肺功能,普通光镜观察HE染色肺组织的病理变化,Western blot检测NF-κB p65在蛋白水平上的表达差异,ELISA法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL-10)浓度.结果 LPS注射后,LPS组W/D显著升高,提示存在肺水肿;BN52021预处理组在不同时间点的W/D均低于LPS组(P<0.05,P<0.01).LPS注射后1 h即有明显炎症反应的病理变化:两组光镜下均显示肺泡出血及中性粒细胞浸润,但BN52021预处理组明显轻于LPS组.LPS组NF-κB p65呈双峰表达,峰值分别为LPS注射后1 h和9 h;BN52021预处理组NF-κB p65呈单峰表达,峰值出现于9 h,除9 h外,各时间点BN52021预处理组NF-κB 065的表达均低于LPS组(P<0.05).与LPS组相比,BN52021预处理组可以明显降低TNF-α的表达(P<0.05),但2组IL-10峰值无统计学意义.结论 BN52021通过抑制NF-κB的早期活化抑制炎症反应,减轻肺组织损伤.     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激人子宫平滑肌细胞白细胞介素8表达的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脂多糖（LPS）刺激离体培养的人晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8表达和核转录因子（NF-κB）活性的影响。方法原代培养足月未临产的子宫平滑肌细胞，10μg／mL LPS与经浓度分别为0（生理盐水对照，NS）、5、10、15mmol／L的NAC预处理的子宫平滑肌细胞作用8h，以及10mmol／L的NAC或NS预处理的子宫平滑肌细胞经LPS干预0h、3h、6h、12h、24h、48h，收集细胞免疫印迹检测NF-κB P65合成情况、RT-PCR检测IL-8 mRNA表达及上清液ELISA检测IL-8浓度。结果①NAC在5～15mmol／L呈剂量依赖性抑制LPS刺激IL-8蛋白合成和mRNA表达。②随着NAC浓度由低至高，NF-κB P65合成由强到弱，差异有统计学意义（P〈0．01），其变化趋势与IL-8 mRNA一致。结论NAC能抑制LPS刺激晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8蛋白合成和基因表达，可能与其抑制NF-κB激活有关。     

N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素致小鼠肺间质纤维化形成及NF-κB、IL-4表达的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素(BLM)致小鼠肺间质纤维化形成及核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-4(IL-4)表达的影响。方法:75只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组:BLM组25只,气管注射BLM5mg/kg制作肺间质纤维化模型;NAC组25只,于注射BLM前5天开始,每天给予NAC250mg/kg直至取材;对照组25只,气管注射生理盐水。第1、3、7、14、28天处死小鼠,取右肺组织行HE染色和Masson染色,左肺组织测羟脯氨酸(HYP)含量;分别采用ELISA法和SP免疫组化染色检测支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量和灌洗细胞中NF-κBp65的表达。结果:第7、14、28天,BLM组肺组织病理可见实变及胶原沉积,而NAC组明显减轻;3组小鼠肺组织HYP含量差异有统计学意义,NAC组HYP含量低于BLM组(P<0.05);第1、3、7天,3组小鼠支气管肺泡灌洗细胞NF-κBp65的表达水平及支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量差异有统计学意义,且NAC组2指标均低于BLM组(P均<0.05)。结论:NAC可能通过抑制NF-κB的活化,减少致纤维化相关细胞因子IL-4的产生,进而减轻BLM所致小鼠肺间质纤维化。     

抑制炎症反应治疗急性肺损伤的实验研究

目的通过观察急性肺损伤（ALI）大鼠血液和肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒ等炎性细胞因子的变化,探讨抑制炎症反应在治疗急性肺损伤中的作用。方法应用气管内滴入内毒素（LPS）复制大鼠急性肺损伤模型。将48只大鼠随机分成4组：对照组（N组）、LPS组、N-乙酰半胱氨酸（NAC）治疗组（NAC组）、NAC联合地塞米松（Dex）治疗组（NAC＋Dex组）,采用免疫印迹法（Western Blotting）检测NF-κΒ的含量,采用RT-PCR检测肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒmRNA的表达,并采用放免检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的IL-6、TNF-α的含量。结果LPS组大鼠肺病理可见明显的肺损伤表现,NAC组及NAC＋Dex组肺组织病理改变明显减轻;NAC组及NAC＋Dex组肺NF-κB,肺IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒmRNA表达水平及血清和BALF中的IL-6、TNF-α含量明显高于N组（P〈0.01）,而明显低于LPS组（P〈0.05）。结论NAC、Dex等可以抑制炎症反应,减少炎性介质的释放从而减轻肺损伤的程度,达到防治急性肺损伤的目的。     

PPAR-β对小鼠脓毒症肝损伤的研究

目的 探讨过氧化物酶增殖物激活受体β亚型(PPAR-β)对小鼠脓毒症肝损伤的作用。方法 将120只小鼠随机分为假手数组(SHAM)、脓毒症肝损伤组(LPS)、肝损伤+激动剂组(LPS+GW0742)、肝损伤+抑制剂组(LPS+GSK0660),每组各30只。在不同时间段检测 ALT、TBIL、AST、IL-1β、IL-18、TNF-α、capase-1、NF-κB水平。结果 不同时间点,LPS+GW0742组血清中ALT、AST和TBIL水平均显著降低于LPS组,差异有统计学意义(P=0.000);LPS+GW0742组小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-18水平均显著低于LPS组,差异有统计学意义(P<0.05);LPS+GW0742组条带面积较LPS组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PPAR-β可以通过下调NF-κB分子的表达及炎性因子的产生,从而减轻小鼠脓毒症肝损伤,为脓毒症的治疗提供新的靶点。     

CXCR3基因在小鼠急性肺损伤中的作用及与白细胞介素-10的关系

目的:探讨CXCR3在内毒素脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤(ALI)发病机制中的作用及与白细胞介素-10(IL-10)的关系。方法:将24只雄性C57BL/6小鼠分为正常组、LPS 2h组及LPS 12h组。HE染色观察肺组织病理改变;流式细胞术检测肺泡灌洗液(BALF)和肺组织CD8+T细胞及CD4+T细胞百分比;酶联免疫吸附试验及实时荧光定量PCR分别检测BALF和肺组织中IL-10和CXCR3的表达。结果:LPS 12h组BALF和肺组织炎症细胞数及CXCR3的表达均较正常组及LPS 2h组增多(P<0.05);IL-10的表达较正常组及LPS 2h组降低(P<0.05),且与CXCR3的表达及CD8+T细胞数呈负相关(P均<0.05)。结论:CXCR3可参与急性肺损伤炎症的发生与发展,且与IL-10的表达呈负相关。重建CXCR3及IL-10的平衡可能会成为治疗ALI的新目标。     

脂多糖诱发的早产小鼠子宫组织NO，PGE2的变化

目的；探讨感染性早产的发生与子宫局部组织一氧化氮（NO）和前列腺素（PGs) 比值变化的关系，方法：将20只孕16天的小鼠分为脂多糖，脂多糖乙二胺四乙酸二钠／一氧化氮（DETA／NO），脂多糖＋DETA以及生理盐水组4组，每组5只，分别注药后观察它们的分娩时间，另外4组孕鼠共20只，在给予上述药物后12小时处死，检测其血清孕酮水平及子宫组织产生的亚硝酸盐和PGE2，结果：给予脂多糖注射的孕鼠子宫组织产生亚硝酸盐及PGE2增加，而亚硝酸盐与PGE2的比值及其血清孕酮水平则明显下降，DETA／NO可以部分逆转。结论：脂多糖可以通过使小鼠血清孕酮水平下降并使其子宫局部组织的NO／PGE2值降低而诱发早产，DETA／NO则可能通过阻止血清孕酮水平的下降以恢复局部组织的NO／PGE2值，从而阻止早产的发生。     

脂多糖诱发的早产小鼠子宫组织NO、PGE2的变化

目的　探讨感染性早产的发生与子宫局部组织一氧化氮 (NO)和前列腺素 (PGs)比值变化的关系。方法　将 2 0只孕 16天的小鼠分为脂多糖、脂多糖乙二胺四乙酸二钠 /一氧化氮 (DETA/ NO)、脂多糖 +DETA以及生理盐水组 4组 ,每组 5只 ,分别注药后观察它们的分娩时间 ,另外 4组孕鼠共 2 0只 ,在给予上述药物后 12小时处死 ,检测其血清孕酮水平及子宫组织产生的亚硝酸盐和 PGE2 。结果　给予脂多糖注射的孕鼠子宫组织产生亚硝酸盐及 PGE2 增加 ,而亚硝酸盐与 PGE2 的比值及其血清孕酮水平则明显下降。DETA/ NO可以部份逆转。结论　脂多糖可以通过使小鼠血清孕酮水平下降并使其子宫局部组织的 NO/ PGE2 值降低而诱发早产 ,DETA/ NO则可能通过阻止血清孕酮水平的下降以恢复局部组织的 NO/ PGE2 值 ,从而阻止早产的发生     

IL-18抑制剂对脓毒症并发血小板减少小鼠的保护作用

目的:探究白细胞介素（IL）-18抑制剂 （IL-18Bp）对脓毒症并发血小板减少小鼠的保护作用。方法:将30只C57BL/6雄性小鼠依次编号，按照随机数字表法分为3组:对照组、脂多糖（LPS）注射模型组（LPS组）、LPS加IL-18Bp干预组（LPS/IL-18Bp组）。其中LPS组和LPS/IL-18Bp组给予单次腹腔注射30 mg/kg LPS制备脓毒症并发血小板减少模型，对照组给予等体积生理盐水；LPS/IL-18Bp组在注射LPS后给予单次腹腔注射50 μg/kg IL-18Bp，其余各组给予等体积生理盐水。观察各组72 h生存率，并于LPS注射后24 h时收集血液样本和脾脏组织，全血细胞分析仪检测血小板计数，ELISA法检测各组富血小板血浆中血小板活化标志物sCD40L以及IL-18和IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达情况；HE染色观察并分析各组脾脏的病理变化。结果:LPS/IL-18Bp组各时间点的生存率均高于LPS组（χ2=0.63，P<0.05）；LPS注射后24 h时LPS/IL-18Bp组血小板计数显著高于LPS组（t=8.37，P=0.001）；LPS/IL-18Bp组sCD40L表达量较LPS组低（t=4.34，P=0.012）；LPS/IL-18Bp组小鼠富血小板血浆中IL-18、IL-6、IL-10和TNF-α的表达均较LPS组显著降低（t=8.18、10.95、5.34、10.68，均P＜0.05）；脾脏病理分析显示，LPS/IL-18Bp组脾脏炎症细胞较LPS组明显减少。结论:IL-18Bp能够缓解LPS诱导小鼠血小板减少、血小板活化和炎症反应，并提高LPS诱导血小板减少小鼠模型的生存率，对LPS诱导血小板减少模型小鼠具有一定的保护作用。     

盐酸利托君联合硫酸镁治疗早产胎膜早破的疗效分析

目的研究盐酸利托君联合硫酸镁治疗早产胎膜早破的疗效。方法将该院收治的早产胎膜早破患者纳入研究,根据治疗方法不同分为给予盐酸利托君联合硫酸镁治疗的观察组和仅给予硫酸镁治疗的对照组,比较两组患者的分娩结局以及炎症反应情况。结果观察组产妇的早产率以及胎儿的早产存活率、足月存活率均低于对照组,足月分娩率均高于对照组;观察组产妇的TNF-a[（0.73±0.12）vs（1.84±0.31）]ug/L、IL-1[（104.8±18.2）vs（233.9±28.3）]ng/L、IL-6[（58.5±8.2）vs（172.9±43.6）ng/L]水平均低于对照组。结论盐酸利托君联合硫酸镁治疗能够延长妊娠时间、提高足月分娩率和胎儿存活率,并控制产妇的炎症反应,是治疗早产胎膜早破的理想方法。     

槲皮素对内毒素性心肌损伤的保护作用及机制

目的观察槲皮素对内毒素心肌损伤心肌的保护作用。方法C57BL/6J 小鼠随机分为阴性对照组、槲皮素对照组、内
毒素血症组以及槲皮素干预组。阴性对照组给予等体积生理盐水腹腔注射,槲皮素干预组大鼠食用含按槲皮素的鼠饲料
（100 mg/kg）。内毒素组小鼠腹腔注射LPS（10mg/kg）诱导内毒素血症模型。槲皮素干预组大鼠先食用含槲皮素（100 mg/kg）
的饲料7 d后,腹腔注射LPS（10mg/kg）。6 h后超声心动仪测定小鼠心功能;Western blot法检测小鼠心肌组织Bax、Bcl-2、NOS
和eNOS表达水平,以及血清中NO含量。同时,记录小鼠5 d生存率,并描绘生存曲线。结果槲皮素预处理后,与内毒素组相
比,小鼠心肌功能显著得到了改善;内毒素组小鼠心肌组织中iNOS蛋白水平增高,eNOS水平降低。而经槲皮素干预后,iNOS
蛋白表达量明显降低,eNOS表达水平增高;LPS处理后,Bax显著增高,Bcl-2轻微降低。槲皮素干预后,Bax降至对照组水平,
Bax/Bcl-2比值降低;内毒素组小鼠血清NO水平增高近3.5倍。槲皮素处理后,NO含量明显降低(P<0.05);内毒素组5d后小鼠
生存率为10%,而槲皮素干预组生存率达45%（P<0.05）。结论槲皮素可减轻LPS 所致的小鼠心功能不全,改善生存率。
     

MMP-8、IL-6、IL-8水平与早产、胎膜早破关系的研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-8(MMP-8)、细胞因子IL-6、IL-8与早产、胎膜早破的关系.方法 选择单胎初产妇100例作为研究对象,按孕周、胎膜是否破裂和产妇是否临产分为早产临产(PL)、未足月胎膜早破(PPROM)、足月胎膜早破(TPROM)、足月临产(TL)、足月未临产产妇组(对照组),共5组,每组各20例.用ELISA法检测孕妇羊水及血清中MMP-8及IL-6、IL-8的水平.用免疫组化法(SP)检测所有产妇子宫下段近宫颈处胎膜组织MMP-8的表达情况.结果 (1)PL、PPROM、TPROM、TL组羊水MMP-8水平分别为(465.71±78.02)ng/ml、(474.12±65.08)ng/ml、(262.81±43.56)ng/ml、(203.46 4±46.94)ng/ml,均高于对照组(121.57±37.38)ng/ml(均P<0.05),PL、PPROM组高于TPROM、TL组(均P<0.05),各组血清MMP-8水平差异无统计学意义(P>0.05);(2)PL、PPROM、TPROM组血清和羊水中IL-6、IL-8水平均高于TL组和对照组(均P<0.05),PPROM组高于TPROM、PL组(均P<0.05);(3)PL、PPROM、TPROM、TL组子宫下段近宫颈处胎膜组织MMP-8表达的免疫组化积分高于对照组(均P<0.05);(4)PL、PPROM、TPROM组合并绒毛膜羊膜炎患者羊水中MMP-8和IL-6、IL-8水平明显高于非绒毛膜羊膜炎患者(均P<0.05);(5)羊水中MMP-8水平与血清、羊水中IL-6、IL-8水平呈正相关(r=0.798、0.793.均P<0.05);羊水MMP-8水平与MMP-8在胎膜上的表达呈正相关(r=0.662 P<0.05).结论 (1)MMP-8、IL-6、IL-8与早产、胎膜早破密切相关;(2)羊水MMP-8和血清、羊水IL-6、IL-8的升高对诊断绒毛膜羊膜炎有临床应用价值,可作为早产、胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的诊断指标;(3)羊水中MMP-8、IL-6、IL-8的升高在早产、胎膜早破中起协同作用,细胞因子IL-6、IL-8通过诱导MMP的合成和活化,使羊水中MMP-8水平升高及胎膜MMP-8表达增加,导致早产、胎膜早破.     

氯胺酮对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的影响及其机制

目的探讨不同剂量氯胺酮对内毒素（LPS）诱导大鼠肺损伤的影响和作用机理。方法48只雄性Wistar大鼠随机分为4组：对照组,LPS组（5mg／kg）,低剂量氯胺酮治疗组（5mg／kg）,高剂量氯胺酮治疗组（10mg／kg）,每组12只。建立内毒素诱导的大鼠急性肺损伤模型,于注射LPS后4h处死大鼠,测肺湿／干重比,观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞计数比、蛋白浓度,测肺组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）、NO水平。RT．PCR测肺组织中．NOSmRNA表达,Western-blot测肺组织中NF-κB蛋白表达。结果LPS组大鼠肺湿／干重比、BALF中性粒细胞计数比、蛋白浓度均明显增加（P〈0．01）,肺组织中TNF-α、IL-8、NO水平显著性升高（P〈0.01）,同时肺组织中iNOSmRNA和核因子-κB（NF-κB）蛋白表达均增加。而氯胺酮治疗组的各项指标均较LPS组减轻,大剂量组作用更明显。结论氯胺酮通过抑制NF-κB表达,减少炎症性细胞因子的产生,从而对内毒素（LPS）诱导的大鼠肺损伤有一定保护作用。     

Role of Nuclear Transcription Factor-κB in Endotoxin-induced Shock in Rats

To investigate the role of NF-κB in endotoxic shock in rats. the model of endotoxinshock rats was induced by intravenous infusion of lipopolysaccharidc (LPS). 1 h. 2 h. 4 h and 6 h after LPS injection, the activation of NF-κB in blood mononuclear cells and the content of TNF-α and IL-6 in plasma was detected by enzyme-linked immunoadsordent assay (ELISA). The level of mean arterial pressure (MAP) and the histopathological changes of lung and liver were also observed. The activation of NF-κB in mononuclear cells increased 1 h after LPS injection and reached its peak 2 h after the injection, and its level was higher than that of normal group. The level of TNF-α was increased 1 h after the infusion and peaked 2 h after the injection, and its level was higher than that of normal group after LPS infusion. The content of IL-6 increased gradually with time. the IL-6 level was higher than that of normal group after LPS injection. MAP was decreased gradually with time and its level was lower than that of normal group after LPS injection. Pathological examination showed that endotoxic shock could cause pulmonary alveolar hemorrhage, edema and infiltration of inflammatory cell in lung tissue and congestion, edema, capillary dilation and inflammatory cell infiltration in liver tissue. It is concluded that NF-κB can up-regulate the expression of TNF-α and IL-6 in plasma and play an important role in endotoxin induced shock in rats.