骨科感染创面铜绿假单胞菌耐亚胺培南临床分析

目的：探讨骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因和可能机制。方法：检测37株骨科感染创面铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD2及金属β-内酰胺酶的表达情况,分析铜绿假单胞菌感染患者临床情况。结果：37株实验菌株中,15株对亚胺培南敏感,22株对亚胺培南耐药,其中有17例与ICU或呼吸内科住院有关,耐药株患者中APACHEⅡ评分达12以上占45．5％,平均住院时间（26．9±7．5）d,2周内有亚胺培南或美罗培南使用史者45．5％（10／22）;敏感株患者中APACHEⅡ评分〉12者6．7％,平均住院时间（13．5±6．6）d,2周内有亚胺培南或美罗培南使用史者0％（0／15）。OprD2相对含量耐亚胺培南菌株组为（2．65±0．54）％,明显低于亚胺培南敏感菌株组的（5．38±0．81）％（P〈0．01）。37株实验菌株中产金属β-内酰胺酶5株（13．5％）,并均在耐亚胺培南菌株组中。结论：他科输入、病情危重免疫力低下、住院时间长、碳青霉烯类抗生素使用是骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培能耐药的主要原因,而OprD2的含量减少和产金属β-内酰胺酶是骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培能耐药的重要机制。     

耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的探讨耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药特性。方法常规方法进行菌株分离，经革兰染色、氧化酶试验等初筛，再经VITEK-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验，部分药敏采用KB法。结果2005年6月至2006年12月分别检测到42株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和30株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌，标本来源主要为痰液，占75．0％（54／72），其次为伤口分泌物8．3％（6／72）。耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌病区分布前4位的是呼吸内科（45．8％）、神经内科（23．6％）、血液内科（18．1％）和神经外科（9．7％）。耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用17种抗菌药物耐蕴率〉50％的有11种，其中耐药率〉90％的也有7种，分别为氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦、头孢唑林、头孢替坦、头孢曲松、复方磺胺甲唑和呋喃妥因，耐药率较低的有妥布霉素（11．9％）、阿米卡星（13．3％）和庆大霉素（21．7％）。耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对常用的17种抗菌药物耐药率最低的为头孢哌酮／舒巴坦（16．7％），对其余16种抗菌药物的耐药率均〉80％。结论耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的多重耐药性严重，临床可根据药敏试验选用抗菌药物，在本文条件下耐亚胺培南鲍曼不动杆菌建议选用头孢哌酮／舒巴坦；耐亚胺培南的铜绿假单胞菌建议选用妥布霉素、阿米卡星和庆大霉素。     

铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及其耐药表型与外膜蛋白OprD2的关系

目的 了解铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）临床分离株对几种常用抗铜绿假单胞菌药物的敏感性；探索铜绿假单胞菌临床分离株对亚胺培南和美罗培南耐药性差异与其膜孔蛋白0prD2变化的关系。方法琼脂对倍稀释法测定142株Pa对亚胺培南、美罗培南等8种常用抗假单胞菌药物的最低抑菌浓度，从中筛出32株对亚胺培南和美罗培南不同耐药表型的Pa，提取外膜蛋白并采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法分离，检测OprD2相对含量。结果耐药率最高的是亚胺培南（54．23％），其次是环丙沙星（45．07％）、美罗培南（28，87％）、氨曲南（19．72％）、阿米卡星（17.61％）、哌拉西林／三唑巴坦（14．08％）和头孢他啶（11．97％），头孢哌酮／舒巴坦耐药率最低（9．86％）。呈现多重耐药的菌株占38．73％（55／142），交叉耐药率高达40．84％（58／142）。在对亚胺培南耐药的菌株中，合并有其他肛内酰胺类抗生素耐药的菌株达到62．34％（48／77）。32株Pa外膜蛋白电泳结果显示OprD2相对含量在耐药组为0～3．5％（其中有一株为8.70％），敏感组为6．20％～10.20％。在碳青霉烯类耐药组与敏感组之间统计分析P〈0．05，耐碳青霉烯类组低于敏感组，但是在亚胺培南耐药、美罗培南敏感组与亚胺培南、美罗培南均耐药组之间差异无统计学意义。结论铜绿假单胞菌耐药菌株常见，且常呈多重耐药和交叉耐药。亚胺培南耐药率高于美罗培南。膜孔蛋白OprD2减少或缺失是我院Pa对亚胺培南耐药的主要原因之一。但在美罗培南耐药中所起的作用，有待进一步研究。     

2015—2017年福州市第二医院铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析

目的 分析2015—2017年福州市第二医院铜绿假单胞菌的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法 收集福州市第二医院2015—2017年临床分离的943株铜绿假单胞菌,对其标本来源分布、科室分布和耐药性进行分析。结果 共分离出943株铜绿假单胞菌,下呼吸道标本和伤口分泌物分别占50.2%、35.6%;科室分布以骨科（29.5%）最多,其次为呼吸内科（13.8%）和ICU（10.8%）。各年耐药率、菌株分离率总体呈下降趋势。铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率最高,达25.7%,对亚胺培南和美洛培南的耐药率分别为13.9%、9.1%,对阿米卡星的耐药率最低,为2.1%。骨科铜绿假单胞菌对亚胺培南（2.5%）和美洛培南（1.8%）仍然十分敏感。但呼吸内科和ICU的铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率已经高达30%、20%。结论 应加强细菌耐药监测,采取有效措施控制耐药菌株传播,对延缓泛耐药铜绿假单胞菌的出现和防止水平传播将起到重要作用。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床分离株金属酶检测的研究

目的了解云南省安宁地区临床分离的铜绿假单胞菌(PA)亚胺培南耐药株产金属酶β-内酰胺酶的情况。方法以头胞他啶、亚胺培南,美洛培南为底物,以地酸二钠(EDTA-Na2)为酶抑制剂,应用复合纸片法检测159株临床分离的PA亚胺培南耐药株β-金属内酰胺酶。结果 159株受试菌株中有35株复合纸片试验阳性,表示受试菌株产金属β-内酰胺酶。结论产金属酶是PA对碳青酶烯类抗菌药物耐药的机制之一;实验室重视对金属酶的检测可帮助临床合理选用抗菌药物并减少细菌耐药性的传播。     

耐亚胺培南铜绿假单胞细菌临床分离株金属酶检测的研究

目的了解昆明地区临床分离的铜绿假单胞菌(PA)亚胺培南耐药株产金属酶β-内酰胺酶的情况。方法以头孢他啶、亚胺培南、美洛培南为底物,乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)为酶抑制剂,应用复合纸片法检测159株临床分离的PA亚胺培南耐药株产金属β-内酰胺酶。结果159株受试菌株中有35株复合纸片试验阳性,表示受试菌株产金属β-内酰胺酶。结论产金属酶是PA对碳青酶烯类抗菌药物耐药的机制之一,实验室重视对金属酶的检测可帮助临床合理选用抗菌药物并减少细菌耐药性的传播。     

某院1998—2010年两种非发酵菌耐药率情况及与抗生素使用相关性分析

目的研究1998—2010年铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌两种非发酵菌耐药性水平变化情况,以及耐药率与抗生素使用之间的相关关系。方法回顾性调查1998—2010年本院铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌两种非发酵菌分离及耐药情况,同时调查同期抗生素的使用消耗情况,采用世界卫生组织(WHO)推荐的限定日剂量(DDD)法分析抗生素的用药频度(DDDs),用SPSS13.0统计软件统计抗生素使用与细菌耐药之间的相关分析。结果铜绿假单胞菌对丁胺卡那、头孢他啶较敏感,耐药率在20%左右,对其他抗生素的耐药率都超过了30%。鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美洛培南耐药率上升较快,到2010年接近40%,耐药率较低的为头孢哌酮舒巴坦,但也超过了30%。统计结果显示亚胺培南、氨曲南的使用DDDs与铜绿假单胞菌的耐药率呈正相关;亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的使用DDDs与鲍曼不动杆菌的耐药率呈正相关。铜绿假单胞菌与不同类抗生素累计DDDs之间相关性统计显示头孢类抗生素的使用与头孢哌酮、氨曲南及亚胺培南的耐药率之间,复方制剂的使用与环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率之间,碳青霉素类抗生素的使用与头孢哌酮、氨曲南及亚胺培南的耐药率之间呈正相关关系。鲍曼不动杆菌耐药率与不同类抗生素累计DDDs之间相关性统计显示,头孢类抗生素的使用与亚胺培南、头孢噻肟及哌拉西林钠他唑巴坦的耐药率之间,复方制剂的使用对头孢他啶、环丙沙星及头孢哌酮/舒巴坦耐药率之间,碳青霉烯类抗生素的使用对亚胺培南、美洛培南、头孢噻肟及哌拉西林/他唑巴坦耐药率之间呈正相关。结论抗菌药物的使用对两种非发酵菌造成了很大压力,耐药现象严重。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶类型的研究

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其它抗菌药物的耐药性及其产金属β-内酰胺酶的类型。方法收集同济医院2004年1月-9月耐亚胺培南铜绿假单胞菌29株，琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）；通过改良Hodge试验、双纸片协同试验（DDST）、聚合酶链反应（PCR）、序列分析等方法分析金属β-内酰胺酶类型，紫外分光光度法测定金属β-内酰胺酶的活性。结果29株细菌均为多重耐药株。11种常用抗菌药物中，仅对哌拉西林／三唑巴坦和阿米卡星敏感率较高，分别为69．7％和60．6％。29株菌中有2株产VIM-2金属β内酰胺酶（6．9％）。结论本院耐亚胺培南铜绿假单胞菌流行主要为医院感染所致，且里多重耐药，有2株发现产VIM-2型金属β-内酰胺酶．     

住院患者临床分离菌菌群分布的随机监测分析

目的了解住院患者临床分离菌的分布及耐药情况，为指导临床合理用药提供参考依据。方法采用Vitek-2全自动微生物分析仪及纸片扩散法（Kirby-Bauer），对778株临床分离菌进行鉴定及药物敏感试验。结果778株分离菌中革兰阴性（G^-）杆菌占52．70％，革兰阳性（G^＋）球菌占35．60％，真菌占11．70％。G^＋球菌对万古霉素的敏感率均达100％，而G^-杆菌对碳青霉烯类抗生素的敏感率未达100％，其中铜绿假单胞菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率分别为24．00％和18．67％，鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率均为4．76％。结论该资料对医院临床抗感染治疗及抗菌药物的选择有参考价值。     

下呼吸道标本铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性分析及机制探讨

铜绿假单胞菌是引起医院内感染的主要病原菌。亚胺培南作为革兰阴性菌的最有效的抗生素，随着青霉烯类抗生素的广泛应用，铜绿假单胞菌的耐药菌株逐渐增多，给临床治疗带来困难。因此，研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制显得尤为重要。为了解我院临床送检的下呼吸道标本铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药情况及机制。我们通过检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶的产生状况以及细胞内主动外排泵出机制两个方面来探讨其耐药机制，现报道如下。     

体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药性的比较

目的通过体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南产生耐药,比较两者产生耐药的时间,分析哪种药更易诱导铜绿假单胞菌产生耐药。方法收集20株对所有抗生素均敏感的铜绿假单胞菌和20株质控菌株,先用肉汤培养,连续传代7次,再用肉汤稀释法测出其平均抑制浓度(MIC),然后按MIC/2配制亚胺培南和美罗培南浓度。肉汤中分别加入配制的亚胺培南和美罗培南,培养观察其耐药性,如耐药性增加,测出其MIC值,取MIC/2值浓度,继续培养至完全耐药。结果质控铜绿假单胞菌在用亚胺培南平均4d后就产生耐药,用美罗培南平均16d后产生耐药;患者铜绿假单胞菌在用亚胺培南平均3d后就产生耐药,用美罗培南平均15d后才产生耐药。结论质控铜绿假单胞菌和患者铜绿假单胞菌对亚胺培南产生耐药的平均时间远小于对美罗培南产生耐药的平均时间,亚胺培南比美罗培南更容易诱导铜绿假单胞菌产生耐药。     

临床常见革兰氏阴性杆菌对抗菌药物的耐药监测

目的了解医院内常见病原菌分布情况,对抗菌药物的耐药性进行回顾性统计分析。方法按《全国临床检验操作规程》第三版进行,对临床送检的标本,分离培养并进行药敏试验后统计分析。结果分离出病原菌前几位是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希氏菌、肠杆菌属、肺炎克雷伯氏菌。分离阳性率前三位的标本是痰、尿、引流液。对抗菌药物耐药率较低是碳青酶烯类药物亚胺培南（IPM）0%,美洛培南（MEM）0%,酶复合抑制剂类药物头孢哌酮/舒巴坦（SCF）0%,哌拉西林/他唑巴坦（TZP）21.0%,头孢菌素类药物头孢吡肟（FEP）3.0%,头孢他啶（CAZ）8.0%,氨基糖苷类药物阿米卡星（AK）5.0%,喹诺酮类药物左氟沙星（LVF）10%。结论严格操作执行操作规范,加强细菌耐药性的监测,为临床合理用药提供依据。     

碳青霉烯类抗菌药物对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的防突变浓度研究

目的:探索碳青霉烯类抗菌药物对临床分离的100株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶表型和铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的防突变浓度(MPC)。方法:采用琼脂稀释法测定碳青霉烯类(亚胺培南、美洛培南、厄他培南和多利培南)对临床分离的革兰阴性耐药菌株的最低抑菌浓度(MIC)及MPC并计算MPC/MIC比值。采用WHONET 5.6及SPASS 13.0进行分析。结果:肠杆菌科细菌和鲍曼不动杆菌的MPC/MIC比值为2~4,铜绿假单胞菌为4-≥16。β-内酰胺酶阳性的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌MPC/MIC比值高于β-内酰胺酶阴性菌株(4至 > 16 μg·mL^-1)。结论:基于MPC的碳青霉烯类抗菌药物可以通过MPC/MIC比值调整给药剂量,降低耐药菌株的总体数量和感染负荷,抑制耐药菌突变体的选择性富集扩增。     

老年患者下呼吸道铜绿假单胞菌感染临床分布与耐药性分析

目的:分析老年患者下呼吸道铜绿假单胞菌感染临床分布与耐药性。方法:搜集2011年6月至2013年6月我院老年下呼吸道感染住院患者,分离培养出铜绿假单胞菌菌株痰标本156份,用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对临床标本中分离的156株铜绿假单胞菌进行鉴定,并采用琼脂扩散法进行体外药敏试验,依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)最新折点判读结果。结果:非多重耐药(MDR)铜绿假单胞菌临床分离株对头孢噻肟、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药性最高,耐药率达70%以上;对亚胺培南、美罗培南、氨曲南和头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林/舒巴坦、阿米卡星的耐药率均在20%以内,其中亚胺培南、美罗培南敏感性均达到100%。而MDR菌株对哌拉西林、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、妥布霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶高度耐药,耐药率达100%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星耐药率高达60%以上,对亚胺培南、美罗培南、氨曲南依旧敏感性较好,耐药率均低于20%。结论:亚胺培南、美罗培南对铜绿假单胞菌有较好的敏感性,可作为老年患者重症下呼吸道铜绿假单胞菌感染治疗的首选药物,如MDR铜绿假单胞菌感染,可联合用药。在联合用药的同时应当加强医院的抗生素合理使用,规范临床用药。     

2种培养基对碳青霉烯类药物抗非发酵菌体外药敏检测结果的影响

目的：评估低氨基酸培养基和MH培养基对碳青霉烯类药物抗非发酵菌体外药敏检测结果的区别。方法：采用琼脂稀释法分别使用MH和低氨基酸培养基测定亚胺培南、美罗培南、帕尼培南等10种抗菌药物对我院临床分离60株铜绿假单胞菌和140株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）,比较其结果的差异。结果：使用MH琼脂作为药敏培养基时,60株铜绿假单胞菌和140株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南和帕尼培南的敏感率分别为90%、85%和68.3%和15.7%、23.6%和15%;使用低氨基酸琼脂作为药敏培养基时,它们的敏感性分别上升到100%（P=0.272）、96.7%（P=0.053）、93.3%（P=0.001）和90.7%（P=0.001）、98.6%（P=0.001）和91.4%（P=0.001）,其中铜绿假单胞菌对帕尼培南的敏感率上升有显著差异,而鲍曼不动杆菌对三者的敏感率上升均有显著差异。结论：我院分离的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的耐药率较高。碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的抗菌活性高于其它类抗菌药物。低氨基酸培养基,由于其碱性氨基酸浓度降低至与人血清中相近的浓度,适宜用于帕尼培南体外敏感性测定。     

痰标本中金黄色葡萄球菌的分离及耐药性分析

目的 回顾性分析痰标本中金黄色葡萄球菌的临床分布和耐药情况,为预防控制措施的制定提供依据.方法 对2009年1月至2013年9月内蒙古自治区人民医院临床分离的309株金黄色葡萄球菌进行分析,细菌鉴定和药敏试验采用VITEK 2 Compact全自动细菌培养鉴定仪.结果 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的分离率为78.6％（243/309）,β内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌分离率为90.0％（278/309）;金黄色葡萄球菌的病区来源主要为神经内科[30.7％ （95/309）]、重症监护病房[22.0％（68/309）]、神经外科[16.5％（51/309）]、呼吸内科[9.4％ （29/309）].金黄色葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、奎奴普丁/达福普汀和呋喃妥因的耐药率≤2.1％,MRSA与对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）以及β内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌与β内酰胺酶阴性金黄色葡萄球菌间的耐药性差异无统计学意义（P＞0.05）;对复方新诺明的耐药性MRSA低于MSSA（P ＜0.05）,β内酰胺酶阳性低于β内酰胺酶阴性金黄色葡萄球菌（P＜0.05）.对其他抗菌药物的耐药性MRSA高于MSSA（P ＜0.05）;β内酰胺酶阳性高于β内酰胺酶阴性金黄色葡萄球菌,但除左旋氧氟沙星外（P＜0.05）,其他差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 MRSA和β内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌的检出率和耐药性较高,临床应依据药敏试验监测结果合理选择抗菌药物.     

Antimicrobial activity of carbapenems and the combined effect with aminoglycoside against recent clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa

The carbapenem susceptibility of 32 strains of Pseudomonas aeruginosa recently isolated in Kakogawa municipal hospital was investigated. The MIC ranges of imipenem, panipenem, and meropenem were 0.25-16 mg/L, 0.5-16 mg/L, and < 0.03-4 mg/L, respectively, and meropenem showed the highest antipseudomonal activity among the three carbapenems tested. In the analysis based on the MIC interpretive standards established by NCCLS, the resistance rates of test strains for imipenem, panipenem, and meropenem were 6.3%, 15.6%, and 0%, respectively. We also investigated the in vitro combined effect of imipenem or meropenem with amikacin against another 20 isolates of P. aeruginosa by checkerboard titration assay. Antagonism (minimum FIC index > 2) was not observed in any combinations against all strains tested. Super-additive effects (minimum FIC index < 1) in the combination of imipenem and amikacin were observed in eight (40%) strains tested. In contrast, in the combination of meropenem and amikacin, super-additive effects were observed in 14 isolates (70%). These results suggested that meropenem is superior to imipenem in combined effect with amikacin against P. aeruginosa. In conclusion, meropenem showed higher antipseudomonal activities than other carbapenems tested in both conditions, alone and in combination with amikacin. With regard to the clinical efficacy and prevention of antibiotic resistance, meropenem monotherapy or combination therapy with aminoglycoside is the most superior treatment for pseudomonal infections, and the findings in this study suggest that meropenem is still clinically very useful.     

铜绿假单胞菌感染分布及耐药性分析

目的 了解我院铜绿假单胞菌的感染分布与耐药情况,为临床治疗提供依据.方法 对住院患者送检样本中培养分离出的403株铜绿假单胞菌的感染分布与耐药情况进行分析.采用稀释法进行药物敏感试验,结果按美国临床实验室标准化研究所标准判定.结果 铜绿假单胞菌主要来自痰标本(339株,84.1％),耐药率最高为头孢曲松(271株,67.2％),对亚胺培南的耐药率最低(61株15.1％),其次为哌拉西林/他唑巴坦(90株,22.3％),对其他11种抗菌药物的耐药率均较高.结论 铜绿假单胞菌主要引起呼吸道感染,对现有多种抗菌药物耐药严重,提示临床医生必须对该菌所致感染予以高度重视,关注易感人群,加强对该菌的监测,合理使用抗菌药物,以提高疗效和减缓耐药菌株的产生.