微血管内血栓形成实验模型的建立与应用

目的 :建立一种血栓形成的模型 ,用于新药开发的药效研究。方法 :利用光化学反应原理制备血栓模型 ,即从静脉内注入光敏剂—血卟啉 ,用落射荧光显微镜的汞灯作光源 ,经紫外滤光片 (波长为 45 5nu)照射后 ,成功地建立了局部血管内血栓形成的模型。在此模型上 ,研究了四种中药制剂抗血栓形成的预防作用。通过观测光照后微血管内血栓形成的时间、血栓的大小等变化进行比较。结果 :四种中药制剂预防组血栓出现的时间均晚于对照组 ,血栓的面积也小于对照组 ;四种中药制剂抗血栓形成的药效有明显的差异 ,2号制剂有极显著效果。结论 :该模型制作简单 ,重复性好 ,病灶的部位、大小容易控制 ,对研究在体血栓形成过程的动态变化 ,尤其是对于抗血栓药物的药效研究有着很好的适应性     

胰激肽原酶减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

目的:探讨胰激肽原酶(PK)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠建立UUO模型后随机分为4组:UUO7组、UUO14组、UUO+PK7组和UUO+PK14组,其中UUO+PK7组和UUO+PK14组给予腹腔注射PK(7.2 U·kg^-1·d^-1)治疗14 d,分别于第7天和第14天处死大鼠;假手术组给予生理盐水。采用Masson染色、HE染色和透射电镜观察各组大鼠的肾间质纤维化程度;免疫组化和Western blot法分别检测炎症因子、致纤因子、氧化应激、细胞凋亡及细胞自噬调控因子的表达。结果:PK治疗明显减轻UUO大鼠肾小管间质纤维化程度,并呈时间依赖性,这种改善伴随着炎症介质[单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和Toll样受体2(TLR-2)]及致纤因子[转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)]的表达下调。UUO所致氧化应激表现为氧化酶[NADPH氧化酶2(NOX-2)和NOX-4]的表达增加和抗氧化酶[超氧化物岐化酶1(SOD1)和SOD2]的表达...     

丹参和胰激肽原酶联用对早期糖尿病肾病患者尿蛋白的影响

糖尿病肾病是糖尿病常见的慢性并发症之一，是糖尿病致死致残的重要原因之一。微量白蛋白尿是糖尿病肾病的早期临床表现，如经过早期诊断、早期治疗可使糖尿病肾病逆转或延缓进展。目前早期肾病的治疗除控制血糖、血压以外，可采用中西医联合治疗。本文采用丹参和胰激肽原酶注射液治疗糖尿病肾病，取得了较好的疗效。     

组织因子在大鼠脑微血管血栓形成中的表达

目的：探讨大鼠脑皮质微血管血栓模型中组织因子（TF）表达的动态变化及意义。 方法： 50只SD雌性大鼠，随机分成正常对照组、血栓2 h、4 h、6 h、24 h组，每组10只，应用光化学法诱导脑皮质微血管梗塞模型。分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫组化的方法检测脑血栓2 h、4 h、6 h、24 h血浆和脑血栓形成局部TF表达水平的变化。 结果： HE光镜和电镜观察的病理形态变化显示复制大鼠脑皮质微血管梗塞模型成功。血浆中TF含量4 h、6 h组显著高于正常对照组（P<0.01）。脑血栓局部微血管内皮细胞TF表达阳性，对照组为阴性，血栓6 h和24 h组TF平均吸光度值显著高于2 h和4 h组（P<0.01）。血浆中血管性血友病因子（vWF）含量2 h（P<0.01）、4 h（P<0.05）组显著高于正常对照组，抗凝血酶（AT）活性24h组显著高于其它各组（P<0.05）。 结论： 光化学诱导大鼠脑血栓形成模型操作简单，稳定可靠，与人体血栓形成过程相似：血管内皮损伤及内皮下TF暴露启动外源性凝血途径。组织因子凝血途径易化因素增强，表明TF参与大鼠脑皮质微血管血栓形成。     

白眉蝮蛇毒激肽原酶对糖尿病模型大鼠血液学变化的影响

目的:从白眉蝮蛇毒中提取激肽原酶,研究白眉蝮蛇毒激肽原酶对糖尿病大鼠血液学变化的影响.方法:用疏水层析技术从白眉蝮蛇毒中提取出的一种高纯度的激肽原酶,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制造大鼠糖尿病模型,将糖尿病大鼠随机分为三组,蛇毒激肽原酶组静脉注射白眉蝮蛇毒激肽原酶,阳性对照组不予处理,消渴丸组灌胃给予消渴丸研粉,另取正常大鼠作为阴性对照组.检测血糖、血小板聚集率、全血黏度.结果:蛇毒激肽原酶降糖作用不明显,但可显著降低实验大鼠模型的血小板聚集率及全血黏度,在改善全血黏度方面优于消渴丸.结论:蛇毒激肽原酶可通过对血液流变的改善作用达到防治糖尿病血管病变的作用.     

磷脂酶A2对大鼠胰性脑病的作用

目前，对胰性脑病（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ，ＰＥ）的病因认为是急性胰腺炎导致胰酶逸出、磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｅｎｚｙｍｅＡ２，ＰＬＡ２）活化入血，通过血脑屏障而引发脑组织出血、软化和脱髓鞘改变。作者就ＰＥ动物模型...     

大鼠胰淋巴管的微细分布

采用半薄切片光镜观察和超薄切片电镜观察方法研究了大鼠胰淋巴管的微细分布。结果证明 ,在胰小叶内包括胰岛内及其周围均不存在毛细淋巴管和淋巴管而有丰富的血管 ;胰的毛细淋巴管和淋巴管仅见于小叶间的结缔组织内。     

肥大细胞介质──胃促胰酶的某些生物学特性及作用

本文介绍了肥大细胞胃促胰酶在体内的分布，引入了肥大细胞ＭＣＴＣ及ＭＣＴ亚群的概念，介绍了此酶的某些生物学特性及作用的研究进展．     

卵泡刺激素对大鼠胰岛素和胰高血糖素分泌影响的体外研究

目的研究卵泡刺激素（FSH）在体外对胰腺组织分泌胰岛素和胰高血糖素的影响.方法体外孵育大鼠胰腺组织并施加不同浓度FSH,应用酶联免疫分析（ELISA）方法检测上清液中胰岛素和胰高血糖素的含量.结果当FSH浓度小于10^-2IU/L时,胰岛素和胰高血糖素分泌量随FSH浓度的增加而减少;当FSH浓度大于10^-2IU/L时,胰岛素和胰高血糖素分泌量随FSH浓度的增加而增加.结论FSH在体外对胰岛素和胰高血糖素分泌具有相同的双向调节作用,FSH可能对胰腺内分泌具有调节功能.     

怡开对白细胞粘附和血液流变性影响的研究

目的 :深入探讨怡开改善微循环及血液流变学的作用机理。方法 :利用活体肠系膜微循环观察、血液粘度和红细胞变形性测定方法。结果 :对照组用内毒素后明显引起静脉内白细胞粘附、游出和血小板聚集 ,血流减慢 ,内皮水肿、内皮细胞间间隙增大、血管内皮损伤、出血等对血管内皮有明显的损伤作用。用PK预防的大鼠明显减轻内毒素引起的白细胞粘附、游出和血小板聚集 ,未见血管内皮水肿和血栓形成 ,出血比对照组轻。结论 :用PK预防的大鼠能明显减轻白细胞粘附、游出和血小板聚集等 ,减轻血管内皮水肿和血栓形成 ,对血管内皮的损伤有一定预防作用     

光化学法诱导大鼠脑皮质微血管梗塞凝血系统动态变化的研究

目的 :探讨大鼠脑皮质微血管梗塞模型凝血系统的动态变化及意义。方法 :5 0只SD雌性大鼠 ,应用光化学法诱导脑皮质微血管梗塞模型 ,观察正常对照组、血栓形成 2h、4h、6h、2 4h等不同时相大鼠血浆中组织因子 (TF)含量、血管性血友病因子 (vWF)含量、凝血酶原时间 (PT)、部分凝血活酶时间 (APTT)、纤维蛋白原 (Fbg)的动态变化。结果 :光镜和电镜的病理形态学显示大鼠脑皮质微血管内皮损伤和血栓形成。血浆中TF含量 4h、6h组显著高于正常对照组 (P均 <0 .0 1) ;vWF含量 2h、4h组显著高于正常对照组 ,P值分别小于 0 .0 1～0 .0 5。PT 4h组比正常对照组明显缩短 (P <0 .0 1) ;APTT 4h、6h组比对照组显著缩短 (P <0 .0 5 )。结论 :光化学法可诱导脑皮质微血栓形成。TF、vWF含量增高 ,PT和APTT缩短是血栓形成的促发因素和病理表现。     

东菱克栓酶对大鼠急性肠系膜微动脉血栓溶栓作用的实验研究

目的 探讨东菱克栓酶（ＤＦ－５２１）对在鼠肠系膜微动脉血栓的溶栓时间和机制。方法 采用光化学诱导法和静脉注射荧光素钠制作大鼠肠系膜微动脉血栓模型,经显微电视摄像系统和多媒体计算机图像处理技术相结合,定量分析不同剂量组ＤＦ－５２１的溶栓时间以及血管再通程度。     

凝血酶对大鼠脑微血管内皮细胞的影响

目的 :探讨凝血酶 (Thrombin ,TM )对脑微血管内皮的影响。方法 :将大鼠脑微血管内皮细胞进行培养 ,培养液中加入 10U的TM或10U的TM + 0 .4mU的组织蛋白酶G(CaspethsinG ,CATG ) ,相差显微镜动态观察内皮细胞形态的变化 ,免疫组织化学技术检测基质金属蛋白酶 2 (MatrixMetalloproteinase 2 ,MMP 2 )表达的改变。 结果 :TM使内皮细胞发生收缩 ,细胞收缩程度具有时间依赖性 ,使内皮细胞MMP 2表达水平明显增加。TM +CATG加入培养液后 ,细胞形态、MMP 2表达与对照组比较均无明显统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :TM通过激活蛋白酶激活受体 1(proteaseactivatedreceptor 1,PAR 1) ,使内皮细胞发生收缩 ,促进MMP 2表达 ,是TM增加血脑屏障 (BloodBrainBarrier,BBB)通透性的可能机制。     

糖尿病早期大鼠胰岛B细胞超微结构的改变及氨胍的保护作用

目的：探讨糖尿病早期大鼠胰岛B细胞超微结构的改变及氨胍（Aminoguaniodine，AG）的保护作用。方法：选择30只健康成年SD大鼠随机分成Ⅰ（正常对照）组、Ⅱ（糖尿病）组和Ⅲ（糖尿病氨胍治疗）组，对Ⅱ、Ⅲ两组一次性空腹注射链脲佐菌素（Streptozocin，SIZ）诱发糖尿病模型。以后各组大鼠每30d测血糖一次。90d时取胰尾组织行透射电镜观察。结果：在30d、60d和90d后Ⅱ、Ⅲ两组血糖升高，与Ⅰ组比较及Ⅱ、Ⅲ两组间比较，差异有显著性（P〈0．05）。糖尿病90d大鼠胰尾胰岛B细胞核固缩，粗面内质网和线粒体出现退行性改变，并见有大量脂滴堆积。AG治疗组90d大鼠胰尾胰岛B细胞细胞核、粗面内质网和线粒体均有明显恢复，胞浆内未见有脂滴堆积。结论：氨胍对糖尿病大鼠胰岛B细胞有保护作用。     

生长抑素类似物对急性胰腺炎大鼠胰腺微血流的影响及作用

在５％牛磺胆酸钠诱导的大鼠急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）模型上应用胰酶分泌抑制剂ＳＭＳ２０１－９９５（一种生长抑素类似物）防治，并观察其对ＡＨＮＰ时平均动脉压、胰腺微区血流量、血清淀粉酶和脂肪酶及胰腺病理形态的影响。发现ＳＭＳ２０１－９９５对大鼠ＡＨＮＰ时平均动脉压早期无明显影响，１２０ｍｉｎ后有所改善；能显著地降低血清淀粉酶和脂肪酶及减轻胰腺炎的病理学严重程度，并进一步增加胰腺微区血流量。表明ＳＭＳ２０１－９９５通过抑制胰酶释放能有效地防治胰腺炎和改善胰腺微血流，同时也说明胰腺炎时胰腺微循环障碍与大量胰酶释放入血有关     

大鼠脑缺血-再灌注损伤对脑微血管通透性的影响

目的 :探讨大鼠脑缺血 -再灌注后脑组织微血管通透性的变化规律 ,为进一步探讨脑缺血及再灌注损伤机制提供参考数据。方法 :应用荧光素钠 (分子量 3 86 ,Fl Na)和 FITC标记的右旋糖苷( FD4,分子量 40 0 0 )为荧光示踪剂 ,以单侧颈总动脉远心端及同侧颈静脉插管并连接二管造成颈总动脉向颈静脉的引流 ,同时用动脉夹夹闭对侧颈总动脉造成脑缺血模型。缺血 1h后松开动脉夹并中断引流造成再灌注模型。测量脑组织荧光强度反映脑微血管通透性的变化。结果 :单纯的脑缺血即可引起脑组织微血管通透性的增强 ,再灌注后对小分子量物质的通透性随再灌注时间的延长有增加的趋势 ,而对较大分子量物质的通透性基本维持在同一水平。结论 :即使是在再灌注损伤最严重时 ,脑微血管对较大分子量的物质通透仍不明显 ,说明血 -脑屏障的存在可以有效地防止有害物质通过微血管壁侵入脑组织 ,但一旦进入脑组织 ,将滞留于脑组织中不易清除。     

大鼠脑微血管内皮细胞的培养

目的:探索一种简便易行、可培养出高纯度大鼠脑微血管内皮细胞的方法。方法:1月龄SD大鼠,解剖得到大脑皮质,密度离心法获得较纯的脑微血管段后进行原代培养,传代采用差速消化和贴壁方法进行纯化。通过形态学观察及第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测对培养细胞进行鉴定。结果:密度离心法分离出的大量微血管段呈"串珠样"结构,培养24h可见短梭形、多角形细胞,8～10天基本融合。第2代细胞经免疫荧光染色,第Ⅷ因子相关抗原呈阳性,阳性率达90%。结论:原代细胞采用低分子量葡聚糖加Percoll密度离心法、传代细胞采用差速消化和差速贴壁法纯化可成功培养高纯度的脑微血管内皮细胞。     

Protective Effect of Quercetin on the Morphology of Pancreatic ��-Cells of Streptozotocin-Treated Diabetic Rats

This study was undertaken to investigate the protective effects of quercetin (QCT) on the morphology of pancreatic β-cells against diabetes mellitus and oxidative stress experimentally-induced by streptozotocin (STZ) treatment in Wistar rats. Fifty male and female Wistar rats (200–250 g) were randomly divided into three experimental groups (i. e., control, STZ-treated, and STZ + Quercetin-treated groups). Diabetes was induced in the diabetic groups (B and C) of animals, by a single intraperitoneal injection of STZ (75 mg/kg), while each of the rats in the ‘control’ group received equal volume of citrate buffer (pH 6.3) solution intraperitoneally. In group C rats, quercetin (QCT, 25 mg/kg/day i. p.) was injected daily for 3 days prior to STZ treatment, and QCT administration continued until the end of the study period (30 days). Diabetes mellitus was confirmed by using Bayer''s Glucometer Elite® and compatible blood glucose test strips. The rats were sacrificed serially until the end of the study period (after 30 days). The pancreases of the sacrificed rats were excised and randomly processed for histological staining and biochemical assays for antioxidant enzymes [such as glutathione peroxidase (GSHPx), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), malondialdehyde (MDA) and serum nitric oxide (NO)]. In the diabetic state, pancreatic β-cells of STZ-treated group B rats histologically demonstrated an early chromatin aggregation, cytoplasmic vesiculation in the central β-cells, nuclear shrinkage, and lysis of β-cells with distortion of granules. The morphology of QCT-treated rats'' pancreases showed viable cellularity with distinct β-cell mass. STZ treatment significantly decreased (p<0.05) GSHPx, SOD, CAT and pancreatic insulin content. However, STZ treatment increased blood glucose concentrations, MDA and serum NO. The QCT-treated group of animals showed a significant decrease (p<0.05) in elevated blood glucose, MDA and NO. Furthermore, QCT treatment significantly increased (p<0.05) antioxidant enzymes'' activities, as well as pancreatic insulin contents. Quercetin (QCT) treatment protected and preserved pancreatic β-cell architecture and integrity. In conclusion, the findings of the present experimental animal study indicate that QCT treatment has beneficial effects on pancreatic tissues subjected to STZ-induced oxidative stress by directly quenching lipid peroxides and indirectly enhancing production of endogenous antioxidants.     

Stress Response of Pancreatic Islets from Diabetes Prone BB Rats of Different Age

Protective and/or repair mechanisms are thought to be activated in pancreatic beta cells in response to injury during insulitis. Manifestation of type-1 diabetes may depend on an imbalance between beta cell damage and repair. To prove this hypothesis, the ability of collagenase-isolated islets to respond to heat stress depending on the age of BB rats was investigated. The islets were exposed either to 44°C (HS) or 37°C (control) for 30 min and then kept at 37°C for 5 h. Immediately and 5 h after heat shock, insulin secretion in response to 20 mmol/l glucose and total protein synthesis of heat-exposed islets were significantly diminished as compared with controls. The islet proteins were separated by SDS-PAGE followed by immunoblotting. Islets from BB rats at an age of 6-90 days responded to heat shock with the expression of major heat shock protein 70 (HSP 70). Islets from 3-day old rats, however, did not respond with induction of HSP 70. In contrast we could detect inducible HSP 70 in islets from 3-day old diabetes-resistant LEW rats. In islets from 90-day old BB rats we observed a decreased amount of HSP 70 compared with islets from 9-, 12-, 30- and 60-day old animals. There was also a higher extent of HSP 70 to observe in islets from 90-day old LEW rats as compared with 90-day old BB rats. Differences in HSP 70 expression between islets of 3-day old BB and LEW rats and other age groups of BB rats might represent distinct stages of maturation of islets whereas diminished expression of HSP 70 in islets of 90-day old BB rats at the age of high probability of developing diabetes might result from reduced ability to induce protective mechanisms.