促红细胞生成素对人脐静脉内皮细胞HoxD3 mRNA表达的影响

目的研究促红细胞生成素(EPO)对体外培养内皮细胞同源盒基因Hox D3 mRNA表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-RAg)鉴定,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞Hox D3 mRNA的表达水平。结果与PBS空白对照组比较,EPO可明显上调内皮细胞Hox D3 mRNA表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EPO可通过影响内皮细胞Hox D3 mRNA表达,从而调节EPO促血管生成作用。     

重组人促红细胞生成素对人脐静脉内皮细胞PCNA表达的影响

目的研究重组人促红细胞生成素（rHuEPO）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。方法从脐静脉体外分离培养HUVEC，采用细胞培养及免疫组织化学方法检测不同剂量rHuEP0（10U／ml、20U／ml、40U／m1）对HUVEC增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。结果对组照及10U／ml、20U／ml、40U／mlrHuEP0实验组内皮细胞PCNA阳性表达百分率分别为（31±3）％、（40±5）％、（68±6）％和（65±5）％，与对照组相比，rHuEPO作用后内皮细胞PCNA表达明显增强（P〈0．05），且随rHuEPO剂量提高作用增强，呈剂量效应关系。结论rHuEP0可促进体外培养内皮细胞增殖。     

重组人促红细胞生成素对人脐静脉内皮细胞HoxB2及HoxD3 mRNA表达影响

目的研究重组人促红细胞生成素(rHuEPO)调节体外培养内皮细胞参与血管生成机制。方法从人脐静脉体外分离培养内皮细胞(HUVEC),采用形态学观察及血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-R Ag)免疫组织化学方法检测进行内皮细胞鉴定,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测HUVEC同源盒HoxB2及HoxD3基因mRNA表达变化。结果与对照组比较,rHuEPO可明显上调内皮细胞HoxB2及HoxD3 mRNA表达水平,差异有统计学意义(P0.05)。结论 rHuEPO可调节内皮细胞HoxB2及HoxD3 mRNA表达,这种调节作用可能是其促血管生成的主要原因之一。     

小檗碱对人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的作用

目的：观察小檗碱对人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的作用，以探讨小檗碱抑制肿瘤生长与转移的机制。 方法： 用小檗碱与体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共同孵育，以MTT法检测细胞的增殖活性，免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，荧光染色法观察凋亡细胞核形态，用Rhodamine123染色，激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位。 结果： 不同浓度小檗碱与HUVEC共同孵育可明显抑制HUVEC的增殖(P<0.05，P<0.01)，呈现一定的浓度依赖性和时效性；20 mg/L小檗碱与HUVEC共同孵育48 h，可显著降低细胞核PCNA的表达（P<0.01），并可见凋亡细胞数增多、线粒体膜电位明显降低（P<0.01）。 结论： 小檗碱抑制血管内皮细胞的增殖，并促进血管内皮细胞凋亡，从而抑制肿瘤血管形成，可能是小檗碱抑制肿瘤生长与转移的机制之一。     

葛根素通过ERK1/2信号通路促进内皮细胞增殖

目的:体外观察葛根素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的促增殖作用,并对其机制进行初步探讨。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度葛根素对HUVEC细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测p-ERK1/2蛋白表达水平。结果:葛根素能剂量依赖性促进HUVEC增殖,在80μM效果最明显,且作用36h时,能显著减少早期凋亡,激活ERK1/2磷酸化。结论:葛根素素对人脐静脉内皮细胞有明显的促进增殖作用,其作用可能与ERK1/2的活化有关。     

miR-203真核表达载体的构建和重组慢病毒的制备及其对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响

目的 构建含有人源microRNA-203(miR-203)的慢病毒表达载体并制备重组慢病毒,感染人脐静脉内皮细胞系(HUVEC-12),观察其对细胞增殖和迁移的影响.方法 使用PCR方法克隆miR-203前体分子的DNA片段,构建并包装过表达miR-203的重组慢病毒.利用慢病毒感染系统建立稳定过表达miR-203的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-Lv-miR-203).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源导入miR-203的表达情况.MTT法检测miR-203对HUVEC体外生长的影响,利用划痕恢复实验检测miR-203对HUVEC迁移能力的影响.结果 成功构建了过表达miR-203重组慢病毒表达系统.MTT法证实miR-203可在体外抑制HUVEC增殖,划痕恢复实验结果提示该细胞株的迁移能力受到显著抑制.结论 miR-203可以抑制体外培养的HUVEC增殖和迁移.     

激活素受体样激酶1促进人脐静脉内皮细胞增殖和迁徙

目的： 研究激活素受体样激酶1（ALK1）对人脐静脉内皮细胞的作用。 方法： 体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），RT-PCR分析ALK1和ALK5在HUVEC激活状态下表达的变化。脂质体转染pcDNA3.1+ALK1到HUVECs，流式细胞仪检测HUVECs增殖的改变，boyden小室检测ALK1对HUVECs迁徙的影响。 结果： ALK1在HUVEC安静状态高表达，ALK1能促进HUVECs的增殖和迁徙。 结论： ALK1通过促进内皮细胞的增殖和迁徙在血管重塑中发挥作用。     

骨髓间充质细胞来源的血管内皮样细胞与脐静脉血管内皮细胞抗凝基因表达的比较

目的观察不同来源的血管内皮细胞抗凝能力的差异。方法采用密度梯度离心及贴壁培养法对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)进行体外培养、纯化和扩增,用含有VEGF(10μg/L)的诱导培养液对其进行体外诱导分化,1周后免疫组化染色鉴定Ⅷ因子相关抗原(VWF),用RT-PCR法检测BMMSCs来源的血管内皮样细胞及脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的主要抗凝血基因的表达。结果BMMSCs能够在体外成功诱导分化为血管内皮样细胞,但不表达主要抗凝基因的mRNA,而HUVEC能够表达这些基因的mRNA。结论虽然BMSCs能够成功诱导分化为血管内皮样细胞,但它的抗凝能力较HUVEC弱。     

重组人促红细胞生成素对人脐静脉内皮细胞CyclinD1表达的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞周期蛋白CyclinD1的影响。方法采用细胞培养及免疫组织化学方法检测不同剂量(10、20、40U/mL)rHuEPO作用下HUVEC中CyclinD1表达的变化。结果对组照及10、20、40U/mlrHuEPO实验组内皮细胞CyclinD1表达阳性百分率(%)分别为26±3、41±5、69±3、65±4,与对照组相比,rHuEPO作用后HUVEC中CyclinD1表达明显增强(P﹤0.05),且随rHuEPO剂量增加作用增强,呈剂量效应关系。结论rHuEPO能明显促进体外培养内皮细胞CyclinD1表达,提示rHuEPO具促内皮细胞增殖作用。     

树突状细胞体外诱导抗肿瘤血管内皮细胞特异性免疫的研究

目的:探讨肿瘤内皮细胞抗原负载的树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的特异性杀伤效应。方法:采用肿瘤细胞的培养上清诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖,制备肿瘤血管衍生的内皮细胞(TdEC)。用RTPCR检测肿瘤内皮标志物(TEM)的表达。制备TdEC的冻融抗原,负载从外周血中扩增的DC,用MTS比色法检测DC刺激自体淋巴细胞增殖的效应;用LDH法检测DC诱导的CTL的特异性杀伤效应。结果:TdEC可表达TEM1和TEM8。负载TdEC抗原的DC,可显著刺激自体淋巴细胞增殖。由其诱导的CTL对TdEC具有特异性的杀伤作用。在效靶比为20∶1和10∶1时,杀伤率分别为33%和27%,高于对照组的14%和10%。结论:TdEC抗原负载的DC,在体外可有效地诱导CTL产生,并特异性地杀伤TdEC。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.