血清HBVDNAPCR荧光定量检测指导乙型肝炎治疗的分析

目的:采用PCR体外扩增法定量检测乙型肝炎病毒DNA的载量,为乙型肝炎的治疗提供参考。方法:采用PCR体外扩增法定量检测乙型肝炎病毒DNA的载量,检测不同病程状态下的乙肝患者76例,血清标本196例。其中HBeAg阳性的患者30例,血清标本60份;HBeAb阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者30例,血清样本60份;接受α干扰素治疗后发生HBeAg血清学转换的患者11例,血清样本66份;急性乙型肝炎治愈患者5例,血清样本10份。结果:HBeAg阳性的血清中HBVDNA水平为8.0×108copies/mL,明显高于HBeAg阴性患者的血清中HBVDNA水平(6.0×104copies/mL)和HBeAg血清学转换患者的HBVDNA水平(2.0×103copies/mL),康复患者HBVDNA为阴性。结论:血清HBVDNAPCR荧光定量检测可以作为判断HBV感染不同病程的有效指标,为指导乙型肝炎诊断、治疗提供参考。     

EB病毒抗体联合检测在鼻咽癌诊断中的应用评价

目的探讨EB病毒抗体在鼻咽癌诊断中的应用价值。方法采用间接免疫荧光法(ⅡF)测定124例患者(其中包括鼻咽癌53例、鼻息肉26例、鼻咽炎31例、颈部淋巴结炎14例)和正常体检40例血清中4项EB病毒抗体。结果EBV VCA-IgA与EBV-EA-IgG在鼻咽癌组与鼻息肉、鼻咽炎和颈部淋巴结炎组及正常对照组的检测阳性率有非常显著差异(P<0.01);EBV- CA-IgA在鼻咽癌患者的检测阳性率71.7%。以VCA-IgA和EA-IgG两项指标进行平行试验,其敏感性(Sen)为86.1%。以VCA-IgA和EA-IgG两项指标进行序列试验,特异性(Sep)为99.5%。结论鼻咽癌病人的EBV-CA-IgA、EBV-EA-IgG阳性率高、特异性强,可作为鼻咽癌血清学诊断指标。EBV-CA-IgA与EBV-EA-IgG两种抗体同时检测可提高鼻咽癌血清学诊断敏感性和特意性。鼻咽癌以鳞状细胞癌较多,其分化程度越高,EBV-CA-IgA抗体滴度越低。     

外周血单个核细胞和血浆标本EB病毒DNA检测结果的比较

目的：研究外周血单个核细胞和血浆标本中 EB病毒D N A含量的差异。方法选取100例外周血单个核细胞EB病毒DNA载量检测阳性的患者标本,用实时荧光定量 PCR方法检测其血浆标本EB病毒DNA含量,并对结果进行比较分析。结果100例外周血单个核细胞EB病毒DNA为阳性的标本中,其血浆标本 EB 病毒 DNA 阳性49例（49.0％）,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论运用荧光定量PCR法检测 EB病毒DNA ,外周血单个核细胞比血浆标本更准确、灵敏。     

急性白血病及多发性骨髓瘤EB病毒DNA检测

目的用荧光定量PCR方法检测急性白血病（AL）与多发性骨髓瘤患者（MM）骨髓中EBV—DNA含量,并探讨其临床意义。方法采用荧光定量PCR技术检测40例急性白血病与25例多发性骨髓瘤患者EBV感染情况,同时检测了32例对照组小细胞低色素性贫血和巨幼细胞性贫血患者骨髓EBV—DNA含量。结果多发性骨髓瘤患者EBV感染率为56%,急性白血病组EBV感染率为7.5%,对照组EBV感染率6.2%。AL组与对照组EBV—DNA阳性率无显著性差异（P〉0.05）,MM组与对照EBV—DNA阳性率有显著性差异（P〈0.01）,MM组与AL组EBV—DNA阳性率有显著性差异（P〈0.01）。结论 AL患者的发病与EB病毒感染关系不大,MM患者的发病与EB病毒感染有关;应用荧光定量PCR方法对MM患者骨髓中EBV—DNA含量进行检测,对于揭示MM的发病与EBV感染之间的相关性提供了敏感可靠的检测方法。     

检测传染性单核细胞增多症患者外周血单个核细胞EB病毒DNA的临床意义

目的应用荧光定量聚合酶链反应方法检测传染性单核细胞增多症患者外周血单个核细胞中的EB病毒DNA含量,探讨EB病毒感染单个核细胞的临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应检测38例传染性单核细胞增多症患者发热7d内,起病1、3、6、9个月外周血单个核细胞（PBMC）及血浆中EB病毒DNA,应用酶联免疫吸附法检测血清EB病毒衣壳抗原IgM。结果38例患者在EB病毒感染发病7d内,PBMC中EB病毒DNA检出阳性34例,阳性率为89．5％（34／38）;EB病毒衣壳抗原IgM检出阳性22例,阳性率为57．9％,二者差异有统计学意义（χ^2=9．388,P〈0．05）;血浆EB病毒DNA检出阳性16例,阳性率为42．1％,与EB病毒衣壳抗原IgM比较,差异无统计学意义（χ^2=2．05,P〉0．05）;PBMC与血浆中EB病毒DNA比较,差异有统计学意义（χ^2=16．05,P〈0．05）。起病后1个月,血浆EB病毒DNA阳性2例、PBMC中EB病毒DNA阳性17例;起病后3、6、9个月血浆EB病毒DNA均为阴性,而PBMC中EB病毒DNA分别检出6例、4例、3例阳性。结论EB病毒感染初期,检测外周血单个核细胞EB病毒DNA,可作为传染性单核细胞增多症早期、快速、敏感的诊断方法;EB病毒可长期存在于单个核细胞中,荧光定量聚合酶链反应方法检测PBMC中EB病毒DNA亦可作为判断疗效及监测病情的一种有效手段。EB病毒感染患者表现出多系统损伤可能与PBMC中EB病毒感染相关。     

实时荧光定量PCR检测乙型肝炎血清DNA的临床观察

目的:探讨乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎标志物关系.方法:采用荧光探针杂交技术为基础的实时荧光定量PCR检测259例乙型肝炎患者血清中DNA含量,与HBV标志物作对比分析.结果:血清HBeAg阳性组HBV-DNA阳性率为98.6%,HBeAb组阳性率为61.5%;HBeAg组阳性率含量明显高于HBeAb阳性组.结论:实时荧光定量PCR检测具有较高的灵敏度和特异性,定量准确、结果可靠,为临床了解病毒复制情况,制定治疗方案及疗效观察提供了确切依据.     

48例传染性单核细胞增多症患儿EB病毒核酸定量和异型淋巴细胞的实验室临床意义

目的研究传染性单核细胞增多症（以下简称传单）患儿实验室检测中EB病毒DNA和异型淋巴细胞的辅助诊断的临床意义。方法采取实时荧光PCR技术来定量检测EB病毒DNA的含量拷贝数（〉1.0×103为阳性）和血液室异型淋巴细胞计数检测比例（〉4%为阳性）。结果在48例传单患者中,EB病毒DNA〉1.0×103（阳性）40例,EB病毒DNA〈1.0×103（阴性）8例。异型淋巴细胞〉4%（阳性）22例,异型淋巴细胞〈4%（阴性）26例。EB病毒DNA阳性率占83.3%;异型淋巴细胞阳性率占45.8%。说明实验室检测对传单患儿有较高的辅助诊断价值。结论 EB病毒DNA定量拷贝数检测有相当高的诊断价值,为临床提供传单患者的快速诊断;异型淋巴细胞检测具有45.8%阳性辅助诊断价值,虽然辅助诊断价值没有核酸检测高,但是对实验室条件要求不高,更适合不具备条件开展分子生物实验室的基层医院开展辅助诊断传单患者。     

探讨三种EB病毒抗体检测在鼻咽癌筛查中的临床价值

目的研究探讨三种EB病毒抗体检测在鼻咽癌筛查中的临床价值。方法抽取2014年9月~2015年9月我院耳鼻喉科收集的经病理诊断确诊为鼻咽癌的患者100例作为研究对象,并以同期合并鼻咽部症状到我院就诊的非鼻咽癌患者500例、接受健康体检的正常人1000例作为对照,采用酶联免疫吸附法分别对三组受检者的三种EB病毒抗体进行测定,比较三组受检者的检出阳性率,同时对不同EB病毒抗体单独或联合诊断鼻咽癌的灵敏度、特异性、准确度、阴性预测值、阳性预测值等进行计算。结果三组不同受检者的VCA-Ig A、EA-Ig A以及Rta-Ig G检测阳性率比较有鼻咽癌组患者对照Ⅰ组患者对照Ⅱ组正常人的情况,且鼻咽癌组患者各项指标的检测结果与其他两组对照组的比较差异有统计学意义(P0.05)。不同EB病毒的检测结果比较,则有鼻咽癌组VCA-Ig A和Rta-Ig G显著高于EA-Ig A,而对照组受检者VCAIg AG显著高于EA-Ig A和Rta-Ig G的情况,比较差异显著。三种EB病毒诊断鼻咽癌的灵敏度、特异性、准确度、阴性预测值、阳性预测值比较均有联合诊断结果均高于每种EB病毒单独诊断时的结果,除阳性预测值略低外(但联合诊断的提升效果最为显著),均达到95%以上。结论联合三种EB病毒抗体的血清学诊断有利于鼻咽癌的有效筛查,颇具临床应用价值。     

HBeAg阴性HBV感染者不同病毒载量与前S1抗原和大蛋白关系研究

目的 通过定量检测HBeAg阴性HBV感染者血清病毒大蛋白(HBV-LHBS)和前S1(PreS1)抗原,探讨HBV-LHBS和PreS1在反映HBV复制中的作用.方法 收集经荧光定量PCR检测HBV-DNA的120份HBeAg阴性HBV病毒感染者血清,将这些标本按DNA拷贝数分为3组(≥106copies/ml、103～105 copies/ml、≤103 copies/ml),每组各40例,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV-LHBS和PreS1抗原.结果 ≥106 copies/ml组,LHBS阳性率和定量检测结果分别为95.0%和(92.12±29.38)ng/ml,103～105 copies/ml组,LHBS阳性率和定量检测结果为72.5%和(33.26±19.44)ng/ml,≤103copies/ml组,LHBS阳性率和定量检测结果为37.5%和(15.02±11.10)ng/ml,3组标本PreS1抗原阳性率依次为80.0%、42.5%、20.0%;LHBS总阳性率为61.6%,PreS1抗原阳性率为38.1%.结论 与PreS1抗原比较,LHBS的测定结果与HBV DNA载量呈现良好的相关性,更能准确地反映HBV感染者体内病毒的复制程度,因此LHBS定量可能成为判断HBV活动的新的血清学指标.     

乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎五项结果的对比分析

目的探讨乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎五项的相关性。方法分别用微粒子化学发光法和荧光定量PCR法检测645例患者的乙型肝炎五项和乙型肝炎病毒DNA含量,并分析两者的关系。结果 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组的乙型肝炎病毒DNA阳性率和DNA定量均显著高于其他组（P〈0.05）。HBeAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为93.4%,HBeAg阴性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为42.8%;HBsAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为65.3%,HBsAg阴性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为7.4%。结论乙型肝炎病毒DNA与HBeAg呈正相关,部分HBsAg阴性患者也能检出乙型肝炎病毒DNA,乙型肝炎病毒DNA与乙型肝炎五项联合检测能更好地监测乙型肝炎病毒的复制情况,对监测疗效和判断预后有重要价值。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学检测的探讨

目的探讨荧光定量PCR法检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学指标的相关性。方法采用ELISA法和荧光定量PCR技术分别对353例乙型肝炎患者血清进行免疫学指标的检测及HBV-DNA的定量检测。结果 ELISA法呈大三阳组患者的HBV-DNA阳性率及病毒平均拷贝数均高于小三阳组;HBeAg(+)组的阳性率及病毒平均拷贝数高于HBeAg(-)组;HBeAb(+)组有较低的HBV-DNA阳性率及病毒平均拷贝数。结论 HBV-DNA的含量与乙肝免疫学检测结果具有相关性。临床上应注意两者联合应用。     

小儿病毒性脑炎血清、脑脊液EB病毒DNA检测的临床意义

目的探讨小儿病毒性脑炎与EB病毒感染的关系。方法利用巢式PCR法对确诊病毒性脑炎64例(设为观察组)小儿血清、脑脊液进行EB病毒DNA检测,并在同期住院确诊为支气管肺炎26例(设为对照组)小儿血清进行EB病毒DNA检测。结果观察组与对照组患者血清EB病毒DNA检测阳性率分别为3.13%、3.85%,统计学上无差异;观察组患者脑脊液EB病毒DNA检测均为阴性。结论本地区小儿一定程度受EB病毒感染,但不是引起散发的病毒性脑炎主要病原体。     

乙型肝炎病毒核酸实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值

目的:建立实时荧光定量PCR检测HBV-DNA含量的方法,探讨其在乙型肝炎预防、诊断、治疗及判断病情等方面的临床应用价值。方法:将临床样本分为3组,同时进行ELISA法与PCR检测HBV-DNA含量水平的测定。第1组为HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)、的患者,第2组为HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)的患者,第3组为HBsAg(+)、HBcAb(+)的患者,组与组之间进行阳性率及HBV-DNA含量的t检验。结果:285例临床样本的检测结果显示,第1组患者HBV-DNA阳性率为100%,显著高于其它各组(P<0.01)。HBV-DNA平均含量为7.5×108copies/ml。第2组患者HBV-DNA阳性率低于第1组(P<0.01),但平均HBV-DNA含量为9.58×107 copies/ml,与第1组无差异(P>0.05)。第3组患者HBV-DNA阳性率为51.83%与第1组有显著性差异(P<0.01)但与第2组无差异(P>0.05),患者的HBV-DNA含量为7.74×107 copies/ml,与第1、2组无差异(P>0.05)。结论:实时荧光定量PCR检测所测HBV-DNA含量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,对临床上抗病毒药物的选择和判断疾病的预后有一定的临床价值。     

颈淋巴结细针吸取的EB病毒原位杂交和PCR检测

目的探讨对颈部肿块细针吸取作EBER-1检测在诊断鼻咽癌转移中的意义。方法采用非同位素标记原位杂交(ISH)和聚合酶链反应技术(PCR)分别对27例颈肿块细针吸取涂片细胞和8例细针吸取液进行EB病毒小分子EBER-1和EB病毒DNA检测。结果鼻咽癌转移组23例原位杂交16例阳性(69．5％)，非鼻咽癌转移组4例皆阴性。PCR7例鼻咽癌转移者均阳性(100％)，1例肺癌转移者阴性。结论应用ISH检测颈部肿块细针吸取涂片细胞中的EB病毒对诊断鼻咽癌具有重要的意义。     

乙型肝炎表面抗原定量与原发性肝癌的相关性研究

目的 比较慢性乙型肝炎(CHB)与HBV相关性原发性肝癌患者中乙肝表面抗原(HBsAg)和HBV DNA 载量情况。方法 采用化学发光法检测403例CHB及肝细胞肝癌(HCC)患者血清乙型肝炎病毒标志物滴度,采用荧光定量PCR技术检测患者血清HBV DNA载量。403例患者按照临床诊断分为CHB组(209例)和HCC组(194例)。结果 CHB组:血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL 者占89.00%; HBV DNA≥1 000 copies /mL 者占88.40%。HCC 组: 血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL 者占79.90%; HBV DNA≥1 000 copies /mL 者占67.70%。两组HBsAg≥250 IU/mL患者的比例差异、HBV DNA≥1 000 copies/mL 患者的比例差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 与CHB相比,HBV相关性原发性肝癌患者HBsAg、HBV DNA载量较低。     

HBeAg阴性HBV感染者不同病毒载量与前S1抗原和大蛋白关系研究

目的通过定量检测HBeAg阴性HBV感染者血清病毒大蛋白(HBV-LHBS)和前S1(PreS1)抗原,探讨HBV-LHBS和PreS1在反映HBV复制中的作用。方法收集经荧光定量PCR检测HBV-DNA的120份HBeAg阴性HBV病毒感染者血清,将这些标本按DNA拷贝数分为3组(≥106copies/ml、103～105copies/ml、≤103copies/ml),每组各40例,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV-LHBS和PreS1抗原。结果≥106copies/ml组,LHBS阳性率和定量检测结果分别为95.0%和(92.12±29.38)ng/ml,103～105copies/ml组,LHBS阳性率和定量检测结果为72.5%和(33.26±19.44)ng/ml,≤103copies/ml组,LHBS阳性率和定量检测结果为37.5%和(15.02±11.10)ng/ml,3组标本PreS1抗原阳性率依次为80.0%、42.5%、20.0%;LHBS总阳性率为61.6%,PreS1抗原阳性率为38.1%。结论与PreS1抗原比较,LHBS的测定结果与HBVDNA载量呈现良好的相关性,更能准确地反映HBV感染者体内病毒的复制程度,因此LHBS定量可能成为判断HBV活动的新的血清学指标。     

鼻咽癌中EB病毒LMP1基因的序列变异发生机制探讨

目的检测贵州省鼻咽癌中EB病毒LMP1基因N-和C-末端区序列变异的热点,并探讨其产生的机制。方法收集贵州省贵阳医学院有明确病理诊断的鼻咽癌患者鼻咽新鲜活检标本30例。采用巢式聚合酶链反应（PCR）扩增EB病毒LMP1基因N-和C-末端区,用Xho I对N-末端区扩增产物进行酶切分析,从中选取2例患者N-末端区的扩增产物进行序列分析。同时检测C-末端区扩增产物30bp缺失的情况。结果30例鼻咽癌组织EB病毒LMP1基因C-末端区存在两种基因型：缺失型（即30bp缺失）和野生型,其中病例组有40％的突变率,对照组有10％的突变率,差异有显著性（P〈O．05）。在本次研究中的30例鼻咽癌及随机收集贵阳医学院体格检查健康成人30例的外周血（EDTA抗凝）2mL作对照组中EB病毒LMP1基因N-末端区都发生了突变,都存在原有酶切位点的缺失。结论鼻咽癌中EB病毒LMP1基因突变在鼻咽癌的发生发展中起重要的作用。     

835例乙型肝炎患者血清HBV-DNA水平与乙肝五项及主要肝功能指标的相关性分析

目的分析不同HBV-DNA病毒载量乙型肝炎患者的乙肝五项指标和主要肝功能指标的相关性,为临床综合诊治乙型肝炎患者提供依据。方法运用荧光定量PCR检测835例乙型肝炎患者血清中的HBV-DNA,同时运用ELISA方法进行乙型肝炎五项指标的检测,全自动生化分析仪检测主要肝功能指标,并对结果进行相关性分析。结果 HBV-DNA拷贝数>1.0×105copies/mL组(280例)与HBV-DNA拷贝数=1.0×104～1.0×105copies/mL组(105例)以大三阳血清表型为主,分别占84%和57%,主要肝功能指标增高明显。HBV-DNA拷贝数≤1.0×103copies/mL组(450例)以小三阳血清表型为主,占69%,主要肝功能指标无明显增高。结论高HBV-DNA拷贝数乙型肝炎患者组以大三阳表型为主,且拷贝数增高与主要肝功能指标呈正相关。不同组的同一表型患者,以高拷贝组主要肝功能指标增高明显。     

传染性单核细胞增多症患儿EBV-DNA检测及其意义

目的 探讨应用PCR技术检测EB病毒DNA(EBV-DNA)的临床应用价值.方法 应用PCR和荧光检测技术检测外周血EBV-DNA,对100例阳性病例的临床特点进行回顾性分析.结果:病例年龄1个月至12岁,中位年龄3岁,＜3岁65例,3～7岁25例,＞7岁10例;传染性单核细胞增多症(IM)组EBV-DNA的阳性率为84.0%(84/100),对照组阳性率为5.0%(2/40),差异有统计学意义(P＜0.01);IM患儿早期EBV的含量[(75.52±175.11)×103 copies/ml],明显高于恢复期EBV的含量[(0.67±2.27)×103 copies/ml](P＜0.01).结论 PCR法检测EBV-DNA时间短,准确性好,灵敏度高,在EB病毒感染相关疾病诊断中有一定价值.     

实时荧光定量聚合酶链反应检测唾液HBV-DNA结果分析

目的:探讨乙型肝炎患者血清中HBV-DNA与唾液中HBV-DNA之间的相关性。方法:用时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎病毒血清标志物,用实时荧光定量聚合酶链式反应(实时荧光定量PCR)检测HBV-DNA。结果:在300例乙型肝炎患者中血清HBV-DNA>103 copies/mL者268例,阳性率为89.33%。唾液HBV-DNA>103copies/mL者219例,阳性率为73.00%。血清、唾液HBV-DNA阳性比较差异有统计学意义(χ2=26.586,P<0.01)。结论:血清中HBV-DAN与唾液中HBV-DNA的含量有很好的相关性,当唾液中HBV-DNA>105 copies/mL时同样导致HBV的水平传播,这在流行病学上有重要意义。