大鼠脑干前庭核5-HT2A受体mRNA表达水平在晕船适应中的变化

目的探讨晕船适应过程中大鼠脑干前庭核5-HT2A受体 mRNA的变化。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组、晕船刺激1d组、3d组、7d组和14d组,利用晕船模拟装置对大鼠进行晕船刺激,根据大鼠脑图谱对前庭核进行取材,抽提总RNA,反转录后进行实时定量聚合酶链反应检测。结果晕船刺激1d、3d、7d、14d的相对表达量分别为对照组的3.35、3.54、1.23、1.02倍。晕船刺激第1天、第3天5-HT2A受体 mRNA显著升高(P<0.01),7d回落到空白对照组水平。结论晕船刺激可以引起大鼠前庭核5-HT2A受体 mRNA升高。     

晕船大鼠体内铁含量的变化

目的　探讨模拟晕船条件下大鼠机体组织铁含量和尿铁排出的变化。方法　将SD大鼠随机分为晕船组和对照组 ,原子吸收分光光度法检测大鼠血清、尿液和部分器官中铁元素的含量。结果　血清、肝脏、大脑、小脑、肾上腺铁含量在对照组依次为 (46 9± 3 5) μmol/L、(94 9± 8 5) μg/g、(3 8 5± 7 5) μg/g、(86 9± 9 5) μg/g、(159 9± 2 1 6) μg/g ,在晕船组依次为 (2 8 1± 4 8) μmol/L、(47 9± 9 1) μg/g、(2 3 6± 6 1) μg/g、(53 0± 8 7) μg/g、(2 96 2± 2 6 5) μg/g ,两组比较 ,差异均具有统计学意义 ;与对照组相比 ,尿液铁在旋转第一天时 ,晕船组大鼠排出量显著减少 ,为 (40 1 4± 2 6 7) μg/d ,第二、三天时显著性增多 ,分别为 (750 7± 2 4 1) μg/d ,(764 3± 2 7 9) μg/d ;而心脏、脑干、下丘脑铁含量与对照组相比有升高的趋势 ,但差异无统计学意义。结论　晕船可能影响大鼠机体铁元素的分布 ,这种变化在晕船发生中的作用值得进一步探索。     

抑制消减杂交技术克隆晕船易感大鼠脑干差异表达基因

目的　筛选晕船易感大鼠脑干组织差异表达基因。方法　利用抑制消减杂交(SSH)技术构建晕船易感大鼠脑干组织差异表达基因 cDNA文库,斑点杂交筛选含有插入片段的阳性克隆。结果　文库中442个克隆含有插入片段,斑点杂交获得的阳性克隆测序,获得39条差异基因片段和2条全长序列基因。其中高表达16条,含未知功能基因片段3条;低表达25条,含未知功能基因片段5条。结论　SSH技术是一种高效的筛选差异表达基因的方法,本实验结果为深入研究晕船易感性机制提供了重要的线索。     

晕船适应大鼠下丘脑差减cDNA文库的构建

目的　分离晕船适应大鼠下丘脑差异表达基因片段 ,以探讨晕船适应机理。方法　采用抑制消减杂交方法将经过模拟晕船刺激获得晕船适应大鼠与正常大鼠的下丘脑组织进行正、反向杂交 ,构建晕船适应大鼠下丘脑差减cDNA文库 ,应用dotblot进行阳性克隆的鉴定。结果　根据dotblot杂交结果送交测序 ,获得下丘脑差异表达基因片段 2 3条 ,上调 1 0条 ,5条为未知功能基因的部分序列 ,下调 1 3条 ,含 6条未知功能基因的部分序列。结论　分析部分含有相关EST的已知功能基因 ,提示SAM、包括加压素在内的神经内分泌系统、血红素加氧酶等系统在晕船及适应发生的过程中有着重要作用     

晕船大鼠血浆血管加压素含量的变化

本研究利用晕船模拟装置刺激大鼠诱发晕船 ,检测晕船时血浆血管加压素含量 ,为研究舰艇人员的晕船防治提供实验依据。1　材料与方法1 1　实验动物　SD大鼠 2 2只 ,体重为 2 50～ 3 0 0g ,均为雄性。1 2　大鼠晕船模型　利用晕船模拟装置 (按Crampton的报道仿制而成 )诱发大鼠晕船[1]。将 2 2只大鼠无束缚地放入旋转装置的有机玻璃笼内 ,绕水平轴顺时针旋转 ,以 16°/s2 角加速度加速 ,达最大速度 12 0°/s后 ,立即以 48°/s2 的角加速度减速 ,直至旋转停止为一个周期 ,时间 10s ,每天刺激 1h ,旋转刺激一个月。根据实验中大鼠异嗜高岭土行…     

大鼠晕船适应过程中血红素加氧酶-3 mRNA表达的变化

目的研究在晕船适应前、后大鼠部分组织中血红素加氧酶-3（HO-3）mRNA的表达变化。方法将经过筛选的30只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、晕船组、晕船适应组，各组动物接受每天1h的模拟晕船刺激后，分不同时间处死；用半定量逆转录-聚合酶链反应对大鼠晕船适应前、后脑干、下丘脑、肾上腺等组织中HO-3mRNA表达变化进行分析。结果晕船发生及适应过程中脑干、下丘脑组织中HO-3mRNA表达水平不断升高，其中晕船组及晕船适应组大鼠脑干组织中HO-3mRNA表达水平分别较对照组上升了116％（P〈0．01）和298％（P〈0．01），而在下丘脑组织中两组分别比对照组上升了98％（P〈0．01）和199％（P〈0．01），肾上腺组织中的表达水平不受晕船状态的影响。结论HO-3mRNA的表达上调在大鼠晕船的适应过程中可能具有一定作用。     

柠檬酸铁剂处理晕船大鼠的某些生化指标的变化

目的探讨晕船时机体铁元素变化在晕船发生过程中的作用以及铁元素的变化与晕船发生的关系及其可能的作用机制。方法将52只SD大鼠随机分为低铁晕船组、中铁晕船组、高铁晕船组,原子吸收分光光度法检测大鼠脑组织中铁元素的含量,比色法测定组织含铁酶琥珀酸脱氢酶(SDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力变化。结果低铁晕船组动物异嗜高岭土量最高,晕船症状重,晕船发生率高;高铁晕船组高岭土摄入较少,晕船症状较轻,晕船发生率低。低铁晕船组动物血清铁水平显著低于其他组别,柠檬酸铁干预后,高铁组血清和脑组织铁水平有升高趋势。SDH、GSH-Px在低铁组大鼠大脑、小脑组织中活力最低,补充铁剂后,高铁晕船组SDH活力升高。结论机体组织铁缺乏更容易发生晕船,且症状较重,补充铁剂可改善铁缺乏状况,改善晕船症状。     

晕船及适应过程中大鼠血浆及脑氨基酸含量变化

目的:通过观察模拟晕船及适应后大鼠血浆及脑内游离氨基酸含量变化,为进一步研究防治晕船的营养干预措施提供实验依据。方法:采用Crampton模型模拟晕船刺激,以异嗜高岭土行为作为判定大鼠晕船及晕船适应的指标,运用高效液相色谱法测定晕船及晕船适应过程中大鼠血浆及脑内游离氨基酸含量变化。结果:模拟晕船刺激1d后,血浆胱氨酸和异亮氨酸含量显著升高,Gly、Pro含量显著下降,BCAA/AAA的比值升高;脑内Ala、Cys+Met、Tyr、His以及总氨基酸含量显著下降;模拟晕船刺激21d后血浆及脑内游离氨基酸无明显变化,脑内Glu/GABA显著升高。晕船耐受与晕船易感大鼠血浆及脑内游离氨基酸含量、血浆BCAA/AAA比值及脑内Glu/GABA比值均无显著差异。结论:晕船刺激使实验大鼠血浆和脑内氨基酸含量发生明显改变,其中有些与神经递质合成有关的氨基酸改变较显著。     

晕船易感大鼠脑干前庭区超微结构观察

目的探讨晕船易感大鼠脑干前庭区超微结构。方法晕船模拟器对SD大鼠进行模拟晕船刺激筛选晕船易感大鼠,取大鼠脑干前庭区利用透射电镜观察超微结构相对于正常对照组的改变。结果成功建立晕船易感大鼠模型,并观察到晕船易感组大鼠脑干前庭区出现线粒体水肿、粗面内质网扩张及细胞核切迹等缺血缺氧症状的病理学改变。结论推测大鼠晕船易感性可能与脑干前庭区缺血缺氧有关。     

晕船条件下大鼠脑皮质电图及海马电图变化

目的 探讨晕船刺激对大鼠脑皮质电图(EcoG)和海马电图(EHG)的影响。方法 利用晕船模拟器对大鼠进行晕船刺激,通过头皮电极记录晕船刺激前1d,晕船刺激第1天30、60、90、120min及第2～5天120min的脑皮质电图和海马电图。结果 和晕船刺激前相比,晕船刺激可使大鼠脑皮质及海马电图频率变慢(P＜0．05),波幅降低(P＜0．05),尤以晕船刺激第1天90min和第4天变化最大(P＜0．01)。结论 晕船刺激引起EcoG及EHG频率及波幅降低,可能与晕船刺激引起脑血管紧张度增加,脑血流减少导致脑组织缺血缺氧有关,且一次晕船刺激90min和连续刺激第4天时晕船改变最明显。     

低氧对模拟晕船处理大鼠某些适应性的影响

目的探讨低氧预处理对大鼠受模拟晕船刺激适应过程的影响。方法36只大鼠随机分为晕船对照组(Ⅰ)、晕船组(Ⅱ)、低氧预处理后晕船组(Ⅲ)3组。Ⅲ组大鼠先接受模拟5km低氧环境4h/d,连续5d。低氧结束次日起Ⅱ、Ⅲ两组接受模拟晕船刺激2h/d,连续15d。测定大鼠每日高岭土摄入量、体增重和进食量。结果Ⅲ组大鼠晕船适应期间高岭土摄入量高于Ⅱ组(P<0.05),且Ⅱ、Ⅲ组均高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组大鼠晕船适应期间体增重均低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组间无差异(P>0.05);各组大鼠晕船适应期间进食量无差异(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ组高岭土摄入量均在晕船第12天起与Ⅰ组无差异(P>0.05)。结论低氧预处理可能加重大鼠晕船症状,但不明显影响其体增重、进食量及其晕船适应的时程。     

利用蛋白质组学技术筛选特发性肺间质纤维化患者血清生物标志物

目的 利用蛋白质组学技术筛选并鉴定特发性肺间质纤维化患者和健康人血清差异表达蛋白。方法 收集山东大学第二医院于2014年10月至2015年10月收治的30例特发性肺间质纤维化患者及健康人血清各30份,组内等量混合后,去除高丰度蛋白,经同位素标记相对和绝对定量试剂标记后采用二维液相色谱-串联质谱鉴定并进行相对定量。对鉴定出的差异蛋白进行基因功能聚类（GO）分析和通路富集分析,筛选出与特发性肺间质纤维化发生相关的蛋白质。结果 质谱鉴定出置信度>95%的蛋白质共490个,其中差异表达蛋白25个。与对照组相比,25个差异蛋白中有4个表达上调,21个表达下调。GO分析显示,大多数差异蛋白处于细胞外区域（92%）;通路富集分析显示,含差异蛋白数量最多的通路为补体和凝血级联通路。结论 特发性肺间质纤维化患者血清中鉴定出了与补体及凝血相关的差异蛋白,其具体功能有待进一步研究。     

肿瘤标志物蛋白芯片法与微粒子捕捉酶免法检测结果的比较及分析

目的 :了解多肿瘤标志物蛋白芯片法与微粒子捕捉酶免法 (MEIA)所测肿瘤标志物结果的符合性。方法 :蛋白芯片法与MEIA测相同标本的 6项肿瘤标志物 ,比对两种方法的符合性。结果 :CA19-9、AFP、PSA、CA12 5 4项指标 ,两方法间差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;CEA和ferritin指标两方法间有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,不符合的病例 ,以MEIA阳性而蛋白芯片法阴性为多。结论 :蛋白芯片法与MEIA检测CA19-9、AFP、PSA、CA12 5的特异性和灵敏度相近 ;CEA和ferritin指标检测的符合性较差 ,但两法不符的病例中 ,亦未见任一方法与病理及临床诊断结果有较好的吻合。     

The influence of dietary protein on lipid peroxide formation in old, food restricted rats

The effect of deetary protein on in vivo lipid peroxidation in the liver and kidney of 21 months-old, SD male rats was investigated after feeding them isocaloric diets for 60 days. Rats were divided into four groups as 5% soy protein isolate (SPI), 20% SPI, 5% casein and 20% casein diet groups and they all received 15 g food/day (59 kcal/day or 25% food restriction). The liver and kidney SOD activities, as well as thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS), were increased in low protein fed animals. Catalase activities did not have significant differences between groups, but it was 15 times higher in the liver than the kidney. Glutathione peroxidase (GPx) showed increased activities in the liver of animals fed 5% protein diet, but the same was not observed in the kidney. Total glutathione was higher in the organs of animals fed 20% protein diet rather than 5% protein diet for both organs, liver and kidney, and values of the former were much higher than those of the latter. Though enzyme activities were not altered as a function of dietary protein level of quality, there is a strong evidence that TBARS is somehow augmented by feeding a low protein diet.     

Genomic-scale analysis of bacterial gene and protein expression in the host

The developing complementary technologies of DNA microarrays and proteomics are allowing the response of bacterial pathogens to different environments to be probed at the whole genome level. Although using these technologies to analyze pathogens within a host is still in its infancy, initial studies indicate that these technologies will be valuable tools for understanding how the pathogen reacts to the in vivo microenvironment. Some bacterial pathogens have been shown to substantially modify their surface components in response to the host immune system and modify their energy metabolism and transport pathways to allow efficient growth within the host. Further detailed analyses of these responses will increase understanding of the molecular mechanisms of pathogenesis, identify new bacterial virulence factors, and aid in the design of new vaccines.     

血清蛋白质谱结合人工神经网络在宫颈癌诊断中的应用

目的:采用蛋白质芯片表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测宫颈癌病人血清蛋白指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物。方法:应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集58例宫颈癌患者和57例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白质组。将115例血清随机分为两组:以训练组30例宫颈癌患者和30例健康人建立人工神经网络(ANN)模型,以验证组28例宫颈癌患者和27例健康人血清标本用于模型的双盲法验证。结果:宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有145个差异表达的蛋白质峰(P0.05),筛选出质荷比(M/Z)分别为5912、5642、8702、4320、6432的标志蛋白(P10-6),建立人工神经网络模型,其对宫颈癌的诊断敏感性为92.86%,特异性为88.89%,阳性预测值为89.66%,阴性预测值为92.31%。结论:特征蛋白在宫颈癌患者较正常人血清明显的高表达或低表达,可能对宫颈癌的早期诊断和治疗后随访具有重要的指导意义。     

Differential protein expression of kidney tissue in the scallop Patinopecten yessoensis under acute cadmium stress

Morphological and proteomic changes in the kidney of scallops exposed to acute cadmium chloride (CdCl₂) were observed, analyzed and compared with those in the non-exposed control group. Under microscopy the paraffin-embedded sections of the kidney revealed that the microstructure of the tissue had been severely deformed after Cd exposure. Two dimensional electrophoresis, MALDI-TOF mass spectrometry and database searches showed 13 differentially expressed protein spots, of which 11 were up-regulated, while two were down-regulated. Among these proteins, guanylate kinase (GK) and C₂H₂-type zinc finger protein are considered to be tightly connected with Cd toxicity. Further studies using quantitative PCR method validated that the GK mRNA was induced under Cd stress. Other proteins identified which had some relevance to Cd toxicity are also discussed. We suggested that differential proteins such as GK could play a potential role as novel biomarkers for monitoring the level of Cd contamination in seawater.