介绍一种新的免疫组化染色方法S－P法

介绍一种新的免疫组化染色方法Ｓ－Ｐ法链菌素生物素蛋白—过氧化酶连接法（Ｓｔｒｅ－ｐｔａｖｉｄｉｎ－ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｃｏｎｊｕｇｔａｔｅｍｅｔｈｏｄ，ＳＰ）是继ＡＢＣ及ＰＡＰ法之后刚开始应用于免疫组化染色的一种新方法。据报道其敏感性高于ＰＡＰ及ＡＢ...     

改良S－P免疫组化染色方法

改良Ｓ－Ｐ免疫组化染色方法周建国，罗招阳（衡阳医学院肿瘤研究所，衡阳，４２１００１）利用特殊标记物标记抗体或抗原，通过抗原抗体反应来检测组织细胞中化学物质，通常采用ＰＡＰ法或ＡＢＣ法。本文介绍Ｓ－Ｐ法，全称链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶连结法（Ｐｒｅｏ...     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因—ｎｅｏｒ基因的质粒ｐＳＶ２ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株—Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５Ｓ细胞。斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５Ｓ细胞可作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ的靶细胞。进一步对Ｐ８１５Ｓ细胞成功地进行５１Ｃｒ标记，以及标记靶细胞５１Ｃｒ最大释放值和自然释放值的测定表明：利用５１Ｃｒ释放法体外检测近交系小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ）ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ功能的方法被建立。     

甲基硝基亚硝基胍对裸鼠异种移植人胚胃粘膜的影响

目的观察甲基硝基亚硝基胍（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｎ′－ｎｉｔｏ－Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎ，ＭＮＮＧ）对裸鼠异种移植人胚胃粘膜的影响。方法用ＭＮＮＧ直接诱导移植于裸鼠体内的人胚胃粘膜，ＨＥ和ＡＢ／ＰＡＳ染色观测胃粘膜组织形态，链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶免疫组化（ＳＰ）法检测胃粘膜ＰＣＮＡ，Ｃ－ｅｒｂＢ－２，ｐ５３表达状态。结果对照组人胚胃粘膜的存活率为７２％（１８／２５），实验组为５６％（     

对免疫组织化学染色的几点体会

目前常用的免疫组织化学染色方法有ＡＢＣ法、ＳＰ法和ＬＳＡＢ法等。免疫组化染色已成为科研和临床工作常用方法。为此，我们就近年来该方面的工作介绍以下几点体会。１组织标本、固定液和缓冲液组织标本离体后，应在３０ｍｉｎ之内及时进行固定，所取组织不宜过大，并应...     

快速免疫组织化学染色技术

为探索免疫组织化学染以全程最短时间，采用微波技术，用ＥＭＡ、Ｋｅｒａｔｉｎ、Ｄｅｓｍｉｎ、Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ、ＬＣＡ、Ｓ－１００、ＧＦＡＰ７种抗体和ＡＢＣ、ＳＡＢＣ、Ｓ－ＰＫｉｔ，对不同的肿瘤组织进行免疫组化染色，并与常规免疫组化方法比较。结果显示：快速免疫组化全程时间在６０￣８０ｍｉｎ左右；除膜抗原外，其余抗体的染色效果与常规免疫组化相同或更优；生物素化二抗和酶联亲和素试剂盒则以Ｓ－ＰＫｉｔ最好     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因－ｎｅｏ基因的质粒ｐＳＶ２－ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５－Ｓ细胞，斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５－Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５－Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５－Ｓ细胞要作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠Ｈ     

P物质在增生性瘢痕中的分布

为初步研究了Ｐ物质（ＳＰ）在增生性瘢痕组织中的分布情况，作者采用兔抗ＳＰ血清和免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白一氧化酶连结法及ＤＡＢ染色技术，并用图像分析仪对染色结果进行半定量分析，发现增生性瘢痕组织中ＳＰ免疫反应性分布显著高于非增生性瘢痕及正常皮肤，认为ＳＰ在增生性瘢痕形成中可能起重要作用。     

免疫组化LSAB法应用中关键环节的处理

免疫组化ＬＳＡＢ法应用中关键环节的处理吴洪娟郭文君刘雨清魏志新（潍坊医学院病理学教研室潍坊２６１０４２）ＬＳＡＢ法（Ｌａｂｅｌｅｄｓｔｒｐｔａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎｍｅｔｈｏｄ）是目前最理想的快速、高敏感的免疫组化染色法，其敏感性比ＡＢＣ法（Ａ－ｖｉ...     

SAC与SPA对人B细胞活化影响

应用体外甲基纤维素培养法和间接免疫荧光法，以ＳＡＣ和ＳＰＡ作刺激源，对脐带血，成人外周血和成人骨髓的Ｂ淋巴细胞集落形成结果进行观察。结果表明：在ＣＡＣ和ＳＰＡ作用下均有ＣＦＵＢＬ形成。当接种条件相同时两种刺激源诱导的ＣＦＵ－Ｂ结果差异极大。ＳＡＣ诱导的ＣＦＵ－ＢＬ较低，ＣＦＵ－ＢＬ中均无ＣＤ３阳性细胞，而ＳＰＡ诱导的ＣＦＵ－ＢＬ形成率较高但ＣＦＵ－ＢＬ中却含有少量ＣＤ３阳性细胞。     

焦虑,抑郁与乙肝病毒感染预后的癌基因研究

目的探讨焦虑、抑郁不良情绪与慢性乙肝发展和转归的关系。方法采用ＬＳＡＢ免疫组化和ＥＬＩＳＡ方法，检测了５２例慢性ＨＢＶ感染者肝细胞Ｃ－ｅｂｂＢ－２Ｐ１８５癌基因蛋白及血清ＨＢｅＡｇ，同时进行了ＳＡＳ和ＳＤＳ调查，结果与国内常模对照。结果Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５癌基因蛋白阳性患者ＳＡＳ和ＳＤＳ总标准分均值Ｘ分别为４４．２１０±６．１２和４９．１３±９．８７，分数升高与国内常模之间有显著差异，（Ｐ＜０．０１）。结论提示焦虑、抑郁情绪在慢性乙肝的发生发展中可能起重要作用。     

一种简易制备白蛋白纯品及抗血清的方法──凝胶切割制备法

利用凝胶切割纯化法得到免疫纯人血清白蛋白（ＡＬＢ），经聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＣ）电泳确认为单一带，经ＳＤＳ－ＰＡＣＥ确定其相对分子质量为６７４６２．８０Ｕ，与Ｓｉｇｍａ纯品ＡＬＢ及日本产羊抗人ＡＬＢ抗血清免疫双扩散融合试验验证其为纯品ＡＬＢ。利用得到的ＡＬＢ免疫绵羊制备羊抗人白蛋白抗血清，与日本产品比较，为单价特异性抗血清。     

原发性肝细胞癌组织中P16蛋白表达的意义

本研究检测了 3 3例原发性肝细胞肝癌 (ＨＣＣ)中Ｐ16蛋白的分布与表达 ,并对Ｐ16蛋白与肝癌发生的关系进行了初步探讨。1　材料与方法1.1　标本　　 3 3例肝癌组织取自西南医院肝胆科 1996～ 1999年手术切除 ,并经病理证实为原发性肝细胞癌 ,2 0例距肝癌 2ｃｍ的相应癌旁肝组织作为对照。标本用 10 %福尔马林固定 ,常规石蜡包埋 ,连续切片 ,厚 4μｍ ,ＨＥ染色。1.2　免疫组化　　采用敏感的链霉菌素 生物素 (Ｓ Ｐ)法。兔抗Ｐ16为美国Ｓａｎｔａｃｒｕｚ产品 ,Ｓ Ｐ试剂盒购自福州迈新生物技术公司 ,ＤＡＢ显色试剂盒为武汉博士德生物工…     

眼睑鳞状细胞癌p53蛋白过度表达与PCNA,AgNOR关系的研究

为探讨Ｐ５３基因突变与眼睑鳞状细胞癌（ＳＣＣ）发生的关系及其临床病理学意义,采用微波处理免疫组化ＬＳＡＢ法对３２例ＳＣＣ进行了Ｐ５３蛋白及增殖细胞核怕（ＰＣＮＡ）检测,同时应用银染法检测了核仁组成区相关嗜银蛋白计数。结果显示：在正常眼睑皮肤及轻度不典型增生上皮未见Ｐ５３蛋白表达,而中、重度不典型增生、原位癌、浸润癌Ｐ５３蛋白阳性表达率逐渐增高,其ＰＣＮＡ指数及ＡｇＮＯＲ计数也有增加趋势;随着癌细胞     

尿激酶型纤维酶原激活系统与肺癌转移的关系

目的 研究尿激酶型纤溶酶原激活物ＵＰＡ及其特异受体ＵＰＡＲ和抑制物ＰＡＩ－１,ＰＡＩ－２与肺非小细胞癌（ＮＳＣＬＣ）转移的关系。方法 用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＵＰＡ,ＵＰＡＲ,ＰＡＩ－１和ＰＡＩ－２在６６例肺ＮＳＣＬＣ中蛋白水平表达。结果肺腺癌,鳞癌有淋巴结转移组ＵＰＡ,ＰＡＩ－１阳性率及表达强度均比无移组高,Ｐ值均〈０．０５。肺大细胞癌有淋巴结转移组ＵＰＡ,ＵＰＡＲ阳性率无比转移组高,Ｐ＝０．     

肝癌及癌旁组织中丙型肝炎病毒NS_5抗原的免疫组织化学观察

肝癌及癌旁组织中丙型肝炎病毒ＮＳ５抗原的免疫组织化学观察汪荣泉周子成杨建民房殿春我们采用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶连接法（ＳＰ法）和ＨＣＶＮＳ５的单克隆抗体、ＨＢｓＡｇ的多克隆抗体对肝癌（ＨＣＣ）及其癌组织中ＨＣＶＮＳ５抗原和ＨＢ－ｓＡｇ的表达进行...     

一种简易制备白蛋白纯品及抗血清的方法——凝胶切割制备法

利用凝胶切割纯化法得到免疫纯人血清白蛋白（ＡＬＢ），经聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＣ）电泳确认为单一带，经ＳＤＳ－ＰＡＣＥ确定其相对分子质量为６７４６２．８０Ｕ，与Ｓｉｇｍａ纯品ＡＬＢ及日本产羊抗人ＡＬＢ抗血清免疫双扩散融合试验验证其为纯品ＡＬＢ。利用得到的ＡＬＢ免疫绵羊制备羊抗人白蛋白抗血清与日本产品比较，为单价特异性抗血清。     

催化信号放大系统的制备及其在免疫组化和原位杂？…

目的：应用本实验室制备的催化信号放大（ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｓｉｇｎａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ,ＣＳＡ）剂试,提高免疫组化（ＩＨＣ）和原位杂交（ＩＳＨ＿的敏感性。方法：ＣＡＳ法应用于ＩＨＣ检测５０例１０种不同类型的肿瘤切片中４０种不同的抗原和ＩＳＨ检测６种不同的ＲＮＡ成分,并与相应的常规方法进行敏感性比较。同时分析了存在的问题。结果：ＣＡＳ－ＩＨＣ法较传统的ＰＡＯＰ法、ＡＢＣ法和ＬＳＡＢ法敏感     

PBP2a体外诱导与MRSA的耐药关系

目的：探讨作用于不同青霉素结合蛋白（ Ｐ Ｂ Ｐｓ） 靶位点的β内酰胺抗生素联合用药对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（ Ｍ Ｒ Ｓ Ａ） 体外抗菌活性的影响及其 Ｐ Ｂ Ｐ２ａ 的诱导作用。方法：测定头孢拉啶和头孢氨噻肟单独和联合对 Ｍ Ｒ Ｓ Ａ 的最小抑菌浓度（ Ｍ Ｉ Ｃ） 和联合抑菌分数（ Ｆ Ｉ Ｃ） ，以甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（ Ｍ Ｓ Ｓ Ａ） 作对照；用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ法分离细菌膜蛋白，用分光光度扫描仪分别测定两种药物单独及联合使用前后菌膜耐药蛋白 Ｐ Ｂ Ｐ２ ａ 的相对含量。结果：头孢拉啶对２０ 株 Ｍ Ｒ Ｓ Ａ 的 Ｍ Ｉ Ｃ５０ 、 Ｍ Ｉ Ｃ９０ 分别为１２８ ｍｇ／ Ｌ、５１２ ｍｇ／ Ｌ，头孢氨噻肟为１６ ｍｇ／ Ｌ、２５６ ｍｇ／ Ｌ；两药联合应用时：头孢拉啶的 Ｆ Ｉ Ｃ５０ 、 Ｆ Ｉ Ｃ９ ０ 为４ ｍｇ／ Ｌ、６４ ｍｇ／ Ｌ，头孢氨噻肟为２ ｍｇ／ Ｌ、３２ ｍｇ／ Ｌ， Ｆ Ｉ Ｃ 指数≤０５ ，两药联合有良好的协同作用。两药单独应用都能在一定范围诱导 Ｍ Ｒ Ｓ Ａ 大量表达 Ｐ Ｂ Ｐ２ａ ，而联合用药却不会诱导 Ｐ Ｂ Ｐ２ ａ 的表达增多。结论：作用于不同 Ｐ Ｂ Ｐｓ 靶位点的β内酰胺抗生素联合用药不诱导耐药蛋白 Ｐ Ｂ Ｐ２ａ 的表     

不同胆囊病变树突状细胞浸润的免疫组化研究

应用免疫组化对胆囊不同病变内Ｓ－１００树突状细胞浸润与肿瘤相关分子的表达相互关系进行对比研究。包括胆囊癌症病人切除标本３０例，结石２０例，慢性炎症２０例。用单克隆抗Ｐ５３蛋白、抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ），抗癌胚抗原（ＣＥＡ）及多克隆抗Ｓ－１００蛋白抗体，ＬＳＡＢ法检查上述病变标本，结果发现癌症病人的Ｐ５３蛋白生为４６．７％（１４／３０），ＰＣＮＡ为８６．７％（２６／３０），ＣＥＡ为３０．０％（９