补肾中药对绝经后骨质疏松症患者骨密度、血清骨保护素和肿瘤坏死因子α的影响

目的:观察补肾中药对绝经后骨质疏松症患者的骨密度、血清细胞因子骨保护素、肿瘤坏死因子α的影响。方法:于2004-06/2005-10选择广州中医药大学附属骨伤科医院骨科入院及门诊治疗的绝经后骨质疏松症患者42例,为治疗组。另选28例健康绝经同龄女性为对照组。受试者均知情同意。治疗组口服补肾中药骨康制剂(由补骨脂、肉苁蓉、淫羊藿、黄芪、熟地黄、白芍等组方),每日清晨餐后30min口服1次,1袋/次,连服6个月;对照组不予服药。治疗组于治疗前后采用双能X射线骨密度仪测量腰椎、股骨颈及Wards三角的骨密度。采用夹心酶联免疫吸附法测定骨保护素、肿瘤坏死因子α水平。结果:随访6个月,治疗组失访1例,因用药60d后出现胃肠道不适感等不良反应退出实验1例。对照组失访2例。治疗组40例、对照组26例进入结果分析。①治疗组治疗前腰椎、股骨颈及Wards三角骨密度明显低于对照组,骨保护素、肿瘤坏死因子α明显高于对照组,差异有显著性意义[分别为(0.824±0.081),(0.943±0.125)g/cm2;(0.735±0.089),(0.790±0.088)g/cm2;(0.573±0.097),(0.634±0.087)g/cm2;(353.600±20.800),(200.800±23.900)ng/L;(1382.500±427.900),(734.700±254.600)ng/L,P<0.05]。②治疗组治疗后腰椎、股骨颈骨密度明显高于治疗前,骨保护素、肿瘤坏死因子α明显低于治疗前,差异有显著性意义[分别为(0.875±0.114),(0.824±0.081)g/cm2;(0.786±0.094),(0.735±0.089)g/cm2,P<0.05;(307.000±17.600),(353.600±20.800)ng/L;(953.200±213.800),(1382.500±427.900)ng/L,P<0.01]。结论:补肾中药治疗绝经后骨质疏松症可提高骨密度,降低血清骨保护素和肿瘤坏死因子α水平     

糖皮质激素性骨质疏松骨保护素表达与骨密度的相关性

目的：探讨糖皮质激素性骨质疏松大鼠骨保护素在骨骼局部的表达，及其对骨密度变化的影响。 方法：实验于2005-01／2006—03在解放军总医院骨科实验室完成。选择6月龄雄性Wistar大鼠48只，随机数字表法分为实验组和对照组，各24只。实验组大鼠给予地塞米松1mg／kg肌肉注射，1次／d；对照组大鼠给予等量生理盐水肌注。两组大鼠给药后2，4，8，12周各处死6只，取松质骨（腰椎）和皮质骨（股骨干），进行骨密度值测量、骨组织形态学观察及骨保护素免疫组织化学染色，并进行图像处理和统计分析。 结果：纳入动物48只，均进入结果分析。①实验组大鼠腰椎骨密度给药后2，4，8，12周与对照组相比均明显下降分别为（0．175&;#177;0．013），（0．212&;#177;0．018）g／cm^2；（0．152&;#177;0．021），（0．211&;#177;-0．019）g／cm^2；（0．129&;#177;0．014），（0．213&;#177;0．015）g／cm^2；（0．113&;#177;0．016），（0．212&;#177;0．015）g／cm^2，P〈0．01]，给药后12周较2周下降更为显著（P〈0．01）；股骨干骨密度给药后2周无明显差异（P〉0．05），给药后4周开始下降[分别为（0．226&;#177;0．013），（0．244&;#177;0．015）g／cm^2,P〈0．05]，给药后8，12周均明显下降[分别为（0.204&;#177;0．014），（0.238&;#177;0．015）g／cm^2；（0．186&;#177;0．016），（0．240&;#177;0．013）g／cm^2，P〈0、01]。②实验组骨小梁排列稀疏，数目减少，小梁明显变细、间距加宽，股骨干中段骨皮质厚度变薄，12周多视野计数可见破骨细胞增多（P〈0．01）。③实验组给药后2周腰椎的骨保护素组织化学染色明显减低4周股骨干内亦明显减低，并且随着给药时间的延长逐渐减低。 结论：糖皮质激素抑制骨骼局部骨保护素表达，并且与局部破骨细胞的增多、骨密度降低密切相关，继发了渐进性骨质丢失，可能参与并促进了骨质疏松的形成。     

牛心包衍生材料引导成骨效应的X射线和骨密度评估

目的:应用X射线和骨密度值评价碳化二亚胺交联处理的脱细胞牛心包的引导成骨作用。方法:实验于2004-09/2005-01在中南大学湘雅二医院中心实验室及湘雅二医院动物部完成。健康雄性成年新西兰白兔20只,在新西兰白兔双侧下颌体各制备7mm×7mm大小的骨缺损,一侧骨缺损上方紧贴骨面覆盖碳化二亚胺交联脱细胞牛心包,作为实验组;另一侧不作处理,作为对照组。每组又分4,8,12,16周4个时间点,每个时间点为5只。术后4,8,12,16周行X射线观察和双能X射线吸收仪测量骨密度,评价骨缺损修复情况。结果:纳入新西兰兔20只,均进入结果分析。①术后骨缺损区大体观察:术后12,16周时实验组骨缺损区创面平坦;对照组骨缺损区凸凹不平,中央有结缔组织长入,16周时仍有直径2mm以上的缺损,呈纤维性愈合。②两组兔术后骨缺损区X射线观察:自8周起,实验组骨缺损区密度均高于对照组。③兔骨密度变化:术后4,8,12,16周实验组骨密度均高于对照组,差异均有显著性意义[分别为(0.337±0.035),(0.304±0.027)g/cm2;(0.373±0.022),(0.354±0.025)g/cm2;(0.365±0.032),(0.341±0.031)g/cm2;(0.347±0.023),(0.311±0.028)g/cm2,P<0.05]。结论:X射线和骨密度评估结果均显示碳化二亚胺交联脱细胞牛心包有良好的引导骨组织再生作用。     

中年女性骨代谢相关指标变化与冬泳运动的干预

目的:观察冬泳运动对中年女性骨密度、骨矿含量和血清性激素水平的影响,以及与骨代谢相关血生化指标的变化。方法:实验于2004-10/2005-03在沈阳体育学院进行。由沈阳市冬泳协会组织冬泳爱好者和非冬泳试验对象各36人,年龄50～55岁,其中冬泳爱好者作为冬泳组,非冬泳者为对照组。纳入标准:较经常参加户外活动,均无明显胃肠道疾病、肾脏疾病、甲状腺疾病、糖尿病等骨代谢疾病,近期未服用激素类和抗癫痫类对骨代谢有影响的药物。冬泳组经3周适应性运动后,每周在2～10℃水温中游泳3次,5～10min/次,每次游泳前后分别进行5～10min的热身和调整运动;对照组未进行任何干预措施。运动周期结束采用单光子骨密度仪测试试验对象骨密度;放射免疫法和生化法分析睾酮、雌二醇和骨代谢等指标的变化。结果:纳入冬泳爱好者36人及非冬泳36人,均进入结果分析。①干预后各组骨密度测量结果:冬泳组桡骨远端的骨密度、骨矿物质均高于对照组[(0.98±0.04),(0.96±0.08)g/cm2;(0.72±0.15),(0.62±0.24)g/cm;P<0.05],骨宽无显著变化(12.25±0.17),(12.20±0.16)cm。②干预后各组血清生化指标的测量结果:冬泳组血清中骨钙素、睾酮、雌二醇值均较对照组显著增高[(13.40±3.60),(11.60±3.20)μg/L;(2.67±0.75),(2.23±0.67)μg/L;(64.60±22.50),(53.90±20.50)ng/L;P<0.05],血清钙、磷、皮质醇两组无显著差异[(2.25±0.16),(2.20±0.24)mmol/L;(1.35±0.22),(1.26±0.23)mmol/L;(313.60±122.00),(300.10±118.00)mg/L;P>0.05]。③干预后冬泳组各项指标与骨密度相关分析:冬泳运动改善血清睾酮、雌二醇和骨钙素的浓度,与骨密度呈正相关(r=0.323,0.311,0.407)。结论:冬泳运动影响中年女性的骨代谢,增加骨密度和骨矿物质的含量,提高骨钙素、睾酮、雌二醇的血液浓度,对于预防骨质疏松的发生有重要意义。     

去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点

目的:观察去卵巢致Wistar大鼠骨质疏松模型骨密度、结构、最大载荷等变化特点,探讨骨量与骨结构的可能关系。方法:实验于2002-09/2004-01在解放军第三军医大学动物研究所及中心实验室完成。选择雌性未孕Wistar大鼠20只,随机数字表法分为去势组、假手术组,各10只。去势组行双侧卵巢切除,假手术组不切除卵巢。术后8周测定以下指标:①骨密度:在双能X射线骨密度仪的探头下,应用小动物软件进行腰椎和股骨的扫描,测定骨密度值。②椎体压缩测试:将磨制好的椎体置于实验机上,取加载速度1mm/min进行测试,其结构力学参数由载荷-变形曲线获得,材料力学参数由应力-应变曲线获得。③骨形态计量学检查指标:骨小梁面积百分数(%Tb.Ar),代表骨量;骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N),骨小梁分离度(Tb.Sp)。④血、尿生化指标的测定:血清钙、磷,尿钙、磷,尿肌酐,均采用BECKMAN自动生化分析仪。血清骨钙素、血清碱性磷酸酶、血清抗酒石酸酸性磷酸酶、尿羟脯氨酸具体参照试剂盒说明。结果:纳入动物20只,均进入结果分析。①去势组大鼠股骨骨密度明显低于假手术组[分别为(0.166±0.026),(0.195±0.027)g/cm2,P<0.05],腰椎骨密度尤其显著[分别为(0.190±0.011),(0.251±0.029)g/cm2,P<0.01]。②去势组大鼠股骨最大载荷与假手术组相比显著降低[分别为(94.43±8.96),(109.49±12.41)N,P<0.05],腰椎最大载荷降低尤其显著[分别为(98.75±8.19),(118.82±15.74)N,P<0.01]。③去势组大鼠骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)与假手术组相比显著降低(去势组分别为4.78±0.76,46.29±9.96,0.64±0.08,假手术组分别为7.74±1.76,60.91±3.80,1.26±0.26,P<0.01);骨小梁分离度(Tb.Sp)显著增高(分别为2300.85±480.10,1112.27±65.81,P<0.01)。④血、尿生化指标显示:骨吸收大于骨形成。结论:Wistar大鼠去卵巢8周成功建立了绝经后骨质疏松模型,骨量与骨结构的一些参数可能存在某种关系。     

利骨素防治去卵巢大鼠骨矿盐丢失机制的研究

目的:通过测定大鼠骨矿盐含量和血清相关激素及白细胞介素6水平,探讨利骨素对去卵巢大鼠骨矿盐代谢的影响及其机制。方法:实验于2003-04/2004-03在广东医学院生理教研室完成。实验材料:普通级4个月龄雌性SD大鼠18只。利骨素由筛选海洋生物中某些贝类的壳和鱼类的骨骼进行组合,配制成粉剂,含Ca6.66mg;Mg0.039mg;Zn8.54μg;P7.32μg;S0.025mg;Co0.078μg;Mn0.61μg。实验分组:用抽签法随机分成3组,即假去卵巢组、去卵巢组、去卵巢 利骨素组,每组6只。实验方法:去卵巢组和去卵巢 利骨素组大鼠切除双侧卵巢。假去卵巢组大鼠手术过程同去卵巢组,但不切除卵巢。去卵巢 利骨素组大鼠于术后第2天开始给予利骨素混悬液按3.0mL/kg体质量灌胃,1次/d,持续11周。实验评估:各组实验动物在第11周末,麻醉状态下动脉放血处死,观察骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重变化。动脉血血清样本-20℃保存待测,放免法同批测定卵泡刺激素、黄体生成素、雌二醇、孕酮、促甲状腺激素、甲状腺素、降钙素、皮质醇、生长素和白细胞介素6。结果:18只大鼠实验数据均进入结果分析。①大鼠骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重变化:去卵巢大鼠各指标均低于假去卵巢组[(504±24),(575±41)mg;(1.55±0.61),(1.82±0.19)g/kg;(293.31±14.00),(381.17±23.00)mg;(0.90±0.04),(1.21±0.14)g/kg;(58.6±0.8)%,(66.3±1.5)%,P<0.05];去卵巢 利骨素组各指标均较去卵巢组高[(613±64),(504±24)mg;(1.89±0.19),(1.55±0.61)g/kg;(405.56±47.00),(293.31±14.00)mg;(1.25±0.13),(0.90±0.04)g/kg;(66.1±0.9)%,(58.6±0.8)%,P<0.05]。②血清相关激素水平:与假去卵巢组比较,去卵巢大鼠血清雌二醇、孕酮、促甲状腺激素、甲状腺素、降钙素、皮质醇、生长素水平低[(2.98±0.72),(23.93±4.48)ng/L;(11.22±1.16),(21.85±2.62)μg/L;(4.10±0.53),(20.07±2.32)mU/L;(5.65±0.77),(13.60±1.74)μg/L;(49.92±6.33),(74.27±6.42)ng/L;(1.70±0.17),(3.81±0.61)μg/L;(2.50±0.51),(6.53±0.73)μg/L,P<0.05],卵泡刺激素、黄体生成素、白细胞介素6水平高[(6.24±1.04),(2.71±0.37)U/L;(14.06±1.22),(3.00±0.24)U/L;(448.33±29.03),(361.50±33.45)ng/L,P<0.05];与去卵巢组比较,去卵巢 利骨素组血清孕酮、生长素、皮质醇、促甲状腺激素、甲状腺素水平高[(14.47±1.40),(11.22±1.16)μg/L;(4.16±0.76),(2.50±0.51)μg/L;(4.95±0.74),(1.70±0.17)μg/L;(13.85±1.99),(4.10±0.53)mU/L;(9.14±1.76),(5.65±0.77)μg/L,P<0.05];血清黄体生成素水平低[(11.19±1.26),(14.06±1.22)U/L,P<0.05]。结论:利骨素可对抗去卵巢所致的骨矿盐丢失,改变去卵巢大鼠体内相关激素水平是对抗去卵巢大鼠骨矿盐丢失的重要机制。     

复合振动对去势骨质疏松大鼠骨强度的作用

目的：观察复合振动骨质疏松大鼠骨强度的影响。方法：4.5月龄SD雌性未育大鼠24只,随机分为对照组和两个实验组。卵巢摘除法骨质疏松造模成功后,实验组各自接受不同的复合振动,分别测大鼠腰椎、股骨骨密度,胫骨骨微结构,腰椎、股骨力学性能。结果：两振动组大鼠腰椎、股骨骨密度均有明显增加,腰椎：0.0055±0.0126g/cm2,0.0132±0.0078g/cm2,股骨：0.0078±0.0081g/cm2,0.0145±0.0053g/cm2,但仅振动2组骨结构（小梁骨数量、间距、连接密度、骨体积分数）和骨极限强度有显著性改善。结论：特定复合振动可以增强去势骨质疏松大鼠骨强度,与同类研究比较可降低振动强度,在治疗骨质疏松方面有应用前景。     

去势大鼠腰椎骨密度及血清生化指标改变及运动训练的干预

目的:通过观察切除卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织形态、血清生化指标以及骨密度的表达情况,了解运动训练对预防绝经后骨质疏松的生物学作用。方法:实验于2005-01/2006-01在解放军第四军医大学动物中心实验室完成。①实验对象:雌性SD大鼠45只,随机分为正常对照组、单纯去势组以及运动训练组,每组15只。②实验方法:单纯去势组、运动训练组分离出双侧卵巢并结扎,摘除,分层缝合切口。正常对照组大鼠仅行手术进入腹腔,切除少量脂肪组织后关闭腹腔。运动训练组术后2周开始进行跑步训练,跑道速度为15m/min。每日上下午各训练1h。各组动物于术后第12周麻醉下处死采血,收集骨骼标本。③实验评估:苏木精-伊红染色观察第3腰椎骨组织形态;DPX-IQ7040双能X线骨密度仪测定第4腰椎骨密度;甲基百里香酚蓝法测定血清钙水平;硫酸亚铁法测定血清磷水平;磷酸苯二钠法测定血清碱性磷酸酶水平;放免法测定骨钙素水平。结果:单纯去势组和运动训练组各有1只动物死亡。其余动物均进入结果分析。①腰椎骨密度:运动训练组明显高于单纯去势组[(0.2443±0.0202),(0.2004±0.0408)g/cm2,P<0.01]。②血清中生化指标检测结果:运动训练组钙离子、碱性磷酸酶、骨钙素水平明显低于单纯去势组[(2.440±0.232),(3.053±0.172)mmol/L;(1.962±0.173),(2.350±0.195)μkat/L;(23.43±3.78),(27.86±4.43)μg/L,P<0.01]。③骨组织形态:运动训练组骨小梁数目增加,小梁的厚度增加,视野下穿孔的数量少于单纯去势组。结论:经过适量运动训练,大鼠去卵巢后体内骨改建的高转换状态可以得到缓解。     

绝经后女性活性氧与骨基质的相关性

目的:分析活性氧与骨基质的相关性,以进一步阐明活性氧与骨质疏松症的内在联系。方法:选择深圳市中医院骨科2003-01/12的女性住院患者90例,所有患者年龄<70岁,绝经1年以上。应用双能X射线骨密度测量仪(QDR-4500A型、美国HOLOGIC公司生产)测定其骨密度,将骨密度低于0.790g/cm2者归于骨质疏松组,骨密度0.790～0.897g/cm2者归于骨量减少组,骨密度不低于0.897g/cm2者归于正常组,每组30例。检测各组血清丙二醛、超氧化物歧化酶及I型胶原羧基端肽水平,用SPSS10.0软件进行直线回归及相关分析,分析各指标间的相关性。结果:90例全部进入结果分析。①丙二醛浓度:骨质疏松组和骨量减少组高于正常组[(11.98±2.12),(9.28±1.44),(7.60±1.70)μmol/L,P<0.01],骨质疏松组高于骨量减少组(P<0.01)。②超氧化物歧化酶活性:骨质疏松组和骨量减少组低于正常组[(722.61±105.10),(882.34±102.38),(1063.06±76.68)μkat/L,P<0.01],骨质疏松组低于骨量减少组(P<0.01)。③I型胶原羧基端肽水平:骨质疏松组和骨量减少组高于正常组[(10.90±1.96),(7.89±1.78),(5.47±1.58)μg/L,P<0.01],骨质疏松组高于骨量减少组(P<0.01)。④丙二醛与I型胶原羧基端肽呈显著正相关(r=0.809,P<0.01),而超氧化物歧化酶与I型胶原羧基端肽呈显著负相关(r=-0.883,P<0.01)。结论:绝经后骨质疏松患者体内的活性氧水平较正常人增高,骨基质的降解也增多,提示活性氧能促进骨基质的降解,加速骨吸收,可能参与和促进了骨质疏松症的病理过程。     

反映骨质疏松大鼠骨代谢变化生化指标的应用

目的:探讨新一代骨代谢生化指标在骨质疏松症诊断和监测中的应用。方法:实验于2003-05/2005-03在郑州大学第一附属医院骨科实验室完成。选择4个月龄雌性SD大鼠30只,将骨质疏松症模型造模成功大鼠20只,随机分为骨质疏松组和雌激素替代治疗组,每组各10只。余10只为假手术组。雌激素替代治疗组给予尼尔雌醇悬浊液灌胃6mL/kg(相当于1.5mg/kg),1次/周,假手术组和骨质疏松组给予同体积生理盐水1次/周,连续12周。全部大鼠于灌胃给药12周后测量全身骨密度,血清生化指标。结果:最终进入统计分析的大鼠保持为3组,共计30只,无缺失值。①骨密度测定:骨质疏松组大鼠在去卵巢8周后全身骨密度较假手术组显著降低犤(0.190±0.031),(0.194±0.045)g/cm2,P<0.05犦,雌激素替代治疗组大鼠在补充雌激素治疗12周后,全身骨密度显著高于骨质疏松组大鼠犤(0.193±0.027),(0.189±0.026)g/cm2,P<0.05犦。②骨代谢生化指标的测定结果:各组实验动物血清钙、碱性磷酸酶在各时间段均无明显差异。骨质疏松组大鼠摘除卵巢4周后,血清骨源性碱性磷酸酶和I型胶原羧基末端肽相比假手术组均显著升高犤(0.61±0.14),(0.36±0.12)μkat/L;(0.45±0.03),(0.28±0.05)μg/L,P<0.05,P<0.01犦,并一直维持在高水平。雌激素替代治疗组大鼠补充雌激素治疗8周后,血清骨源性碱性磷酸酶和I型胶原羧基末端肽相比骨质疏松组开始显著下降犤(0.43±0.17),(0.68±0.13)μkat/L;(0.33±0.08),(0.48±0.07)μg/L,P<0.05,P<0.01犦。结论:联合应用血清骨源性碱性磷酸酶,I型胶原羧基末端肽有助于诊断骨质疏松症,判断抗骨质疏松药物的疗效。