糖络宁浸膏对糖尿病大鼠周围神经氧化应激及下游MAPKs信号转导通路的影响

目的探讨糖络宁浸膏治疗糖尿病周围神经病变的可能作用机制。方法采用一次性腹腔内注射大剂量链脲佐菌素(60 mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、中药组、西药组,每组23只,另设健康大鼠15只为正常组。中药组予糖络宁浸膏按生药20 g/(kg·d)灌胃,西药组予α-硫辛酸20 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组大鼠予等体积蒸馏水灌胃,连续12周。观察各组大鼠血清和坐骨神经中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,大鼠背神经根节(DRG)p38 MAPK、pp38 MAPK、p46JNK、p-p46JNK、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清、坐骨神经SOD活性显著降低,而MDA含量均显著增多(P0.01);与模型组比较,中药组和西药组大鼠血清、坐骨神经SOD活性均显著增强,MDA含量均显著减少(P0.01)。各组大鼠DRG的p38 MAPK、p46JNK、ERK1/2总蛋白表达量相近,组间比较差异均无统计学意义(P0.05);与正常组比较,模型组大鼠DRG的p-p38 MAPK、p-p46JNK、p-ERK1/2活性蛋白表达均明显增高(P0.05),而中药组、西药组大鼠DRG的p-p38 MAPK、p-p46JNK、p-ERK1/2活性蛋白表达均较模型组明显减弱(P0.05)。结论糖络宁浸膏具有显著降低糖尿病大鼠血清、坐骨神经MDA含量,提高血清、坐骨神经SOD活性的作用,有效抑制糖尿病大鼠DRG的p-p38 MAPK、p-p46JNK、p-ERK1/2活性蛋白表达,从而抑制氧化应激反应,对MAPK信号转导通路具有负性调控作用。     

逍遥散对慢性应激大鼠海马组织DUSP14基因表达及对MAPK信号通路的影响

目的：探讨逍遥散对慢性应激大鼠海马组织双特异性磷酸酶 14 （DUSP14） mRNA 表达及对 p38 丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、c-Jun 氨基末端蛋白激酶（JNK）、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）、细胞外信号调节蛋白激酶 5（ERK5）等四类丝裂原活化蛋白激酶 （MAPKs） 信号通路活化状态的影响。方法：将 80 只大鼠分为空白组、模型组、氟西汀组及逍遥散组。空白组大鼠常规饲养,每天灌胃 2 mL 生理盐水;模型组大鼠每天灌胃 2 mL 生理盐水后进行慢性应激刺激;氟西汀组和逍遥散组分别灌胃氟西汀和逍遥散后进行慢性应激刺激;剂量均为 10 mL/（kg · d）。检测各组大鼠海马组织 DUSP14 mRNA 表达及p38、磷酸化 p38 （p-p38）、JNK、磷酸化 JNK （p-JNK）、ERK、磷酸化 ERK （p-ERK）、ERK5、磷酸化 ERK5 （p-ERK5） 的相对含量。结果：与空白组比较,模型组 DUSP14 mRNA 表达显著上调 （P＜0.01）,p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK5/ERK5 均显著升高 （P＜0.01）,p-ERK/ERK 显著降低 （P＜0.01）。与模型组比较,逍遥散组和氟西汀组 DUSP14 mRNA 表达均下调 （P＜ 0.01）;逍遥散组 p-p38/p38、p-JNK/JNK 显著降低（P＜0.01）,p-ERK/ERK 显著升高（P＜0.01）;氟西汀组 p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK5/ERK5 均显著降低 （P＜0.01）,p-ERK/ERK 显著升高 （P＜0.01）。与氟西汀组比较,逍遥散组 p-JNK/JNK、p-ERK5/ERK5 均较高（P＜0.05,P＜0.01）。结论：逍遥散和氟西汀对慢性应激引起的 DUSP14 mRNA 表达变化及 MAPK 各信号通路活性变化的调节作用趋势基本一致,对 p38 MAPK 信号通路的调节作用相当,但在 ERK5 MAPK 通路中逍遥散未表现出活性调节作用,在 ERK、JNK MAPK 通路活化状态调节过程中氟西汀更显优势。     

知葛通脉汤对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节MAPK / ERK通路的影响

目的:研究知葛通脉汤对糖尿病周围神经病变背根神经节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路的影响。方法:选取无特定病原体级SD雄性大鼠50只为研究对象,随机选取10只作为对照组,其余40只为研究组,随机分为四组:知葛通脉汤低、中、高剂量组:分别按照每日2.5g/kg、7.5g/kg、15g/kg体重标准灌胃知葛通脉汤,模型组灌胃给予等量生理盐水,连续给药6周,观察记录大鼠背根神经节中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、p38MAPK、ERK、磷酸化ERK(p-ERK)活性和表达水平以及p38MAPK、ERKmRNA水平。结果:模型组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);知葛通脉汤低、中、高剂量组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显低于模型组(P0.05);知葛通脉汤高剂量组p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平明显低于低剂量组(P0.05),各组之间p38MAPK、ERK活性和蛋白表达水平无明显差异(P0.05);模型组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);知葛通脉汤低、中、高剂量组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显低于模型组(P0.05);知葛通脉汤高剂量组p38MAPK、ERKmRNA表达水平明显低于低剂量组(P0.05)。结论:知葛通脉汤可降低p-p38MAPK、p-ERK活性和蛋白表达水平,有效抑制背根神经节MAPK/ERK通路。     

电针对脾虚大鼠胃动力及丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的影响

目的探讨电针对脾虚大鼠胃动力的调节作用及其相关机制。方法 SD大鼠皮下注射利血平造成实验性脾虚模型,实验分为正常组、模型组、针刺组、非穴组,电针"足三里"干预7 d,观察大鼠胃电参数变化,检测胃排空率及肠推进率,血清胃泌素及胃动素水平,胃窦组织缝隙连接蛋白43(CX43)、p-细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、p-c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、p-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠胃运动频率及幅度显著降低,胃排空率、血清胃泌素及胃动素水平降低,胃窦组织CX43蛋白表达明显下调;与模型组、非穴组比较,电针组大鼠胃运动频率及幅度显著升高,胃排空率及血清胃泌素、胃动素水平升高,胃窦组织CX43、p-ERK1/2、p-p38 MAPK蛋白表达明显上调。结论电针"足三里"可促进脾虚大鼠胃动力,其作用机制可能与胃窦组织CX43的高表达和MAPK信号转导通路ERK1/2及p38 MAPK磷酸化有关。     

柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及ERK/p38 MAPK信号通路的影响

目的:观察柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、柴朴汤低、中、高(0.75,1.5,3.0 g·kg-1)组,地塞米松组。采用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型。柴朴汤低、中、高剂量组于激发前0.5 h给予相应剂量柴朴汤灌胃;地塞米松组于激发前0.5 h给予地塞米松(0.005 g·kg-1)灌胃;模型组于激发前0.5 h给予等体积生理盐水灌胃;空白组以生理盐水代替OVA进行腹腔注射及雾化吸入;隔日1次,共激发28 d。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类细胞计数的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织磷酸化ERK(p-ERK),磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的活性;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析检测ERK,p38 MAPK mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK,p-ERK,p38MAPK,p-p38 MAPK蛋白的表达;光镜下观察病理组织形态学变化及进行炎症评分。结果:模型组大鼠BALF中细胞总数和分类细胞计数;肺组织p-ERK,p-p38 MAPK的活性,ERK,p38 MAPK mRNA的表达,p-ERK,p-p38 MAPK的表达,炎症评分均明显高于空白组(P0.01);柴朴汤低、中、高剂量组和地塞米松组上述指标则明显低于模型组(P0.05,P0.01)。结论:柴朴汤可改善哮喘模型大鼠气道炎症,其机制可能与其抑制ERK/p38 MAPK信号通路有关。     

基于MAPKs信号通路探讨补肾助孕方改善BN大鼠黄体功能的作用机制

目的：探讨补肾助孕方降低黄体功能不全(LPD)自然模型-棕色挪威(BN)大鼠卵巢凋亡水平的可能作用机制。方法：使用随机数表法将50只SPF级雌性BN大鼠分为模型组、地屈孕酮组(0.002 g·kg^-1)、补肾助孕方低、中、高剂量组(4.5、9、18 g·kg^-1),给予相应药物剂量灌胃,每天1次,给药3个动情周期。使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠c-Jun氨基酸末端激酶(JNK)、磷酸化(p)-JNK、细胞外信号调节激酶(ERK)、p-ERK、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、p-p38MAPK、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2的蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠JNK、ERK、p38 MAPK、Bax、Bcl-2 mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清孕酮(P)和雌二醇(E₂)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢形态。结果：与模型组比较,补肾助孕各剂量组使用1个周期后,大鼠动...     

姜黄素抗脑缺血再灌注损伤作用与MAPK信号通路的相关性分析

目的探讨姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤中细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1/2）、C-Jun氨基末端（JNK）/应激化蛋白激酶（SAPK）及p38MAPK信号转导通路的影响。方法采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉（MCAO）建立局灶性脑缺血模型,观察不同浓度姜黄素（20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg）对脑缺血再灌注损伤后大鼠神经行为学评分的影响,并用Western blot法检测p38MAPK、p-p38MAPK、ERK1/2、p-ERK1/2及JNK的表达。结果假手术组无神经行为学改变;各用药组神经行为学评分明显低于缺血再灌注组（P〈0.05）。与缺血再灌注组相比各用药组p-p38MAPK及JNK表达明显降低（P〈0.05）,而p-ERK1/2表达显著增加（P〈0.05）,p38MAPK及ERK1/2表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与抑制p38MAPK和JNK/SAPK信号转导通路以及增强ERK1/2信号转导通路有关。     

苦参颗粒对兔耳痤疮模型P38MAPK/ERK相关信号通路的影响

目的:探讨苦参颗粒溶液对兔耳痤疮模型P38MAPK/ERK相关信号通路的影响及其治疗效果。方法:家兔除空白对照组外,其余各组用kligman法建立兔耳痤疮模型,于造模成功后,予模型组、夫西地酸乳膏组、苦参颗粒100、200、400mg/ml组分别涂敷生理盐水和相应药物,每日一次,连续14d。通过HE染色显微镜下判断其治疗效果;免疫组化检测TNF-α、IL-6、IL-8蛋白的表达;Western blot法检测p-p38MAPK、p-ERK、p38MAPK、ERK蛋白表达;ELISA测定法p-p38MAPK、p-ERK蛋白的含量。结果:与空白组比较,模型组TNF-α、IL-6、IL-8 MOD值和p-p38MAPK、p-ERK表达明显升高,p38MAPK、ERK表达明显下降;与模型组相比,给药各组TNF-α、IL-6和IL-8 MOD值和p-p38MAPK、p-ERK表达明显降低,p38MAPK、ERK表达明显增加。结论:苦参颗粒溶液能降低TNF-α、IL-6、IL-8含量,下调p-p38MAPK、p-ERK蛋白表达,上调p38MAPK、ERK蛋白表达,干预ERK、p38MAPK通路,从而干预痤疮的形成,对痤疮有疗效。     

制大黄-川芎“药对”抑制造影剂肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡信号通路的机制研究

目的研究制大黄-川芎“药对”抑制造影剂。肾病（CIN）大鼠。肾小管上皮细胞凋亡信号通路的机制。方法将32只雄性sD大鼠分为正常组（A组）、模型组（B组）、药对组（C组）、N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（D组）。C组于造模前7天每日灌胃“药对”水煎液,D组造模前3天每日腹腔注射NAC（150μg／g）。B、C、D3组按照文献方法制备CIN模型。造模后24h处死大鼠,测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;HE染色观察肾脏病理改变,Western印迹检测肾组织p-p38MAPK、Bcl-2及Bax表达。结果与A组比较,B、C、D组大鼠血清肌酐、尿素氮均明显升高（P〈0．05,P〈0．01）,出现肾间质水肿、肾小管上皮细胞胞浆空泡样变,p-p38MAPK、Bax蛋白表达上调,Bcl-2表达下降。与B组比较,C、D组血清肌酐、尿素氮明显降低（P〈0．05）,肾脏病理改变显著减轻,p-p38MAPK、Bax蛋白表达下降,而Bcl-2表达增加（P〈0．01）。结论p38MAPK通路活化参与了CIN大鼠急性。肾损伤过程,且制大黄-川芎“药对”能通过抑制该通路活化保护CIN大鼠肾功能。     

清肺通络膏对大鼠呼吸道合胞病毒肺炎肺组织MAPK信号通路的影响

目的:通过观察清肺通络膏及其拆方对大鼠呼吸道合胞病毒肺炎肺组织MAPK信号通路的影响,探讨清肺通络膏对大鼠呼吸道合胞病毒肺炎的防治机制。方法:以呼吸道合胞病毒滴鼻感染大鼠,治疗组分别予清肺通络膏全方、主药和辅药干预。感染病毒后第7天,实时荧光定量PCR(real time RT-PCR)检测大鼠肺组织中p38、ERK、JNK m RNA的含量,western blot的方法观察肺组织中p-p38、p-ERK、p-JNK蛋白水平。结果:正常组和模型组肺组织中均可检测到p38、ERK2、JNK1 m RNA表达及p-p38、p-ERK、p-JNK蛋白表达,但模型组明显高于正常组(P0.05)。治疗组中清肺通络膏全方组p38、ERK2、JNK1 m RNA表达及p-p38、p-ERK、pJNK蛋白表达最低,与主药组、辅药组比较有显著性差异(P0.05)。结论:呼吸道合胞病毒感染大鼠时激活了MAPK信号通路,清肺通络膏全方组能较好的抑制MAPK信号通路的活化,且优于主药及辅药组。     

耳甲电针对抑郁模型大鼠海马Raf/ERK/RSK/CREB信号通路的影响

目的:观察耳甲电针对慢性不可预知性温和刺激(CUMS)诱导的抑郁大鼠海马细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路的影响,探讨耳甲电针抗抑郁效应的机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、耳甲电针组、PD98059抑制剂(PD)组、二甲基亚砜(DMSO)组、PD+耳甲电针组,每组10只。采用孤养结合连续21 d CUMS方法制备抑郁大鼠模型。耳甲电针组、PD+耳甲电针组于耳甲区的"心"和"神门"耳穴给予连续28 d电针刺激,每天30 min;PD组、DMSO组、PD+耳甲电针组分别给予连续28 d侧脑室注射PD98059、DMSO、PD98059,每只5μL/d。记录造模前后、干预后各组大鼠糖水消耗量。采用Western blot法检测干预后各组大鼠海马Raf、p-Raf、ERK、p-ERK、RSK、CREB、p-CREB蛋白的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水消耗量及海马Raf、p-Raf、ERK、p-ERK、RSK、CREB、p-CREB均显著降低(P<0. 01)。与模型组比较,耳甲电针组大鼠糖水消耗量及海马Raf、p-Raf、ERK、p-ERK、RSK、CREB、pCREB均显著升高(P<0. 05,P<0. 01),PD+耳甲电针组p-Raf、ERK、CREB明显升高(P<0. 01,P<0. 05),PD组p-ERK明显下降(P<0. 05)。与耳甲电针组比较,PD+耳甲电针组p-ERK、RSK和pCREB明显下降(P<0. 05,P<0. 01)。结论:海马内Raf/ERK/RSK/CREB信号通路可能参与了耳甲电针的抗抑郁效应,且该效应在一定程度上可被ERK阻断剂所抑制。     

山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨山柰酚对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法 培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,使用不同浓度山柰酚(5、10、20μmol/L)进行处理。采用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p-ERK1、p-p38 MAPK蛋白表达。结果 与对照组比较,各浓度山柰酚组多囊肾囊肿衬里上皮细胞克隆细胞数、CDK2、PCNA、Bcl-2、p-ERK1、p-p38 MAPK蛋白表达降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结论 山柰酚可能通过抑制MAPK信号通路抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖,并诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。     

电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿流动力学及脊髓组织ERK/CREB/Bcl-2通路表达的影响

目的 观察电针“次髎”“中极”“三阴交”“大椎”对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿流动力学及脊髓组织ERK/CREB/Bcl-2通路表达的影响。方法 60只雌性SD大鼠随机选取24只分为空白组和假手术组各12只,其余36只采用脊髓横断法造模,将成模大鼠随机分为模型组和电针组,每组12只。电针组取单侧“次髎”“中极”“三阴交”“大椎”进行电针刺激,每次30 min,1次/d,连续7 d。干预结束后行尿流动力学检测,HE染色观察大鼠膀胱逼尿肌组织形态,TUNEL法检测脊髓组织细胞凋亡情况,Western blot测定脊髓组织p-ERK1/2、p-CREB、p-p90Rsk、CRE、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠膀胱基础压力、最大压力及漏尿点压明显增加（P<0.01）,膀胱最大容量及顺应性明显降低（P<0.01）;膀胱平滑肌细胞结构严重破坏、排列紊乱,伴大量炎性细胞浸润;脊髓组织细胞凋亡率明显升高（P<0.01）,脊髓组织p-ERK1/2、p-p90Rsk、p-CREB、CRE、Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显升高（P<0....     

糖尿病大血管纤维病变中丝裂原活化蛋白激酶信号通路的表达及中药桃仁的干预作用研究

目的基于丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路探究桃仁治疗2型糖尿病大血管纤维化大鼠的作用机制。方法雄性SD大鼠200只,随机选取30只为空白对照组,余170只制备2型糖尿病大血管纤维化大鼠模型,分为早期干预组、低剂量组、高剂量组、模型对照组;早期干预组与低剂量组予桃仁颗粒剂水溶液10 m L/(kg·d)灌胃,高剂量组予桃仁颗粒剂水溶液20 m L/(kg·d)灌胃,模型对照组予0. 9%氯化钠10 m L/(kg·d)灌胃,空白对照组不干预,其中早期干预组从2型糖尿病模型成模后随即开始干预,余各组从2型糖尿病大血管纤维化大鼠模型成模后开始干预。药物干预1周、3周及7周后处死并取材。观察大鼠股动脉病理改变,采用Western blotting方法检测股动脉的ERK1/2及p-ERK1/2的表达情况,采用RT-PCR检测MAPK mRNA表达水平。结果 (1) Western blotting方法检测ERK1/2及p-ERK1/2表达比较:空白对照组与其他四组相比,差异有统计学意义(P 0. 05),空白对照组大鼠股动脉ERK1/2、p-ERK1/2表达值最低;第1、3周,早期干预组与其他四组相比,差异有统计学意义(P 0. 05),早期干预组大鼠股动脉ERK1/2、p-ERK1/2表达值低于低剂量组、高剂量组、模型对照组;第7周,早期干预组与高剂量组相比,差异无统计学意义(P 0. 05);第3、7周,低剂量组与高剂量组、模型对照组,高剂量组与模型对照组相比,差异有统计学意义(P 0. 05),高剂量组大鼠股动脉ERK1/2、p-ERK1/2表达值低于低剂量组,低剂量组大鼠股动脉ERK1/2、p-ERK1/2表达值低于模型对照组。(2)大鼠股动脉MAPK mRNA表达组间比较:空白对照组与其他四组相比,差异有统计学意义(P 0. 05),空白对照组大鼠股动脉MAPK mRNA表达量最低;第1、3周,早期干预组与其他四组相比,差异有统计学意义(P 0. 05),早期干预组大鼠股动脉MAPK mRNA表达量低于低剂量组、高剂量组、模型对照组;第7周,早期干预组与高剂量组相比,差异无统计学意义(P 0. 05);第3、7周,低剂量组与高剂量组、模型对照组,高剂量组与模型对照组相比,差异有统计学意义(P 0. 05),高剂量组大鼠股动脉MAPK mRNA表达量低于低剂量组,低剂量组大鼠股动脉MAPK mRNA表达量低于模型对照组。结论桃仁能降低ERK1/2、p-ERK1/2及MAPK mRNA的表达,对糖尿病大血管纤维化病变有改善作用,其作用与剂量和干预时间有相关性。     

电针联合身痛逐瘀胶囊改善慢性坐骨神经损伤模型大鼠疼痛及对GFAP/p38MAPK信号通路的影响

目的:观察电针联合身痛逐瘀胶囊对慢性坐骨神经损伤(CCI)大鼠疼痛及脊髓组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白表达的影响。方法:90只清洁级SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、电针组、中药组和针药组,每组分为3 d、7 d和14 d共3个亚组,每个亚组6只大鼠。按照Bennett的方法建立CCI大鼠模型,电针组给予损伤侧环跳、阳陵泉电针治疗,每日1次,每次30 min;中药组给予身痛逐瘀胶囊治疗(1.64 g/kg),药物通过灌胃给药,按照15 m L/kg的给药容积,每只大鼠每天灌胃1次;针药组在给予每日1次电针治疗的基础上,同时给予中药灌胃治疗;假手术组和模型组给予等容积生理盐水灌胃。采用热缩足反射潜伏期(TWL)检测大鼠行为学变化,Western blot法检测大鼠脊髓组织GFAP、p-p38MAPK蛋白表达。结果:TWL检测结果显示,模型组大鼠各时间点TWL值较假手术组显著降低(P 0.05);电针组、中药组及针药组各时间点TWL较模型组显著升高(P 0.05);针药组大鼠各时间点TWL较电针组和中药组显著较高(P 0.05)。Western blot检测结果表明,模型组大鼠各时间点GFAP、p-p38MAPK蛋白表达较假手术组显著降低(P 0.05);电针组、中药组及针药组各时间点GFAP、p-p38MAPK蛋白表达较模型组显著升高(P 0.05);针药组大鼠各时间点GFAP、p-p38MAPK蛋白表达较电针组和中药组显著较高(P 0.05)。结论:电针联合身痛逐瘀胶囊能够减轻CCI模型大鼠疼痛反应,其机制可能与下调脊髓组织中GFAP和p-p38MAPK蛋白表达有关。     

齐墩果酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区MAPK/ERK通路相关蛋白表达的影响

目的探讨MAPK/ERK信号转导通路在阿尔茨海默病中的变化,以及中药女贞子有效成分齐墩果酸治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的部分作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和齐墩果酸组,采用侧脑室注射聚集态β-淀粉样蛋白25-35建立AD大鼠模型。齐墩果酸组大鼠予20mg·kg-1齐墩果酸,假手术和模型组予等体积蒸馏水,各组均每日灌胃1次,共灌胃4周。采用Western blot法检测各组大鼠海马区Ras、Raf-1、B-Raf、MEK1/2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达的变化。结果与假手术组比较,模型组Ras、Raf-1、MEK1/2、ERK1/2、pERK1/2相对表达量和p-ERK1/2与ERK1/2相对表达量比值均显著增加,B-Raf表达量显著下降,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,齐墩果酸组Raf-1、MEK1/2、p-ERK1/2表达量和p-ERK1/2与ERK1/2相对表达量比值均显著下降,B-Raf表达量显著增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 MAPK/ERK通路在AD模型大鼠脑中被过度激活,齐墩果酸可能是通过调控MAPK/ERK通路活性,从而达到治疗AD的作用。     

归脾汤对心肌缺血大鼠ERK1/2和p38 MAPK表达的影响

目的：探究归脾汤对心肌缺血大鼠的治疗作用及机制。方法：50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、归脾汤低、高剂量组(7.52、15.04 g·kg^-1)、曲美他嗪组(0.002 g·kg^-1)。通过灌胃维生素D₃、高脂饮食和注射异丙肾上腺素的方法建立心肌缺血大鼠模型，药物治疗15 d后，心电图分析其心肌损伤程度；全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的变化；苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌组织病理改变；原位末端标记(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心脏中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、剪切胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果：与正...     

电针药氧对大鼠全脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探讨电针药氧对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:采用改良Pulsinelli4血管阻断全脑缺血方法,建立短暂反复全脑缺血再灌注(Cerebral ischemia/reperfu-sion,CI/R)大鼠模型。选择造模成功的大鼠随机分为5组:假手术组(S组)、模型组(M组)、电针组(E组)、药氧组(O组)、电针药氧联合组(C组),每组6只大鼠。采用免疫组化与医学图像分析检测大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白阳性细胞数目、平均灰度。结果:M组与S组比较,海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白阳性细胞数目均增多,平均灰度均降低(P0.05;P0.01);E、O、C组与M组比较,Bcl-2蛋白阳性细胞数目增多,平均灰度降低,Bax蛋白阳性细胞数目减少,平均灰度升高(P0.05),以C组效果更明显。结论:全脑缺血后早期电针药氧可上调Bcl-2、下调Bax蛋白的表达,这可能是电针药氧治疗缺血性脑血管病的机制之一。     

腺苷A2A受体在针刺抗脑缺血后神经损伤作用机制研究

目的:探讨腺苷A_(2A)受体在针刺抗脑缺血后神经损伤中的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为假手术组、MCAO组、SCH58261组、针刺组和针刺+CGS21680组各10只。MCAO组、SCH58261组、针刺组和针刺+CGS21680组参照改良Longa法制备动物脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,针刺组和针刺+CGS21680组在造模前及缺血后再灌注前进行电针预治疗30分钟;SCH58261组和针刺+CGS21680组在插入线栓5分钟后分别腹腔注射SCH58261(1mg/kg)和CGS21680(0.2mg/kg)。再灌注24小时后,对各组大鼠进行进行神经功能缺损评分;采用TTC法检测脑梗死体积百分比;HE染色检测脑组织损伤;TUNEL检测脑组织细胞凋亡;Western Blot检测p-p38MAPK、p38MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果:与假手术组相比,MCAO组、针刺组、SCH58261组和针刺+CGS21680组大鼠脑组织细胞凋亡率明显增加(P0.05),p-p38MAPK、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达明显上调(P0.05);与MCAO组相比,针刺组和SCH58261组大鼠神经体征缺失评分、脑组织细胞凋亡率明显下降(P0.05),脑梗死体积百分比明显增加(P0.05),Bcl-2的表达明显上调(P0.05),p-p38MAPK、Bax和Caspase-3的表达明显下调(P0.05)。结论:针刺可能通过抑制腺苷A_(2A)受体抑制p38MAPK的磷酸化,保护脑缺血大鼠的神经损伤。     

风湿祛痛胶囊对类风湿关节炎滑膜Akt和MAPK信号通路的影响

目的:观察风湿祛痛胶囊(FSQTC)对蛋白激酶B(Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,以探讨其抑制类风湿关节炎(RA)滑膜血管新生的机制。方法:采用SD大鼠诱导建立胶原诱导性关节炎(CIA)模型,灌胃给予FSQTC低、中、高剂量(0. 25,0. 5,1 g·kg~(-1)) 19 d后,取膝关节滑膜组织备用;血管内皮细胞生长因子(VEGF,20μg·L~(-1))诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC),肿瘤坏死因子-α(TNF-α,20μg·L~(-1))体外诱导人RA成纤维样滑膜细胞系MH7A,分别加入不同质量浓度FSQTC(0. 02,0. 1,0. 5μg·L~(-1))作用后,取细胞备用。分别提取滑膜组织以及MH7A和HUVEC两种细胞中的蛋白,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化Akt(p-Akt),p-p38 MAPK,p-细胞外信号调节激酶(ERK),p-氨基末端激酶(JNK)的蛋白表达水平。结果:CIA模型组大鼠关节滑膜中p-Akt,p-p38 MAPK,p-ERK和p-JNK的表达水平均较正常组显著升高(P 0. 01),经0. 25,0. 5,1 g·kg~(-1)·d~(-1)的FSQTC治疗后降低(P 0. 05,P 0. 01);与空白组比较,VEGF或TNF-α能分别诱导p-Akt,p-p38 MAPK,p-ERK和p-JNK在MH7A或HUVEC细胞中的异常升高(P 0. 01),0. 02,0. 1,0. 5μg·L~(-1)的FSQTC能明显降低p-Akt,p-p38 MAPK,p-ERK,p-JNK的表达水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:FSQTC能负调节Akt和MAPK信号通路在CIA大鼠滑膜组织、体外培养的血管内皮细胞和成纤维滑膜细胞中的异常活化,这可能与其对RA滑膜血管新生的抑制作用有关。