溶血磷脂酸与卵巢肿瘤

溶血磷脂酸(LPA)是一种多功能磷脂信使,通过G蛋白耦联受体介导的多种信号传导通路发挥其生物学效应.已知的人类LPA受体有3种,LPA1(Egd2),LPA2(Edg4)和LPA3(Edg7),其中LPA1主要分布于正常组织,而LPA2和3在某些肿瘤组织中明显增多.LPA主要通过靶细胞上特异性受体发挥其多种生物学功能.近年的研究表明,其与卵巢癌的发生、发展、浸润、转移及代谢耐药关系极为密切,了解其作用机制,信号传导通路及与卵巢肿瘤的关系,可指导早期诊断、复发预测、预后判断及基因调控靶向治疗卵巢癌.     

溶血磷脂酸抑制顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)抑制顺铂(DDP)诱导卵巢癌细胞凋亡的机制。方法:体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV3,选用促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路特异性阻断剂PD98059,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定DDP、DDP+LPA和DDP+LPA+PD98059对SKOV3细胞增殖活性的影响;应用Ho-echst33258荧光染色观察凋亡细胞;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定单用LPA或合用PD98059对SKOV3细胞环氧化酶-2(COX-2)表达的影响;应用流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡及细胞周期的变化。结果:LPA对DPP抑制卵巢癌细胞增殖有拮抗作用,且增加S期细胞比率;联合应用PD98059后,卵巢癌细胞生长受抑制,S期比率降低,而凋亡小体产生增多。RT-PCR结果显示,LPA能促进COX-2表达(P<0.05),而合用PD98059后COX-2表达降低(P<0.05)。结论:LPA通过MAPK信号传导通路抑制顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡,且与COX-2表达有关。     

溶血磷脂酸在早期诊断卵巢癌中的应用

溶血磷脂酸 (ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃａｃｉｄ ,ＬＰＡ)属于脂类中小分子物质。近几年来的研究发现 ,ＬＰＡ在体内信号传递过程中起十分重要的作用 ,被称为多功能“磷脂信使” ,受到有关研究学者的高度重视[1] 。特别是近两年来 ,又发现ＬＰＡ可以用于早期诊断卵巢癌等妇科肿瘤。现将ＬＰＡ在早期诊断卵巢癌等妇科肿瘤方面的研究综述如下。一、ＬＰＡ的生物化学特性有关ＬＰＡ的物理化学性质 ,如相变行为等知道的较少。由于ＬＰＡ仅有一个脂酰集团 ,因此它的极性比其他的脂类要强 ,水溶性也相对较强。由于它不一定与膜结合 ,有些…     

卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸水平及其受体Edg-4表达的研究

目的探讨卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)水平及其受体Edg-4在卵巢肿瘤组织中的表达情况。方法2002-01-2004-01扬州大学临床医学院测定57例卵巢恶性肿瘤患者、66例卵巢良性肿瘤患者及37例健康对照者血浆LPA水平和血清CA125水平,比较两者在诊断卵巢恶性肿瘤中的敏感性和特异性。并用RT-PCR方法检测其中18例卵巢恶性肿瘤患者及24例卵巢良性肿瘤患者肿瘤组织Edg-4mRNA的表达情况。结果卵巢恶性肿瘤患者、卵巢良性肿瘤患者及健康对照者血浆LPA水平分别为(5.63±2.35)μmol/L、(2.80±1.13)μmol/L、(2.51±1.08)μmol/L,前者血浆LPA水平与后两者相比,差异有统计学意义(P<0.01);后两者之间血浆LPA水平差异无统计学意义(P>0.05)。LPA和CA125在诊断卵巢恶性肿瘤的敏感性和特异性方面差异无统计学意义(P>0.05)。18例卵巢恶性肿瘤患者肿瘤组织中有16例Edg-4mRNA表达阳性,24例卵巢良性肿瘤患者肿瘤组织中有11例Edg-4mRNA表达阳性,两者在Edg-4mRNA表达方面差异有统计学意义(P<0.01)。结论卵巢恶性肿瘤患者血浆LPA水平明显高于良性肿瘤患者和健康对照者;大多数卵巢恶性肿瘤患者表达Edg-4受体,部分卵巢良性肿瘤患者表达Edg-4受体,血浆LPA及其受体Edg-4可能成为治疗卵巢恶性肿瘤的新靶点。     

溶血磷脂酸在上皮性卵巢癌诊断及病情监测中的价值

目的 探讨溶血磷脂酸（LPA）在上皮性卵巢癌诊断及病情监测中的价值.方法 选择2005年4月至10月河北医科大学第四医院收治的40例初治上皮性卵巢癌患者,测定其术前和术后的血浆LPA和CA125,同时测定其中20例腹水中的LPA,并选择同期20例良性卵巢肿瘤患者血浆和腹腔冲洗液作对照.结果 上皮性卵巢癌组术前血浆LPA明显高于良性对照组（P＜0.01）,且术后水平低于术前（P＜0.01）.上皮性卵巢癌患者腹水LPA明显高于良性卵巢肿瘤患者腹腔冲洗液（P＜0.01）.LPA诊断Ⅰ期上皮性卵巢癌的敏感性及特异性分别是75%和80%.CA125的敏感性及特异性分别是25%和40%.结论 LPA升高可能成为早期上皮性卵巢癌诊断的新的生物学指标,同时可监测病情并判断病人的预后.     

溶血磷脂酸在卵巢癌进展中的机制研究

在卵巢癌的发生发展中,脂代谢发挥重要作用,溶血磷脂酸(LPA)作为一种生物活性磷脂分子,通过与多种G蛋白偶联受体结合,参与卵巢癌的增殖、转移和侵袭活动。一方面,LPA可通过促进肿瘤血管新生、调节细胞周期、抑制凋亡、促进糖代谢及维持肿瘤干细胞(CSC)的特性来促进卵巢癌细胞增殖;另一方面,LPA可增加基质金属蛋白酶(MMP)及尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)的表达、干预细胞间连接和骨架蛋白、促进上皮-间质转化(EMT),进而促进卵巢癌的转移和侵袭。此外,卵巢癌患者血浆中高水平的LPA单独或与卵巢癌的其他肿瘤标记物联合检测具有更高的敏感度和特异度。综述LPA在卵巢癌增殖、转移和侵袭中的作用机制以及潜在的诊断、治疗靶点方面的研究进展。     

溶血磷脂酸受体在卵巢癌细胞系3AO、OVCAR3、SKOV3及卵巢癌组织中的表达

目的:研究溶血磷脂酸受体在人卵巢癌细胞系和人卵巢癌组织中蛋白的表达。方法:用免疫细胞化学和免疫组织化学法检测LPA1,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系3AO、OVCAR3、SKOV3和人卵巢癌组织中的表达水平。结果:免疫细胞化学显示LPA1,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系中均有表达;免疫组织化学显示LPA1蛋白在正常卵巢上皮和卵巢良性肿瘤中高表达,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌组织中高表达。结论:LPA1,LPA2和LPA3在人卵巢癌细胞系和人卵巢癌组织中均有广泛表达;LPA2,LPA可能与卵巢癌的发生发展密切相关。     

溶血磷脂酸在妇科恶性肿瘤诊断中的应用价值

溶血磷脂酸(LPA)是一种生长因子，具有多种生物活性，通过G蛋白偶联受体发挥作用。近年多项研究发现，LPA在妇科恶性肿瘤腹水及血浆中明显升高。体外试验也发现，LPA能促进妇科恶性肿瘤细胞增生和浸润。LPA可能是早期诊断妇科恶性肿瘤的有效标志物。     

溶血磷脂酸与卵巢癌

溶血磷脂酸(LPA)是一类生长因子的磷脂类信号分子,通过G蛋白偶联受体引起多种生物学效应,其中最主要的作用是诱导各类细胞增生。近年研究发现,LPA在卵巢癌患者的腹水及血浆中显著增高,有可能成为卵巢癌早期诊断的有效标志物。体外研究表明,LPA能促进卵巢癌细胞增殖,在癌细胞的浸润和转移过程中起重要作用。调节LPA的代谢,阻断LPA受体,干扰LPA信号传递途径,均可成为新的抗卵巢癌药物的治疗靶点。     

溶血磷脂酸在妇科恶性肿瘤诊断中的应用价值

溶血磷脂酸(LPA)是一种生长因子,具有多种生物活性,通过G蛋白偶联受体发挥作用.近年多项研究发现,LPA在妇科恶性肿瘤腹水及血浆中明显升高.体外试验也发现,LPA能促进妇科恶性肿瘤细胞增生和浸润.LPA可能是早期诊断妇科恶性肿瘤的有效标志物.     

反复早期自然流产血浆溶血磷脂酸及其受体3在绒毛、蜕膜组织中的表达

目的 探讨反复早期自然流产患者血浆溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)水平及溶血磷脂酸受体3(lysophosphatidic acid receptor3,LPA3)在绒毛、蜕膜组织中的表达.方法 2007年1-6月在石家庄市妇幼保健院选取反复早期自然流产患者30例以及同孕龄正常早孕妇女30例和30例正常非孕期妇女采用薄层比色法测定外周血血浆溶血磷脂酸水平;并采用免疫组化方法检测上述反复早期自然流产惠者及正常早孕妇女人工流产的绒毛、蜕膜组织中溶血磷脂酸受体3的表达情况.结果 反复早期自然流产患者血浆溶血磷脂酸水平(3.72±2.39)μmol/L高于正常早孕妇女(1.99±O.94)μmol/L及正常非孕期妇女(1.70±O.67)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.01);后两者相比差异无统计学意义(P>0.05).反复早期自然流产患者绒毛、蜕膜组织中溶血磷脂酸受体3的表达[(2.667±1.093)μmol/L,(2.60±1.192)μmol/L]低于正常早孕相应孕龄妇女[(5.867±2.161)μmoL/L,(5.333±1.807)μmol/L],两者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 血浆溶血磷脂酸水平升高及绒毛、蜕膜组织中溶血磷脂酸受体3的低表达可能导致反复早期自然流产的发生率增高.     

妊娠期高血压疾病溶血磷脂酸及其受体的变化及意义

目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)在妊娠期高血压疾病患者血液中的水平及其受体在胎盘组织的表达。方法:应用生化法检测60例妊娠期高血压疾病患者和20例正常晚期妊娠妇女血浆LPA水平,同时应用免疫组化技术检测60例妊娠期高血压疾病患者和20例正常妊娠妇女胎盘组织LPA受体Edg4和Edg7的表达,以初步探讨LPA与妊娠期高血压疾病的关系。结果:妊娠期高血压疾病组血浆LPA水平明显高于正常晚期妊娠妇女组(P<0.05),且妊娠期高血压疾病不同组别血浆LPA水平相比均有显著差异(P<0.05)。溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、Edg7主要在胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞的细胞质和细胞膜上高表达,免疫组化染色呈浅黄或棕黄色。Edg4、Edg7在子痫前期组的表达显著高于正常晚期妊娠妇女组。结论:血浆LPA及其在胎盘组织中的溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、Edg7可能参与妊娠期高血压疾病的发生及发展,血浆LPA水平有望成为妊娠期高血压疾病预测、诊断、病情监测及预后判断的重要临床指标。     

溶血磷脂酸在卵母细胞体外成熟过程中作用的研究进展

卵母细胞体外成熟(IVM)已成为一项热门的辅助生殖技术(ART),有广泛的应用和发展前景。但其体外成熟率和受精后的发育能力还有待提高,培养条件需要进一步优化。溶血磷脂酸(LPA)是磷脂激素家族的重要成员,有生长因子和激素样活性,可产生广泛的生物学效应。研究表明LPA存在于卵泡液中,对卵泡发育、卵母细胞IVM、受精、胚胎发育、种植等产生重要作用。本文就LPA特性及其在卵母细胞体外成熟过程中的作用做一简要的阐述。     

血浆溶血磷脂酸在卵巢上皮性癌诊断中的应用初探

目的探讨血浆溶血磷脂酸水平在卵巢上皮性癌诊断中的价值。方法 选择31卵巢上皮性癌、22例卵巢良性上皮性肿物和24例内膜异位囊肿患者作为研究对象,测定其血浆溶血磷脂酸及CA125水平,分别计算并比较其诊断卵巢癌的敏感性及特异性。结果 卵巢癌组血浆溶血磷脂酸值(6±2.4)μmol/L及CA125值(275.8±191.7)U/mL明显高于非癌组(分别为2.4±1.6μmol/L与51.0±44.2U/mL)(P<0.01)。血浆溶血磷脂酸诊断卵巢癌的敏感性及特异性分别为93.5％与71.7％,且特异性明显高于CA125(39.1％,P=0.002)。结论血浆溶血磷脂酸用于诊断卵巢癌具有良好的敏感性和特异性,可能具有潜在的诊断价值。     

血浆溶血磷脂酸诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤价值初探

目的:初步探讨血浆溶血磷脂酸(LPA)诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤的潜在价值.方法:分别测定31例早期卵巢恶性上皮性肿瘤(Ⅰ～Ⅱ期),20例卵巢良性肿瘤,20例卵巢巧克力囊肿及20例正常妇女血浆LPA和血清癌抗原125(CA125)水平.结果:早期卵巢恶性上皮性肿瘤组、卵巢良性肿瘤、卵巢巧克力囊肿组、正常妇女组血浆LPA水平分别为4.12±1.36 μmol/L、1.74±0.71μmol/L、2.99±1.28μmol/L.、1.85±0.35μmol/L,早期卵巢恶性上皮性肿瘤组血浆LPA水平高于卵巢良性肿瘤组及卵巢巧克力囊肿组及正常妇女组(P均＜0.05).血浆LPA和血清CA125诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤的敏感性分别为80.65%和54.84%,血浆LPA水平在诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤的敏感性方面要优于CA125(P＜0.05);但两者的特异性分别为85.00%、76.67%,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:早期卵巢恶性上皮性肿瘤组血浆LPA水平高于卵巢良性肿瘤组及卵巢巧克力囊肿组及正常妇女组,敏感性优于CA125,血浆LPA检测对诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤可能具有一定的积极意义.     

病毒性脑炎患儿复方丹参治疗前后血浆溶血磷脂酸浓度的变化及意义

目的观察病毒性脑炎(病脑)患儿血浆溶血磷脂酸(LPA)浓度动态变化，并探讨其临床意义。 方法2004年9月至2005年9月，对保定市儿童医院收治的102例病脑住院患儿，按入院日期随机分为观察I组(52例)和观察II组(50例)，两组均给常规治疗，观察I组加用复方丹参注射液。两组均在入院治疗前采静脉血5mL，治疗后5，7，10，14d分别于清晨采空腹静脉血5mL，采用比色测定法测定血浆LPA浓度，同时测定凝血指标。设健康儿童20例为对照组，并进行比较。 结果病脑病情轻度者，LPA浓度于治疗后不同时间的差异不显著，P>005；重度病脑患儿发病后LPA即明显升高，以后渐降低，治疗14d时基本正常。观察I组LPA恢复正常时间较观察II组短，病情好转亦快。10d时观察I组比观察II组临床治愈好转的例数多，P<005。凝血指标的变化与LPA呈正相关。 结论病脑患儿急性期LPA浓度升高，证明病脑存在血栓前状态，LPA升高与病情严重程度呈正相关，随病情好转而恢复正常。提示病脑患儿尤其是重度者应予以抗凝治疗。LPA浓度可作为病脑病情严重程度及估计预后指标之一，可用于指导治疗。     

妊娠期高血压疾病患者血浆溶血磷脂酸水平的测定及其意义

妊娠期高血压疾病是影响妊娠预后最常见的妊娠期特有疾病，直接威胁母儿的生命安全，其病因及病理机制尚不清楚，目前多认为其发病可能与血管内皮细胞损伤、自身免疫、凝血及纤溶系统失调等有关。溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid，LPA）是一种细胞间磷脂类信号分子，通过G蛋白耦联受体发挥广泛而多样的生物学功能。近年来研究发现，妊娠期高血压疾病患者血液中的LPA可以来源于活化的血小板，而血小板的活化聚集则促使血栓形成，因此，LPA在缺血性脑卒中的诊断及中风预警中有重要价值。本研究通过对妊娠期高血压疾病患者血浆IJPA水平的检测，以探讨LPA与妊娠期高血压疾病的发生、发展及预后的关系。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7的表达及其意义

目的 探讨胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7的表达与妊娠期高血压疾病发生的关系及作用机制。方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法,检测20例正常晚期妊娠妇女（正常晚孕组）、20例妊娠期高血压患者（妊娠期高血压组）、20例轻度子痫前期患者（轻度子痫前期组）、30例重度子痫前期患者（重度子痫前期组）的胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4与Edg7的表达。结果（1）表达部位：Edg4与Edg7主要表达于胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞的细胞质和细胞膜。（2）Edg4和Edg7在胎盘绒毛滋养细胞中的表达阳性率：正常晚孕组分别为25％和20％,妊娠期高血压组分别为60％和40％,轻度子痫前期组分别为80％和65％,重度子痫前期组分别为83．3％和86,7％。轻、重度子痫前期组阳性率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义（P〈0,05）;妊娠期高血压组与正常晚孕妇组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）Edg4和Edg7在胎盘蜕膜细胞中的表达阳性率：正常晚孕组分别为20％和25％,妊娠期高血压组分别为55％和50％,轻度子痫前期组分别为70％和55％,重度子痫前期组分别为83．3％和73．3％。轻度子痫前期组及重度子痫前期组阳性表达率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;妊娠期高血压组与正常晚孕组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7呈高表达,提示溶血磷脂酸与胎盘组织中的特异性受体Edg4、7结合,并参与了妊娠期高血压疾病的发生。     

卵巢上皮性肿瘤组织中溶血磷脂酸受体Edg4与Edg7蛋白的表达及其临床意义

卵巢上皮性癌（卵巢癌）由于其组织学的复杂性,病变的隐秘性,为临床诊断和治疗增加了极大的困难.1998年,Xu等[1]发现,卵巢癌患者血浆及腹水中溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）水平明显升高,推测LPA在卵巢癌的发生、发展中起重要作用.而LPA主要通过其相关的G蛋白偶联受体Edg2、Edg4、Edg7起作用.本研究采用免疫组化法检测LPA受体Edg4与Edg7蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达情况,探讨其与卵巢上皮性肿瘤发生、发展的关系,为进一步了解卵巢癌的生物学行为及寻找卵巢癌新的基因治疗靶点提供理论依据.     

Edg4基因小分子干扰RNA载体的构建及其对卵巢上皮性癌细胞的沉默效应

目的构建针对Edg4基因的小分子干扰RNA（siRNA）载体,初步观察其对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞的沉默效应。方法利用软件分析、设计针对人Edg4 mRNA的siRNA靶序列,合成发夹样DNA序列;退火成双链,克隆至真核表达载体pRNAT—U6．1质粒上,经PCR技术鉴定及DNA双向测序证实其序列无误后,用脂质体包裹并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,用荧光显微镜初步观察其在SKOV3细胞中的转染率。采用实时荧光定量荧光定量PCR技术检测转染前后SKOV3细胞中Edg4 mRNA的表达,生化法测定转染前后SKOV3细胞上清液中溶血磷脂酸（LPA）含量的变化,流式细胞术检测转染后SKOV3细胞的凋亡率。结果经PCR技术鉴定及DNA双向测序证实重组真核表达载体的序列无误,并将此命名为pRNAT—U6．1—siEdg4。荧光显微镜下观察,转染后SKOV3细胞内有明显绿色荧光信号,转染率为64％;实时荧光定量PCR技术检测显示,转染后SKOV3细胞的Edg4 mRNA表达水平（0．05±0．01）明显低于转染前（0．29±0．04,P〈0．05）;SKOV3细胞上清液中LPA的含量,转染后明显低于转染前[分别为（3．0±1．0）、（7．5±2．2）μmol／L;P〈0．05];流式细胞仪检测显示,转染后SKOV3细胞的凋亡率明显高于转染前（分别为53．38％、0．51％;P〈0．05）。结论本研究成功构建了针对人Edg4基因的siRNA真核表达载体,并能较高效转染SKOV3细胞,转染后能明显抑制SKOV3细胞中Edg4 mRNA的表达,诱导卵巢癌细胞凋亡。