江浙蝮蛇毒C_4组分的中枢镇痛作用及其机理研究

目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分的中枢镇痛作用并初步探讨其镇痛机理。方法:通过侧脑室给药、脊髓化鼠镇痛实验和足跖定压刺激试验研究C4组分的镇痛作用部位;通过C4组分与阿托品、利血平、纳络酮药物的相互作用,研究其与乙酰胆碱受体、阿片受体间的作用关系。结果:C4组分的镇痛部位主要在脑中枢,且C4组分不通过乙酰胆碱受体作用,而与阿片受体相关。结论:江浙蝮蛇毒C4组分镇痛通过中枢起效,提示江浙蝮蛇毒C4组分可能与增加内源性阿片肽系统的活动有关。     

江浙蝮蛇毒镇痛组分对小鼠镇痛的药理实验研究

目的 :将分离纯化的江浙蝮蛇镇痛组分进行小鼠镇痛实验 ,研究其毒性及其镇痛效果。方法 :采用小鼠热板法和醋酸扭体法 ,对分离的江浙蝮蛇毒各组分进行实验 ,经Bliss法计算LD50 和ED50 ,测定治疗指数筛选最佳镇痛组分。结果 :筛选出 3、6号组分 ,其治疗指数分镇痛为 5 5 .32、17.35。结论 :3号组分具有较高的安全性和有效性 ,为江浙蝮蛇毒最佳镇痛组分。     

江浙蝮蛇毒镇痛组分对小鼠镇痛的药理实验研究

目的：将分离纯化的江浙蝮蛇镇痛组分进行小鼠镇痛实验，研究其毒性及其镇痛效果。方法：采用小鼠热板法和醋酸扭体法，对分离的江浙蝮蛇毒各组分进行实验，经B1iss法计算LD50和ED50，测定治疗指数筛选最佳镇痛组分。结果：筛选出3、6号组分，其治疗指数分镇痛为55．32、17.35。结论：3号组分具有较高的安全性和有效性，为江浙蝮蛇毒最佳镇痛组分。     

江浙蝮蛇毒C_4组分的分离纯化及药理性质研究

目的:分离筛选江浙蝮蛇毒的C4组分,研究其毒性、机体耐受性和依赖性等药理学性质。方法:采用离子交换和分子筛,以柱层析法分离蛇毒C4组分,并用急性毒性实验和自然戒断实验、耐受性实验考察其毒性、依赖性和耐受性。结果:经分离筛选后得到C4组分,并获得蛇毒C4组分的毒性作用、机体耐受性和依赖性等性质。结论:C4组分作为江浙蝮毒中的一个有效组分,在一定剂量范围内安全性良好,未发现耐受性和依赖性,值得进一步开发利用。     

江浙蝮蛇毒镇痛组分分离纯化方法的研究

采用国际先进的AKTA—explorer蛋白快速纯化系统对蛇毒进行分离，通过多级分离与条件优化，将江浙蝮蛇毒镇痛组分分离纯化，并结合药理实验确定其镇痛组分。方法：江浙蝮蛇经过多步分离法分离。将分离的各组分，进行小鼠镇痛实验，以确定镇痛组分。结果：经三步柱分离可得单一色谱峰，纯度为99％。分离所得3、6号主峰具有显著镇痛作用。结论：利用三步柱分离法可将江浙蝮蛇毒中主要组分分离纯化。3、6号组分可基本确定为江浙蝮蛇毒镇痛组分。     

江浙蝮蛇毒的质量分析

目的 :建立江浙蝮蛇毒的质量分析方法。方法 :采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对江浙蝮蛇毒进行定性鉴别 ,以Lowry法测定江浙蝮蛇毒的总蛋白量。结果 :聚丙烯酰胺凝胶电泳法能较好的鉴别江浙蝮蛇毒 ;Lowry法测定 ,表明江浙蝮蛇毒总蛋白量在 2 5 μg·mL-1～ 2 5 0 μg·mL-1范围内有较满意的线性关系 ,回归方程为Y =0 .0 14 7+ 1.4 5 5 3X ,r=0 .9992 ,平均回收率为 10 0 .0 9% ,RSD =1.76 % (n =6 )。结论 :上述方法简便、精确 ,可以作为江浙蝮蛇毒的质量控制方法。     

江浙蝮蛇毒的抗凝作用及应用

心脑血管病是我国的多发病，有很高的致残率和病死率。根据中国高血压联盟公布资料，我国高血压病人近亿人，脑血管病患者450万人，每年新发生150万人。因此，血栓病的研究治疗，特别是抗血栓药物的研制已经成为特点。现今，人们一方面采用分子生物学技术对现有药物进行分子结构改造，以便获得更为优良的溶栓药物；另一方面，也在积极的寻找一些安全性好，疗效好且副作用小的天然来源的溶栓药物^[1]。     

江浙蝮蛇毒对体外培养人滑膜细胞凋亡的影响

目的探讨江浙腹蛇毒(AHV)诱导类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞凋亡的作用及对相关蛋白Caspase-3表达的影响。方法 AHV处理培养的滑膜细胞后,采用MTT比色法检测AHV对滑膜细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达。结果 MTT的检测结果显示5μg/mL AHV处理组滑膜细胞增殖抑制率达67.2%,且与时间、剂量具有正相关关系(P0.05),AHV体外作用滑膜细胞24 h的IC50为3.508μg/mL。流式细胞仪结果显示,与对照组相比,AHV各剂量组凋亡率明显增加(P0.05),并与剂量呈正相关。AHV体外作用滑膜细胞24 h时出现了明显的Caspase-3蛋白表达,其蛋白表达率明显高于对照组。结论 AHV对滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,细胞凋亡率明显增加可能与AHV诱导滑膜细胞Caspase-3活化相关。     

尖吻蝮蛇毒活性肽K组分的研究

目的从尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种小分子活性肽K组分,测定其理化性质及生物学活性。方法经Sephadex G-75凝胶过滤,超滤,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析法分离纯化活性肽K,采用高效液相鉴定纯度,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子量,等电聚焦法测定等电点,用比浊法测定其抗血小板聚集活性,通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测K组分对血管生成的影响。结果从尖吻蝮蛇毒中分离相对分子量约为7 862D,等电点为4.29的组分。该组分能抑制由二磷酸腺苷(ADP)、胶原(collagen)、凝血酶(thrombin)诱导的血小板聚集并成剂量依赖性;具有抑制鸡胚尿囊膜血管生成的作用。结论从尖吻蝮蛇毒中纯化出活性肽K,该组分有很强的抗血小板聚集和抗血管生成作用。     

石膏注射液中枢镇痛作用的实验研究

实验用三碘季铵酚制动猫进行．以隐神经C类纤维传入冲动引起的大脑皮层体感区诱发电位(C-CEP)为慢痛指标。结果表明，在34例实验中，静脉注射石膏注射液使26例(76．47％)的CCEP峰-峰值明显衰减甚至消失．6例(17．65％)的C-CEP峰-峰值无明显变化．2例(5．88％)的CCEP峰-峰值增大。石膏注射液对A类纤维传入引起的体感皮层诱发电位(A-CEP)无明显影响。石膏注射液对C-CEP的抑制作用既能被纳洛酮翻转．又能被异搏定所拮抗。提示石膏注射液具有较明显的选择性中枢镇痛作用，其中枢镇痛作用可能与Ca^2 及内阿片肽释放有关。     

浙江蝮蛇毒诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的体外实验研究

目的：研究浙江蝮蛇毒诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的作用及机理，方法：采用MTT法测定IC50值及生长曲线，流式细胞仪（FCM)Annexin Ⅴ FITC/PI法检测细胞凋亡发生率，PI染色法检测细胞周期，同时用流式细胞汁FCM及Western-blot检测Bcl-2蛋白表达。结果：浙江蝮蛇毒能抑制Jurkat细胞生长，且呈剂量依赖关系，并能诱导人白血病Jurkat细胞凋亡，48h时作用最强，此时Bcl-2蛋白表达下降，随后此作用减弱，低浓度作用下细胞逐渐恢复生长，结论：浙江蝮蛇毒能诱导人白血病Jurkat细胞凋亡，且呈剂量依赖关系，此作用与Bcl-2蛋白表达下调有关。     

蛇毒蛋白C激活剂的活化蛋白C特性及影响因素的探讨

目的:研究蛇毒蛋白C激活剂(PCA-SV)活化蛋白C的特性,探讨可能影响PCA-SV作用的实验条件.方法:分别采用APTT法和CBS02.46发色底物法,研究PCA-SV的作用特点,探讨PCA-SV在不同实验条件下的抗凝活性及酰胺酶活性.结果:PCA-SV是蛋白C特异性激活剂,可特异性地作用于蛋白C,使后者表现抗凝和酰胺酶活性.PCA-SV的最适pH值为6.0～7.0,最适温度为37～40℃,肝素、枸橼酸钠等抗凝剂及Na 、K 、EDTA等不影响其活性.结论:PCA-SV是一种效价较高、特异性强、影响因素少的蛋白C活化剂.