阶跃切应力对内皮细胞释放前列环素的影响

采用流室定量研究阶跃切应力内皮细胞释放前列环素（ＰＧＩ２）的影响。结果提示：在活体中血液流变学因素－血流切应力对血管内皮细胞释放前列环素有促进作用。     

切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的前列环素分泌变化

目的：研究切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的抗凝血功能。方法：应用流动腔系统,对与平滑肌细胞联合培养的同皮细胞施加生理大小的切应力,以放免分析法检测内皮细胞分泌ＰＧＩ２的变化。结果：ＰＧＩ２峰值释放速率及稳定释放速率随切应力的增大而增高,峰值释放速率的衰减常数（ｔ１／２）随切应力的增大而减小。结论：切应力作用下,与平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的抗凝血功能增强。     

切应力对培养的人脐静脉内皮细胞内钙的影响

目的 探讨切应力对血管内皮细胞内钙的影响。方法 设计离体血流循环切应力测试装置，选择15dyne/cm^2、50dyne/cm^2、300dyne/cm^2三种切应力，分别模拟大中动脉处、大中动脉分叉处及病理状态下的切应力，以体外培养的人脐静脉内皮细胞作为实验对象，测定切应力分别作用0，0．5，1，2，4，6，10h的内皮细胞内总钙的含量。结果 细胞内钙于切应力作用0.5h时达最高峰值，然后迅速恢复。15dyne/cm^2组峰值最低，50dyne/cm^2组峰值最高，300dyne/cm^2组峰值居中，差异有显性意义（P＜0．05）。切应力分别作用0．5，1，2，4，6，10h的内皮细胞内钙含量与静态对照（0h）间差异有显性意义（P＜0．05）。结论 切应力可影响内皮细胞内钙的含量，进而改变内皮细胞功能，参与动脉粥样硬化的发生过程。     

切应力作用下脐静脉内皮细胞的流变特性

用流室法研究人工培养脐静脉内皮细胞在切应力作用下的变形特性。对脐静脉内皮细胞分别施加０．６、３．８及７．５Ｐａ的切应力，作用１２小时，通过实时显微观测和计算机图象分析，结果证明切应力为３．８或７．５Ｐａ。作用１２小时后内皮细胞被拉长，长轴与流场方向一致，并且内皮细胞的拉长与定向程度，切应力大小及其作用时间的长短有关。     

流体切应力对内皮细胞的作用

与血流有关的机械作用力在对血管健康状况的准确控制、动脉结构的调节和重建、动脉粥样硬化发生的部位等方面都起到很重要的作用.而这些作用主要都是通过血液流动过程中产生的切应力对内皮的作用而发生的.通过内皮对血液动力的转导和传递导致内皮细胞对流体切应力(Fluid Shear Stress:FSS)发生生物物理的、生化的和基因调控水平的反应.     

切应力作用下脐静脉内皮细胞的流变特性

用流室法研究人工培养脐静脉内皮细胞在切应力作用下的变形特性。对脐静脉内皮细胞分别施加０．６、３．８及７．５Ｐａ的切应力，作用１２小时。通过实时显微观测和计算机图象分析，结果证明切应力为３．８或７．５Ｐａ，作用１２小时后内皮细胞被拉长，长轴与流场方向一致；并且内皮细胞的拉长与定向程度、切应力大小及其作用时间的长短有关。     

白细胞介素-6对人脐静脉内皮细胞前列环素合成的影响

目的 :探讨白细胞介素 - 6 (IL - 6 )对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)合成前列环素 (PGI2 )的影响以及钙拮抗剂、糖皮质激素对 IL - 6的作用的影响。方法 :采用培养的原代人脐静脉内皮细胞为实验对象 ,用放免法测定细胞培养液中的 6 - keto PGF1α。结果 :IL - 6组内皮细胞合成的 6 - keto PGF1α的量较对照组显著减少 ,对照组为 (6 2 0 .4±34 .1) pg/ ml,而 IL - 6组 (5 0 u/ m l、10 0 u/ ml)分别为 (5 0 3.2± 2 3.6 )、(470 .3± 2 3.6 ) pg/ m l(P <0 .0 5 ) ;钙拮抗剂可以拮抗 IL - 6的上述效应与 IL - 6组比较 ,P <0 .0 5 ,而地塞米松无此作用。结论 :IL - 6能抑制内皮细胞合成分泌PGI2 ,此作用可能是通过钙离子作为第二信使而实现的     

切应力与内皮细胞关系研究进展

血管内皮细胞具有活跃的分泌、合成和代谢功能，可产生多种细胞因子和生物活性物质，调节机体的生理功能。而血液流动产生的切应力对内皮细胞的作用极为重要。本文就切应力改变影响内皮细胞功能的研究进行综述。     

切应力对内皮细胞一氧化氮合酶及细胞凋亡的影响

目的探讨切应力作用对体外培养的牛胸主动脉内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达和细胞凋亡的影响。方法体外培养牛胸主动脉内皮细胞，采用平行平板流动腔装置模拟体内血流切应力(5dynes／cm^2和25dynes/cm^2)作用于内皮细胞12h，采用Western blot分析和DNA片段凝胶电泳，观察不同切应力对体外培养的血管内皮细胞eNOS蛋白表达和细胞凋亡的影响。结果静息状态下，体外培养的牛胸主动脉内皮细胞呈多角形“铺路石”状排列，形态大小均匀。不同切应力(5，25dyne／cm^2)作用12h后，血管内皮细胞形态学未见明显改变。但与静止状态细胞的基础水平相比，Western blot分析发现，牛胸主动脉血管内皮细胞eNOS蛋白表达在低切应力时降低；低切应力还可诱导血管内皮细胞发生凋亡，凝胶电泳检测出现明显的DNA梯形带；但在高切应力(25dynes／cm^2)作用下，内皮细胞eNOS表达水平与未处理组接近，而且DNA片段凝胶电泳也未见明显凋亡现象。结论低切应力可降低内皮细胞eNOS蛋白表达和诱导内皮细胞凋亡，提示低切应力可能是导致血管内皮细胞eNOS表达降低和细胞凋亡的重要因素。     

微囊化人血管抑素基因工程细胞对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的了解海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微囊化人血管抑素基因工程细胞对人脐静脉内皮细胞(Huecv304)增殖的影响。方法采用APA制备微囊包裹的表达人血管抑素(human angiostatin,hAS)的基因工程细胞(APA-hAS/293细胞微囊)或空载体转染的基因工程细胞(APA-0/293细胞微囊)。分别将上述两种细胞微囊以不同浓度与人脐静脉内皮细胞Huecv304细胞共培养,于培养0、24、48及72h时,以MTT法测定Huecv304细胞的增殖情况。结果 APA-hAS/293细胞微囊对共培养的Huecv304细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),且具有良好的量效关系。而对照组APA-0/293细胞微囊对Huecv304细胞的增殖无明显抑制作用。结论体外培养的表达人血管抑素基因的工程细胞的分泌物可以通过微囊膜并对人脐静脉内皮细胞的增殖产生显著的抑制效应。     

基质细胞衍生因子-1对人脐静脉血管内皮细胞迁移的影响

目的:利用Boyden chamber体外迁移体系初步探索基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)在人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)迁移中的作用及其信号转导机制。方法:以HUVEC为实验材料,首先利用免疫荧光技术及蛋白印迹方法检测HUVEC表达SDF-1α受体CXCR4,其次利用Boyden chamber体外迁移体系,先观察不同浓度的SDF-1α对HUVEC迁移的影响,最后以磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)阻断剂wortmannin(50 M)或LY294002(10μM)、丝裂酶原活化蛋白激酶(MAPK)阻断剂PD98059(50μM)、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)阻断剂U73122(10μM)、CXCR4特异性阻断剂AMD3100(0.1 mg/ml)等不同预处理HUVEC 30 min,观察分析SDF-1α对HUVEC迁移影响的信号转导通路。结果:培养的HUVEC表达SDF-1α受体CXCR4,HUVEC体外迁移能力随着SDF-1α浓度的递增而逐渐增强,并且SDF-1α浓度在100 ng/ml时,HUVEC迁移到滤膜上的细胞数最多;Wort-mannin、LY294002、PD98059、U73122、AMD3100对HUVEC迁移均有影响,其中U73122、AMD3100对HUVEC迁移阻断的效应最显著。结论:SDF-1α/CXCR4所介导的HUVEC迁移与MAPK)、PI-PLC和蛋白激酶C(PKC)等信号途径有关,且PKC途径可能处于中心环节。     

顺铂对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:为细胞间黏附分子(ICAMs)是否参与顺铂引起的血管损伤病理反应寻找证据。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)以不同浓度顺铂(Cisplatin)或同一浓度顺铂处理不同时间后,蛋白印迹分析法和RT-PCR检测内皮细胞CAMs的表达情况,并通过凝胶阻滞分析(EMSA)和特异性抑制剂来探讨NF-κB在其中的作用。结果:顺铂能够在mRNA和蛋白水平明显上调内皮细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,而对P-选择素、E-选择素和VCAM-1的表达无明显影响。其表达是通过核因子κB(NF-κB)依赖途径实现。结论:ICAM-1参与了顺铂的血管毒性病理过程,具有靶向治疗前景。     

烟曲霉感染对人脐静脉内皮细胞表达血管假性血友病因子的影响

目的通过建立烟曲霉菌丝感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的体外模型,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达血管假性血友病因子（vWF）的变化,以及用不同干预因素处理对HUVEC表达vWF的影响,以探讨侵袭性曲霉病血管侵袭的机制。方法实验分六组,即空白对照组、TNF-α组、烟曲霉菌丝组、细胞松弛素D组、N-钙黏蛋白抗体组和地塞米松组,分别于2、6、12及18 h提取细胞培养上清液,采用ELISA法检测vWF浓度。结果与2 h比较,空白对照组和TNF-α组的vWF表达量在18 h增加（P〈0.05）,其余各组vWF表达量在6、12及18 h均增加（P〈0.05）;各实验组与空白对照组比较,除N-钙黏蛋白抗体组HUVEC的vWF表达量在2 h无明显变化外,其余各时间点vWF表达量均升高（P〈0.05）。TNF-α组HUVEC的vWF表达量在2 h高于烟曲霉菌丝组,而在18 h低于烟曲霉菌丝组。N-钙黏蛋白抗体组HUVEC的vWF表达量在2 h和6 h分别低于烟曲霉菌丝组相应时间点。细胞松弛素D组和地塞米松组vWF在各时间点与烟曲霉菌丝组的差异均无统计学意义。结论烟曲霉菌丝感染后,HUVEC过度表达vWF,N-钙黏蛋白单克隆抗体可减少vWF的表达,而细胞松弛素D和地塞米松对vWF的表达无明显影响。     

牙龈卟啉单胞菌对脐静脉血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察牙龈卟啉单胞菌（Pg)对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖的影响，探讨Pg对牙龈血管内皮细胞的毒性作用。方法：以厌氧袋法培养Pg，原代培养HUVEC，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）观察HUVEC的增殖状态。结果：活的和灭活的Pg都剂量依赖性地抑制HUVEC的增殖，活的Pg作用比灭活的Pg更为强烈，而Pg毒力株W83和非毒力株ATCC33277对HUVEC增殖的影响无显著差异。结论：Pg可能通过损伤牙龈组织的血管内皮细胞加重局部的炎性反应，可能是Pg诱导牙周组织破坏的病理机制之一。     

平阳霉素对体外培养的脐静脉内皮细胞损伤的研究

目的：在体外研究平阳霉素（ＰＹＭ）对人脐静脉血管内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的作用。方法：在体外培养的ＨＵＶＥＣ中加入不同浓度的ＰＹＭ，培养０．５ｈ及１ｈ后取贴壁细胞及培养液进行研究。结果：⑴作用１ｈ后，２５μｇ·ｍｌ１以上浓度组均可见细胞多数收缩，随浓度增高，细胞脱落增多。⑵随药物浓度、作用时间增加，培养液中ＬＤＨ活性及细胞杀伤率明显升高。结论：ＰＹＭ对ＨＵＶＥＣ损伤具有剂量和时间依赖性。防止局部注射药物流失可能是治疗海绵状血管瘤的关键。     

ox-HDL_3对人脐静脉内皮细胞的损伤作用

目的:探讨氧化高密度脂蛋白3(ox-HDL3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的损伤作用。方法:体外培养HU-VECs与不同浓度(50~200mg/L)ox-HDL3共孵育,用普通光镜和荧光显微镜分别观察HUVECs形态及核形态的变化,用噻唑兰(MTT)比色法检测细胞存活状况。结果:ox-HDL3使内皮细胞数目减少,形态改变;Hoechst 33258染色后可见大量的细胞核浓缩呈高亮度蓝色荧光的凋亡细胞;MTT结果显示,细胞存活率下降,且呈剂量依赖性。结论:ox-HDL3可导致内皮细胞受损,从而促进动脉粥样硬化的发生发展。     

血管内皮生长因子的基因克隆与表达

目的　构建编码正反义血管内皮生长因子 1 65(vascularendothelialgrowthfactor 1 65 ,VEGF1 6 5)的真核表达质粒 ,观察质粒转染体外培养的人脐静脉血管内皮细胞 (humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)后 ,靶细胞VEGF的分泌及细胞生长速度是否发生改变。方法　RT PCR从人胚胎肾组织中获hVEGF1 6 5的cDNA片段 ,构建编码正反义hVEGF1 6 5真核表达质粒 (pCR3 .1 /anti VEGF1 6 5及 pCR3 .1 /VEGF1 6 5) ,通过脂质体介导将质粒转入HU VEC细胞 ,ELISA测定转染后细胞VEGF的分泌量 ,设空载体组及未转染的细胞为对照。筛选稳定表达外源基因的细胞克隆 ,在相差显微镜及透射电镜下观察转染后细胞形态是否发生变化 ,MTT方法检测细胞生长曲线是否有改变。结果　DNA测序结果 ,获得重组质粒pCR3 .1 /anti VEGF1 6 5与pCR3 .1 /VEGF1 6 5所携带的外源基因序列与文献报道的基本一致。质粒转染后靶细胞形态均无明显变化 ,仅在透射电镜下观察到与蛋白质合成相关的细胞器结构发生了相应的改变。反义VEGF转染明显降低靶细胞VEGF的分泌量 ,抑制率为 67.7% (P <0 .0 1 ) ,同时细胞生长速度明显减慢 (P <0 .0 5)。而转入正义基因的细胞VEGF的分泌量则能明显提高 ,与空白对照组比较增长率为984.8% (P <0 .0 1 ) ,细胞生长速     

山莨菪碱对缺氧复氧损伤血管内皮细胞凋亡的影响

目的探讨山莨菪碱(anisodamine,Ani)对缺氧复氧损伤血管内皮细胞凋亡的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞缺氧复氧方法观察血管内皮细胞凋亡的变化,实验分5组:对照组、生理盐水组、肾上腺素组、Ani组、肾上腺素+Ani组。采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用RT-PCR法检测血管内皮细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)mRNA表达水平。结果 5组血管内皮细胞复氧12 h、24 h的细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中生理盐水组复氧12 h、24 h细胞凋亡率与肾上腺素组、Ani组、肾上腺素+Ani组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肾上腺素组与Ani组复氧12 h、24 h细胞凋亡率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而这两组与肾上腺素+Ani组复氧12 h、24 h的细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。复氧12 h、24 h后5组的Bcl-2 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肾上腺素+Ani组Bcl-2 mRNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ani可以降低缺氧血管内皮细胞的凋亡。Ani干预缺氧所...     

三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞损伤后活性的影响

目的:检测三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响,探索三七总皂苷对内皮细胞的保护作用。方法:把体外培养的人脐静脉内皮细胞株传代培养,共分为6组,即正常组,模型组,三七总皂苷4个浓度组,用10μg·L~(-1)的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)造成细胞损伤模型,三七总皂苷组分别加入不同浓度的三七总皂苷2.5 mg·L~(-1)、5 mg·L~(-1)、10 mg·L~(-1)、20 mg·L~(-1),用CCK-8方法检测各组细胞活性。结果:CCK-8检测结果显示,人脐静脉内皮细胞在TNF-α诱导损伤后,用4个浓度的三七总皂苷干预,随着时间的延长,细胞存活率逐渐降低,组间差异具有统计学意义,其中6 h的细胞存活率最高,24 h的细胞活性最差,差异无统计学意义;和模型组相比,三七总皂苷4个浓度组细胞活性明显较高(P0.01或P0.05),其中5 mg·L~(-1)三七总皂苷组细胞活性最高,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:三七总皂苷能提高人脐静脉内皮细胞损伤后的活性。