血管内皮细胞生长因子与冠状动脉狭窄及侧支循环的关系

目的探讨急性心肌梗死患者血浆中血管内皮细胞生长因子的含量与冠状动脉狭窄程度及侧支循环形成的关系。方法对76例急性心肌梗死患者于入院后3~7天及6个月分别进行冠状动脉造影检查,确定冠状动脉狭窄的程度及有无侧支循环形成;于首次冠状动脉造影检查时采血5mL,采用酶联免疫吸附法检测血浆中血管内皮细胞生长因子含量。结果冠状动脉狭窄程度<50%、50%~75%和>75%的患者血浆血管内皮细胞生长因子含量分别为97.6±17.3ng/L、241.6±28.9ng/L和391.7±48.4ng/L,不同冠状动脉狭窄程度的血浆血管内皮细胞生长因子含量比较差异有统计学意义(P<0.01);24例有侧支循环形成的患者与52例无侧支循环形成的患者血浆中血管内皮细胞生长因子含量分别为410.3±42.9ng/L和220.9±105.2ng/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论急性心肌梗死患者血浆中血管内皮细胞生长因子的含量愈高,冠状动脉狭窄程度愈重,愈有利于侧支循环的形成。     

血管内皮生长因子基因治疗犬闭塞性血管病的初步研究

目的探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗犬闭塞性血管病的可行性，并对其安全性进行初步观察。方法构建了重组ＶＥＧＦ基因的真核表达载体。在基因转移前３天，肌肉内注射肌肉再生剂丁哌卡因（ｂｕｐｉｖａｃａｉｎｅ），并通过基因缝线和直接注射法，向血管闭塞症犬（ｎ＝５）的肌肉内转移重组ＶＥＧＦ基因（０．５ｍｇ／ｋｇ），应用ＲＴ－ＰＣＲ技术观察ＶＥＧＦ基因的表达，通过血管造影观察ＶＥＧＦ基因导入犬体内的生物效应；并应用临床自动血液生化分析仪和眼底镜进行转基因的安全性观察。结果转ｐｃＤＮＡ３／ＶＥＧＦ基因２８天后，缺血区肌肉组织内ＶＥＧＦ的表达明显高于对照单纯转ｐｃＤＮＡ３组；１４天后血管造影可见明显新生血管和侧枝循环的形成，２８天后更明显，一年后未见血管无限制生长；血液生化测定未见明显副作用。结论肌肉内转移ＶＥＧＦ基因通过促进血管新生和侧枝循环建立，促进血流恢复，经一年连续观察，无明显毒副作用，为闭塞性血管病的治疗，提供一种新的有效方法。     

肌肉电针介导血管内皮生长因子基因治疗猴闭塞性血管病的实验研究

目的　利用一种新的基因转移方法探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗猴闭塞性血管病的可行性。方法构建重组ＶＥＧＦ基因的真核表达载体。转基因前３天肌肉内注入肌肉再生剂了哌卡因（ｂｕｐｉｖａｃａｉｎｅ）,通过电针向血管闭塞症猴（ｎ＝６）骨骼肌内转移重组ＶＥＧＦ基因（１６００μｇ／只）,应用血管造影、局部血管染色及超声多普勒等方法观察ＶＥＧＦ基因导入猴体内后的生物效应,并利用临床自动生化分析仪、病理切片和Ｂ超进行转基因的安全性研究。结果转ｐｃＤ２／ＶＥＧＦ基因２８天后,血管造影可见明显的新生血管和侧支循环形成,超声多普勒发现血流明显恢复,３个月后更显著,血管染色记数两组间差异有显著性（ＰｃＤ２／ＶＥＧＦ组４０．３±９．４３／ｍｍ２;ｐｃＤ２组２５．９±９．００／ｍｍ２,Ｐ＜０．０１）。血液生化测定、主要脏器病理切片和Ｂ超检查未发现异常。结论利用电针向肌肉内转移ＶＥＧＦ基因可促进局部组织新生血管形成和侧支循环建立,促进血流恢复,且安全、简便,为闭塞性血管病的基因治疗提供一种新的基因转移方法。     

心肌注射碱性成纤维细胞生长因子促进犬侧支血管形成的实验研究

目的　评价在犬急性心肌梗死模型中 ,心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对心肌局部血流量及侧支血管形成的影响。方法　 17条杂种犬 ,结扎第一、第二对角支和第一、第二钝缘支造成急性心肌梗死模型。冠状动脉结扎 2 0min后 ,治疗组 (n =9)在梗死边缘区心肌 5点注射2 0 0 μgbFGF ,对照组 (n =8)以相同的方法注射生理盐水 2 0 0 μl。在冠状动脉结扎之前、结扎即刻、结扎后 3h、7d及 2 8d使用非放射性彩色微粒子测量心肌局部血流量。试验终点观察侧支血管密度变化。结果　与对照组相比 ,治疗组心肌注射 2 0 0 μgbFGF后 ,梗死区心外膜心肌局部血流量明显增加 :冠状动脉结扎 3h治疗组心肌血流量为 (36 4 0± 2 0 4 ) % ,对照组为 (32 32± 3 0 7) % ,P <0 0 5 ;7d后治疗组为 (5 6 30± 3 4 9) % ,对照组为 (35 6 8± 1 6 2 ) % ,P <0 0 1;2 8d分别为 (70 6 2±3 17) % ,(46 2 0± 2 5 8) % ,P <0 0 1。与之相似 ,治疗组梗死边缘区心外膜心肌血流量也明显增加 :冠状动脉结扎 7d治疗组为 (6 8 0 6± 2 6 9) % ,对照组为 (5 3 94± 2 2 7) % ,P <0 0 1;2 8d治疗组为(79 74± 4 6 1) % ,对照组为 (6 1 84± 4 5 2 ) % ,P <0 0 1。与对照组相比 ,治疗组梗死区血管密度 :治疗组为 (7 2     

血管内皮生长因子在治疗性血管生成中的应用

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是特异的有丝分裂素,除有促进内皮细胞增生、转移、增加血管通透性和血管生成的作用外,微血管造影证实ＶＥＧＦ可促进侧枝血管的形成。人重组ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ转基因治疗促进缺血模型的治疗性血管生成。ＶＥＧＦ基因还成功地用于严重下肢缺血病人的转基因治疗。     

血管内皮生长因子与血管形成作用研究进展

血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）因其特异性的促血管形成作用而成为近年的研究热点。它在缺血性疾病的治疗、肿瘤防治、创伤愈合等方面均参与血管形成，并起关键性作用．被誉为最有希望的候选基因治疗之一。本文对VEGF的血管形成作用研究进展综述如下。     

门静脉高压侧支循环与血管内皮细胞生长因子

新近发现门静脉高压侧支循环形成与血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导的血管生成有一定的关系,这对传统认为的门静脉压力增高引起被动的血管通道开放的理论提出了挑战．研究提示在门静脉高压动物中VEGF／VEGF-R2 通路促进了门静脉系统侧支血管和高动力循环的形成．从而证实门静脉高压症侧支循环形成不仅归咎于连接门体静脉系统的分支血管, 而且是VEGF依赖的血管生成结果．现就近来这方面研究的文献作一综述．     

急性缺血性脑卒中侧支循环与血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的相关性

目的探究急性缺血性脑卒中侧支循环与血管内皮细胞生长因子(VEGF)以及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的相关性。方法选取首次急性期大脑中动脉M1段严重狭窄或闭塞的缺血性脑卒中患者89例,根据弥散加权成像-Alberta卒中项目早期CT评分(ASPECTS)将患者分为侧支良好组44例(ASPECTS 8～10分)和侧支不良组45例(ASPECTS 0～7分),并行多模态CT血管造影(mCTA)侧支循环评分。选取同期健康体检者46例为对照组。比较各组VEGF、bFGF水平。结果侧支良好组VEGF、bFGF水平明显高于侧支不良组和对照组,中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)明显低于侧支不良组(P<0.05,P<0.01)。NLR为侧支循环建立的危险因素(P=0.003),VEGF、bFGF为侧支循环建立的保护因素(P<0.05)。mCTA侧支循环评分与血清VEGF、bFGF水平均呈正相关(P<0.01)。血清VEGF、bFGF水平诊断侧支循环建立良好曲线下面积分别为0.683(95%CI:0.576～0.778,P=0.001)、0.724(95%CI:0.619～0...     

心肌内注射腺病毒介导血管内皮生长因子基因的血管生成实验研究

目的探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的血管生成作用. 方法在猪冠状动脉回旋支起始处放置Ameroid闭合器,制备慢性心肌缺血模型,28 d时行选择性冠状动脉造影,观察回旋支狭窄程度.开胸,治疗组(6只)在缺血区心肌内多点注射含人VEGF165基因的重组腺病毒载体(Ad-VEGF165);对照组(6只)在缺血区心肌内多点注射含细菌半乳糖苷酶基因的重组腺病毒载体(Ad-β-gal).转染重组腺病毒载体28 d时重复行冠状动脉造影后,处死猪,取缺血区心肌,做组织学检查;应用酶标法检测血浆中VEGF浓度,采用Rentrop分级、缺血区心肌侧支血管积分和心肌碱性磷酸酶染色法评价血管生成作用. 结果与对照组比较,基因转染3 d时治疗组血浆VEGF增高[(114.6±5.4)pg/ml对(60.3±1.8)pg/ml,P<0.001],7 d时血浆VEGF为(128.4±3.0)pg/ml对(70.9±5.3)pg/ml,P<0.001,14 d后恢复到基线水平.与对照组比较,基因转染28 d时治疗组Rentrop分级增高(2.8±0.4对1.3±0.8,P<0.001),侧支血管积分增高(4.8±0.8对1.7±0.8,P<0.001),缺血区毛细血管密度增高(210±19对62±6,P<0.001). 结论心肌转染Ad-VEGF165后,缺血心肌表达VEGF,产生了血管生成作用.     

血管内皮生长因子基因转染内皮祖细胞移植于大鼠缺血心肌的研究

目的:将编码有血管内皮生长因子基因的腺病毒(Ad.VEGF)转染诱导培养的骨髓内皮祖细胞(EPCs),移植于大鼠缺血心肌,评价其对心功能的保护和促血管再生作用。方法:Ficoll离心分离大鼠骨髓单个核细胞,诱导培养EPCs;在50倍的转染倍数(病毒数/靶细胞)下,用Ad.VEGF转染诱导的EPCs。然后将其移植于结扎冠状动脉前降支的Lewis大鼠缺血心肌内(组Ⅰ),同时设置单纯细胞移植组(组Ⅱ)和基因治疗组(组Ⅲ),以注射磷酸盐缓冲液的大鼠为对照组(组Ⅳ)。术后4周通过血流动力学指标评价其对心功能的保护作用;另外通过免疫组化染色观察移植细胞存活、分化和血管再生情况。结果:骨髓EPCs移植于缺血心肌4周后,缺血区的移植细胞部分分化为血管内皮细胞,组Ⅰ心功能明显好于组Ⅱ、组Ⅲ和组Ⅳ(P<0.01),在促血管新生方面,组Ⅰ也明显优于以上3组[组Ⅰ(32.2±3.5)、组Ⅱ(17.6±2.7)、组Ⅲ(19.4±3.3)、组Ⅳ(5.9±1.2)个/高倍视野]。结论:转染Ad.VEGF后的EPCs移植于缺血心肌后,可促进缺血心肌再血管化,更好地保护和改善心脏功能。     

直接心肌植入VEGF_(165)基因的实验研究

目的 :评估VEGF1 6 5基因直接心肌内注射促进心肌血运重建的疗效。方法 :中国实验小型猪 11只 ,体重 (2 9 3± 4 3)kg。在左冠状动脉回旋支 (LCX)近心端放置Ameroid收缩环。术后 6周行冠脉造影示LCX狭窄 >95 %为慢性心肌缺血模型形成。将选用模型随机分为治疗组 (n =6 )和对照组 (n =5 )。治疗组将VEGF1 6 5质粒注射到左室侧壁 10处有标记的心肌中层。对照组只注射空白质粒。治疗前和治疗 6周后 ,采用体表超声心动图观察静息与小剂量多巴酚丁胺负荷 (LDDSE)状态下左心室壁运动及功能 (LVEF、RT、MVCF、WMSI) ,通过2 0 1 TI SPECT观察心肌灌注改变。处死动物后进行心肌血管密度和VEGF基因mRNA表达测定。结果 :治疗 6周后 ,在静息与LDDSE(10 μg min kg)状态下 ,A组RT和WMSI较治疗前显著改善 ,侧壁灌注缺损明显缩小 ,B组改善不明显。A组每个视野的血管面积、血管周长及血管数目均较B组多。A组 2 3例局部心肌VEGF基因mRNA的表达明显 ,B组 3 3例均无表达。结论 :直接心肌内注射VEGF1 6 5基因可促进慢性缺血心肌的血管再生 ,改善局部心肌灌注和室壁运动。     

血管内皮生长因子基因治疗小型猪冠状动脉闭塞的实验研究

目的探讨应用血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗动物实验性冠状动脉闭塞的疗效.方法中国实验用小型猪19只,结扎左冠状动脉前降支中远段,心肌内多点注射自行构建的pcD2/hVEGF121真核表达质粒.应用逆转录聚合酶链反应、VEGF免疫组化染色、Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色等方法检测VEGF基因在心肌中的表达及其生物学作用,用常规冠状动脉造影观察VEGF基因治疗对闭塞冠脉侧支循环建立的作用.结果转移VEGF基因后,小型猪心肌内VEGF mRNA高表达,VEGF免疫组化染色提示VEGF蛋白表达水平升高;Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色显示心肌毛细血管增加;冠状动脉造影证明VEGF基因治疗能够促进闭塞冠脉侧支循环的建立.结论心肌内注射pcD2/hVEGF121真核表达质粒能够获得VEGF mRNA和蛋白的有效表达,促进心肌毛细血管增生,促进侧支循环建立.     

Role of circulating vascular endothelial growth factor and hepatocyte growth factor in patients with coronary artery disease

Vascular endothelial growth factor (VEGF) and hepatocyte growth factor (HGF) are thought to stimulate endothelial cell proliferation and induce angiogenesis in vivo. However, the precise mechanism responsible for VEGF and HGF release in patients with coronary artery disease is still unknown. We studied serum concentrations of VEGF and HGF in 20 patients with acute myocardial infarction (AMI), 20 patients with stable angina pectoris (AP) who had reversible perfusion defects on stress myocardial scintigraphy, and 16 patients with old myocardial infarction (OMI) who had no reversible defects on stress myocardial scintigraphy. The control group consisted of 20 patients with atypical chest pain who had angiographically normal coronary arteries. Serum VEGF and HGF concentrations were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Both the serum VEGF and HGF concentrations in the early stage of myocardial infarction in the patients with AMI were higher than those in the patients with AP and with OMI, and control patients. The VEGF concentration in the patients with AP was higher than in the patients with OMI, whereas the HGF concentration did not differ in the patients with AP and OMI. The VEGF concentration in AMI patients who had had preinfarction angina on admission was higher than that of patients who had had no preinfarction angina, whereas the HGF concentration did not differ between the two groups of patients. These results suggest that the serum VEGF concentration may reflect myocardial ischemia to a greater degree than the serum HGF concentration. Received June 9, 2000 / Accepted September 30, 2000     

血管内皮生长因子基因转染骨髓间充质干细胞移植促进缺血心肌血管生成的研究

目的研究血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)基因转染骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)移植对缺血心肌的血管生成作用。方法于2004年5月至2005年8月取第四军医大学西京医院分离、培养Wistar大鼠的MSCs,用真核表达载体pcDNA3.1(-)/hVEGF165转染MSCs。45只近交系Wistar大鼠随机均分为转染组(MSCs/VEGF组)、对照组(MSCs组)、无血清培养基组(DMEM组),结扎前降支建立急性心肌梗死模型后在梗死区边缘区行5×106细胞移植,DMEM组行等量培养基注射。细胞移植前行CM-DiI标记。移植1个月后行心脏B超测量射血分数值,组织化学染色评价新生血管密度。结果培养的MSCs呈典型贴壁生长成纤维样外观,pcDNA3.1(-)/hVEGF165能有效转染大鼠MSCs,移植1个月后MSCs/VEGF组较其余各组左室射血分数(LVEF),再生血管密度明显增加,差异均有显著性(P<0.01)。结论VEGF基因转染MSCs移植能显著促进缺血心肌血管再生,进而改善心脏功能。     

心肌缺血预适应及冠脉侧支循环对急性心肌梗塞患者的保护

目的：探讨心肌缺血预适应（IP）与冠脉侧支循环形成是否独立或协同地对急性心肌梗塞（AMI）患者起保护作用。方法：收集2006年9月~2010年4月择期行冠脉介入治疗（PCI）的103例初发AMI患者的住院资料,按梗塞前24~48 h内有、无心绞痛分为缺血预适应组（IP组,有心绞痛）53例,无缺血预适应组（NIP组,无心绞痛）50例。根据冠脉造影结果,每组再按有无梗塞相关冠脉侧支循环形成分为两个亚组。计算各组在心梗面积,左室射血分数（LVEF）,并发症等方面的差异。结果：①与NIP组比较,IP组的肌酸激酶[CK,（2163.2±962.1）U/L∶（1312.4±681.1）U/L],肌酸激酶同工酶[CK-MB,（292.6±126.7）U/L∶（161.8±58.9）U/L]峰值,心电图QRS积分[（11.6±4.6）分∶（6.9±2.3）分],肌钙蛋白I[cTnI,（29.8±13.4）U/L∶（15.7±6.1）U/L]峰值水平,以及严重心律失常（26.00%∶13.61%）、Killip分级（Ⅱ~Ⅲ）（26.00%∶16.98%）、心源性休克（14.00%∶7.55%）、室壁瘤发生率（12.00%∶5.66%）等显著降低（P均〈0.05）;IP组的LVEF[（55.5±5.6）%]显著高于NIP组[（45.1±6.1）%,P〈0.05];②两组内亚组间相比,有侧支循环亚组的Killip分级、心源性休克、室壁瘤形成率等,显著低于无侧支循环亚组（P均〈0.05）,而有侧支循环亚组的LVEF显著高于无侧支循环亚组（P均〈0.05）;而严重心律失常发生率,两组的两亚组间均无显著差异（P〉0.05）。结论：心肌缺血预适应和冠脉侧支循环形成均能减少急性心肌梗塞患者的心梗面积,阻止室壁瘤形成,改善左室收缩功能,并存在协同保护关系。     

Simvastatin enhances myocardial angiogenesis induced by vascular endothelial growth factor gene transfer

Statins have cardioprotective roles. We explored the cardiac angiogenic effects of simvastatin in combination with transient overexpression of vascular endothelial growth factor (VEGF). Compared with normal mice, 1-year-old ApoE(-/-) mice fed on a high-fat diet (HFD) had about 30% less myocardial capillary (P < 0.001) and arteriolar (P < 0.03) densities, associated with decreased VEGF (55%), VEGFR-1 (56%) and VEGFR-2 (78%) mRNA expressions and myocardial endothelial nitric oxide synthase (eNOS) production (58%). By contrast, angiopoietin-1 and angiopoietin-2 mRNA expressions were increased (500% P < 0.02, and 400% P < 0.01, respectively) in the ApoE(-/-) hearts. No change was observed in Tie-2 gene expression. Phosphorylation of antiapoptotic Akt was lower and proapoptotic p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) was higher in the ApoE(-/-) mice compared with controls. Intramyocardial VEGF gene transfer increased capillary and arteriolar densities in the ApoE(-/-) mice, and simvastatin treatment further enhanced capillary density (P < 0.03) to a level similar to that of normal mice. Simvastatin did not change the lipid profile but blocked p38 MAPK phosphorylation in the ApoE(-/-) myocardium. Concurrent with these changes, there were increased levels of expression of mVEGF (P < 0.04) and VEGFR-2 (P < 0.03) mRNAs and increased production of eNOS (P < 0.05) in the ApoE(-/-) mice, while no changes were detected in the angiopoietin system. Thus, increased myocardial angiogenesis in the ApoE(-/-) mice following transient overexpression of VEGF is further increased by additional simvastatin treatment. These effects occurred concurrently with simvastatin-induced stimulation of the VEGF system, increased eNOS production and reduction in p38 MAPK phosphorylation.     

Resveratrol enhances neovascularization in the infarcted rat myocardium through the induction of thioredoxin-1, heme oxygenase-1 and vascular endothelial growth factor

We have previously shown that resveratrol possesses cardioprotective effect, which may be attributed to its ability to (i) stimulate nitric oxide production and (ii) free radical scavenging activity. Since resveratrol is one of the major components of certain varieties of red grapes, these events may underlie the cardioprotective effects thought to be obtained from moderate red wine consumption. Here we report resveratrol enhanced myocardial angiogenesis both in vivo and in vitro by induction of vascular endothelial growth factor (VEGF), which was regulated by thioredoxin-1 (Trx-1) and heme oxygenase-1 (HO-1). Human coronary arteriolar endothelial cells exposed to resveratrol or Trx-1 on Matrigel demonstrated significantly accelerated tubular morphogenesis with induction of HO-1 and VEGF expression. This angiogenic response was repressed by tin-protoporphyrin IX (SnPP), an HO-1 inhibitor, along with downregulation of VEGF expression. However Trx-1 expression was not affected by SnPP. Again, rat neonatal cardiomyocytes treated with resveratrol significantly expressed Trx-1, HO-1 as well as VEGF. Rats were orally administered with resveratrol (1 mg/kg per day) for 14 days and then underwent permanent left anterior descending coronary artery (LAD) occlusion to document similar pro-angiogenic effect. Our results demonstrated that pretreatment with resveratrol markedly reduced infarct size 24 h after myocardial infarction (MI) and increased capillary density in the peri-infarct myocardium along with better left ventricular function 4 days after MI compared with vehicle-treated control. Concomitantly, resveratrol-treated myocardium after MI significantly induced Trx-1, HO-1 and VEGF expression. This effect was blocked by SnPP. Our findings suggest that resveratrol mediates cardioprotection and neovascularization through Trx-1-HO-1-VEGF pathway in rat ischemic myocardium.     

老年大鼠心肌缺血后VEGF及其亚型的表达

目的探讨老年急性心肌缺血后VEGF各亚型表达特点,为老年心血管疾病的促血管生成治疗奠定基础。方法复制老龄大鼠心肌梗死模型,采用RT-PCR技术同管扩增VEGF和内参基因,比较VEGF各亚型与内参基因的比值,VEGF120、164、188的和为总VEGF。结果老年大鼠心脏总VEGFmRNA在缺血各阶段明显少于年青大鼠(P<0.01),而且达到峰值的时间推迟,老年大鼠第6小时总VEGFmRNA与GAPDH的比值(2.86±0.19)明显低于年青大鼠第3小时的比值(6.09±0.30)(P<0.001)。缺血后各时间点年青和老年大鼠的VEGF164所占比例最高,VEGF120最低。老年大鼠VEGF188的表达比例增加。结论老年大鼠心肌缺血后VEGF表达减少,而且没有血管生成活性的VEGF188所占比例增加,可能导致老年缺血心肌血管生成能力下降。