慢性酒精中毒大鼠学习记忆及Meynert基底核胆碱能神经元的变化

目的研究酒精致大鼠学习记忆障碍与Meynert基底核(NBM)胆碱能神经元变化的关系。方法将24只雄性Wister大鼠随机均分成对照组和酒精中毒组,酒精中毒组大鼠隔日胃内注入含酒精(2.5 g/kg)的蒸馏水2 ml共90d,对照组则注入不含酒精的蒸馏水2 ml。然后采用Morris水迷宫和免疫组织化学技术,分析大鼠Meynert基底核胆碱能神经元、额叶皮层星形胶质细胞数的变化和学习记忆能力的关系。结果酒精中毒组大鼠Morris水迷宫潜伏期明显延长,Meynert基底核胆碱能神经元数目明显减少,额叶皮层星形胶质细胞数目反应性增生。结论酒精致大鼠学习记忆能力障碍与Meynert基底核胆碱能神经元减少有关。     

平行绑定多电极技术研究大鼠基底核毁损对海马自发放电的影响

目的:研究应用平行绑定多电极细胞外记录技术探讨海人藻酸(KA)注射毁损Meynert基底核(NBM)后海马CA1区自发放电活动的改变。方法:雄性SD大鼠在水合氯醛麻醉和脑立体定位仪引导下,KA注射后破坏双侧NBM,一周后用改装的平行绑定多电极记录大鼠海马CA1区自发放电活动。结果:(1)与传统的细胞外单电极或多电极记录相比,本方法电极制备简单、灵活、造价低廉,细胞损伤小,可同时记录单个核团内多个神经元或相邻脑区多个神经元的活动,便于进一步对神经元环路活动进行分析。结合锋电位分类技术,可对单一通道获得的多个神经元活动进行甑别,大大提高实验精度和效率;(2)比较NBM毁损组和对照组核团放电发现:NBM毁损组大鼠CA1区自发放电频率明显减少,其中单个放电与爆发式(burst)放电类型的平均放电频率同时降低;NBM毁损组自发放电类型发生改变,burst数量增加,但burst内发放频率下降,burst间隔延长。结论:(1)平行绑定多电极技术简便、易行、灵活,结合多通道记录技术可为开展神经元环路活动研究提供有力工具;(2)NBM毁损可致大鼠海马CA1区自发放电频率减少和放电模式改变,提示NBM胆碱能系统参与海马环路的神经活动调控,NBM损伤所致海马自发放电活动的改变可能有助于解释阿尔茨海默病认知功能的下降。     

血管性痴呆小鼠海马结构SS及CCK蛋白表达的改变

目的:观察血管性痴呆小鼠海马结构生长抑素(SS)和胆囊收缩素(CCK)阳性神经元的数量变化,探讨血管性痴呆的发生机制。方法:复制小鼠血管性痴呆模型,利用Y-迷宫检测血管性痴呆模型小鼠学习记忆能力,采用ABC免疫组织化学方法,研究血管性痴呆小鼠与正常小鼠海马结构SS和CCK阳性神经元数量的变化。结果:血管性痴呆小鼠比正常小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多,差异有统计学意义;海马结构CA1区、CA3区及齿状回(DG)区SS和CCK阳性神经元的数量明显减少,差异有统计学意义。结论:血管性痴呆的发生可能与海马结构CA1区、CA3区及齿状回(DG)区SS和CCK阳性神经元的数量明显减少有关。     

不同剂量贫铀污染对大鼠皮层及海马结构生长抑素阳性神经元的影响

目的：探讨贫铀污染对大鼠皮层及海马结构SS阳性神经元的影响。方法：采用不同剂量贫铀颗粒气管灌注大鼠3个月后,观察大鼠皮层及海马结构各区SS阳性神经元形态和数目的变化情况。结果：DU1mg组、DU3mg组和DU5mg组大鼠皮层SS阳性神经元染色较浅,阳性神经元数目与NS组比较均明显减少。海马结构各区DU3mg组和DU5mg组SS阳性神经元染色较浅,阳性神经元数目与NS组比较也明显减少。结论：贫铀污染能引起大鼠皮层和海马结构SS阳性神经元数目减少,并可能通过此途径引起脑功能障碍。     

老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化

目的　研究老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化情况。方法　用 15月龄老年Wistar大鼠以D 半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏蕈氨酸 (ibotenicacid ,IBO)脑内Meynert核注射造模 ,然后运用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS神经元数目。结果　老年性痴呆模型大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS阳性神经元数目及其积分光密度较正常老年组和正常青年组有明显减少的趋势 ,组间比较有差异显著性。结论　大鼠海马结构nNOS神经元的减少是老年性痴呆病的主要病理变化之一     

Alzheimer病模型大鼠海马生长抑素神经元变化

目的：检测早老型痴呆(Alzheimer，AD)模型大鼠海马内生长抑素(Somatostatin，SS)神经元变化。方法：模型组用D-半乳糖和鹅膏蕈氨酸(Ibotenic acid，IBO)损毁Meynert核联合造模。运用免疫组化ABC法结合图像分析，检测并统计2组大鼠海马SS阳性神经元数目、截面积和灰度值。结果：模型组大鼠海马生长抑素神经元数目减少明显，灰度值增加明显，组间差异显著；生长抑素神经元胞体截面积无明显变化。结论：D半乳糖合并IBO损毁双侧Meynert核所致AD大鼠海马生长抑素神经元衰退明显。     

17 老年学习记忆减退大鼠海马和新皮质小白蛋白阳性神经元的丢失

<正>小白蛋白(Parvalbumin,pv)是一种细胞内钙调节蛋白,存在于GABA能神经元的一个亚型中,有研究报道它与学习记忆有密切关系.本文研究了衰老脑PV阳性神经元的变化及其与老年性学习记忆缺陷的关系.实验以青年鼠在Morris水迷宫测试中平均逃避潜伏期99%和95%正常值范围,将老年鼠分为学习记忆损害组和学习记忆正常组.用免疫组化方法显示海马结构、额皮质和颞皮质的PV阳性神经元,并对其进行定量分析.结果发现老年正常、损害组海马CAI区PV阳性神经元数量较青年组均明显减少(P<0.01),CA3区和齿状回老年正常、损害组PV阳性神经元数量较青年组显著减少(P<0.01),此外,老年损害组也较老年正常组明显减少(P<0.05),颞皮质只有老年损害组PV阳性神经元较青年组明显减少(P<0.05).相关分析结果表明被检脑区PV阳性神经元数量与大鼠在Morris水迷宫的平均逃避潜伏期、原平台象限游泳距离百分比分别呈显著正相关和负相关关系(P<0.01,r=-0.68;P<0.01,r=0.70).本研究结果提示在老年大鼠颞叶皮质和海马结构,尤其是海马CA3区和齿状回的PV阳性神经元的丢失可能与老年性学习记忆缺陷有关.     

Meynert基底核的老龄改变及相关因素

年龄的增长将伴随认知功能不同程度的衰退或障碍。近年来对有认知功能障碍疾病的研究表明 ,在老龄认知功能障碍时 ,基底前脑Meynert基底核 (简称NBM )内的胆碱能神经元显著丢失 /萎缩 ,不仅其本身的代谢活性减低而且还累及到NBM投射区 (即皮质 )的形态及功能的改变。NBM内神经元退行性改变的机制虽尚未明确 ,但动物实验表明 ,这很可能是神经元营养供应不足或缺乏的结果。本文将对NBM神经元退行变及其神经营养机制作进一步的讨论。     

催产素在大细胞基底核中对大鼠学习记忆的影响

目的：探讨催产素在大细胞基底核（NBM）内对大鼠学习记忆的影响。方法：于Wistar雄性大鼠大细胞基底核内微量注入不同剂量（0,0.2,2,8nmol）的催产素及催产素拮抗剂-阿托西班（Atosiban）,然后用水迷宫检测大鼠的学习记忆能力及其量效关系。结果：NBM内注入2及8nmol催产素组的大鼠找到平台的时间（潜伏期）显著延长,0.2nmol组与对照组比较未见有显著性差异,先注入催产素拮抗剂后再注入催产素,其找到平台的时间与正常组之间没有显著性差异。结论：NBM内的催产素损害了大鼠的学习记忆能力,其作用是通过催产素受体介导的。     

免疫毒素192-IgG-saporin致痴呆动物基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的:建立侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin致痴呆动物模型,观察其学习记忆能力和基底前脑一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化。方法:侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin,行Y迷宫检测,采用NADPH-d组织化学法染色,结合图像分析技术观察大鼠基底前脑NOS阳性神经元数目和形态学参数的变化。结果:模型组大鼠的学习、记忆能力较正常组明显下降。模型组基底前脑内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)NOS阳性神经元数分别减少到正常组的21.62%和17.70%;细胞周长和面积降低,灰度值升高,均有显著性差异。结论:应用192-IgG-saporin免疫毒素可使基底前脑NOS阳性神经元明显减少。     

缺锌对大鼠海马结构含生长抑素mRNA神经元的影响

要采用缺锌饲料喂养动物四周后，用原位杂交组织化学结合图象分析技术，研究了缺锌大鼠海马结构内含生长抑素mR-NA神经元的变化。并采用原子吸收分光光度计测定血浆锌含量。结果与对照组相比.缺锌大鼠血浆锌含量明显降低（P＜0.05），海马和齿状回合生长抑素mRNA的神经元数目明显减少（P＜0.01），胞体的灰度值明显降低（P＜0.01），而胞体的截面积无明显改变。结果提示，缺锌时，海马结构生长抑素mRNA的表达下调，海马结构神经元合成生长抑素的能力降低。这种变化可能是缺锌影响脑的学习记忆功能的重要原因之一。     

亚甲蓝对APP/PS1转基因小鼠学习记忆及海马结构内GFAP表达的影响

目的:观察亚甲蓝对APP/PS1转基因小鼠学习记忆及胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic pro-tein,GFAP)在海马结构表达变化的影响。方法:20只3月龄APP/PS1小鼠,随机分2组,每组10只,对照组:自由饮水;治疗组:根据小鼠饮水量将亚甲蓝加入日常饮水中(25 mg/kg/d)连用4个月至7月龄。水迷宫测试观察其行为学的改变,免疫组化、Western Blot和TUNEL染色法观察GFAP在海马结构的表达及神经元的凋亡情况。结果:水迷宫测试结果显示亚甲蓝喂养组APP/PS1转基因小鼠第2～4 d的平均潜伏期显著低于对照组小鼠的潜伏期,说明治疗组与对照组相比在7个月时出现明显差异(P<0.05);免疫组化和Western结果显示治疗组海马结构内的GFAP在APP/PS1转基因小鼠的表达下调(P<0.05)。TUNEL染色法显示治疗组海马CA1、CA3区和齿状回TUNEL阳性细胞数较对照组明显减少(P<0.05)。结论:亚甲蓝能够下调APP/PS1小鼠海马结构内GFAP蛋白的表达,并通过抑制海马结构神经元的凋亡,提高APP/PS1小鼠的认知能力。     

血管性痴呆大鼠海马Ng及其磷酸化水平的动态变化

目的:观察血管性痴呆(VD)模型大鼠海马神经颗粒素(Ng)及其磷酸化水平的动态变化,探讨Ng在VD学习记忆功能障碍中的作用及其机制。方法:采用双侧颈总动脉夹闭再灌注同时腹腔注射硝普纳建立血管性痴呆模型,在15d,1,2,4个月等时间点,采用Morris水迷宫和免疫荧光方法分别观察大鼠空间学习记忆能力及海马Ng及其磷酸化水平的变化。结果:模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期(EL)比假手术组均明显延长(P0.01);海马CA1区Ng及其磷酸化Ng免疫阳性神经细胞数表达较假手术组明显减少(P0.01,P0.05),而且随造模手术后时间的延长,以上变化逐渐加重。齿状回仅在2个月和4个月时间点的免疫阳性神经细胞数比假手术组显著减少(P0.01,P0.05)。结论:模型组大鼠的空间学习记忆功能障碍可能与海马(特别是CA1区)的Ng及其磷酸化Ng表达水平持续降低有关。     

空间辨别性学习记忆活动与大鼠海马结构基质细胞衍生因子 1表达的关系

目的 探讨大鼠空间辨别性学习记忆活动与趋化因子基质细胞衍生因子.1(SDF-1)的关系. 方法用免疫组织化学方法、免疫印迹法和RT-PCR方法对获得空间辨别性学习记忆大鼠海马结构内SDF-1表达进行研究,并与游水组和对照组比较.结果 1.免疫组织化学方法显示,对照组大鼠海马结构内趋化因子SDF-1阳性细胞分布在海马结构各亚区和各层.阳性细胞的形态以圆形为主,少见锥体形和梭形.阳性产物主要分布在细胞膜上;游水组大鼠海马结构内SDF-1阳性细胞的形态和分布与对照组相比未见组间差异;训练组大鼠海马结构内SDF-1免疫阳性细胞的数量比对照组增多(P<0.01).阳性细胞的形态以锥体形和三角形居多,在分布上有向齿状回聚集的趋势.2.免疫印迹方法检测训练组大鼠海马结构内SDF-1蛋白质的表达明显高于对照组(P<0.01).而且在训练组内则随着训练时间的延长表达量随之增加.3.RT-PCR方法检测训练组大鼠海马结构内SDF-1mRNA的量明显高于对照组(P<0.01),且随着训练时间的延长表达增加.在水盆中漫游的游水组大鼠,不论是免疫组织化学方法,还是免疫印迹法以及RT-PCR方法获得的结果与对照组相比均未见组间差异. 结论 经水迷宫训练使大鼠获得空间辨别性学习记忆功能,致使海马结构内细胞导向因子SDF-1表达上调,上调的SDF-1蛋白质可能与所获功能需要的形态基础.神经微环路的形成有关.     

Physiologic effects of nucleus basalis magnocellularis stimulation on rat barrel cortex neurons

Cholinergic neurons in the nucleus basalis magnocellularis (NBM) project to the cerebral cortex and are thought to play an important role in learning and memory, and other cognitive functions. In the present study, we examined the effects of NBM stimulation on the response properties of individual cortical neurons in layer V of the rat somatosensory cortex. Seventy-three neurons were studied before and after a brief electrical stimulation of NBM. Transient changes in spontaneous activity were observed in 60% of the cells, and in most cases this background activity decreased. Recordings lasting more than 1 h stimulation were obtained from 56 cells. Because some NBM stimulation-induced effects lasted several hours, neurons were evaluated in two groups, NBM1 and NBM2. NBM1 neurons were those exposed to either the first NBM stimulation of the day or an NBM restimulation following a more than 5 h stimulation-free period. Neurons exposed to NBM restimulation following a stimulation free interval of less than 5 h were classified as NBM2. Sixty-nine percent of the 32 NBM1 neurons displayed marked decreases in spontaneous activity and/or increases in the response evoked by deflecting a contralateral facial vibrissa. NBM1 stimulation caused some units to respond to previously minimally effective whisker stimuli. Stimulation effects often lasted several hours. By contrast, long-lasting changes were observed in only 25% of the 24 NBM2 neurons, and the only consistent effect was on spontaneous, not stimulus-evoked, activity. Systemic injection of atropine blocked NBM stimulation-induced changes in spontaneous and stimulus-evoked activities. Control neurons, studied without NBM stimulation, failed to display consistent alterations in their response properties during the course of 1 h or more. Results demonstrate that NBM activation produces long-lasting, cholinergically mediated alterations in the response properties of somatosensory cortical neurons. Effects were complex, being influenced by factors such as the time interval between successive stimulations during an experiment. The complexity of these NBM mediated effects should be considered when designing therapies for neurodegenerative disorders characterized by loss of NBM neurons.     

肝硬化后大鼠海马结构中P物质的变化

目的　研究P物质 (SP)在大鼠海马结构中的分布特点及肝硬化后对大鼠海马结构中SP的影响。方法　用Wistar雄性大鼠 1 2 0～ 1 5 0g分别用四氯化碳和人血白蛋白免疫损伤制造大鼠肝纤维化模型 ,采用荧光免疫组化技术结合激光扫描共聚焦显微镜技术。结果　 ( 1 )SP样阳性纤维及终末散在分布于海马结构各部分 ,并见于海马全层 ,以锥体层较为密集 ,该层还可观察到较密集的SP样阳性神经元 ;( 2 )肝硬化后SP在海马结构中的分布与正常组基本一致 ,但阳性反应物的密集度明显增高 ,平均荧光强度显著增强。结论　肝硬化后海马结构中SP含量较正常明显增多 ,很可能是脑损害的一种继发性代偿作用。     

大鼠海马和颞叶一氧化氮合酶阳性神经元在学习记忆时的表达

目的　对获得空间辨别性学习记忆大鼠的海马结构和颞叶皮质内一氧化氮合酶 (NOS)免疫阳性神经元系统的观察 ,为一氧化氮 (NO)在学习记忆活动中的作用提供形态学依据。方法　以经水迷宫训练获得空间辨别性学习记忆的大鼠为模型组 ,建立游水对照组和空白对照组。用免疫组化的方法观察 3组大鼠海马和颞叶的NOS阳性神经元的形态学特征及测定免疫反应阳性产物的光密度值 (OD )。结果　 (1)NOS阳性神经元在 3组大鼠海马和颞叶呈散在分布。在海马CA1、CA2、CA3、CA4及龄状回 (DG)都有少量分布 ,颞叶以Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ层分布为主。神经元胞体形态有锥体形 ,圆形或椭圆形 ,梭形3种。 (2 )模型组大鼠海马和颞叶皮质NOS阳性神经元较对照组明显增多。 (3)其免疫反应阳性产物的OD值也较对照组明显增大。结论　NOS阳性神经元形态发生了可塑性变化 ,参与了学习记忆     

雄激素对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马神经元的影响

目的探讨雄激素对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元的影响。方法7月龄雄性SAMP8小鼠30只,随机分为假手术组、去势组及去势 雄激素补充治疗组。十一酸睾酮(TU)剂量为37.4mg/(kg.15d)。雄激素补充治疗45d后,通过Morris水迷宫观察小鼠学习记忆能力;用苏木素伊红染色,Aβ免疫组织化学及图像分析观察海马CA1区神经元的变化。结果1.Morris水迷宫中,去势组定位航行试验潜伏期明显长于其他组(P<0.05),探索实验跨越平台次数减少(P<0.05)。TU补充治疗能改善学习记忆能力,与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.去势组海马CA1区弥漫性空泡变性,细胞排列疏松、紊乱,核深染、固缩;Aβ阳性神经元染色深,其数量及吸光度(A)明显高于其他组(P<0.05)。结论去势后,雄激素缺乏可导致学习记忆能力下降,海马神经元严重损伤,雄激素补充治疗可减轻神经元损伤,改善学习和记忆能力。     

口服生长抑素基因疫苗对小鼠免疫影响的初步研究

目的 研究口服生长抑素(SS)基因疫苗在体内表达HBsAg/SS融合蛋白情况.方法 用SS基因疫苗免疫小鼠,姬姆萨染色观察细菌在体内分布;观察小鼠质量增长情况;应用免疫组化法显示小肠乙肝表面抗原(HBsAg)和SS阳性细胞的分布及数量变化.结果 免疫后16 h空肠细菌数量达到高峰,免疫后4 d脾脏出现细菌;两试验组小鼠体质量较对照组均无显著变化;首次免疫后第3周两试验组小肠内出现HBsAg阳性细胞并维持至第7周;首次免疫后第5、7周两试验组小肠内SS阳性细胞数量比对照组极显著减少(P＜0.01).结论 口服型SS基因疫苗免疫小鼠后可在小肠表达HBsAg/SS融合蛋白,同时SS阳性细胞数量减少,推测该基因疫苗刺激机体表达蛋白后能产生SS抗体.