肝脏肿瘤组织中麦胚凝集素受体的定位

采用ABC法对肝细胞癌、肝内胆管细胞癌等肝脏肿瘤中麦胚凝集素受体进行组织学定位,并以正常肝组织、肝硬变组织及癌周肝组织等为对照,结果表明:肝细胞癌中麦胚凝集素受体的不规则分布与正常肝组织、肝硬变组织中带状分布形成明显对比,与胆管细胞癌中麦胚凝集素受体的分布也有差别。用神经氨酸苷酶处理后,麦胚凝集素受体的分布有明显变化。提示:细胞内麦胚凝集素受体的分布特点有利于肝脏肿瘤的诊断和鉴别诊断。     

重组红细胞血型糖蛋白A脂质体与麦胚凝集素的相互作用

本研究应用重组的红细胞血型糖蛋白A脂质体．分别与麦胚凝集素和交联有麦胚凝集素的Sepharose 4B(WGA—Sepharose4B)相互作用。结果发现重组的红细胞血型糖蛋白A脂质体与麦胚凝集素作用，有明显的凝集现象；并能结合在交联有麦胚凝集素的Sepharose颗粒周边4B上．从而为人工模拟红细胞膜提供了一可靠的实验依据。     

麦胚凝集素简易提取及在α-淀粉酶测定中的应用

目的:通过麦胚凝集素对唾液淀粉酶(AMYs)的抑制,建立胰淀粉酶(AMYp)的检测方法。方法:从食用淀粉中简易提取麦胚凝集素,对其抑制AMYs的能力进行检测,并计算出抑制率。结果:麦胚凝集素对AMYs的平均抑制率为88.4%。通过对抑制后的淀粉酶活性测定,比较真实地反映AMYp的水平。结论:日常工作中检测淀粉酶的活性为总活性,用简易方法获得的麦胚凝集素加以抑制,然后测定AMYp的活性,对急性胰腺炎有鉴别诊断价值。     

傅里叶变换红外技术研究麦胚凝集素作用下血型糖蛋白A构象变化

目的进一步阐明麦胚凝集素作用下，膜血型糖蛋白Ａα螺旋改变的部位。方法：首先，制备重组蛋白体膜血型糖蛋白Ａ，然后，以ＦＴＩＲ技术定量测定麦胚凝集素作用下，血型糖蛋白Ａ二级结构的改变。结果发现：麦胚凝集素结合于血型糖蛋白，导致血型糖蛋白Ａα螺旋减少，β结构增加。且相同浓度的麦胚凝集素作用下，重建脂蛋体膜血型糖蛋白Ａα螺旋下降较多，溶液血型糖蛋白Ａα螺旋下降较少。提示：麦胚凝集素作用下，膜血型糖蛋白Ａ膜内、膜外螺旋均有减少。     

RP-HPLC法测定口服麦胚凝集素修饰脂质体中胰岛素

目的:建立RP-HPLC方法,测定麦胚凝集素修饰脂质体中胰岛素的含量和包封率。方法:利用逆相蒸发-超声法制备麦胚凝集素修饰胰岛素脂质体,反相高效液相色谱法测定脂质体中胰岛素含量和包封率。利用Phenomenex-C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.01％三氟乙酸(300:700)为流动相,测定波长为210nm,建立了HPLC测定胰岛素含量的方法。结果:HPLC测定方法线性范围5～100μg/ml,线性关系良好。普通胰岛素脂质体的包封率为(30.30±2.77)％(n=3),麦胚凝集素修饰脂质体包封率为(69.33±4.54〕％(n=3)。结论:建立的RP-HPLC方法便捷准确,重现性好,可用于测定麦胚凝集素修饰脂质体中胰岛素的含量和包封率。     

麦胚凝集素慢病毒载体的构建及其表达的研究

目的 探讨麦胚凝集素慢病毒载体的构建与表达的方法.方法 采用基因工程方法,将麦胚凝集素的基因插入慢病毒表达载体Plvx-IRES-ZsGreen1中.再采用慢病毒包装,将构建好的质粒和其他三种包装质粒(RPEV、PRRE、VSVG)在293T细胞中进行共转染,获取病毒液后感染人源的脂肪干细胞(ADSC).结果 显微镜下显示绿色荧光报告蛋白表示感染成功.对感染后的脂肪干细胞运用免疫染色技术进行显色,结果显示麦胚凝集素已经成功在脂肪干细胞中实现表达.结论 慢病毒包装WGA蛋白的方法可靠高效,可作为一种高效的示踪技术广泛应用于各类细胞.     

麦胚凝集素沉淀血清糖蛋白对原发性肝癌的诊断意义

采用麦胚凝集素(浓度5mg／me)分别与48例样品血清孵育，沉淀物用N-乙酰葡萄糖胺复溶，SDS-PAG电泳谱发现有三条区带；结果表明：原发性肝癌患者血清中与麦胚凝集素结合的二条区带SDS-PAG电泳谱带浓度显著增加；其机制可能是糖苷转移酶活性异常，或糖蛋白的生成增加，而清除能力下降．     

健康人肝组织麦胚凝集素亲和型糖蛋白表达谱分析

目的分析健康人肝组织麦胚凝集素(wheatgermagglutinin,WGA)亲和型糖蛋白表达谱。方法从30例健康人肝组织混合样本的总蛋白中用WGA凝集素亲和层析分离纯化糖蛋白,再利用双向电泳结合SYPRO Ruby荧光染色进一步分离WGA亲和型糖蛋白。目的蛋白质点经质谱鉴定后对其进行生物信息学分析及功能分类。结果初步建立WGA亲和型糖蛋白的双向电泳图谱,图谱均点数为(650±50)个,质谱鉴定并去冗余共获116个蛋白。经生物信息学分析104个蛋白具有不同程度的N糖基化位点,最后按Gene Ontology的分类原则进行功能分类。结论凝集素亲和层析结合双向电泳荧光染色、质谱鉴定是一种高通量的检测方法,WGA亲和型糖蛋白表达谱的初步构建为后续研究奠定了基础。     

麦胚凝集素的分离纯化及其在亲和层析中的应用

目的 :将分离纯化麦胚凝集素 (WGA)的方法和固定化WGA亲和层析柱的制备方法进行改良 ,从而得到能够有效结合细胞膜受体的亲和层析柱。方法 :依次用去脂抽提、分级盐析、离子交换层析、甲壳素亲和层析的方法分离纯化WGA ;将制备的WGA与用溴化氰活化的琼脂糖 4B(Sepharose 4B)耦联固定。结果 :得到的纯化倍数为 15 8 5倍的WGA单体相对分子质量为 160 0 0 ,表观相对分子质量为 3 2 0 0 0 ,血凝活力为 8 3mg·L-1。WGA Sepharose4B可以与红细胞表面糖基特异性结合。结论 :改良的WGA分离纯化方法和固定化WGA亲和层析柱的制备方法简便、有效 ,可用于实验室中细胞膜受体的研究     

凝胶电泳法测定麦胚凝集素的分子量

凝胶电泳法测定蛋白质分子量的方法已经广泛应用,但该法测定植物凝集素分子量的报道很少.因植物凝集素大都是糖蛋白,用凝胶电泳法测定往往出现拖尾现象.笔者介绍了用平板凝胶电泳法测定麦胚凝集素的最佳条件,其测定结果与文献报道的一致.     

麦胚降血脂干预试验

社区高危人群经筛检高胆固醇血症149人,随机分麦胚粉(Ⅰ)、对照(Ⅱ)、烟酸肌醇酯(Ⅲ)3组;组间具有可比性,随访依从率90%,原则上遵照盲法观察。结果表明麦胚降TC作用Ⅰ组优于Ⅲ组(F=2.87、P=0.06),Ⅰ组LDL-C显著低于Ⅲ组(F=4.26、P=0.016),并有提高HDL_2-C作用。服用麦胚粉无异常反应。麦胚含有较丰富的不饱和脂肪酸和有利于心血管的微量元素,可用于人群CVD的一级预防。     

麦胚抗动脉粥样硬化实验研究

雄性鹌鹑高脂饲料喂养45d可形成典型的动脉粥样硬化病变。给予麦胚每只10g/d具有明显的抗动脉粥样硬化作用,表现体重增加,生理活动增强,降低血清胆固醇,显著增高HDL-C,其抗动脉粥样硬化作用优于烟酸肌醇酯(每日2.5mg/100g体重),且无药物所致进食减退、体重减轻、肝脏脂肪变性等副作用。实验表明麦胚是一种理想的有前途的抗动脉粥样硬化食品。     

麦胚凝集素对红细胞膜变形性的影响

利用分子生物学方法和激光衍射仪研究了红细胞变形性。结果,低粘滞系数(η=2cp)的磷酸缓冲液(PBS)悬浮红细胞,在低切变率((?)=150s~(-1))时红细胞的变形指数(DI)随麦胚凝集素(WGA)浓度的增大而增加;高粘滞系数(η=15cp)的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)悬浮红细胞,在高切变率((?)=800s~(-1))时,WGA浓度增大,红细胞变形指数随之减小。     

WHEAT GERM AGGLUTININ (WGA) RECEPTORS ON HUMAN SPERM MEMBRANE AND MALE FERTILITY

Wheat Germ Agglutinin (WGA), one kind of lectins, was used as membrane probe to observe the alteration of human sperm WGA receptor during the process of in vitro capacitation and make comparison of WGA receptor between normal fertile men and infertile patients. FITC-labeled WGA was used to localize WGA receptor on sperm membrane. WGA△OD value, spectrophotometry of sperm agglutinability induced by WGA within 20 min was taken as an indicator to estimate WGA receptors. It has been proved that (1) the localization of WGA receptors on sperm membrane was shifted from head to tail and at the same time WGA-induced agglutinability was increased under the condition of in vitro capacitation. (2) the WGA△OD value of unexplained infertile men was much lower than the normal value among 69 out of 110 cases. Since the fertilizing ability of spermatozoa from these patients was recoverd after the membrane-bound Igs has been eliminated and WGA receptors reappeared after oral administration of steroid drugs or washing the spermatozoa, it seemed that there is a close relationship between WGA receptor on sperm membrane and male fertility.     

QUANTIFICATION AND LOCALIZATION OF WHEAT GERM AGGLUTININ RECEPTOR ON HUMAN SPERMME MBRANE IN FERTILE AND INFERTILE MALES

It has been proved/n our prcvious study that wheat germ agglutinin (WGA) receptor on human sperm membrane is closely related to male fertility and there exists a significant difference in WGA receptors betweea fertile and infertile mcn. In this report, enzyme linked     

铅对小鼠生殖细胞染色体的影响

4组雄性小鼠自由饮用含醋酸铅0、500、1000、2000ppm的水连续50天后,测得其平均血铅值分别为12、42、71和87μg/dL。用BrdU体内实验方法作精原细胞染色体制片观察染色体畸变率和姊妹染色单体互换率。结果提示:雄性小鼠长时间接触高剂量的醋酸铅可能导致对生殖细胞遗传物质某些损伤效应。     

氯化甲基汞对小鼠生殖细胞的毒性作用

本实验一次灌胃给予小鼠不同剂量(0、5、10和15mg/kg体重)氯化甲基汞,于染毒后第5、10和15天分别处死各组部分小鼠,检查其精子总数、形态及睾丸病理改变,实验结果表明,给予氯化甲基汞小鼠精子数目减少,精子畸形率增高,睾丸呈现不同程度的病理改变。该实验从形态学方面证实氯化甲基汞对小鼠雄性生殖细胞具有明显的毒性作用。     

苯对雄性小鼠生殖细胞损伤的研究

本研究以浓度为30mg/m~8,300mg/m~8、3000mg/m~8和30000mg/m~8的苯给小鼠静式吸入染毒,作精子畸形、初级精母细胞染色体畸变、精原细胞SCE三项检查。三个试验的结果一致,表明苯有性腺毒性作用,可诱发雄性小鼠生殖细胞突变