环孢菌素A诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的：本实验旨在观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。方法：采用瑞氏染色、DNA电泳、流式细胞仪、TUNEL法观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。结果：20μmol/L环孢菌素A作用24小时可诱导K562细胞凋亡，瑞氏染色呈瑞典型的凋亡形态学改变，DNA电泳呈“阶梯状”条带，流式细胞仪显示凋亡峰，细胞周期分析环孢菌素A可使K562细胞生长阻滞于G0－G1期，环孢菌素A处理组的凋亡率高于对照组（P＜0．01）。结论：环孢菌素A可诱导K562细胞株凋亡。     

乙醇诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的研究低浓度乙醇对肝癌细胞的影响及作用机制。方法采用噻唑蓝比色法观察乙醇对细胞增殖的影响；采用流式细胞仪法观察乙醇对肝癌细胞内活性氧的影响；采用琼脂凝胶电泳法观察DNA片断化条带。结果低浓度乙醇可明显抑制细胞增殖；乙醇作用于细胞后2h内引起活性氧产生，24h后细胞出现典型的凋亡表现。结论乙醇能够通过诱导细胞内活性氧的产生引起细胞凋亡，呈明显的剂量依赖性。     

新城疫病毒诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究新城疫病毒Lasota株（NDV－L）杀伤肿瘤细胞及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法：通过噬斑形成单位、HA效价、MTT法等方法检测NDV－L对细胞的杀伤作用；通过Giemsa's染色法、倒置相差显微镜、透射电镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测NDV－L诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结果：NDV对肿瘤细胞有选择性杀伤作用。经NDV－L诱导后，肿瘤细胞呈现典型的凋亡特征。结论：NDV除通过自身复制直接杀伤肿瘤细胞外，还具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

参麦注射液诱导肿瘤细胞凋亡作用的实验研究

探索参麦注射液诱导肿瘤细胞凋亡作用。方法：给荷Ｓ１８０肉瘤的脾虚小鼠腹腔注射参麦注射液３２,１６和８ｍｇ／ｋｇ。结果：全部标本（ｎ＝３０）Ｐ＾５３基因蛋白均呈性表达,电镜下亦未见到肿瘤细胞皱缩、出芽和凋亡小体出现,提示参麦注射液对已突变的Ｐ＾５３基因无促进修复和／或抑制突变型Ｐ＾５３基因的作用。     

基因转移FasL诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：探讨体外基因转移Fas配体（Fas-Ligand,FasL)对恶性人脑胶质瘤细胞凋亡的影响，方法：用携带人FasL cDNA的缺陷型重组腺病毒载体（Ad-FL)，在体外转导5株人脑胶质瘤细胞，并使其表达，通过流式细胞仪，RT－PCR，TUNEL法及荧光显微镜分别进行Fas/FasL表达检测和相关凋亡检测，分析，结果：RT－PCR和流式细胞仪检测5株胶质瘤细胞表达均表达Fas，不表达FasL,而Ad-FL转导的5株胶质瘤细胞均能表达FasL,Fas表达水平与抗Fas抗体诱导胶质瘤细胞凋亡敏感性无相关性，Ad-FL能显著诱导5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长，结论：重组腺病毒FasL在体外诱导人脑胶质瘤凋亡效果显著。     

3种药物诱导兔血管平滑肌细胞凋亡实验研究

目的 研究阿克拉霉素(ACR)、雷公藤甲素(TP)、羟基喜树碱(HCPT)是否具有抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖并诱导其发生凋亡的作用，为临床开发新型药物涂层支架提供实验依据。方法 体外主动脉SMCs培养和流式细胞仪检测，DNA凝胶电泳。结果TP组与阳性对照地塞米松组相比．凋亡率有显著增高，ACR组凋亡率与正常细胞组相比基本无变化；HCPT组细胞凋亡率高于正常细胞组，但相比阳性对照地塞米松组无显著性差异。3种药物干预组凝胶电泳谱型呈凋亡特征性梯状条带。结论 ACR、TP、HCPT可抑制指数生长期SMCs增殖并诱导其凋亡。     

庆大霉素诱导LLC—PK1细胞凋亡的实验研究

目的：观察庆大霉素是否能诱导体外培养的肾小管上皮细胞发生凋亡诱导，并探讨细胞凋亡与庆大霉素肾毒性之间的关系。方法：将体外培养的猪肾近端小管上皮细胞（LLC－PK1细胞）与0．2－3.2mg/ml浓度的庆大霉素共同培养达24－96h，倒置相差显微镜下观察细胞生长情况，HE染色观察凋亡细胞形态变化，MTT法测定庆大霉素对LLC－PK1细胞增 殖的抑制率，抽提细胞DNA行琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋的梯形条带，流式细胞术测定细胞凋亡率。结果：庆大霉素对LLC－PK1细胞增殖有抑制作用，庆大霉素具诱导LLC－PK1细胞凋亡的作用，凋亡率呈药物浓度和作用时间的依赖性。结论：庆大霉素的肾毒性可能与其诱导体内肾小管上皮细胞凋亡有关。     

白藜芦醇诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的:观察白藜芦醇对宫颈癌HeLa细胞凋亡作用.方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测白藜芦醇对HeLa细胞的抑制效应,并采用末端标记法(TUNEL)对凋亡细胞进行定量检测.结果:白藜芦醇对HeLa细胞48h的抑制效应为20.15%,72h的抑制效应为38.60%.TUNEL检测结果为白藜芦醇促进HeLa细胞凋亡.结论:白藜芦醇抑制HeLa细胞增殖,对指导临床药物治疗宫颈癌具有重要意义.     

逍遥散诱导胃癌细胞凋亡实验研究

采用形态学、结构及原位末端 DNA检测的方法 ,观察逍遥散提取液对胃癌 (MGC- 80 3)细胞的作用。结果显示 ,逍遥散提取液使胃癌 (MGC- 80 3)细胞出现典型的凋亡形态学变化 ,药物组与对照组相比 ,凋亡率差异高度显著 (P <0 .0 1) ,且呈明显的时间、剂量依赖性     

金蒲抑瘤片诱导体外培养的人肝癌BEL-7404细胞凋亡的实验研究

目的：探讨金蒲抑瘤片体外对肝癌细胞的诱导凋亡作用。方法：应用MTT法、生长曲线、荧光染色、血清药理学、DNA凝胶电泳等实验技术研究金蒲抑瘤片体外对BEL－7404细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。结果：金蒲抑瘤片体外对BEL－7404细胞有明显的抑制作用，且这种抑制作用呈浓度依赖性。经体内代谢的含药血清也具有抑制细胞生长的能力。药物作用后的细胞出现荧光染色增强、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化。结论：金蒲抑瘤片及其含药血清，在一定浓度下能诱导BEL－7404细胞凋亡。     

血必净对脓毒症大鼠肾脏细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的 探讨早期应用血必净对脓毒症导致急性肾损伤后肾小管细胞凋亡的影响,及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化。方法 54只SD大鼠,♂,随机分为假手术组、脓毒症组、血必净组,每组18只;各组再分为3个亚组,每组6只。根据实验要求分别以术后12,24,48 h作为时间观察点,在各时间点检测大鼠的血液生化指标,测定肾脏血流、并留取肾脏组织观察病理学变化,测定肾小管损伤评分,采用原位末端标记法测定肾小管凋亡细胞,并计算积分光密度值（IOD）。采用免疫印迹法测定Bcl-2、Bax的变化。结果 血必净组能明显改善肾功能,稳定血流动力学,减轻组织病理学变化,减少肾小管细胞凋亡,肾小管损伤评分和IOD值与脓毒症组相比有显著差异（P<0.01）。同时,血必净组能升高Bcl-2的表达,抑制Bax的表达,保持Bcl-2/Bax的平衡,与脓毒症组相比有显著差异（P<0.01）。结论 早期应用血必净可以减少肾小管细胞在脓毒症进程中的凋亡,改善脓毒症导致急性肾损伤的病理学改变,保持Bcl-2/Bax的平衡,减轻脓毒症导致的肾损伤。     

LiCl对七氟醚引起的神经细胞凋亡的缓解作用

目的 研究氯化锂(LiCl)对中枢神经系统发育期七氟醚神经毒性的影响,以及β-arrestin2/AKT信号通路在其中所起的作用。方法 对离体培养7 d的海马神经细胞及出生后7 d的Sprague-Dawley幼鼠进行七氟醚处理(3%,6 h),制备七氟醚神经毒性模型。离体实验中给予LiCl或LiCl+β-arrestin2 siRNA转染处理后,应用流式细胞仪、MTT及Hoechst染色检测细胞凋亡;应用免疫印迹检测total AKT、Phospho-AKT、total GSK3β、Phospho-GSK3β、Bax及Bcl-2的蛋白表达水平;应用条件恐惧实验及Morris水迷宫检测实验动物的情绪及空间学习记忆功能变化。结果 七氟醚处理(3%,6 h)使海马神经细胞凋亡增加,应用LiCl则可明显缓解七氟醚神经毒性。七氟醚处理可降低Phospho-AKT及Bcl-2的蛋白表达,增加Phospho-GSK3β及Bax的蛋白表达;LiCl可增加Phospho-AKT及Bcl-2表达,降低Phospho-GSK3β及Bax表达水平。LiCl的神经保护作用可被转染β-arrestin2 siRNA、SH-5或LY294002所逆转。LiCl明显缓解了中枢神经系统发育期七氟醚处理引起的情绪及空间学习记忆功能异常。结论 LiCl可缓解中枢神经系统七氟醚神经毒性,其机制可能与β-arrestin2依赖的AKT/GSK3β信号通路有关。     

新生儿大肠埃希菌败血症耐药性及抗生素治疗分析

目的:分析新生儿大肠埃希菌败血症的药物敏感特点,为选择抗菌药物提供参考。方法:选取重庆医科大学附属儿童医院2011年1月至2018年9月血培养确诊为大肠埃希菌败血症的152例新生儿药敏结果进行回顾性分析。根据败血症发生时间分早发组(<3 d)及晚发组(≥3 d);根据是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)分ESBLs(+)组与ESBLs(-)组;根据胎龄(GA)分早产儿组(GA<37周)与足月儿组(GA≥37周)。结果:产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率晚发组(55.6%)与早发组(43.4%)比较差异无统计学意义(P>0.05);早产儿组(70.4%)高于足月儿组(40.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。大肠埃希菌对β-内酰胺类尤其头孢菌素类耐药率较高,对β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、碳青霉烯类、氨基糖苷类耐药率较低(4.9%~17.1%),对阿米卡星耐药率为0。ESBLs(+)菌株对多类型抗菌药物耐药率高于ESBLs(-)菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:早产儿ESBLs阳性率更高,多重耐药大肠埃希菌逐年增加;新生儿大肠埃希菌败血症尤其是ESBLs(+)菌株感染,可首选含β-内酰胺酶抑制剂复合制剂或碳青霉烯类抗菌药物。     

亚低温延缓脑创伤后神经元迟发性凋亡进程的研究

目的:观察亚低温对脑创伤后神经元程序性细胞死亡进程的延缓作用,从细胞水平测试亚低温治疗的意义。方法:分离培养乳鼠脑皮质神经元,免疫荧光方法鉴定;部分神经元反复冻融,将细胞裂解液加入正常神经元细胞表面,分别置于33℃和37℃温控培养箱中培养;测定培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,TUNEL法检测原位凋亡细胞数量,以hoechst33258标记法检测亚低温对凋亡速度的影响。结果:免疫荧光检测神经元特异标记蛋白神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白(MAP-2)阳性表达率分别为(74.7±8.4)%和(80.1±6.7)%。培养于33℃的LDH水平和发生原位凋亡的细胞数量均低于37℃培养组(P<0.05),hoechst33258标记法显示亚低温可延缓神经元调亡速度(P<0.05)。结论:亚低温可明显减缓脑创伤后神经元调亡进程,为其他治疗争取救治时间。     

铭铂诱导人卵巢癌细胞A2780凋亡

目的：观察铭铂诱导的人卵巢癌细胞A2780凋亡,探讨其抗肿瘤作用机理。方法：用MTT法测定了铭铂对A2780的细胞毒作用;荧光显微镜从形态学上观察凋亡发生,琼脂糖DNA电泳检测程序性细胞死亡特征的DNA降解。结果：铭铂对A2780细胞有细胞毒作用,半数抑制浓度具有药物接触细胞时间依赖性;铭铂处理的A2780细胞形态学上显示出凋亡细胞特性,琼脂糖凝胶电泳显示出特征性程序性细胞死亡DNA梯形图谱。结论：铭铂能够诱导A2780细胞凋亡,诱导肿瘤细胞凋亡是其一个抗肿瘤作用机理。     

乌司他丁治疗严重脓毒症的临床疗效观察

目的观察乌司他丁对严重脓毒症患者的临床疗效。方法将100例严重脓毒症患者分为治疗组(UTI组,52例)和对照组(48例),治疗组在常规治疗的基础上予以乌司他丁300 000 U静注,q 8 h×7 d。检测治疗前及治疗后第7天IL-6、TNF-α及Nt-proBNP水平,检测APACHEⅡ评分、MODS发生率。结果治疗后7d治疗组患者IL-6、TNF-α及Nt-proBNP水平较对照组明显降低(P<0.05),治疗前两组差异无统计学意义(P>0.05);治疗后7d,治疗组APACHEⅡ评分较对照组明显降低(P<0.05)、MODS发生率低于对照组(P<0.05)。结论乌司他丁辅助治疗严重脓毒症患者,可有效改善各项炎症指标,保护心、脑等器官功能,可以有效阻断MODS发生。     

ODN2088减轻线粒体DNA致脓毒症大鼠急性肺损伤

目的:探讨血浆线粒体DNA(mtDNA)含量与脓毒症大鼠急性肺损伤(ALI)程度的关系及选择性TLR9受体抑制剂ODN2088对脓毒症大鼠ALI的保护作用.方法:按随机数表法将80只大鼠分为假手术(sham)组、脓毒症(sepsis)组、脓毒症大鼠腹腔注射mtDNA 1.4 mg/kg(sepsis+mtDNA)组、脓...     

小檗碱诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究

目的探讨小檗碱诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)凋亡的作用。 方法将处于对数生长期的MOLT-4细胞分为3组，A组加入小檗碱(10，100 mg·L^–1)，B组加入柔红霉素1 mg·L^-1，C组加入小檗碱＋柔红霉素，作用6 和24 h后，用MTT法检测细胞存活率；用流式细胞术、DNA电泳及光学显微镜观察小檗碱对MOLT-4细胞凋亡的影响。结果作用6，24 h后，A组(10 mg·L-¹)细胞存活率分别为81.80%，64.67%； B组为98.38%，38.46%，C组为68.35%，20.51%；C组与A、B组比较，在两个时间段差异均有显著性(P＜0.05)。小檗碱诱导MOLT-4细胞发生典型的细胞凋亡形态学变化，出现DNA规律性断裂，电泳呈典型的梯状条带变化。细胞周期分析提示小檗碱浓度在10，100 mg·L-1时作用24 h细胞凋亡率分别为5.83%，19.93%。结论小檗碱具有诱导白血病细胞凋亡的作用，且小檗碱可增强柔红霉素的抗肿瘤作用，为其临床应用提供了依据。     

左旋-二脱水伊地醇双甲磺酸酯诱导HL-60细胞凋亡机制的研究

目的:以人原髓细胞白血病细胞HL-60为例,观察左旋-二脱水伊地醇双甲磺酸酯(DMDAI-L)对HL-60细胞的诱导凋亡作用,初步探讨其作用机制。方法:通过酶解可见光底物DEVD-p NA测定给药前后HL-60细胞内的caspase-3酶活性;膜电位依赖性结合的荧光探针JC-1标记法观察给药前后细胞线粒体膜电位(△Ψm)的荧光变化。结果:DMDAI-L 1.25,2.5,5,10和20μg·ml-1剂量组作用24 h后,HL-60细胞内的caspase-3酶活性显著上升(P<0.05);在DMDAI-L作用下,随着浓度增加及作用时间延长,HL-60细胞内线粒体膜电位明显降低。结论:DMDAI-L诱导HL-60细胞凋亡过程中,其作用机制可能与在一定剂量范围及作用时间内,激活或调节细胞内的caspase-3酶活性、降低细胞线粒体膜电位有关。     

氧化应激在TRAIL诱导Hela细胞凋亡中的作用

目的 探讨氧化应激在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用.方法 40μg·L-1 TRAIL处理细胞后,用MTT法检测TRAIL对细胞增殖的抑制作用;用分光光度法检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪检测胞浆内的活性氧(ROS)水平;激光共聚焦测定细胞线粒体膜电位(△Ψm);蛋白质印迹法检测Bcl-2、Cyt C、DR 4、DR 5蛋白量.结果 40 μg·L-1 TRAIL对Hela细胞的生长具有显著的抑制作用;使抗氧化因子GSH含量明显下降,氧化应激产物ROS、MDA含量明显增多;到6h时△Ψm不断降低,能明显下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,引起线粒体Cyt C向细胞质的释放;同时上调死亡受体DR 5的表达.而抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能抑制TRAIL引起的这些变化.结论 氧化应激在TRAIL诱导的Hela细胞凋亡中起着重要作用,可能与ROS激活线粒体途径和上调DR 5的表达密切相关.