基于土大黄苷定性定量检测的大黄类中药掺伪鉴定方法研究进展

大黄为临床常用中药,且处方众多,《中国药典》2015年版中共收载了153个含大黄的中药制剂.近年来,由于多种因素影响,大黄及其制剂中出现较多掺伪现象,因此,加强大黄真伪鉴定对保障临床用药安全有效具有重要意义.土大黄苷为大黄真伪鉴定指标化成分,在《中国药典》2015年版中用于大黄饮片、九味肝泰胶囊、三黄片和致康胶囊的定性...     

薄层扫描法检测牛黄解毒片中土大黄甙

<正> 目前,市售大黄存在许多土大黄等混乱品种。正品大黄中不含土大黄甙(Rhaponticin),而土大黄中含有土大黄甙,故多以土大黄甙的存在与否进行鉴别大黄的真伪。土大黄甙有致腹痛作用,通常作为兽药及化工原料。本文的土大黄甙薄层扫描检测方法快速准确,可以作为检出大黄药材及牛黄解毒片中土大黄的方法。牛黄解毒片由大黄等八味中药组成,我们对选自全国各地18个省市大中小厂家的牛黄解毒片,进行了薄层扫描法检测土大黄甙的研究,方法简便可行。     

抗菌消炎胶囊中土大黄苷的薄层鉴别及HPLC鉴别方法研究

目的 建立抗菌消炎胶囊中土大黄苷的快速检验方法.方法 采用薄层色谱法快速检验样品中的土大黄苷,以乙酸乙酯-丁酮-水(10∶7∶1)为展开剂,在紫外光灯(365 nm)下观察斑点荧光,并用高效液相色谱法确证.结果 土大黄苷有非常清晰的蓝紫色荧光,正品制剂在相应位置上无斑点;土大黄苷液相色谱主峰在325 nm有最大吸收.结论 本法操作简便、快速、准确.     

复方胆通片和十滴水中土大黄苷的检测

目的 建立TLC结合HPLC法检查复方胆通片、十滴水中的土大黄苷的方法.方法 采用硅胶C板,展开剂为乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10:7:1:1),在365 nm下检视;采用LichrosphelC18柱(250mm x4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-水(7:30:63),检测波长为320 nm.结果 复方胆通片、十滴水中非法掺人土大黄的指标性成分土大黄苷在365nm下显持久的蓝紫色荧光斑点,通过HPLC法得到进一步验证.结论 所建方法简便、快速、专属性强,能有效地检查复方胆通片、十滴水中是否掺有土大黄.     

HPLC法测定栽培河套大黄中土大黄苷的含量

目的:建立 HPLC 法测定栽培河套大黄中土大黄苷的含量。方法:采用 ZORBAX Eclipse XDB—C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-水(35:5:60)为流动相,流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长为320 nm,采用外标法定量测定。结果:土大黄苷进样量在0.206～2.06μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率(n=6)为99.31%,RSD 为0.82%。结论:本方法操作简便,结果准确可靠,适用于栽培河套大黄中土大黄苷的含量。     

关于《中国药典》2010年版快速鉴别大黄、土大黄的探讨

针对检验工作常发现的土大黄混充作大黄的情况,对<中国药典>2010年版大黄质量标准进行探讨,并根据经验提炼出两者的快速鉴别要点,采用药材荧光法检查大黄药材及饮片断面有无土大黄苷荧光,样品无需前处理,快速灵敏,容易掌握.同时,土大黄苷检查项建议用薄层色谱法,以土大黄苷为对照,可以较纸色谱法更容易判断实验结果.采用上述方法可以快速鉴别大黄真伪,监测药材及饮片质量,使药品安全性得到进一步的保障.     

HPLC法测定四季三黄丸中大黄素及大黄酚的含量

目的:建立四季三黄丸中大黄素和大黄酚的含量测定方法.方法:采用C18色谱柱(4.6mm×250mm),以甲醇-0.2%磷酸溶液(85.15)为流动相;检测波长为254nm.结果:大黄素和大黄酚的含量测定线性范围为0.318～0.742 μg和0.6234～1.4546 μg,平均回收率为97.43%和98.47%.结论:所建立的方法简便、准确可靠,重现性好,可作为四季三黄丸中大黄的定量分析方法.     

大黄灌肠液的薄层色谱鉴别方法及土大黄苷的限量检查方法

目的:建立大黄灌肠液的薄层色谱鉴别方法及土大黄苷的限量检查方法。方法:采用薄层色谱鉴别方法鉴别大黄灌肠液中的主要成分大黄及土大黄苷的限量检查。结果:所建立的大黄灌肠液中的大黄薄层鉴别方法阴性对照无干扰,专属性强,斑点清晰,操作简单;土大黄苷限量检查简单易行。结论:可作为大黄灌肠液的质量标准的部分内容。     

大黄制剂中土大黄苷检查及含量测定的通用方法分析

目的:检查大黄制剂中的土大黄苷的含量,并分析其测定的通用方法。方法:常用的检查方法为薄层色谱法和高效液相色谱法,比较两者的特点,建立适用于各种制剂的检测。结果:薄层色谱法主要用于土大黄苷的迅速检出,而高效液相色谱法主要是用于土大黄苷的定量检出。结论:薄层色谱用于物质的定性分析,具有快速有效的特点,而高效液相色谱法则具有准确定量的特点,两者均是土大黄苷检查的通用方法。     

复方龙胆碳酸氢钠片中非法成分土大黄苷定性筛查与定量测定方法的建立

目的:建立复方龙胆碳酸氢钠片组方药材大黄伪品中指标性成分土大黄苷的定性筛查与定量测定方法。方法:从药品流通领域抽样获取来自国内8家药品生产企业(编号:A～H)的45批复方龙胆碳酸氢钠片,采用薄层色谱法(TLC)初步定性鉴别样品中的土大黄苷;采用高效液相色谱法(HPLC)对土大黄苷进行含量测定;采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)进一步对检出的土大黄苷成分进行结构确证。结果:TLC法检测结果显示,来自D企业的10批样品在紫外光灯(365 nm波长)可见土大黄苷的亮蓝色荧光斑点。HPLC法方法学考察结果显示,土大黄苷质量浓度在0.884～88.4μg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);进样量检出限、定量限分别为0.707 2、3.536 ng;精密度、重复性、稳定性试验RSD均小于1%;平均加样回收率为96.55%(RSD=0.53%,n=6)。D企业产10批样品中土大黄苷含量为0.732 4～2.890 8 mg/g。UPLC-MS/MS法检测结果显示,D企业产样品与土大黄苷对照品均有质荷比(m/z)419.0的准分子离子峰和m/z 257.1、241.2的碎片离子峰。结论:建立的TLC法定性初筛、HPLC法定量测定与UPLC-MS/MS法结构确证相结合的检测方法操作简便、灵敏、可靠,可用于复方龙胆碳酸氢钠片中土大黄苷的定性筛查和定量测定。45批次抽检样品中,有来自1个生产企业的10批样品中检出土大黄苷成分,提示该企业在生产复方龙胆碳酸氢钠片时存在以伪品大黄药材替代正品的现象。     

大黄类药材的质量评价进展

大黄是传统常用中药材,其质量优劣关系到用药的安全性和有效性。本文对大黄性状及显微鉴定、薄层鉴定、化学成分评价、指纹图谱、分子鉴定等方面近十年研究进行归纳总结,并对今后大黄的质量评价研究方向进行展望,为大黄质量控制和进一步研究提供参考。     

Gewinnung eines gerbstoffarmen Extraktes aus Rhizoma Rhei

A nearly tannin-free Extract of Rhizoma Rhei The tanníns were removed from a rhubarb extract by chromatography on a polyamid column, whereby the concentration of the anthra-compounds was increased. A concentrate containing 50% anthra-compounds and about 5% tannins was obtained. The original ratio of the anthra compounds in the drug was more or less maintained, and this was confirmed by the quantitative assay of some of the active ingredients.     

Die Einzelbestimmung von Anthra-Agluconen und Anthramonoglucosiden in Rhizoma Rhei

Determination of Anthra-Compounds in Rhubarb A thin-layer chromatographic method for the determination of anthra-compounds is described. A percolate of the drug in methanol is chromatographed on Silica-gel plates using different solvents and the isolated anthra-compounds are determined spectrophotometrically, using their yellow colour. The following anthra-compounds could be determined individually: Aloeemodin, Rheumemodin, Rhein, Physcion, Chrysophanol, Aloeemodinmonoglucoside, Rheumemodinmonoglucoside, Rheinmonoglucoside and a mixture of Physcion- and Chrysophanolmonoglucoside.     

大黄滴眼剂的研制

目的：研制中药滴眼剂,治疗结膜炎。方法：采用反相高效液相色谱法。进行稳定性考察及药理学研究。结果：回收率98.32%-102.9%,3.03%＜RSD＜4.33%,体外对金葡萄MIC1/10,大肠杆菌MIC1/5。结论：大黄滴眼剂制备工艺及质量可靠,有体外抑菌作用,可试用于临床。     

大黄蒽醌含量测定方法的研究

目的：测定大黄中游离蒽醌和总蒽醚的含量。方法：采用甲醇冷浸法，利用蒽醌衍生物在碱性条件下呈红色的特点，用可见分光光度法测定其含量。结果：该法测定平均回收率为100．2％，RSD＝2．96％(n＝5)，线性范围为5μg一30μg，r＝0．9999。结论：用本法检测大黄中的蒽醌含量，方法简便，结果可靠。     

大黄中18种无机元素的含量测定

目的：建立大黄中无机元素含量的测定方法。方法：采用原子荧光、电感耦合等离子光谱、电感耦合等离子质谱等方法来进行无机元素的测定。结果：测定了大黄中Ca、Cu、Fe、Mg、Zn、Sr、V、Cd、Cr、Co、Al、Mn、Mo、Ni、P、Pb、As、Se等18种无机元素的含量。结论：分析方法简便、快捷、准确,适于无机元素的分析测定。     

大黄配方颗粒的UHPLC指纹图谱研究

目的：建立大黄配方颗粒的UHPLC指纹图谱,为配方颗粒的快速质量评价提供方法。方法：采用超高效液相色谱法,以Agilent pomshell 120EC C18柱（4．6mm×100mm,2．7μm）为色谱柱;以甲醇：0．4％冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱;检测波长254nm;流速0．8mL／min;柱温25℃。结果：建立了大黄配方颗粒的UHPLC指纹图谱,确定了17个共有峰,各大黄配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0．9以上,可以用于大黄配方颗粒的快速定性鉴别。结论：该方法简单、准确、快速、重复性好,能有效地对大黄配方颗粒的质量进行评价。     

大黄中游离蒽醌对HK-2细胞系的毒性作用研究*

目的:观察大黄中大黄素等游离蒽醌对人近曲小管上皮细胞(HK-2)的细胞毒性作用及毒性作用机制。方法:体外培养HK-2细胞,利用MTT法评价大黄素等对HK-2细胞的增殖抑制作用,观察不同浓度药物对细胞形态和LDH释放率的影响,利用TUNEL染色检测大黄素等对HK-2细胞凋亡的影响,细胞线粒体膜电位和活性氧(ROS)生成的检测采用流式细胞技术,分别以DCFH-DA和罗丹明-123为荧光探针。结果:大黄素、大黄酸和大黄素甲醚作用HK-2细胞48 h后,明显抑制细胞增殖,其IC50值分别为130.65,82.97和76.02μmol.L-1,芦荟大黄素轻微抑制HK-2细胞增殖,大黄酚作用不明显。大黄素、大黄酸和大黄素甲醚能够导致细胞皱缩和空泡化,LDH漏出率增加以及促使细胞凋亡,3种蒽醌均使细胞的线粒体膜电位降低,而ROS生成减少,80μmol.L-1大黄素预处理细胞能够明显降低H2O2引起的ROS升高。结论:大黄素、大黄酸和大黄素甲醚可能是大黄中主要的肾毒性物质,能够引起HK-2细胞的凋亡,其机制可能涉及线粒体膜电位途径,但是不包括ROS生成途径。     

提取方法对大黄中总蒽醌含量的影响

对六种不同提取方法(水提2次,每次1h;70%乙醇回流0.5h 2次。1 h 2次与2 h 2次;其粉回流1 h 2次及渗漉法)所得提取物中大黄总蒽醌含量测定表明,以其粗粉回流1h 含量最高。     

多基源大黄药材的梯度全信息薄层色谱鉴别法研究

目的建立多基源大黄药材的全信息薄层色谱鉴别法。方法采用薄层色谱法,分别以环己烷-乙酸乙酯-甲酸试液(12∶3∶0.1,V/V/V)、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(8∶2∶4∶1,V/V/V/V)、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(8∶5∶3∶0.5,V/V/V/V)、乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶7∶1∶1,V/V/V/V)、三氯甲烷-甲醇-甲酸-水(10∶3∶0.2∶0.3,V/V/V/V)为梯度展开剂,通过365 nm、254 nm紫外光灯和日光检视3种基源大黄醇提、水提溶液中的脂溶性、中极性、水溶性成分显色前后的各信息斑点。结果共检出脂溶性、中极性和水溶性成分斑点53个,3种基源大黄提取溶液色谱中相同位置处的斑点一致。结论所建立的方法简便、快捷、实用,可多指标、快速鉴别大黄药材的质量,识别大黄药材的真伪。