短段腓总神经功能束三维重建的初步研究

目的 基于组织学连续断层切片,利用计算机技术进行短段腓总神经功能束三维重建.方法 取自愿捐献的成人约5 cm长胭窝段腓总神经,连续横断冰冻切片,片厚10 μm,切片间距0.25 mm,共切取200张切片.采用乙酰胆碱酯酶组织化学染色,镜下观察神经束变化规律,通过数码摄像系统将染色切片转化为数字图像,图像拼接获取放大100倍的二维全景图像,人工判断功能束性质,图形处理软件配准分割后,利用Amira 3.1三维重建软件实现腓总神经功能束的三维重建.结果 (月国)窝段腓总神经内部功能束可划分为感觉神经束、运动神经束、混合神经束和以运动神经纤维为主的混合神经束.其中,腓深神经和腓浅神经间无神经束的交叉融合,神经束的交叉融合主要发生在腓深神经和腓浅神经内部的功能束间.三维重建结果能较真实地再现周围神经的三维立体结构及其内部功能束组的三维立体行径,重建结构能单独或搭配显示,还能任意角度显示.结论 基于组织学和计算机技术,可以三维重建短段腓总神经功能束,为长段周围神经功能束的三维重建提供可行性依据.     

游离股薄肌移植在臂丛损伤治疗中的显微组织学及定量研究

目的 观察股薄肌移植在臂丛损伤治疗中显微组织学变化及神经纤维数量变化.方法 新鲜尸体下肢标本6具(成年男性),显微镜下分离观察股薄肌肌支神经,标记方位后在不同平面取材,4％甲醛溶液固定后冰冻切片,行改良Kamovsky-Roots法AchE组织化学染色,观察神经组织染色结果及不同断面上的神经束分布情况;石蜡包埋切片,行Loyez髓鞘染色法染色,应用图像分析系统对组织切片进行定量分析:测算各神经断面有髓神经纤维数目、神经束截面积和神经干截面积,计算神经束和结缔组织所占比例并采用配对样本t检验.结果 低倍镜下股薄肌肌支神经束大多数神经纤维呈现酶活性反应,有少量稀疏的块状酶染区.高倍镜下神经纤维形态清晰可见,轴突染色,髓鞘及周围结缔组织不染色.应用Loyez髓鞘染色法显示断面有髓神经纤维,通过图像分析系统,能够测算神经分支及各断面的神经纤维数目和结缔组织面积等指标.股薄肌神经有髓神经纤维数为(1958±375)根.前、后支有髓神经纤维数,前、后支截面积差异均有统计学意义,P＜ 0.05,后支的神经纤维数和截面积大于前支.股薄肌神经干上各个平面之间结缔组织面积差异均有统计学意义(P＜0.05),结缔组织所占比例向远端逐渐增加,而神经束所占比例的变化趋势和结缔组织相反.结论 应用AchE组织化学染色方法,股薄肌神经运动束的特征清晰可辨,结合显微解剖结果,能够明确股薄肌神经束的走行及分布情况.应用Loyez髓鞘染色法通过定量分析可明确神经纤维数,有助于选择合适的供体神经,保证两吻合神经之间达到相互匹配.     

化学去细胞异体神经添加不同组织来源雪旺细胞对周围神经损伤修复的功能评价

目的构建不同组织来源雪旺细胞(Schwann cells,SCs)及化学去细胞异体神经(chemically extracted acellular nerve allograft,CEANA)移植物,比较其修复周围神经缺损的效果。方法 4周龄SD大鼠3只,体重80～120g,体外培养、扩增和鉴定BMSCs及脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)。体外诱导BMSCs和ADSCs分化为类雪旺细胞(dMSC,dADSC),并采用胶质细胞标记物p75和抗胶原纤维酸性蛋白(glial fi brillary acidic protein,GFAP)进行鉴定。取出生3d SD大鼠10只,体重6～8g,分离培养SCs。20只成年Wistar大鼠,体重200～250g,取双侧约20mm坐骨神经制备CEANA。40只成年雄性SD大鼠,制备左侧15mm坐骨神经缺损模型,根据神经缺损修复方法不同随机分为5组(n=8):A组,取自体坐骨神经翻转后吻合;B组,取15mm CEANA吻合后补充5×105个SCs;C组,取15mm CEANA吻合后补充5×105个dMSC;D组,取15mm CEANA吻合后补充5×105个dADSC;E组,取15mm CEANA吻合。术后12周行感觉和运动功能恢复评价及组织学评价。结果 BMSCs和ADSCs表面抗原标志为CD34-、CD45-、CD90+。经诱导后BMSCs和ADSCs形态变化与SCs相似,呈双极、星形结构,SCs标记物p75和GFAP均表达阳性。术后12周,A、B、C、D、E组肢体50%回缩阈值分别为(13.8±2.3)、(15.4±6.5)、(16.9±5.3)、(16.3±3.5)和(20.0±5.3)g,A组与E组比较差异有统计学意义(P0.01),B、C、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。A、B、C、D、E组小腿三头肌收缩力恢复率分别为87.0%±9.7%、70.0%±6.6%、69.0%±6.7%、65.0%±9.8%和45.0%±12.1%,A、B、C、D组与E组比较差异有统计学意义(P0.05)。各组远端吻合口神经坚牢蓝染色显示神经纤维排列整齐,无炎性反应。甲苯胺蓝染色和透射电镜观察显示,B、C、D组有髓神经纤维计数及有髓神经纤维髓鞘厚度均大于E组,差异均有统计学意义(P0.01);B组轴突直径大于C、D组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CEANA补充dADSC修复周围神经缺损与补充dMSC和SCs具有类似的修复效果。dADSC来源广泛,可作为组织工程神经理想的种子细胞,在复合CEANA修复周围神经缺损发挥重要作用。     

颈交感神经在臂丛神经慢性卡压伤中的作用

目的 研究颈交感神经在臂丛神经慢性卡压伤中的作用.方法 24只雄性SD大鼠,随机分成A、B、C三组,每组8只.A组:臂丛神经下干慢性卡压模型;B组:臂丛神经下干慢性卡压模型,加颈中交感神经节切除;C组:对照组.3个月后,各组进行神经电生理检测第一骨间肌复合肌肉动作电位(CMAP),记录其波幅和潜伏期;切取臂丛神经下干卡压远侧3 mn神经干和C组臂丛神经下干,行甲苯脓蓝染色,半薄横切片,计数有髓神经纤维;切取C8、T1背根神经节,用RT-PCR方法检测背根节中P物质(SP) mRNA.结果 神经电生理检测CMAP波幅:A组(2.2± 1.1)mV,B组(3.9±1.1)mV,C组(8.6±2.0)mV;A组＜B组＜C组,差异有统计学意义(P＜0.01).潜伏期:A组(4.8±0.9)ms,B组(3.9±0.5)ms,C组(2.8±0.2)ms;A组＞B组＞C组,差异有统计学意义(P＜0.01).有髓神经纤维总数:A组(3583.0±540.0),B组(5098.0±742.0),C组(7934.0±868.0);A组＜B组＜C组,差异有统计学意义(P＜0.01).P物质mRNA表达水平:A组(3.6±0.8)×10-2,B组(2.2±0.7)×10-2,C组(1.2±0.3)×10-2;A组＞B组＞C组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 在交感神经作用下,臂丛神经慢性卡压伤的损伤程度加重,背根神经节中疼痛介质P物质表达增强,去交感神经有利于减轻臂丛神经慢性卡压伤损伤程度,有利于减轻因卡压引起的疼痛.交感神经激惹可能是臂丛神经慢性卡压性疾病发展的一个协同因素.     

化学去细胞同种异体神经复合缓释神经生长因子修复周围神经缺损

目的 探讨化学去细胞异体神经复合缓释神经生长因子(nerve growth factor,NGF)修复周围神经缺损的效果. 方法采用药物微球技术制备NGF微球,与生物纤维蛋白胶混合形成NGF复合缓释制剂.取健康雄性SD大鼠20只,体重280～300 g,制备化学去细胞异体神经.取健康雄性Wismr大鼠52只,体重250～300 g,制备大鼠左侧世骨神经10 mm缺损模型.根据修复缺损材料不同,随机分成4组(n=13):自体神经移植组(A组)、化学去细胞异体神经移植加NGF复合缓释制剂组(B组)、化学去细胞异体神经移植组(C组)和化学去细胞同种异体神经移植和纤维蛋白胶组(D组).右侧不作处理作为空白埘照组.术后行大体观察;术后2周测鼍神经轴突生长距离;术后16周行电生理检测,计算术侧坐骨神经运动传导速度恢复率、术侧小腿三头肌收缩力恢复率及湿重恢复率,并行移植神经吻合中段HE和半薄切片甲苯胺蓝染色观察. 结果 所有动物均存活至实验完成,切口愈合良好.术后2周A组神经再生距离较其余3组长(P＜0.05),B组优于C、D组(P＜0.05),C、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).术后16周,A、B、C、D组术侧坐骨神经运动传导速度恢复率分别为73.37%±7.82%、70.39%±8.45%、53.51%±6.31%、55.28%±5.37%;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).A、B、C、D组术侧小腿三头肌收缩力恢复率分别为85.33%±5.59%、69.79%±5.31%、64.46%±8.49%、63.35%±6.40%:A组与B、C、D组比较筹异有统计学意义(P＜0.05),B、C、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).A、B、C、D组术侧小腿三头肌湿重恢复率分别为62.54%±8.25%、53.73%±4.56%、46.37%±5.68%、45.78%±7.14%;A组与B、C、D组比较筹异有统计学意义(P＜0.05),B组与C、D组比较差异有统计学意义(P＜0.05),C、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).组织学图像分析示B组有髓神经纤维数量、轴突直径及髓鞘厚度均优于C、D组(P＜0.05),B组轴突直径小于A组(P＜0.05). 结论 复合缓释NGF的化学去细胞同种异体神经能满意修复一定长度的周围神经缺损,是一种有效的周围神经组织工程修复材料.     

C7神经前后股末端神经束结构特点和三维重建初步研究

目的研究C7神经前、后股末端神经束的特点。方法取自愿捐献新鲜成人尸体臂丛神经标本,确定C7神经,切取股束结合部由神经外膜包绕的前、后股末端,以4根头发作为定位线,连续横断面冰冻切片,片厚10μm,行乙酰胆碱酯酶染色,采集图像后进行神经功能束的鉴别和计数,并用Amira 4.1医学三维重建软件进行三维重建。结果前、后股染色深浅对比不明显,神经功能束由近向远逐渐分开。C7神经前股末端感觉束多于运动束,感觉束主要位于内侧,运动束主要位于外侧;后股末端运动束多于感觉束,运动束及感觉束内、外侧均有分布。C7神经前股末端运动束(2.85±0.36)束,感觉束(5.13±1.01)束;后股末端分别为(6.00±0.69)束及(3.78±0.94)束;前、后股末端间运动束和感觉束差异均有统计学意义(P<0.05)。三维重建后可从不同角度观察C7神经前、后股末端神经功能束的特点,可见神经功能束在走行过程中不断交叉、融合。结论 C7神经前股末端以感觉束为主,主要位于内侧;后股末端以运动束为主,内、外侧均有分布。应用Amira 4.1软件可实现C7神经前、后股末功能束的三维重建。     

周围神经端侧缝合后神经再生及其趋化性的实验研究

目的进一步验证周围神经端侧缝合的有效性,初步探讨端侧缝合后神经再生的趋化性问题。方法雌性清洁级SD大鼠10只20侧,实验分3组,分别为神经端侧缝合组、正常对照组、切断对照组。神经缝合后5个月采用电生理、组织学、电镜等方法,观测再生神经纤维及其靶器官结构功能的改变;乙酰胆碱酯酶染色观测再生运动神经纤维及比例。结果端侧组肱二头肌复合肌肉动作电位的(CMAP)潜伏期较正常组减慢64％,最大波幅为正常组的27％。肱二头肌肌湿重为正常组的72％,肌纤维横截面积与正常组元明显差异。端侧组肌皮神经有髓神经纤维计数占正常组的44．5％,有髓神经纤维髓鞘厚度、最大直径、最小直径分别占正常组的85．9％、77．3％和65．5％。乙酰胆碱酯酶染色示端侧组肌皮神经主干运动神经纤维比例为[(0．39±0．07)％,x±s,下同],与正常组的差异无统计学意义;肱二头肌肌支运动神经纤维比例为(0．38±0．07)％,与正常组比较差异有统计学意义(P>0．01)。结论周围神经端侧缝合后有相当数目的再生神经纤维,但以髓鞘薄,直径小的纤维为主,同时能有效防止肌肉萎缩。周围神经端侧缝合后神经侧方出芽对特定靶器官的趋化性不明显。     

应用micro-CT实现兔坐骨神经显微三维结构可视化研究

目的探讨通过micro-CT扫描新西兰大白兔坐骨神经标本,利用三维可视化软件Mimics17.0重建兔坐骨神经内部显微三维结构。方法取6只成年新西兰大白兔坐骨神经组织标本分成A、B组(n=3),分别用1%、5%Lugol液对两组标本染色,于染色0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 h时,行光镜及micro-CT观察两组标本的显像变化,将显像良好的micro-CT图像序列导入Mimics软件,采用三维重建工具重建兔坐骨神经神经显微三维结构。结果 A组标本在染色2.5 h、B组标本在染色1.5 h时,经光镜及micro-CT观察可获得较为清晰的显微三维结构图像。图像显示新西兰大白兔的坐骨神经主要分3组神经束,且各神经束立体行径相对固定,Mimics软件测量各神经束横截面积分别为(0.425±0.013)、(0.038±0.007)、(0.242±0.026)mm~2,生成的数字化三维模型可在任意横断面观察坐骨神经内部显微结构。结论应用micro-CT可清晰真实显示兔坐骨神经显微三维结构,为建立大样本量周围神经显微解剖学数据库提供了可靠方法。     

复合脂肪来源干细胞的脱细胞异种神经联合富血小板血浆修复兔面神经损伤的实验研究

目的探讨复合脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的脱细胞异种神经联合富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)修复兔面神经损伤的早期效果。方法取15只3月龄雌性SD大鼠双侧坐骨神经进行脱细胞处理,作为异种神经移植体。取成年新西兰大耳白兔颈背部脂肪垫,采用Ⅰ型胶原酶单独消化法分离培养ADSCs;兔耳静脉采血后经两步离心法提取PRP;观察不同体积分数PRP对ADSCs增殖的影响,以及诱导其为类雪旺细胞可行性。取第3代ADSCs,CM-Dil活细胞染色剂标记后,荧光显微镜观察细胞标记及传代后荧光衰减情况。另取32只新西兰大耳白兔建立左侧面神经1 cm长缺损模型,随机分成4组(n=8),A、B、C、D组分别采用CM-Dil-ADSCs复合脱细胞异种神经+自体PRP、CM-Dil-ADSCs复合脱细胞异种神经、脱细胞异种神经、自体神经移植修复神经缺损。术后1、8周静态下测量各组动物左侧上唇与面正中线成角(θ角);4、8周神经电生理检测记录神经传导速度;8周荧光显微镜观察A、B组再生神经远近端CM-Dil-ADSCs数量,各组再生神经甲苯胺蓝染色计数有髓神经纤维、透射电镜观察再生神经纤维结构。结果 5%~20%PRP均能促进ADSCs增殖,经20%PRP诱导后细胞S-100免疫荧光染色呈阳性。ADSCs经CM-Dil标记后荧光显微镜下观察示细胞标记率达90%以上,被标记细胞传代后细胞增殖良好,传代后荧光稍衰减。术后各组动物均存活至实验完成。术后1周各组动物面部均发生不同程度功能障碍,A、B、C、D组左侧θ角分别为(53.4±2.5)、(54.0±2.6)、(53.7±2.4)、(53.0±2.1)°,均显著低于健侧(P0.05);术后8周分别为(61.9±4.7)、(56.8±4.2)、(54.6±3.8)、(63.8±5.8)°,与健侧及术后1周比较差异均有统计学意义(P0.05)。大体观察各组动物再生神经完整性及连续性均良好。术后4、8周神经电生理检测示,A、D组神经传导速度均显著快于B、C组,B组快于C组(P0.05),A、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。术后8周荧光显微镜观察示,A组移植神经远、近端横断面均可见大量CM-Dil-ADSCs通过,B组通过细胞相对较少。甲苯胺蓝染色示,A、D组有髓神经纤维密度均显著高于B、C组,B组高于C组(P0.05);A、D组间差异无统计学意义(P0.05)。透射电镜观察示,D组有髓神经纤维鞘直径大、壁厚,形态规则;A组髓鞘形态与D组相似;B、C组髓鞘形态不规则,直径小、壁薄。结论 ADSCs可以作为种子细胞在体内存活,并可在PRP诱导下分化为类雪旺细胞,与脱细胞异种神经复合后修复兔周围神经损伤可获得较好效果。     

腋神经中三角肌功能束组在四边孔平面分布的显微解剖及组织学研究

目的观察研究腋神经中支配三角肌的功能束(组)于四边孔平面在神经干中的分布规律及组织学特征。方法根据自然分束逆行显微解剖分离12具(24侧)福尔马林灌注固定成人尸体标本(左右各半)的腋神经,于四边孔平面观察记录三角肌功能束组在神经干中的分布情况并测量其直径;另取新鲜冷冻尸体上肢标本6具(左右各半),对腋神经束组于四边孔平面断面取材,组织横断面切片,分别行乙酰胆碱酯酶染色(Karnovsky-Roots法)及Loyez髓鞘染色,观察断面纤维束性质及行纤维计数。结果腋神经在四边孔平面可分为两大束组,支配三角肌的腋神经前支组成的束组走行于神经干外侧,截面积为(2.449±1.327)mm2,占神经干面积的55.4%±9.3%;纤维束性质表现为运动纤维;纤维计数为(2112±631)根,占神经纤维总数的45.6%±1.1%。结论在臂丛神经根性损伤进行神经移位重建肩外展功能时,将移位神经选择性与腋神经外侧束组吻接,会减少纤维散失,提高功能恢复率。     

Study of sensory and motor fascicles in brachial plexus and establishment of a digital three-dimensional graphic model

To investigate a 3-dimensional (3D) model of human brachial plexus including its topography of sensory and motor fascicles with the assistance of the computer technology, 2 brachial plexus were serially horizontally sliced. Each slice was stained by Karnovsky-Roots acetylcholinesterase histochemical method. The stained sections were scanned, and the image was put into the computer serially. At last, the 3D diagram of brachial plexus was made. The internal structure of the brachial plexus was found to be very complicated. The fascicles bifurcated and recombined with one another with no fixed rules. All fascicles were mixed sensory and motor fibers. Acetylcholinesterase histochemical staining from a serial tissue section is a useful technique to distinguish sensory fibers from motor ones. The 3D visualization of the brachial plexus may help to develop a computerized database of the fascicle topography to provide an anatomical reference in fascicular repair of brachial plexus.     

饲服环磷酰胺对兔耳早期增生性瘢痕组织的影响

目的 通过饲服环磷酰胺观察其对兔耳早期瘢痕的影响,以探讨临床应用口服免疫抑制剂防治早期瘢痕的可行性.方法 以32只新西兰白兔兔耳建立增生性瘢痕动物模型,并将其随机分成4组,即蒸馏水组(A组)、5mg·kg-1·d-1环磷酰胺组(B组)、10 mg·kg-1·d-1组(C组)及30mg·kg-1·d-1(D组).在制作模型前及灌胃后14、28 d时分别采血观察白细胞、淋巴细胞变化.28 d时取组织HE染色、VG染色法观察瘢痕增生指数(HI)、成纤维细胞密度(NA)、胶原纤维面密度(AA)数值变化.各组数据(HI、NA、AA)比较采用方差分析,方差不齐时作秩和检验.结果 14 d时,A、B、C、D组白细胞数量分别为(8.62 +0.58)×109/L、(4.48±0.41)×109/L、(2.7±0.26)×109/L、(1.33±0.27)×109/L,淋巴细胞数量分别为(3.11±0.21)×109/L、(1.67 +0.16)×109/L、(0.42 +0.10)×109/L、(0.40 +0.09)×109/L;28 d时,A、B、C、D组白细胞数量分别为(8.63±0.53)× 109/L、(5.10±0.27)×109/L、(3.10±0.26)× 109/L、( 1.98±0.20)×109/L,淋巴细胞数量分别为(3.06±0.16)×109/L、( 2.08±0.14)×109/L、(0.96±0.19)×109/L、(0.14±0.07)×109/L,实验各剂量组(B、C、D组)白细胞数量和淋巴细胞数量下降,且随药物剂量的增加而下降更明显,呈负相关,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).A、B、C、D组HI值分别为3.02±0.24、2.59±0.43、2.06±0.19、1.63±0.11,AA值分别为40.49±2.07、35.29±1.99、28.36±1.87、24.99±1.82,NA值分别为4570.5±259.3、4222.5±199.6、3540.3±170.3、3341.4±228.8,对照组与实验各剂量组的HI、AA、NA数值之间比较差异有统计学意义(P＜0.01),且随剂量的增加,除NA值C和D组比较差异无统计学意义外,其余实验各剂量组HI、AA、NA值变小更明显,呈负相关,各组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 饲服环磷酰胺在抑制白细胞和淋巴细胞的同时能明显抑制瘢痕增生,对兔耳早期增生性瘢痕有明显的防治作用.     

The histochemical study of rat sciatic nerve cholinesterase in degeneration and regeneration

With a modified, less time-consuming, Karnovsky-Roots method, this study evaluated the reduction and recovery of rat sciatic nerve cholinesterase (ChE) in degeneration and regeneration. Characteristics of motor fascicles included not only partial staining of acetylcholinesterase (AchE) in the axon, but also a small amount of more intense staining of butyrylcholinesterase (BuchE) in the unmyelinated fibers, scattered between the myelinated fibers in a spot or fleck form. Characteristics of sensory fascicles included more intense staining of BuchE in the unmyelinated fibers, (appearing as irregular balls or pieces), and a scattering between unstained myelinated fibers. Mixed fascicles had characteristics of both motor and sensory fascicles. Unmyelinated fibers exhibited BuchE activity, but myelinated fibers exhibited AchE activity. Preparation time for a specimen to react to ChE-positive staining was about 1 to 2 hr; the method is very suitable for diagnosis during surgery. After nerve transection, AchE activity at the distal nerve end began to reduce gradually; no AchE could be tested after two weeks. But BuchE activity in unmyelinated fibers could be found until 30 days after transection. After epineurial suturing of the peripheral nerve transection, new AchE activity could be found at the anastomosis site until about two weeks and at 1 cm distal to the anastomosis site until about three weeks. It became more intense with the passage of time and, at about six weeks, regenerated AchE-positive myelinated fibers could be seen at the distal end of the nerve.     

Carbonic anhydrase activity of human peripheral nerves: a possible histochemical aid to nerve repair

The return of usable function after injury of peripheral nerves depends upon the appropriate regeneration of axons to their end organs. Debridement trimmings of severed nerves harvested during surgery were stained to demonstrate carbonic anhydrase activity. This histochemical method can be accomplished within 3 to 4 hours of receiving the tissue. Nerve fascicles were readily discriminated from one another by the individual staining patterns of their constituent axons. Axoplasmic staining was predominantly a feature of sensory fibers, and myelin staining was characteristic of skeletal motor axons. Carbonic anhydrase histochemistry may provide a means of accurately matching fascicles in cut nerve ends.     

交感神经对慢性卡压的臂丛神经背根节中P物质mRNA表达的影响

目的 研究交感神经不同功能状态对周围神经慢性卡压伤产生疼痛是否有不同的影响.方法 雄性SD大鼠48只,制作臂丛下干慢性卡压模型,分成A1、B1、C1、A2、B2、C26组,每组8只.A1(对照组)、B1(封闭组)、C1(去交感组)3组造模术后满3个月取卡压侧C8T1背根节;A2(对照组)、B2(封闭组)、C2(去交感组)造模术后满3个月去除卡压,继续饲养1个月后取卡压侧C8T1背根节.以RT-PCR方法检测背根节中P物质mRNA含量.结果 A1、B1、C1三组C8T1背根节中P物质mRNA相对含量均值分别为(3.620±0.830)×10-2、(2.945±0.724)×10-2、(2.239±0.734)×10-2,经方差分析,差异有统计学意义(P＜0.05);A2、B2、C2三组C8T1背根节中P物质mRNA相对含量均值分别为:(3.163±1.026)×10-2、(2.355±0.680)×10-2、(1.487±0.802)×10-2,三者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 周围神经慢性卡压伤产生的疼痛程度受交感神经影响,交感神经功能越低,疼痛程度越轻;行交感阻滞或切除有助于周围神经卡压疾病去卡压后疼痛的缓解.

Abstract：

Objective To investigate the effect of different function of sympathetic nerve on the pain of peripheral nerve chronic compression. Methods Forty-eight male Sprague-Dawley rats were made into lower trunk chronic compression models and divided into 6 groups (A1,B1,C1,A2,B2,C2) with 8 rats per group. The C8T1 dorsal root ganglions of the compressed sides of group A1 (control group), B1 (sympathetic block group)and C1 (de-sympathetic group) were harvested 3 months after compression surgery. The compressed lower trunks of group A2 (control group), B2(sympathetic block group)and C2(de-sympathetic group)were decompressed 3 months after compression surgery and bred for another month and then the C8T1 dorsal root ganglions of the compressed sides were harvested. The levels of substance P mRNA in the C8T1 dorsal root ganglions were tested with RT-PCR technique. Results the mean relative levels of substance P mRNA of group A1, B1 and C1 were (3.620 ± 0.830) × 10-2, (2.945 ± 0.724) × 10-2, (2.239 ± 0.734) × 10-2, respectively, with a significant difference (P = 0.006) and those of group A2, B2 and C2 were (3.163 ± 1.026) × 10-2, (2.355 ± 0.680) × 10-2,(1.487 ± 0.802) × 10-2, the difference among which was statistically significant (P = 0.003). Conclusion The pain of peripheral nerve chronic compression is affected by sympathetic function. The more lower the sympathetic function is, the more light the pain is. Sympathetic blockage or resection helps to relieve the pain of peripheral nerve compression disease after being decompressed.     

移植段神经与周围静脉伴行修复长段周围神经缺损的实验研究

目的观察长段神经移植后与周围静脉伴行修复长段周围神经缺损中,移植神经再血管化过程以及与神经再生的关系。方法取6～8月龄新西兰大白兔60只(体重2.0～2.5 kg,雌雄不限),制备左前肢正中神经约3 cm缺损模型,随机分成实验组与对照组(n=30)。对照组行正中神经原位吻合;实验组行正中神经原位吻合同时与肘静脉伴行,将移植神经外膜与血管外膜用神经吻合线缝合。术后1、2、4、8、12周行大体观察、电生理检测、病理组织学观察,术后12周行透射电镜观察,对比分析神经移植段再血管化过程、神经纤维再生及功能恢复情况。结果大体观察示,实验组术后1周出现再血管化,术后2、4、8、12周再血管化程度明显高于对照组。病理组织学观察示,术后8、12周,实验组神经纤维再生速度、质量、数量均优于对照组。术后2、4、8、12周,实验组与对照组正中神经神经传导速度分别为(10.32±0.94)、(13.14±1.22)、(22.68±1.16)、(24.09±1.27)m/s和(9.18±1.07)、(11.12±1.03)、(19.81±1.37)、(20.67±1.19)m/s,术后2、4、8周组间比较差异无统计学意义(P>0.05),术后12周组间比较差异有统计学意义(t=3.167,P=0.001)。术后12周透射电镜观察示,实验组髓鞘大小相近,鞘板脱层少,雪旺细胞形态正常,富含细胞器,其内可见正常微丝、微管及轴索内线粒体,轴索内线粒体无肿胀、空泡,嵴膜清晰,神经原纤维走行趋于正常。实验组有髓神经纤维面积、髓鞘厚度及轴突直径分别为(5.93±0.94)mm2、(0.72±0.12)μm、(3.12±0.12)μm,对照组分别为(5.28±0.72)mm2、(0.65±0.09)μm、(2.98±0.16)μm,差异均有统计学意义(t=3.736,P=0.002;t=3.271,P=0.002;t=4.533,P=0.001)。结论与周围静脉伴行的神经移植可促进兔移植神经段血管生成,对神经再生和功能恢复有明显促进作用。     

神经端侧吻合术与侧侧吻合术对神经干损伤后功能恢复作用的比较

目的　比较神经端侧吻合与神经侧侧吻合后功能恢复作用的差异。方法　将Wistar大鼠 18只分成A、B两组 ,每组 9只。端侧吻合组 :左侧腓总神经切断并在胫神经干上外膜开窗后 ,与胫神经主干作端侧吻合 ;侧侧吻合组 :左侧腓总神经切断后与胫神经作侧侧吻合。术后 3个月 ,行形态学检查、电生理检查、肌湿重检查及图像分析 ,评价神经再生及肌肉功能恢复的情况。结果　神经端侧吻合组和神经侧侧吻合组神经纤维的数目分别为 73 2 .8± 5 3 .4、712 .5± 5 8.4,其截面积分别为 (712 .5± 5 8.4) μm2 、(182 .3± 3 9.7) μm2 ,神经的传导速度分别为 (2 5 .6± 8.3 )m /s、(18.5± 9.8)m/s ,胫前肌肉的湿重两组分别为 (2 0 5 .6± 2 0 .7)mg、(2 0 1.8± 2 1.3 )mg ,肌纤维的面积分别为 (13 2 0 .6± 10 3 .9) μm2 、(14 0 3 .7± 13 8.4) μm2 ,再生的运动终板面积分别为 (15 3 7.5±5 2 7.8) μm2 、(1774.2± 45 8.7) μm2 ,吸光度值为 0 .42± 0 .15、0 .5 5± 0 .17,所有测量值差异无显著性 (P <0 .0 5 )。结论　神经端侧吻合术与神经侧侧吻合术的功能恢复差异无显著性     

MR扩散张量成像表观扩散系数和各向异性分数对不同病程颈脊髓压迫症的诊断价值

目的 :探讨MR扩散张量成像(MR-diffusion tensor imaging,MR-DTI)表观扩散系数(ADC)和各向异性分数(FA)对不同病程颈脊髓压迫症的诊断价值。方法:2010年1月~2011年6月经MRI常规检查诊断为颈脊髓压迫症的患者50例,其中急性颈脊髓压迫患者15例(A组),均为外伤患者,在伤后72h内接受MRI检查;慢性颈脊髓压迫23例(B组),均为脊髓型颈椎病患者,病程超过6个月;慢性合并急性颈脊髓压迫12例(C组),均有超过6个月的脊髓型颈椎病病史,且本次MRI检查前72h内受到颈部外伤累及颈髓。15例健康志愿者为对照组(D组),MRI常规检查颈脊髓未见异常。4组均行MR-DTI检查,测量A、B、C组患者颈脊髓受压处及D组C5/6椎间盘平面脊髓的ADC和FA,并行组间比较。结果:A、B、C、D组的ADC分别为(0.712±0.241)×10-3mm2/s、(1.012±0.256)×10-3mm2/s、(0.812±0.125)×10-3mm2/s、(0.823±0.106)×10-3mm2/s,FA分别为0.401±0.098、0.472±0.095、0.496±0.172、0.541±0.158。A组ADC和FA与D组比较均明显降低(P<0.05);B组FA与D组比较明显降低、ADC明显增高(P<0.05);C组ADC与D组比较无显著性差异(P>0.05),FA值低于D组(P<0.05)。A组ADC及FA均低于B、C组(P<0.05);B组ADC高于C组,FA低于C组,组间差异有显著性(P<0.05)。结论:MR-DTI的ADC及FA对不同病程颈脊髓压迫症有诊断价值。     

Mixed nerve suture facilitated by enzyme-staining techniques

Identification of motor and sensory fascicles to correctly match the motor and sensory fascicles helps surgeons to correctly align nerve stumps. Motor fibers, with their high cholinesterase activity, can be differentiated from sensory fibers. I developed a new modification that requires less than 1 hour and shows clearer differentiation compared with other histochemical techniques. In my clinical research, proximal stumps can be stained as long as 16 months after injury, however, distal stumps cannot be stained after 5 days. After 5 days, this staining could provide useful proximal information and distal fascicles may be identified by anatomic or topographical knowledge. I think this staining is especially useful in proximal nerve lesions and nerve injuries that require nerve graft within 4 days after injury. Also, this technique is useful in functioning muscle transfer to find motor fascicles and, in a sensate flap, to identify the sensory fascicle.     

膀胱出口部分梗阻早期结缔组织生长因子的表达及意义

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠膀胱出口部分梗阻(B00)致膀胱重塑时早期各时相在逼尿肌中的表达.方法 Wistar大鼠36只随机分为3组:梗阻7d组、梗阻14d组及对照组,每组12只.按设计,各时段获取膀胱标本,测量其重量及最大膀胱容量.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定膀胱逼尿肌的CTGF mRNA.CTGF相关蛋白定位、定性诊断实验用免疫组织化学法.结果 梗阻14 d组(B002组)、梗阻7 d组(B001组)的CTGFmRNA相对峰值分别为0.99±0.58、0.84±0.12.两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).B002组、B001组膀胱重量分别为(241.08±4.36)、(237.08±6.02)g,均高于对照组(158.50±4.62)g(P＜0.05).B002组、B001组膀胱容量分别为(0.82±0.03)、(0.74±0.03)ml,均高于对照组(0.62±0.02)ml(P＜0.05).免疫组织化学结果提示:B001组(3/12)及B002组的标本部分或全部免疫染色,显色区分布在黏膜下固有层或平滑肌肌束间.对照组无1例染色.结论 CTGF是PB00膀胱纤维化早期过程中重要的调节因子.