一种新的百日咳无细胞菌苗在健康成人志愿者中的试验

本文作者用一种新的百日咳无细胞菌苗(PV)在54名健康成人志愿者(男42人,女12人)中进行免疫原性和反应原性试验。这种新菌苗含丝状血凝素(FHA)、百日咳毒素(BT)和菌毛凝集原2和3(AGG 2+3)3种成份。PT和FHA是从百日咳杆菌培养物上清中纯化,AGG 2+3是从菌体中纯化。PT、FHA和AGG 2+3用甲醛脱毒。每份菌苗含有脱毒后的PT、FHA和AGG 2+3各10μg和1份佐剂。佐剂分氢氧化铝(A)和磷酸铝(B)两种。在54名志愿者中,15人接种PVA,20     

一种百日咳无细胞菌苗的研制及作为免疫加强剂在健康成人中的应用

本文报道一种主要由高纯度丝状血凝素(FHA)和百日咳毒素(PT)组成的百日咳菌苗,并对其在临床应用的安全性、反应原性和免疫原性进行评价。菌苗的制备:PF和FHA从百日咳Tohama菌株发酵培养液中提取和纯化,并进行各种鉴定。脱毒后采用淋巴细胞增多促进因子(LPF)、组胺致敏因子(HSF)和中国仓鼠卵巢(CHO)试验及高压液相层析(HPLC)检测其残留毒性。毒性恢复检测则在4℃或37℃放置1个月后重复上述试验,用天然毒素作为对照。一个接种量的菌苗含灭活的PT和FHA各25μg,将其吸附于0.5mg Al(OH)_3。通过测定特异性抗体和抗攻击感染保护力来确定菌苗的免疫原性和效力。接种对象为45     

百日咳无细胞菌苗的纯化和特性

作者研究了Biken百日咳无细胞菌苗的纯度、效力和毒性。菌苗提纯程序为:将Ⅰ相百日咳杆菌在S-S液体培养基中,36℃培养5天。经离心并过滤取上清,浓缩后,用1/3饱和硫酸铵在冷室中盐析,沉淀物溶于含1M氯化钠的pH8.0的磷酸盐缓冲液中,高速离心,上清经蔗糖密度梯度离心,用福尔马林脱毒。将此制剂稀释至特定浓度,加吸附剂氢氧化铝,制成Biken菌苗。作者用ELISA和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了减毒前原液中百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)的含量,发现PT与FHA比率接近1∶1时,纯度为97～99%。日本对百日咳无细胞菌苗的要求比全菌     

百日咳患者和接种全细胞百日咳菌苗的婴儿血清中各类免疫球蛋白的水平

作者使用纯化的百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和凝集原2和3(Agg2/3),在ELISA试验中,测定了114名百日咳患者,49名与百日咳患者密切接触者和139名接种DTP(其中含百日咳全细胞菌苗)菌苗婴儿血清中PT、FHA和Agg2/3的IgG、IgA和IgM的应答。     

百日咳69kDa蛋白预防小鼠喷雾感染的研究

沉降精制百日咳菌苗抗感染的抗原成份已知有百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、缴。最近有报告提出,菌体外膜蛋白69kDa(69k)具有预防小鼠脑内感染及喷雾感染的活性,作者对69k和其他抗原合并应用的抗感染效果进行了研究,获得了若干新的认识。实验选用雌性4周龄小鼠。FHA及PF用东浜1相菌的液体培养上清。缴和69k从培养菌体精制。各种抗原用甲醛灭活及脱毒后用于试验。抗原单独或按适当比例调整为     

白细胞介素12能增强百日咳无细胞菌苗的效力

作者曾用小鼠呼吸道感染模型证实,百日咳杆菌感染或百日咳全细胞菌苗免疫能诱导抗原特异性Th1细胞,且能完全抵御百日咳杆菌的气雾攻击,而用含脱毒百日咳毒素(PTd)、丝状血凝素(FHA)和69kDa外膜蛋白(pertactin)的无细胞菌苗免疫则诱导Th2细胞。     

小鼠口服脂质体包被的丝状血凝素和百日咳类毒素后血清和呼吸道的抗体应答

本文报道以脂质体包被的丝状血凝素(FHA)和脱毒的百日咳毒素(PT)给小鼠口服后诱发的特异性全身和分泌性免疫应答。 纯化的FHA和PT通过溶剂稀释微载体技术包被在多层磷脂囊内,该磷脂囊由卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酸、中性脂按8:1:0.7:0.3的比例组成,经凝胶过滤去除游离FHA和PT。作者选用5～6周龄雌性BALB/c小鼠分别口服包被FHA的脂质体、包被PT的脂质体、包被FHA和PT的脂质体、游离FHA、游离PT、游离的FHA和PT,以及未包被的脂质体(作为对照)。每次剂量为4μg蛋白,0和4天基础免疫,第30天以同样剂量加强免疫。加强免疫后10天,采集血液和肺灌洗液,应用ELISA测定血清和肺灌洗液中特异性抗FHA和PT抗体滴     

15～24月龄婴儿与4～6岁儿童对百日咳无细胞菌苗与全细胞菌苗免疫后应答的比较

作者在使用过全细胞百白破菌苗免疫的65名15～24月龄婴儿和56名4～6岁儿童中,使用双盲法对含百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)的百日咳无细胞菌苗(AC-12.5与AC-25)与普通全细胞菌苗(WC-DTP)进行比较,以评价其效果。所用百日咳无细胞菌苗由法国Merieux研究所提供,每0.5ml含PT和FHA各12.5μg(AC-12.5)或25μg(AC-25)及含10Lf破伤风类毒素和30Lf白喉类毒素的氢氧化铝吸附菌苗。普通百白破全细胞菌苗由美国的Lederle研究所提供。每0.5ml含4个单位小鼠保护力百日咳抗原,5Lf破伤风类毒素,12.5Lf白喉类毒素的磷酸铝吸附菌苗。     

百日咳全菌体菌苗中百日咳毒素、丝状血凝素、69KDa外膜蛋白、凝集原2和3及脂多糖含量的测定

百日咳全菌体菌苗可诱导对多种抗原[如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69KDa外膜蛋白(69KDa OMP)、凝集原2和3(AGG 2和3)以及其他外膜蛋白]的抗体应答。在百日咳菌苗中,这些抗原成分的含量影响其免疫应答。 作者测定了丹麦当地4种百日咳菌株等量混合的百日咳全菌体菌苗中相应抗原成分的含量。菌苗经甲醛和硫柳汞灭活制成。每剂菌苗含16浊度单位(菌体数约为16×10~9)。从菌苗中提取各种抗原,用ELISA测定菌苗中各种抗原和脂多糖(LPS)含量。 应用2M尿素,在60℃加热30分钟,随后超声处理45秒是提取FHA、69KDa OMP、AGG2和3的最有效方法。提取PT的最佳方法是1M NaCl 4℃过夜,随后超声处理。     

百日咳无细胞菌苗:用于婴儿和儿童初免程序的建议

1991～1992年间,美国食品和药物管理局(FDA)批准,婴儿于2、4、6月龄初免3剂百日咳全细胞菌苗DTP(DTwP)后,第4和第5剂免疫可用百日咳无细胞菌苗DTP(DTaP).最近,在欧洲完成的DTaP试验已证实这些菌苗用于婴儿初免有效.基于这些研究,FDA批准Tripedia〔Con-naught药厂,含百日咳类毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)〕和ACEL-IMUNE〔Wyeth-Lederle药厂,含PT、FHA、2型菌毛蛋白(FIM2)和69kDa外膜蛋白(PRN)〕两种DTaP用于3剂初免程序.     

新一代百日咳无细胞菌苗和重组菌苗

40年代研制的百日咳全细胞菌苗成功地控制了百日咳流行。对这种菌苗的反应原性的担心导致无细胞菌苗的研制。日本应用无细胞菌苗作常规免疫,证明它安全、有效而且副作用较小。具有不同抗原组分和浓度的新型菌苗正在进行临床试验,以进一步提高无细胞菌苗的效力。用某些化学方法脱毒的百日咳类毒素的毒性仍可恢复,为了解决这个问题,研制了含有遗传学方法脱毒的百日咳毒素（PT）的重组百日咳菌苗。Sl基因的定位诱变能消除PT的ADP-核糖基转移酶活性、B寡聚物基因的突变能减少有丝分裂原和血凝活性。含有Sl Lys9Gly129 PT类似物的重组菌苗证明是安全的,反应原性较弱,免疫原性较强。     

在菌苗效果现场试验中对用血清学和鼻咽培养法诊断百日咳的评价

用鼻咽涂抹接种对百日咳诊断有高特异性,但敏感度低,作为补充的血清学法可增加敏感性。本文根据鼻咽分离及测定血清中抗丝状血凝素(FHA)、抗百日咳毒素(PT)抗体,用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞法测PT中和抗体等试验对接种和未接种菌苗的儿童血清进行分析,并对假阳性结果及患者早期抗体的变化作了研究。     

提纯的百日咳杆菌组分在小鼠增重试验中的作用

小鼠增重试验(MWGT)是广泛应用的百日咳菌苗毒性试验。在MWGT过程中,小鼠体重在不同时间的变化与菌苗中不同组分有关,如注射菌苗后24小时的体重减轻与脂多糖(LPS)的含量有关;试验后期的体重减轻与百日咳毒素(PT)的含量有关。过去的研究都是用部分提纯的组分进行的。本文将高度提纯的PT、LPS和丝状血凝素(FHA)单独和联合进行试验,以确定各组分在MWGT中的作用。在实验中,以白细胞数作为PT的活性指标。所有实验皆以磷酸盐缓冲液(PBS)和英     

三组分百日咳无细胞菌苗与百日咳全菌体菌苗在2月龄婴儿中的比较

作者对含百日咳无细胞菌苗[由百日咳类毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和69kDa外膜蛋白(pertactin)组成]的DTP(DTaP)和含百日咳全菌体菌苗的DTP(DTwP)引起的副作用发生率以及血清学应答作了比较。     

改良的百日咳菌苗

改良百日咳菌苗的研究是尽可能地去除或减少内毒素等与副反应相关的成分,提取在防御感染上有用的成分。从百日咳杆菌培养上清中回收百日咳毒素(PT)以及丝状血凝素(FHA)组分,去除内毒素,用福尔马林处理清除PT的毒性,加少量铝佐剂,制定沉淀精制百日咳菌苗,与白喉和破伤风类毒素一起组成新的DTP。实验室和临床试验结果表明,新型DTP保持了国际公认的免疫效力,与全菌体菌苗相比,其发热以及接种部位红肿和硬结等局部反应轻得多。这种改     

含遗传脱毒的百日咳毒素的百日咳无细胞菌苗能在成人中诱导长期的体液和细胞免疫

作者对成人接种单组分和三组分百日咳无细胞菌苗后的长期免疫应答进行了随访研究,检测了由百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和69kDa蛋白诱生的抗体水平,及抗PT中和抗体滴度和细胞免疫应答。     

在瑞典进行的两种百日咳无细胞菌苗第Ⅲ期效果评价

1986～1987年,在瑞典,对日本国立卫生研究所(JNIH)制备的两种百日咳无细胞菌苗进行了接种后第Ⅲ期效果评价。批号为JNIH-6菌苗内含百日咳类毒素(PT)和丝状血凝素(FHA),共接种了1389名儿童;批号为JNIH-7菌苗仅含有单一的PT,共接种了1406名儿童,另有929名儿童注射安慰剂,作为对照。经连续观察发现,接种JNIH-7菌苗的儿童通过血清学和细菌培养后证实,有84名感染了百日咳杆菌,而接种JNIH-6菌苗的仅有     

制备百日咳无细胞菌苗的简易方法

作者应用染色配体层析法从百日咳杆菌的培养上清中提取百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA),并研究了用水溶性1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)-碳化二亚胺(EDAC)进行类毒化的条件。应用SS培养基加环糊精和环糊精液体(CL)培养基制备PT和FHA。用Blue Sepharose层析从培养上清中提取抗原。SS培养基加环糊精产生的PT是FHA的2.5倍,     

5种组分的新百日咳无细胞菌苗在成人和幼儿中的对照研究

作者报道一种含有5种组分的百日咳无细胞(AP)菌苗,它含有百日咳类毒素(PT)10μg,丝状血凝素(FHA)5μg,混合的凝集原(Agg)2和3 5μg及pertactin(Per)3μg。Per是69kDa腺苷酸环化酶相关蛋白,与FHA结合,在小鼠脑内攻击效力试验中具有保护作用。在自然感染百日咳患者或全细胞菌苗接种者的在血清中发现抗69kDa腺苷酸环化.酶相关蛋白的抗体。这个新鉴定的蛋白质,     

两种不同量PT和FHA的百日咳无细胞菌苗在2～6月龄婴儿中的安全性和免疫原性

作者对两种百日咳无细胞菌苗(APV)进行了研究。小剂量APV含百日咳类毒素(PT)10μg,丝状血凝素(FHA)5μg,菌毛抗原(FIM,凝集原2和3)5μg,69kDa蛋白3μg,白喉类毒素(DIP)15絮状反应单位(Lf),破伤风类毒素(TET)5Lf。大剂量APV含PT和FHA各20μg,其他成份含量相同。用随机双盲法对8个地区2050名婴儿进行初免。为了对大剂量抗原提供足够的安全性资料,婴儿人数分配比例按大剂量APV组:小剂量APV组=6:1。