D3低形态学评分胚胎的继续培养及其意义

目的:研究和评估低形态学评分胚胎的囊胚形成率及其价值。方法:将IVF/ICSI患者剩余的D3低形态学评分的胚胎转移至G2液中培养到D6,根据卵裂球生长速度和碎片比例分组,观察各组囊胚形成率和优质囊胚率。结果:低形态学评分胚胎中F1组的囊胚形成率和优质囊胚率均高于F3和F4组,F2组的囊胚形成率高于F4组;C1和C2组囊胚形成率和优质囊胚率均明显高于C3组,C1组的优质囊胚率高于C2组;D1组的囊胚形成率明显高于D2组。结论:低形态学评分的胚胎具有一定的发育潜能和利用价值,其继续发育能力与卵裂球数、碎片比例及发育速度有关。     

影响形态学低评分胚胎体外囊胚形成的相关因素研究

目的探究影响形态学低评分胚胎体外囊胚形成的相关因素。方法选取2015年5月至2016年7月在南方医科大学广济医院行常规体外受精与卵胞浆内单精子显微注射治疗周期中正常受精的D 3低形态学评分胚胎并将其移入囊胚培养液中进行培养,直至囊胚形成同时给予分级,随后分析囊胚形成与年龄、卵裂球数量、碎片率、受精方式的相关性。结果卵裂球数≥6个组的囊胚形成、可移植囊胚形成、优质囊胚形成情况均显著优于卵裂球数6个组;碎片率25%组囊胚形成、可移植囊胚形成、优质囊胚形成情况均显著优于碎片率≥25%组。结论形态学低评分胚胎具有不同程度的发育潜能,胚胎碎片率以及卵裂球数会影响其囊胚形成、可移植囊胚、优质囊胚形成。     

D3形态学低评分胚胎囊胚形成的影响因素分析

目的：探讨取卵后第3天（D3）形态学低评分胚胎体外囊胚培养的发育潜能,分析影响囊胚形成的临床及胚胎因素。方法：通过序贯培养将D3低评分胚胎继续培养至囊胚期,观察囊胚形成率及优质囊胚形成率。分析年龄、基础窦卵泡数、基础卵泡刺激素（bFSH）、促性腺激素（Gn）总剂量、人绒毛膜促性腺激素（hCG）日雌二醇（E2）水平、获卵数、D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片与囊胚形成的关系。结果：共收集422个取卵周期1 745个低评分胚胎进行囊胚培养,共形成1 046个（59.9%）囊胚,763个（43.7%）优质囊胚。不同基础窦卵泡、bFSH、Gn总剂量、hCG日E2水平、获卵数组间囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均无统计学意义（P＞0.05）;不同年龄组间囊胚形成率差异无统计学意义（P＞0.05）,但优质囊胚形成率差异有统计学意义（P＜0.05）;不同D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片组间囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：低评分胚胎有不同程度的发育潜能,D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片影响低评分胚胎的囊胚形成;年龄、D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片影响低评分胚胎优质囊胚的形成。     

部分卵裂球损伤对冻融后胚胎发育潜能的影响

目的了解部分卵裂球损伤对冻融后优质胚胎发育能力的影响，为解冻周期移植胚胎的挑选提供依据。方法对502例解冻移植周期进行回顾性分析。所有移植胚胎分为两类，胚胎冻融后所有卵裂球均无损伤，卵裂球数〉6，碎片〈10％（A型）；冻融后胚胎有1～2个卵裂球损伤，但仍有至少6个完整无损伤卵裂球，碎片〈10％（B型）。无损伤组移植的所有胚胎均为A型（n=294周期），部分损伤组移植胚胎中至少包含1个B型胚胎（n=208周期）。比较2组临床妊娠率和着床率。结果无损伤组临床妊娠率为36．73％（108／294），着床率19．42％（153／788），部分损伤组为38．46％（80／208）和19．43％（110／566），2组临床妊娠率和着床率比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。而且含1枚B型胚胎组（163周期）和2枚B型胚胎组（42周期）的临床妊娠率和着床率比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论少量卵裂球损伤的冻融后优质胚胎，其发育潜能与无损伤优质胚胎相同。     

胚胎卵裂速度异常对囊胚形成的影响

目的:探讨卵裂速度异常对胚胎发育能力的影响。方法:回顾分析78个第2天未卵裂的胚胎及1 298个发育迟缓的胚胎继续培养至第6天的囊胚形成情况。结果:卵裂迟缓的胚胎囊胚形成率、优质囊胚率、胚胎利用率(24.7%、25.6%、6.3%)均显著低于卵裂速度正常的优质胚胎(50.3%、62.3%、31.3%),且细胞数越少囊胚形成率越低。第2～3天发育停滞的胚胎,其囊胚形成率、胚胎利用率(21.9%、4.7%)均显著低于继续卵裂的胚胎(27.7%、8.1%)。第2天未卵裂胚胎培养后无囊胚形成。结论:卵裂速度是影响胚胎发育能力的重要因素,第2天不卵裂的胚胎及第3天细胞数≤3的胚胎几乎无发育活性,第2～3天继续卵裂的胚胎具有较高的临床利用价值。     

4859枚非优质胚胎和废弃胚胎囊胚培养的临床观察

目的:探讨不孕症患者辅助生殖治疗过程中废弃的胚胎和新鲜周期移植后不够冷冻标准胚胎培养的临床意义。方法:收集本院不孕症患者接受辅助生殖治疗后第3天(D3)废弃的胚胎和移植后不够冷冻标准的胚胎,序贯培养至囊胚,将可利用囊胚进行冷冻保存。分析年龄、不孕类型、受精方式、胚胎卵裂球数目、集合培养胚胎的个数、胚胎质量分级等与囊胚形成的关系。同时比较冻融周期移植正常的卵裂期胚胎和培养形成的可利用囊胚的妊娠和出生婴儿情况。结果:共收集4859枚废弃的胚胎和新鲜周期移植后不够冷冻标准的胚胎,培养至第6天(D6),形成囊胚2020枚(41.6%),优质囊胚661枚(32.7%)。D3胚胎卵裂球数目≥10个,囊胚和优质囊胚的形成率最高,7~9个次之,6个时囊胚和优质囊胚的形成率急剧下降。D3Ⅰ~Ⅱ级胚胎囊胚形成率和优质囊胚显著高于Ⅲ、Ⅳ级胚胎(P0.05)。集合培养有利于囊胚的形成,每个微滴培养1个胚胎时优质囊胚形成率最低。冻融胚胎移植周期中移植D3胚胎和囊胚的临床妊娠率、流产率、双胎率、活产率、出生体重均为无统计学差异,其D3胚胎着床率低于囊胚且有统计学差异。结论:部分非优质胚胎和废弃胚胎仍具有发育潜能,囊胚培养有助于筛选出高发育潜能胚胎并进行保存,冻融囊胚移植可提高患者卵子的利用率,节约患者的治疗成本。     

胚胎卵裂球损伤与继续发育对临床结果的影响

目的:比较玻璃化冷冻人卵裂期胚胎解冻后卵裂球损伤和继续发育对种植率以及临床妊娠率的影响。方法:选择在辅助生殖中心行181个卵裂期的FET周期进行研究。试验一根据复苏胚胎有无损伤和继续发育分为:A有损伤无发育,B无损伤有发育,C无损伤无发育,D有损伤有发育4组;试验二以B组无损伤有发育为基础,据移植继续发育胚胎数目分为:B1组1个胚胎继续发育,B2组2个胚胎继续发育,B3组3个胚胎继续发育,比较种植率以及临床妊娠率。结果:B组妊娠率、胚胎种植率高于A、C两组,差异有统计学意义(P<0.05);B3组妊娠率高于B1、B2两组,差异有统计学意义(P<0.05)。但胚胎种植率、多胎妊娠率各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:解冻复苏胚胎继续培养后是否有进一步发育对预测临床妊娠较卵裂球是否损伤更有价值。     

裸核注入法在小鼠体细胞核移植中的应用

目的：探讨供核细胞的处理方式对小鼠体细胞核移植胚胎体内外发育潜能的影响。方法：对供核细胞采用供体胞浆内完整注入和裸核注入两种不同的注核方式,观察重构胚的激活、卵裂及囊胚发育情况;并设立体外受精组通过胚胎受体内移植观察2种注核方式所获重构胚的发育结局。结果：完整细胞组的卵裂率和囊胚率均低于裸核组,差异有统计学意义（χ2卵裂=5.785,P=0.016;χ2囊胚=6.092,P=0.014）;3组所获仔鼠质量比较差异有统计学意义（F=14.331,P=0.00）,体外受精组最轻,完整细胞组最重,而完整细胞组所获得胎盘的质量高于裸核组及体外受精组,差异有统计学意义（与体外受精组相比,t=-8.786,P=0.00;与裸核组相比,t=-6.573,P=0.00）。结论：裸核注入法可提高小鼠体细胞核移植胚胎的体内外发育潜能。     

卵胞浆内精子注射后和原核形成期间非损伤性测定人胚胎所吸收的葡萄糖和丙酮酸量

为实施体外受精(IVF)-胚胎移植(ET), 选择人类胚胎常根据胚胎的形态和卵裂率。尽管做了最大努力来改进预测胚胎活力的记分技术,但着床率仍很低。不是所有形态好的胚胎都着床,有碎片的胚胎在体外也可以发育到囊胚期。为了达到可接受的妊娠率,常规地移植1个以上的胚胎,这样伴随着不可避免的多胎的危险。     

细胞松弛素B在人类体外成熟卵子冷冻中的作用

目的:探讨细胞松弛素B在人类体外成熟卵子玻璃化冷冻中的作用。方法:收集常规胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)周期中未成熟卵母细胞234枚(包括生发泡期即GV期和第1次减数分裂中期即MⅠ期),在体外培养24～48 h,181枚卵母细胞成熟(排出第2极体),随机分成3组并行玻璃化冷冻。A组(43枚)用细胞松弛素B(CB)预处理30 min后行玻璃化冷冻;B组(66枚)用CB预处理20 min后行玻璃化冷冻,C组(72枚)未用CB预处理直接行玻璃化冷冻。D组为对照组30枚体内成熟卵子未用CB处理直接玻璃化冷冻。各组卵子冷冻3周后解冻,复苏的卵子行ICSI辅助授精,观察各组成活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:冻融后的体外成熟卵子,其成活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率均显著低于体内成熟卵子(P<0.05)。A组的成活率显著低于B、C两组(P<0.05),A、B、C 3组间的受精率、卵裂率差异无统计学意义(P>0.05),A、B两组未获囊胚,C组仅有1枚囊胚。结论:冻融体外成熟卵子,成活率、受精率、卵裂率均下降,囊胚形成率低,胚胎后期发育潜能显著降低。CB预处理未能提高卵子冷冻的成活率、受精率、卵裂率及胚胎的发育潜能。     

Does sperm DNA fragmentation affect the developmental potential and the incidence of apoptosis following blastomere biopsy?

Common methods employed in assisted reproduction technology (ART) include intracytoplasmic sperm injection (ICSI) with an unspecified level of sperm DNA fragmentation (SDF) and preimplantation genetic diagnosis (PGD). The aim of this study was to investigate the impact of SDF on human preimplantation embryo development and the incidence of apoptosis following a single blastomere biopsy. Using sperm chromatin dispersion (SCD) to assess SDF, a total of 20 processed semen samples were categorized into two groups; group I: SDF ≤30% and group II: SDF >30%. After ICSI, fertilization, cleavage, and embryo quality score were assessed. A single blastomere was biopsied from day 3 embryos and development was monitored on day 4. The frequency of apoptosis in biopsied embryos was assayed by TUNEL and the level of BCL-2, BAX, hsa-mir-15a, and hsa-mir-16-1 were assessed by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). SCD was found to be negatively correlated with sperm motility and normal form spermatozoa (p?<?0.05). The rate of fertilization, cleavage, and embryo quality score were not significantly different between the two groups (all p?>?0.05). SDF >30% had no negative effect on potential development and did not increase the proportion of apoptotic cells and the level of apoptosis-related genes and microRNAs (miRNAs) in group II vs. group I (p?>?0.05). It appears that at the levels assessed paternal genome damage had little if any negative effect on preimplantaton embryo development and apoptosis following single blastomere biopsy. This may reflect the selection of morphologically normal sperm for ICSI and the repair capacity of the oocyte.     

冻融后损伤胚胎发育潜能对临床结局的影响

目的探讨冻融后部分损伤胚胎发育潜能对临床结局的影响。方法回顾性分析2013年7月至2014年10月哈尔滨医科大学附属第一医院生殖中心310个出现部分损伤的冻融胚胎移植周期,根据过夜培养后胚胎继续发育情况分为两组,胚胎解冻第二天未继续发育的41个周期为A组,解冻第二天至少有1枚胚胎继续发育的269个周期为B组。比较两组的种植率及临床妊娠率。结果 B组的种植率及妊娠率[17.83%(110/617)、32.34%(87/269)]均高于A组[7.69%(7/91)、14.63%(6/41)](P0.05)。结论冻融后部分损伤胚胎,过夜培养后未继续发育者种植率及妊娠率低,发育潜能是影响临床结局的重要因素。     

Good quality blastocyst from non-/mono-pronuclear zygote may be used for transfer during IVF

Although healthy infants have developed from non- and mono-pronuclear zygotes, the transfer of embryos from non- and mono-pronuclear zygotes is not recommended because there are no proper selection criteria. In the present study, we discuss how to select non- and mono-pronuclear embryos with the highest developmental potential at 19–20 hours post-insemination. We found that the percentage of blastocysts with normal chromosome constitution in non-pronuclear zygotes was slightly higher than in mono-pronuclear zygotes. Non- and mono-pronuclear embryos that were at the 4-cell stage on D2 and/or at the 6- to 8-cell stage on D3 had higher incidence rates of blastocysts with normal chromosome constitutions. We also found higher incidences of blastocysts with normal chromosome constitution on D6 than on D5. The results suggest that if high quality non- and mono-pronuclear zygotes develop to the 4-cell stage on D2 and the 6-to 8- cell stages on D3, along with high quality D6 blastocysts, the incidence of blastocysts with normal chromosome constitution is higher.     

严重自发空泡化对胚胎发育潜能的影响

目的:探讨授精后第5天(D5)严重自发空泡化的形成对胚胎发育潜能的影响。方法:回顾性分析2016年1月-2017年12月于本中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵细胞胞质内单精子注射术(ICSI)治疗患者的临床资料,选取授精后D5出现严重自发空泡化的873个胚胎作为空泡组,同期形态无异常的5709个胚胎作为对照组。比较两组第6天(D6)胚胎的可利用囊胚率、优质囊胚率及临床结局。结果:空泡组D6可利用囊胚率(8.3%)及优质囊胚率(22.2%)均低于对照组(27.9%、65.2%)(P<0.05)。临床结局方面,无论是单胚复苏移植还是与正常胚胎的联合复苏移植,空泡组与对照组的妊娠率、活产率和流产率均无差异(P>0.05)。结论:授精后D5严重自发空泡化的形成虽然影响D6可利用囊胚率及优质囊胚率,但可利用囊胚与对照组有相似的临床结局。     

38岁以上不孕女性ART新鲜周期优选移植策略的探讨

目的 探讨≥38岁不孕女性在辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)新鲜周期优选单囊胚移植与双卵裂期胚胎移植的效果.方法 回顾性分析2019年1～12月在广西壮族自治区生殖医院≥38岁不孕女性新鲜周期双卵裂期胚胎(A组:2D3,621例)和单囊胚(B组:1D5-6,71例...     

胚胎冷冻时间对冻融胚胎移植结局的影响

目的：探讨玻璃化冷冻保存卵裂期胚胎的时间对冻融胚胎移植结局的影响。方法：回顾性分析2017年1月—2020年12月山西医科大学第一医院生殖医学中心进行卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植的3 847个周期,包括8 767枚冻融胚胎。根据胚胎冻存时间分为5组,≤1年组,（1~2]年组、（2~3]年组、（3~4]年组和>4年组,比较各组患者的一般情况、胚胎解冻复苏情况及临床结局的差异,并采用二分类Logistic回归分析取卵年龄、移植年龄、冻存时间、移植胚胎数和优质胚胎数对移植结局的影响。结果：各组患者取卵年龄、移植年龄、移植胚胎数、临床妊娠率及活产率比较,差异有统计学意义（P<0.05）。Logistic回归分析显示取卵年龄、移植年龄、冻存时间对临床妊娠、活产无影响（P>0.05）,移植胚胎数及优质胚胎数对临床妊娠、活产有影响（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻保存卵裂期胚胎的时间对胚胎复苏及妊娠结局没有显著影响。     

辅助生殖技术中移植胚胎数目、级别与妊娠结局关系的探讨

目的:探讨辅助生殖技术中新鲜周期移植胚胎数目、级别与妊娠结局的关系.方法:回顾性分析1261个新鲜移植周期患者的临床资料.按照年龄分层后依据移植胚胎数目分组(<35岁:A组,移植1枚胚胎;B组,移植2枚胚胎;≥35岁:a组,移植1枚胚胎;b组,移植2枚胚胎;c组,移植3枚胚胎),每组再依据移植Ⅰ级胚胎数分亚组,A组分为...     

Al(NO_3)_3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法 ,以Al(NO3) 3为受试物 ,培养基中Al3+ 浓度为 0 6～ 9 0 μg ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎 48h ,观察Al(NO3) 3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响 ,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现 ,随着铝剂量增加 ,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势 ,有一定的剂量 效应关系。其中 ,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感 ,相关指标在Al3+ 浓度为1 2 μg ml时比对照组显著降低 (P <0 0 5 )。≥ 3 0 μg ml时 ,除下颌外各项指标均明显降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,同时胚胎畸形发生率明显升高 ,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3) 3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。