HIV感染与AIDS患者CD4^＋T淋巴细胞计数与肺结核主要症状体征的相关性研究

目的探讨HIV感染与AIDS患者CD4⁺ T淋巴细胞计数与肺结核主要临床症状、体征的相关性。方法选择2010年7月至2012年6月期间在广西CDC、广西龙潭医院、南宁市第四人民医院就诊登记的HIV感染与AIDS患者733例,采用液体培养和改良中性罗氏培养方法对患者痰标本进行结核分枝杆菌培养,采用流式细胞仪检测法对CD4⁺ T细胞进行检测,分析CD4⁺ T淋巴细胞计数与肺结核相关临床症状、体征的关系。结果HIV感染与AIDS患者结核分枝杆菌痰培养阳性率为16.1%（118/733）。CD4⁺ T淋巴细胞计数分级为1级的痰培养阳性率为12.3%（9/73）,2级为10.3%（6/58）,3级为17.0%（15/88）,4级为17.1%（88/514）,不同CD4⁺ T淋巴细胞计数级别的痰培养阳性率的差异无统计学意义（χ²趋势性=2.004,P=0.157）;不同级别CD4⁺ T淋巴细胞计数与结核分枝杆菌培养阳性率之间具有相关性（r=-0.048,P=0.035）。CD4⁺ T淋巴细胞计数与是否有咳嗽、咯痰＞2周症状有关,有咳嗽、咯痰＞2周症状的患者CD4⁺ T淋巴细胞计数（1.54±0.65）lg低于无该症状的患者（1.68±0.70）lg（t=-2.621,P=0.009）。结论HIV感染与AIDS患者CD4⁺ T淋巴细胞计数级别与结核分枝杆菌痰培养结果具有相关性,临床上对于咳嗽、咯痰＞2周的HIV感染与AIDS患者应予以重视,警惕合并肺结核的可能。     

肺结核患者疗程中外周血辅助性和调节性T细胞的动态研究

目的 探讨辅助性T细胞17（Th17）和CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞与结核病的发病及抗结核治疗转归的关系。 方法 纳入对象包括32例活动性肺结核患者、25例Mtb潜伏感染者、45例健康对照者。流式细胞术检测外周血Th17细胞分泌细胞因子IL-17和CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达强度。结果以x±s表示,所有数据均使用Prism 4.0统计软件进行分析,两组间比较采用非配对t检验,多组间的比较采用ANOVA方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 肺结核患者组治疗前IL-17表达为（3.25±1.68）%,明显低于健康对照组［（4.62±1.46）%］（F=6.633,P<0.0001）。比较活动性肺结核患者组IL-17表达在治疗前、治疗3个月［（4.17±2.27）%］、治疗6个月［（5.58±1.66）%］时的检测结果,发现治疗3个月时高于治疗前,但差异无统计学意义（F=12.244,P=0.057）;而治疗6个月时明显高于治疗前（F=12.244,P<0.0001）和治疗3个月时（F=12.244,P=0.004）。健康对照组CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达为（4.97±1.60）%,与Mtb潜伏感染组［（5.00±1.08）%］比较,差异无统计学意义（F=11.986,P=0.937）;活动性肺结核患者组治疗前表达为（6.59±1.73）%,显著高于健康对照组及Mtb潜伏感染组(F=11.986,P<0.0001)。比较活动性肺结核患者组治疗前、治疗3个月［（8.28±2.04）%］、治疗6个月［（7.46±1.87）%］时的CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达,发现治疗3个月时的表达明显高于治疗前（F=6.458,P=0.001）;治疗6个月时的表达低于治疗3个月时（F=6.458, P=0.085）,但差异无统计学意义;治疗6个月与治疗前的表达相比较,差异无统计学意义（F=6.458,P=0.068）;治疗6个月CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞表达明显高于健康对照组（t=6.255,P<0.0001）。 结论 结核病患者外周血Th17细胞明显减少,经有效抗结核治疗后,Th17细胞逐渐增加,表明Th17细胞在抗结核免疫中起保护作用。结核病患者外周血CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞明显增多,经抗结核治疗后CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞逐渐减少,进一步说明CD4⁺CD25⁺CD127 ^low调节性T细胞在抗结核免疫中起抑制作用。     

肺结核及肺外结核患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

目的 探讨肺外结核患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺、CD8 ⁺T淋巴细胞亚群及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值的变化及其临床意义方法 搜集2017年11月至2019年1月在成都市公共卫生临床医疗中心结核病区住院的147例患者(包括63例单纯肺结核、60例肺结核并发肺外结核和24例单纯肺外结核患者,分别为肺结核组、肺结核并发肺外结核组和肺外结核组)作为研究对象。采用流式细胞仪及四色淋巴细胞亚群检测试剂盒检测纳入的各组患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺、CD8 ⁺T淋巴细胞的绝对计数及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值,分析上述各组患者外周血T淋巴细胞亚群的差异。结果 肺结核并发肺外结核患者外周血CD3 ⁺和CD4 ⁺T淋巴细胞计数分别为596.000(377.500,823.250)个/μl和347.500(214.000,479.250)个/μl,均低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.507,P=0.012;Z=-2.431,P=0.015)。肺结核并发肺外结核患者的CD8 ⁺T淋巴细胞计数与CD4 ⁺/CD8 ⁺比值分别为195.500(137.250,278.750)个/μl和1.670(1.258,2.273),较肺结核患者的244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)降低,但差异均无统计学意义(Z=-1.892,P=0.058;Z=-0.546,P=0.585)。单纯肺外结核患者外周血CD3 ⁺和CD4 ⁺ T淋巴细胞计数分别为551.500(283.750,949.000)个/μl和295.500(134.250,461.750)个/μl,低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.089,P=0.037;Z=-2.460,P=0.014);单纯肺外结核患者外周血的CD8 ⁺T淋巴细胞计数[185.000(92.000,366.250)个/μl]及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值[1.455(1.018,2.128)]与单纯肺结核患者[分别为244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)]相比,差异均无统计学意义(Z=-1.315,P=0.188;Z=-1.429,P=0.153)。结论 随着肺结核患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺ T淋巴细胞计数的逐步降低,结核分枝杆菌可能更易播散至肺外;外周血CD8 ⁺T淋巴细胞计数及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值在肺外结核发生机制中的作用尚需进一步探讨。     

结核分枝杆菌Ag85B-ESAT-6融合蛋白重组耻垢分枝杆菌对小鼠的免疫原性研究

目的 评价表达Mtb Ag85B-ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌（Ag85B-ESAT-6-rM.s）在小鼠中的免疫原性。 方法 6周龄BALB/c小鼠经背部皮下注射1×10⁶ CFU（colony-forming unit,菌落形成单位）的Ag85B-ESAT-6-rM.s,同时设M.s免疫组（10只）、BCG免疫组（10只）、Ag85B-ESAT-6融合蛋白免疫组（10只）和生理盐水组（10只）。接种免疫后1～6周,尾静脉采血,检测小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺ T细胞所占百分比;免疫后6周,MTS［3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt］法检测小鼠脾淋巴细胞增殖和酶联免疫斑点检测（enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT）检测脾淋巴细胞分泌γ干扰素（interferon γ,IFN-γ）、白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）和白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）等细胞因子的水平。 结果 Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠后能够明显刺激小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺ T细胞的产生,其所占百分比［（59.6±1.5）%］明显高于BCG免疫组［(48.8±2.3)%］（t=12.252,P<0.05）和原始M.s免疫组［(45.7±1.6)%］（t=20.166,P<0.05）。Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖指数（3.23±0.31）与BCG免疫刺激的增殖指数（2.95±0.36）相当（t=1.864,P>0.05）,但其诱生IFN-γ的能力［斑点形成细胞(spot forming cells,SFC) ］［(167.5±36.6)SFC/10.6］明显高于BCG［(98.5±26.9)SFC/10⁶ ］（t=4.804,P<0.05）。 结论 Ag85B-ESAT-6融合蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达能够明显提高M.s的免疫原性,并能够刺激小鼠机体产生有利于抗Mtb感染的免疫反应,作为TB新型候选疫苗具有一定的研究前景。     

结核分枝杆菌休眠相关抗原Rvl733cDNA疫苗的构建及免疫学特性研究

目的 构建结核分枝杆菌（Mtb）休眠相关抗原Rv1733c的真核表达载体,并评价其作为DNA疫苗的免疫学特性。 方法 利用限制性酶切的方法从本室前期保存的pMD-18T-Rv1733c质粒中构建Rv1733c的真核表达载体pcDNA-Rv1733c。将pcDNA-Rv1733c重组质粒稳定转染P815细胞,并用间接免疫荧光法检测Rv1733c的表达。采用数字表法随机将BALB/c小鼠分为3组,每组10只,即pcDNA-Rv1733c质粒DNA组、生理盐水组和BCG组。pcDNA-Rv1733c质粒DNA组和生理盐水组采用肌内注射方式免疫,间隔2周免疫1次,共免疫3次。BCG组采用皮下免疫一次。各组小鼠每2周采血,ELISA检测血清中特异性抗体水平和IgG2a/IgG1抗体亚类比率与比值。初次免疫8周后,MTS［3-(4,5-diethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-etrazolium,inner salt］（四氮唑蓝盐化合物）法检测小鼠脾淋巴细胞特异性增殖、ELISPOT检测脾淋巴细胞分泌IFN-γ的水平。流式细胞法检测脾淋巴细胞中CD4⁺和CD8⁺ T细胞所占比率;LDH法检测CTL（cytotoxic T lymphocytes;细胞毒性T淋巴细胞）活性。 结果 成功构建Rv1733c的真核表达载体pcDNA-Rv1733c。间接免疫荧光实验表明pcDNA-Rv1733c质粒稳定转染的P815细胞中能够稳定表达Rv1733c蛋白。pcDNA-Rv1733c质粒DNA免疫小鼠后能诱导小鼠产生特异性抗体,抗体亚类以IgG2a为主,随着免疫时间的延长,IgG2a/IgG1的比值趋于平衡;脾淋巴细胞增殖指数（2.00±0.36）高于BCG组（1.1±0.06）（t=3.096,P<0.05）;特异性分泌IFN-γ的脾淋巴细胞频数(41.48±5.30) SFC/10⁶高于生理盐水组（2.75±1.37）SFC/10⁶（t=4.752,P<0.05）;然而脾淋巴细胞中CD4⁺、CD8⁺ T细胞所占比率［分别为(18.15±2.30)%、(7.68±1.34)%］、CTL杀伤活性［(29.52±1.96)%］都与生理盐水组相当［(16.43±2.02)% (t=0.571,P>0.05)、(7.32±0.42)% (t=0.234,P>0.05)、（25.28±2.51）%（t=0.726,P>0.05）］。 结论 成功构建Rv1733c真核表达载体pcDNA-Rv1733c;并能够诱导小鼠机体产生特异性的体液和细胞免疫应答,提示用于结核病新型疫苗的研究具有一定的意义。     

持续低效血液透析滤过对重症急性胰腺炎患者肠黏膜屏障功能及免疫功能的影响

目的 评价持续低效血液透析滤过（SLEDF）对重症急性胰腺炎（SAP）患者肠黏膜屏障功能及免疫功能的影响。方法 将51例SAP患者随机分为持续静脉静脉血液滤过（CVVH）组25例和SLEDF组26例,在常规治疗基础上分别接受CVVH和SLEDF治疗。比较两组患者预后、血、尿淀粉酶恢复正常时间、治疗前和治疗第2、4、8、14d血D-乳酸、内毒素（ET）、二胺氧化酶(DAO)、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞水平、CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值及血液净化相关并发症发生情况。结果 两组患者死亡率、血、尿淀粉酶恢复正常时间比较差异均无统计学意义,血D-乳酸、ET、DAO、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞水平和CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值在治疗前和治疗第2、4、8、14d比较差异均无统计学意义（P>0.05）。两组患者治疗第4、8、14d D 乳酸、ET和DAO水平均较同组治疗前降低,第8、14d均较同组治疗第4d降低（P＜0.05）。两组患者治疗第4、8、14d的CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞水平和CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值均较同组治疗前升高,第8、14d均较同组治疗第4d升高（P＜0.05）;两组患者治疗第4、8d的CD8⁺T淋巴细胞水平较同组治疗前降低,第8、14d较第4d降低（P＜0.05）。结论 SLEDF和CVVH改善SAP患者肠道屏障功能障碍和免疫功能异常的作用相似,其中SLEDF操作方便,医疗费用低,值得临床推广。     

HIV阴性肺结核患者外周血CD4+T淋巴细胞减少的免疫干预意义及影响因素分析

目的: 探讨HIV阴性肺结核患者外周血CD4⁺T淋巴细胞减少的发生率、免疫干预意义和影响因素。 方法: 回顾性分析2020年12月至2021年7月安徽省胸科医院收治的213例肺结核患者,根据外周血CD4⁺T淋巴细胞计数分为CD4⁺T淋巴细胞减少组(计数<410个/μl)和对照组(计数≥410个/μl);将CD4⁺T淋巴细胞减少患者根据是否行免疫干预治疗分为免疫干预组和非免疫干预组。收集研究对象的人口学特征(性别、年龄、职业、文化水平)、吸烟、饮酒、症状数目、治疗分类、合并疾病、耐药情况、影像学及实验室检查结果等临床资料。疗效分析组间比较采用χ²检验。经单因素分析筛选后,采用多因素logistic回归分析探讨HIV阴性肺结核患者外周血CD4⁺T淋巴细胞减少的影响因素。 结果: 213例肺结核患者中,61例发生CD4⁺T淋巴细胞减少,发生率为28.6%。疗效分析显示治疗2~4个月,免疫干预组痰涂片阴性率为93.9%,高于非免疫干预组的75.0%(χ²=4.320,P<0.05)。治疗5~7个月,免疫干预组病灶吸收率为51.5%,高于非免疫干预组的25.0%(χ²=4.462,P<0.05)。单因素分析显示,CD4⁺T淋巴细胞减少组男性、年龄≥60岁、农民职业、文盲文化、症状数目≥4个、并发肺外结核、累及肺野4~6个、肺部空洞、血红蛋白<110g/L、血小板<125×10⁹/L、白蛋白<35g/L、CD8⁺T淋巴细胞计数<190个/μl的构成比(77.0%、44.3%、36.1%、26.2%、36.1%、34.4%、77.0%、55.7%、45.9%、18.0%、68.9%、29.5%)均明显高于对照组(60.5%、11.2%、19.7%、10.5%、19.7%、21.1%、38.2%、40.8%、25.7%、5.3%、44.7%、7.9%),差异均有统计学意义(χ²值分别为5.242、29.060、10.095、13.650、6.290、4.165、26.342、3.929、8.274、8.738、10.137、16.805,P值均<0.05)。多因素logistic回归分析显示,肺结核患者CD4⁺T淋巴细胞减少的危险因素有:年龄≥60岁(OR=4.816,95%CI:1.650~14.052)、病变累及肺野4~6个(OR=3.669,95%CI:1.548~8.696)、血小板<125×10⁹/L(OR=3.753,95%CI:1.069~13.173)、CD8⁺T淋巴细胞计数<190个/μl(OR=3.908,95%CI:1.394~10.954)。 结论: HIV阴性肺结核患者较易发生CD4⁺T淋巴细胞减少,免疫干预治疗对提高患者疗效具有积极意义。高龄、肺部病变累及范围大、血小板减少和CD8⁺T淋巴细胞减少是肺结核患者CD4⁺T淋巴细胞减少的独立危险因素。     

中试生产的结核DNA疫苗免疫效能研究

目的 以300 L发酵罐中试规模生产的冻干Mtb Ag85A质粒DNA疫苗为基础免疫小鼠,对该疫苗的免疫效能进行研究。 方法 将4~6周龄的BALB/c小鼠20只通过数字表法随机分为2组,一组免疫Mtb Ag85A质粒DNA疫苗（结核DNA疫苗免疫组）,另一组免疫PBS作为阴性对照（PBS对照组）;于免疫前采血,肌内注射免疫3次。在第3次免疫后3周摘眼球处死小鼠,收集血清,进行血清特异性抗体检测和细胞因子(IFN-γ、IL-4)检测;同时对每只小鼠取脾细胞进行特异性γ干扰素 (IFN-γ) 分泌检测和脾细胞CD4⁺、CD8⁺百分率检测。 结果 （1）免疫前后免疫组与对照组抗体水平吸光度A值均小于0.2。（2）结核DNA疫苗免疫组血清细胞因子IL-4水平［（146.2±34.3）pg/ml］低于PBS对照组［（177.7±28.1）pg/ml］,差异有统计学意义（t=2.244,P=0.038）,而IFN-γ水平［（129.6±159.0）pg/ml］虽然高于PBS对照组［（76.5±21.5）pg/ml］,但差异无统计学意义（t=－1.047,P=0.309）。（3）酶联免疫斑点检测结果表明结核DNA疫苗免疫组脾细胞特异性IFN-γ分泌水平（分泌IFN-γ细胞个数）（103.60±112.14）高于PBS对照组（5.78±5.83）,差异有统计学意义（t=36.538,P=0.018）。（4）结核DNA疫苗免疫组CD4⁺细胞百分率均值（21.57%）高于PBS对照组（12.17%）,差异有统计学意义（t=3.043,P=0.038）;CD8⁺细胞百分率均值（13.70%）与PBS对照组（10.57%）相比,差异无统计学意义（t=0.847,P=0.445）。 结论 Mtb Ag85A质粒DNA疫苗主要刺激机体Th1型细胞免疫,而对诱导机体产生Th2型细胞免疫应答没有显著的促进作用。     

急性期骨关节型布鲁菌病患者外周血 CD4+T淋巴细胞亚群的表达水平及意义分析

目的 探讨急性期骨关节型布鲁菌病患者外周血CD4⁺T淋巴细胞亚群的表达水平及意义。方法 选取2014年1月至2021年5月期间本院收治的98例布鲁菌病患者为研究对象,分为骨关节型组(n=41)和非骨关节型组(n=57),并选取同期来本院体检的80例健康成人作为对照组。比较三组的外周血CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、Th1、Th2等T淋巴细胞的各亚群水平,计算CD4⁺/CD8⁺、Th1/Th2比值。采用Pearson相关分析来探讨骨关节型组患者WOMAC评分与外周血T淋巴细胞亚群水平的相关性。结果 骨关节型组外周血CD4⁺T淋巴细胞、Th1细胞的比例、CD4⁺/CD8⁺比值、Th1/Th2比值显著高于非骨关节型组,骨关节型组外周血CD4⁺T淋巴细胞、Th1细胞的比例、CD4⁺/CD8⁺比值、Th1/Th2比值显著高于对照组,非骨关节型组外周血...     

Correlation analysis of HRCT image features and CD4 + T lymphocyte level in AIDS patients complicated with thoracic tuberculosis

目的 分析获得性免疫缺陷综合征(AIDS;即“艾滋病”)并发胸部结核患者的高分辨CT(HRCT)征象及其与CD4 ⁺T淋巴细胞计数的相关性。 方法 选取2013年1月至2017年12月于首都医科大学附属北京地坛医院就诊或住院治疗,并经病理及实验室检查证实或临床确诊的AIDS并发胸部结核患者作为研究对象,共计235例。收集研究对象HRCT征象及CD4 ⁺T淋巴细胞计数资料。将研究对象CD4 ⁺T淋巴细胞计数分为Ⅰ、Ⅱ级(Ⅰ级:CD4 ⁺T淋巴细胞计数<100×10 ⁶/L;Ⅱ级:CD4 ⁺T淋巴细胞计数≥100×10 ⁶/L),分析研究对象CT征象与不同免疫水平的相关性。 结果 研究对象继发性肺结核、血行播散性肺结核及纵隔淋巴结结核总的发生率分别为66.8%(157/235)、31.9%(75/235)、63.8%(150/235)。CD4 ⁺T淋巴细胞计数Ⅰ、Ⅱ级研究对象中,纵隔淋巴结结核发生率分别为51.9%(122/235)和11.9%(28/235),差异有统计学意义(χ ²=3.59,P=0.048)。CD4 ⁺T淋巴细胞计数Ⅰ级AIDS并发继发性肺结核患者,HRCT征象中实变影、实变伴空洞、多发空洞的发生率分别为55.4%(87/157)、17.2%(27/157)、10.2%(16/157),均高于CD4 ⁺T淋巴细胞计数Ⅱ级者[分别为13.4%(21/157)、3.8%(6/157)、1.9%(3/157)],差异均有统计学意义(χ ²值分别为6.47、8.22、7.47,P值分别为0.014、0.004、0.045);继发性肺结核发生于上叶前段、右中叶、左舌段的比率[分别为26.1%(41/157)、24.2%(38/157)、27.4%(43/157)] 均高于CD4 ⁺T淋巴细胞计数Ⅱ级者[分别为5.7%(9/157)、3.2%(5/157)、3.8%(6/157)],差异均有统计学意义(χ ²值分别为0.78、5.40、6.79,P值分别为0.037、0.045、0.039)。 结论 AIDS并发胸部结核以继发性肺结核和纵隔淋巴结结核为主,其HRCT征象与CD4 ⁺T淋巴细胞的免疫功能损坏程度有关,CD4 ⁺T淋巴细胞计数越低,胸部HRCT征象越复杂、越不典型。     

结核病人外周血CD_4~+T细胞TLR2的表达

目的研究结核患者与正常人Toll样受体TLR2的表达情况。方法选取肺结核(PTB)患者39例,结核性胸膜炎(TP)患者22例为研究组,38例健康者为对照组。通过流式细胞仪分析TLR2在结核病人中的活化的CD_4~+TT细胞和静息CD_4~+TT中及健康者中的表达,用实时定量PCR检测健康者和结核病人中的TLR2 mRNA的相对含量。结果在活化的CD_4~+TT细胞中TLR2阳性CD_4~+TCD+8T细胞,较静息CD_4~+TT细胞表达较高,TLR2在结核病人中的活化的CD_4~+TT细胞和静息CD_4~+TT中的表达量都明显高于健康者(P0.001,P0.05);在结核病人中TLR2 mRNA相对含量要明显高于健康者(P0.01)。结论对TLR2的测定对于结核病的诊断有一定指导意义,可作为于结核的诊断的辅助手段。     

脂阿拉伯甘露糖抗体检测对AIDS合并肺结核患者的诊断价值

目的 探讨脂阿拉伯甘露糖(lipoarabinomanna,LAM)抗体检测在获得性免疫缺陷综合征(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)合并肺结核患者中的诊断价值.方法 收集我院2013年3月至2016年3月就诊的AIDS感染肺结核患者38例(研究组)及无肺结核的AIDS患者38例(对照组),对两组患者均进行LAM抗体检测及PPD试验,比较两组患者LAM抗体阳性率及PPD阳性率.同时对所有患者行CD4+T淋巴细胞计数.根据CD4+T淋巴细胞计数,将研究组患者进一步分为CD4+T淋巴细胞≥200/μl组和CD4+T淋巴细胞＜200/μl组,比较两组患者LAM抗体阳性率及PPD阳性率.比较LAM抗体检测及PPD试验对AIDS合并肺结核的诊断价值.结果 研究组患者LAM抗体检测阳性率为84.2％,对照组LAM抗体检测阳性率为l0.5％,两组患者比较差异有统计学意义(P＜0.05).研究组患者PPD阳性率为42.1％较对照组(23.7％)高,但差异无统计学意义(P＞0.05).CD4+T淋巴细胞≥200/μl组患者LAM抗体阳性率92.9％,较CD4+T淋巴细胞＜200/μl组(79.2％)高,但差异无统计学意义(P＞0.05).CD4+T淋巴细胞≥200/μl组患者PPD阳性率为92.9％,较CD4+T淋巴细胞＜200/μl组(12.5％)高,且差异有统计学意义(P＜0.05).LAM抗体检测诊断AIDS合并肺结核的敏感度为84.2％,特异度为89.5％,阳性预测值为94.1％、阴性预测值为85.7％、阳性似然比为15.9、阴性似然比为0.17.LAM抗体诊断AIDS合并肺结核阳性似然比＞10,即表示LAM抗体诊断AIDS合并肺结核的可能性显著增加.结论 LAM抗体检测在AIDS患者合并肺结核的诊断中特异度及敏感度高,有利于AIDS合并肺结核患者的诊断.值得临床进一步地推广应用.     

复治肺结核患者外周血中活化(HIA-DR+)和静止(HLA-DR-)T细胞的变化及其意义

目的 探讨结核病尤其足复治肺结核的免疫发病机制.方法 采用流式细胞术对106例复治肺结核患者外周血中活化和静止T细胞及T细胞亚群水平进行检测,并与142例初治和39例非活动性肺结核患者进行比较,同时对22例复治肺结核患者外周血中活化和静止T细胞水平进行随访.结果 外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+ CD4+/CD3+、CD3+ CD8+/CD3+ T细胞水平3组病例间差异无统计学意义.外周血中活化总T细胞以复治组最低,组间差异有统计学意义(P<0.05～0.01).静止总T细胞以复治组最高,与其他两组相比差异有统计学意义(P<0.05).活化CD4+T细胞也以复治组最低,组间差异有显著统计学意义(P<0.01).静止CD4+T细胞以复治组为最高,其与非活动组相比差异有统计学意义(P<0.05).活化CD8+T细胞复治组最低,与非活动组和初治组相比差异有显著统计学意义(P<0.01).各组外周血中静止CD8+T细胞水平无明显差异.22例复治肺结核患者经过抗结核治疗后外周血中活化总T细胞和活化CD4+T细胞水平升高(P<0.05).结论 活化T细胞水平降低伴或不伴静止T细胞水平升高是复治肺结核重要的免疫学特征.也可能是复治肺结核发生与发展的重要原因.     

结核病小鼠T淋巴细胞亚群及其表达的四项细胞因子分析

目的 探讨T淋巴细胞(简称T细胞)表达穿孔素(PFN)、颗粒酶B(GzmB)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)与结核免疫的关系.方法 60只MK小鼠按随机数字表法分成结核病组和健康对照组,每组30只.以CD3PerCP、CD4FTTC、CD8APC单抗标记T细胞亚群,以藻红蛋白标记PFN、GzmB、IFN-γ、IL-2单抗标记细胞因子,以流式细胞仪检测分析总的淋巴细胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD8+;双阳(DP)T细胞计数和各亚群占淋巴细胞百分率,观察各T细胞亚群内表达PFN、GzmB、IFN-γ、IL-2的阳性细胞计数和各自占淋巴细胞百分率.采用t检验进行统计学分析.结果 (1)CD4+CD8+、DP T细胞均能不同程度地表达PFN、GzmB、IFN-γ、IL-2.PFN、GzmB的表达以CD8+T细胞占优势.IFN-γ、IL-2的表达以CD4+T细胞占优势.(2)T细胞亚群细胞计数结果与T细胞亚群占总淋巴细胞百分率结果,所反映的T细胞免疫变化趋势可能相似,也可能不同甚至相反.(3)两组间表达PFN的T细胞差别不明显,但结核病组表达GzmB的各个T细胞亚群计数和CD3+%、CD8+%、DP%高于对照组(t值为-3.72～4.13.均P<0.05).(4)结核病组表达IFN-γ的CD3+、CD4+T细胞计数高于对照组;但结核病组表达IL-2的CD8+、DP T细胞计数和CD3+%、CD4+%、CD8+%、DP%均低于对照组(t值为2.62～3.46,均P<0.05).结论 、CD,4+、CD8+、DPT细胞均能不同程度地表达PFN、GzmB、IFN-γ、IL-2;联合评价T细胞各亚群计数和其占淋巴细胞百分率更能判断免疫学状态.     

肺结核患者IL-15和效应性CD8+T细胞的检测及意义

目的 通过检测肺结核患者IL-15水平及其效应性CD8+T细胞的变化,探讨IL-15在结核病免疫保护和结核病病情进展中的作用.方法 对98例肺结核患者进行血清IL-15水平及效应性CD8+T细胞检测,并结合痰涂片、病变程度等进行分析.结果 肺结核患者初治、复治组IL-15水平及效应性CD8+T细胞的百分比计数均较正常对照组下降(P<0.05或P<0.01),复治组IL-15水平及效应硅CD8+T细胞的百分比计数低于初治组(P值均<0.01);肺结核患者重度组IL-15水平及效应性CD8+T细胞百分比计数明显低于轻、中度组(P值均<0.01).痰菌阳性、痰菌阴性两组间II-15水平及效应性CD8+T细胞百分比计数比较差异无统计学意义.结论 IL-15有望为结核病病情判断、内源性复发的评估提供一个新的指标.     

肺结核患者外周血CD4~+T淋巴细胞凋亡与细胞因子相关性及临床意义研究

目的探讨肺结核患者外周血CD4+T淋巴细胞凋亡与血清IL-4、IL-6、TGF-β的相关性及其临床意义。方法分离结核病患者和健康者外周血单个核细胞,标记后用流式细胞仪测定CD4+T淋巴细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附试验测定42例肺结核患者及28例健康人群血清IL-4、IL-6、TGF-β水平。结果结核病患者外周血CD4+T淋巴细胞凋亡率(15.8820±4.6500)显著高于对照组(7.9389±4.16564)(t=7.491,P<0.01),血清IL-4水平(0.6219±0.78565)较对照组(0.2120±0.07367)显著升高(t=2.732,P<0.05)。肺结核患者中涂阳组IL-6水平(0.0602±0.01833)较涂阴组(0.0905±0.05023)显著升高(t=-2.296,P<0.05),TGF-β水平复治组(0.1128±0.04704)较初治组(0.0748±0.01659)显著升高(t=-3.019,P<0.05)。外周血CD4+T淋巴细胞凋亡率与IL-4水平呈正相关(r=0.366,P<0.05);血清IL-6的含量与TGF-β的含量呈正相关(r=0.829,P<0.01)。结论结核病患者CD4+T淋巴细胞凋亡率显著增加,可能与肺结核感染免疫有关;IL-4、IL-6和TGF-β是抗结核感染免疫的重要调节因子,其血清水平可作为监测病情活动和转归的重要指标。     

Complications in tuberculous patients--with special reference to secondary mixed infections

An attempt was made to elucidate the mechanism which makes pulmonary tuberculosis intractable. Patients with pulmonary tuberculosis were divided into the following two groups; one group consisted of patients (n = 37) in which tubercle bacilli converted to negative within 6 months after the institution of anti-tuberculous chemotherapy and remained negative thereafter, and the other group (n = 21) in which tubercle bacilli persisted in spite of long-term chemotherapy. A comparison was made on serum factors and blood cell components, which were linked with humoral and cellular immunity respectively, between the above two groups of tuberculosis patients. As the result, reductions was observed in the ratio of serum albumin to globulin and increase in erythrocytes sedimentation rate and in amount of immunosuppressive acidic proteins in the chronic bacillary cases as compared with the patients in which negative conversion of bacilli had been achieved. A depressed cellular immunity was also found in the former group of the patients as evidenced with the reduction in a ratio of helper/inducer T lymphocytes to suppressor/cytotoxic T lymphocytes and in intensity of skin reaction to PPD. The depressed humoral and cellular immunity observed in chronic bacillary cases were one of possible causes of intractability of the disease and also the major cause of the frequent involvement with pulmonary infections with pathogens other than tubercle bacilli. At the second part, a problem in treating patients with both lung cancer and pulmonary tuberculosis was discussed, since iatrogenic immunosuppression was induced almost unavoidably by the use of anticancer agents.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Significance of the frequency of CD4+CD25+CD127- T-cells in patients with pulmonary tuberculosis and diabetes mellitus

Background and objective: Pulmonary tuberculosis and diabetes mellitus (DM) are closely associated. The objective of this study was to determine whether the expression of CD4+CD25+CD127? T‐cells (regulatory T‐cells (Treg)) is associated with diabetic pulmonary tuberculosis. Methods: Flow cytometry was used to determine the frequencies of CD4+CD25+ and CD4+CD25+CD127? T‐cells in peripheral blood, bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and pleural effusions from 120 patients (30 with pulmonary tuberculosis and DM (TBDM), 30 with pulmonary tuberculosis without DM (TB), 30 with tuberculous pleurisy without DM (TBP) and 30 healthy volunteers). The concentrations of interferon (IFN)‐γ and interleukin (IL)‐10 in BALF and pleural effusions were determined by enzyme‐linked immunosorbent assay. Results: Treg frequencies in peripheral blood were significantly higher in patients with TBDM, TB and TBP than in the control group, with the frequency in TBDM being the highest (P < 0.01 for all). In TBP patients, Treg frequencies were significantly lower in pleural effusions than in peripheral blood. In TB patients, Treg frequencies in BALF and peripheral blood were not significantly different. However, in TBDM patients, Treg frequencies were significantly higher in BALF than in peripheral blood. IL‐10 expression was significantly higher, and IFN‐γ expression was significantly lower in BALF of TBDM patients compared with BALF and pleural effusions of TB patients. Conclusions: In patients with pulmonary tuberculosis and DM, the imbalance between Treg and effector T‐cells at pathological sites may be associated with weakened immunity and clinical manifestations of TB.     

重症肺结核患者T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子的表达及其预后意义

目的 探讨重症肺结核患者T淋巴细胞亚群、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(TIM-1,TIM-3)的表达及其预后意义。方法 回顾性分析2019年1月至2021年6月在我院收治的1 056例重症肺结核患者为研究对象,并将其定义为重症肺结核组,另选同期在我院进行治疗的1 000名轻症肺结核患者作为轻症肺结核组。比较两组患者TIM-1、TIM-3以及外周血T细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺)水平;检测并比较外周血单个核细胞中TIM-1、TIM-3的mRNA水平;分析重症肺结核患者外周血T细胞亚群、TIM-1、TIM-3与患者预后的关系。结果 重症肺结核组CD8⁺、TIM-1和TIM-3水平均高于轻症肺结核组,CD4⁺水平低于轻症肺结核组(均P<0.001)。重症肺结核组TIM-1 mRNA和TIM-3 mRNA水平均高于轻症肺结核组(均P<0.001)。死亡组CD8⁺、TIM-1和TIM-3水平均高于存活组,CD4⁺水平低于存活组(均P<0.001)。相关性分析发现:存活组患者TIM-1、TIM-3与CD4⁺均呈负相关(r值分别为-0.114和-0.211,P<0.05),而与CD8⁺均呈正相关(r值分别为0.571和0.680,P<0.05)。结论 重症肺结核患者免疫功能紊乱可能与其体内外周血T细胞亚群水平异常以及TIM-1、TIM-3 表达水平升高有关。     

AIDS合并结核病患者HIV RNA定量和CD4+T淋巴细胞计数特点分析

目的 总结AIDS合并结核病的临床特点,进一步提高对AIDS合并结核病的认识.方法 将AIDS合并结核病患者分为肺内结核组、肺内结核并肺外结核组和肺外结核组,比较和分析3组之间HIV RNA定量、CD4+T淋巴细胞计数的差异.结果 肺内结核组的HIV RNA定量明显低于肺内并肺外结核组和肺外结核组(P均＜0.05).肺内结核组的CD4+T淋巴细胞计数明显高于肺内并肺外结核组和肺外结核组(P均＜ 0.05).结论 患者的HIV RNA载量越高、CD4+T淋巴细胞计数越低,免疫功能越差,越易发生肺外结核和肺内并肺外结核,越易导致结核分枝杆菌播散性传播.