海南汉族人群中α和β纤维蛋白原基因核苷酸多态性及其单倍型与缺血性脑卒中的关联分析

目的研究α纤维蛋白原基因的Taq Ⅰ多态性和β纤维蛋白原基因-455G／A、-249C／T、-148 C／T、＋1689T／G、βBsmA ⅠG／C、448G／A、Be／ⅠG／A、Hinf Ⅰ A／C单核苷酸多态性及其单倍型与缺血性脑卒中的关系。方法用比浊法测定160例海南籍缺血性脑卒中和130名海南籍对照个体的血浆纤维蛋白原浓度，用PCR-限制性片段长度多态法确定基因型。用EH＋程序分析核苷酸多态性的连锁不平衡关系及单倍型，用卡方检验分析病例组和对照组的等位基因频率、基因型频率及单倍型频率的差异。结果-455G／A、-148C／T、448G／A多态性的基因型频率、等位基因频率在病例组和对照组之间的差异有统计学意义（P〈0．01），其余6个核苷酸多态性的基因型频率、等位基因频率在病例和对照组间的差异无统计学意义（P〉0．05），A^-455、T^-148、A^448携带者患缺血性脑卒中的相对危险度比非携带者分别大2．46倍、2．30倍和2．08倍。连锁不平衡分析未发现所分析的区域内存在单倍型板块。9个位点构建的单倍型在病例组和对照组之间的差异无统计学意义，以4个位点构建的单倍型中，某些单倍型在病例组和对照组之间的差异有统计学意义，对照组中某些携带G^-455、C^148、G^448位点的单倍型的频率高于病例组，而病例组中某些携带A^-455、T^-148、A^448位点的单倍型的频率高于对照组。结论多个位点和单倍型分析的结果提示8纤维白原455G／A、-148C／T、448G／A可能是海南汉族人群中与缺血性脑卒中关联的危险因素。     

海南汉族、黎族人群纤维蛋白原基因9个核苷酸多态性及单体型的比较研究

目的研究海南汉族、黎族人群体纤维蛋白原基因αTaqⅠ、βBclⅠG/A、βHinfⅠA/C、β448G/A、βBsmAⅠG/C、β 1689T/G、β-148C/T、β-249C/T、β-455G/A9个位点的等位基因频率、连锁不平衡关系及单体型。方法从末梢血提取316名海南汉族个体和182名海南黎族个体的DNA标本,用PCR-RFLP法及测序法分析多态性和确定基因型,用EH 程序分析核苷酸多态性的连锁不平衡关系及单体型,用χ2检验分析人群间的等位基因频率及单体型频率的差异。结果纤维蛋白原基因αTaqⅠ、βBclⅠG/A、βHinfⅠA/C、β448G/A、βBsmAⅠG/C、β 1689T/G、β-148C/T、β-249C/T、β-455G/A的稀有等位基因频率在汉族人群中分别为0·429、0·255、0·128、0·255、0·302、0·267、0·282、0·468、0·274,在黎族人群中分别为0·312、0·363、0·150、0·344、0·328、0·350、0·331、0·626、0·350。海南汉族人群和黎族人群αTaqⅠ、βBclⅠG/A、β448G/A、β 1689T/G、β-249C/T、β-455G/A5个位点的稀有等位基因频率分布存在统计学差异(P<0·01)。黎族人群9个位点两两之间的连锁不平衡的紧密程度比汉族人群高。部分单体型的分布在两个人群之间的分布存在统计学差异。结论海南汉族、黎族人群纤维蛋白原基因的某些多态性及单体型的频率存在差异。     

β-纤维蛋白原基因启动子区单体型与缺血性脑卒中的关联分析

目的研究β-纤维蛋白原(β-Fg)基因启动子区单体型与缺血性脑卒中的关系。方法用比浊法测定160例缺血性脑卒中患者和130例健康对照个体的血浆纤维蛋白原浓度,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)、等位基因特异聚合酶链反应及核苷酸序列测定法分析β- Fg基因启动子区的-1420G/A、-993C/T、-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T单核苷酸多态性(SNPs)和基因型,用EH 程序分析核苷酸多态性的连锁不平衡关系及单体型,用x2检验分析病例组和对照组之间的基因型频率、等位基因频率及单体型频率的差异,用MatInspeetor程序预测序列中的顺式作用元件。结果缺血性脑卒中组-455(GA AA)、-148(CT TT)基因型携带者急性期的血浆Fg水平比-455(GG)、-148(CC)基因型携带者高(P<0．05);脑卒中组与对照组之间的-993C/T、-455G/ A、-148C/T 3个位点的基因型频率和等位基因频率存在显著性差异(p<0．01),由-1420G、-993C、-854G、-455G、-249C、-148C构成的单体型H1在对照组中的频率高于病例组(P<0．05),由-1420A、-993T、-854G、-455A、-249T、-148T构成的单体型H14在病例组中的频率高于对照组(P <0．01);野生型序列存在6个不同于突变型的顺式作用元件,突变型序列出现9个不同于野生型的顺式作用元件。结论海南汉族人群中β-Fg-455G/A、-148C/T多态性与缺血性脑卒中急性期血浆Fg升高相关,单体型H14可能是与缺血性脑卒中相关的危险因素,单体型H1可能是降低缺血性脑卒中发生风险的保护性因素,单体型与缺血性脑卒中的相关性可能是由于顺式作用元件改变所致。     

纤维蛋白原β基因-148C/T多态性与脑梗死的关系

目的探讨纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）β基因启动子区-148C／T多态性、血浆Fg水平与急性动脉粥样硬化性脑梗死的关系。方法用多聚酶链反应．限制性片段长度多态性方法对151例脑梗死患者和101名健康对照进行Fgβ-148C／T基因多态性分析，并应用凝血酶原时间衍生法检测血浆Fg水平。结果脑梗死组血浆Fg水平明显高于对照组（P〈0．01）；T等位基因携带者较CC基因型者血浆Fg水平明显增高（P〈0．01）；按性别分组后差异仍有统计学意义；按年龄段分组后，病例组各组T等位基因携带者较CC基因型者血浆Fg水平增高（P〈0．05）。中年梗死组较中年对照组T等位基因频率的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Fgβ-148C／T基因多态性影响血浆Fg水平，T等位基因可能独立或通过与其它血栓危险因素或环境因素协同作用增高血浆Fg水平，成为脑动脉血栓形成的危险因素。     

纤维蛋白原Bβ链基因多态性与肥胖影响因素的关联分析

目的 研究纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)Bβ链-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bcl-1G/A位点基因多态性与肥胖症的影响因素及血浆Fg含量和聚合功能表达的关系.方法 选取开滦集团离退休职工1391人,依体重指数将其分为体重正常、超重及肥胖组,抽取静脉血测定血生化、血浆Fg浓度和纤维蛋白单体聚合反应速率(fibrin monomer polymerized velocity,FMPV)、最大光密度(Amax)、FMPV/Amax等反映Fg聚合功能的指标,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术进行Bβ链6个位点多态性检测.结果 Fg Bβ6个位点中仅Bcl-1A等位基因和变异基因型在超重组的频率分布明显高于正常体重组(P＜0.01);3组均为Fg Bβ-854变异基因型人群Fg浓度、FMPV、FMPV/Amax显著高于野生型(P＜0.01),超重组Bβ-455变异基因型人群FMPV/Amax以及Bβ-249变异基因型人群FMPV分别高于野生型(P＜0.05).结论 Fg BβBcl-1A等位基因及其变异基因型人群是易发体重超重的高危人群,Bβ-455和-249的变异基因型可通过调控血浆Fg聚合功能的表达而成为发生超重的累效基因.     

白介素等细胞因子与血浆纤维蛋白原浓度和分子活性基因表达的相关性研究

目的:通过分析多种白介素等细胞因子与纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)Bβ链-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bcl-1G/A六个具有代表性位点基因多态性的关系及其对血浆Fg浓度和分子活性系列指标的影响,探讨白介素等细胞因子与血浆Fg浓度和分子活性基因表达的相关性。方法:采用整群抽样的方法选取开滦集团离退休职工1 391人进行体检和问卷调查,抽取静脉血测定血生化及血C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNFα-)和白介素6(IL-6)、IL-8、IL-10,同时测定血浆Fg浓度和纤维蛋白单体聚合反应速率(FMPV)、最大光密度(Amax)、FMPV/Amax等反映Fg分子聚合功能指标,同时应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术进行六位点的基因多态性检测。结果:FgBβ-854位点各基因型人群间IL-6、FM-PV/Amax及Fg浓度差异均有显著性意义(P<0.05);Bcl-1各基因型人群间IL-8有差异性(P<0.05)。多元逐步回归分析,以IL-6和IL-8为因变量时筛选出Bβ-854、-249、Bcl-1、Fg浓度(P<0.05);以IL-10和TNFα-为因变量时则筛选出Bβ448、Bcl-1、FM-PV/Amax(P<0.05);以FMPV/Amax为因变量,依次筛选出Bβ448AA、Bβ-854GA、Fg浓度、IL-10、TNFα-(P<0.05)。结论:血浆Fg浓度和分子聚合功能的基因调控和表达与多种因素和多部位基因位点可能有关,其中血浆Fg浓度与IL-6、IL-8等因子和FgBβ-854、-249及Bcl-1等基因位点可能有关,而Fg分子聚合活性则与TNFα-、IL-10等细胞因子和FgBβ448、Bcl-1等基因位点可能相关联,同时血浆Fg浓度与其分子聚合活性的表达可能交互影响。     

复发性流产与β-纤维蛋白原基因-455G／A多态性关系的研究

目的探讨血浆纤维蛋白原（Fg）及βFg-455G／A基因多态性与山西地区汉族妇女复发性流产的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法，检测复发性流产组30例和对照组30例βFg-455G／A基因的多态性，并测定其血浆纤维蛋白原（Fg）的含量。结果经X2检验，各基因型构成比和等位基因频率在两组间均无显著性差异（P〉0.05）；复发性流产纽血浆Fg水平（2.31±0．57g/L）较对照组（3.08±0．57g/L）显著降低（P〈0．05）。结论本研究发现血浆纤维蛋白原水平降低是复发性流产的危险因素，βFg-455G／A基因多态性不会影响复发性流产血浆纤维蛋白原水平。     

纤维蛋白原Bβ多位点基因多态性与其功能表达和脑梗死类型的关系

目的:研究人体纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)Bβ-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bcl-1G/A的基因多态性与血浆Fg浓度、分子聚合活性等功能表达指标和脑梗死类型的关系。方法:采用病例对照研究,选取2002年7月-2003年6月在开滦医院神经内科住院的急性脑梗死患者160例,其中脑动脉主干支梗死组(MCI)54例、脑动脉穿通支梗死组(PCI)106例,选取同期在开滦医院健康查体且结果均正常的志愿者160例为对照组,测定所有样本的血浆Fg浓度、纤维蛋白单体聚合反应速率(FMPV)、最大吸光度(Amax)及其比值(FMPV/Amax)等反映Fg分子聚合功能参数和甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL)等血液生化指标,应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术进行FgBβ链六位点的基因多态性检测。结果:MCI组Fg浓度、FMPV、FMPV/Amax及PCI组TG、VLDL、FMPV均高于对照组(P0.05);FgBβ-854 A和Bcl-1 A等位基因在三组间分布频率有统计学差异,且MCI和PCI组的GA、AA型分布频率高于对照组(P0.05),其余位点等位基因及基因型分布在三组间均无显著性差异(P0.05);MCI组FgBβ-249T携带者人群Fg、FMPV低于CC型(P0.05);PCI组-148T携带者人群FMPV/Amax高于CC型(P0.05);对照组Bcl-1A携带者人群Fg浓度高于GG型(P0.05),而PCI组此人群则FMPV高于GG型(P0.05)。结论:FgBβ链5’端启动子区-249多态性位点可影响血浆FMPV功能的表达,-148位点是调控血浆Fg分子聚合功能表达的重要部位;3’端Bcl-1是血浆Fg浓度的重要基因调控位点,其变异基因型人群是MCI的遗传易感人群;血浆Fg浓度、FMPV/Amax和FMPV同时异常是MCI的重要危险因素,而仅FMPV和TG异常则易发PCI。     

血压对多态性纤维蛋白原Bβ链基因功能表达的影响

目的:研究血压对多态性血浆纤维蛋白原(Fg)Bβ链-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bc l-1G/A基因功能表达的影响。方法:选取开滦集团离退休职工1 391人进行体检和问卷调查,受检者清晨抽取静脉血标本测定血浆Fg浓度和纤维蛋白单体聚合反应速率(FMPV)、最大吸光度(Am ax)、FMPV/Am ax等反映Fg聚合功能的指标,然后立即测定血压;应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测Fg Bβ链6个多态性位点的基因型。结果:高血压状态组(HG)与正常血压组(NG)组间6个基因多态性位点等位基因及各基因型的频率分布均无显著差异(P0.05)。HG与NG的Fg浓度、FMPV/Am ax无显著差异(P0.05),但HG的FMPV、Am ax低于NG(P0.05),HG和NG的Bβ-854位点变异基因型组Fg浓度、FMPV、Am ax、FMPV/Am ax均高于野生型(P0.05),且NG的Bc l-1位点变异基因型的Fg浓度、FMPV高于野生型(P0.05),但HG的Bβ-854和Bc l-1变异基因型组的Fg、FMPV、Am ax均低于NG(P0.05)。结论:Fg Bβ-854基因位点是调控Fg功能表达的重要部位,Bc l-1的变异基因型可使血浆Fg浓度和FMPV升高;高血压状态可以明显抑制这种调控作用,并损伤纤维蛋白单体聚合成二聚体的过程,从而导致特殊类型的凝血功能障碍。     

纤维蛋白原Bβ-455G/A、-854G/A基因多态性和功能表达与脑梗死的关系

目的:探讨血浆纤维蛋白原(Fg)Bβ-455G/A、-854G/A基因多态性和Fg浓度、分子活性等功能表达与脑梗死(CI)的关系.方法:采用病例对照研究方法,选取160例首发急性CI患者、114例陈旧CI患者及162例正常对照者;应用聚合酶链反应-限制性酶切法(PCR-RFLP)进行基因多态性分析;并测定血浆Fg浓度、Fg单体聚合反应速率(FMPV)、最大光密度(Amax)、FMPV/Amax等参数及血糖等5项生化指标.结果:Bβ-455等位基因和基因型分布频率在三组间无统计学差异(P＞0.05);Bβ-854等位基因A在急性CI组分布频率明显高于正常组(P＜0.01),其变异型分布频率高于正常组(P＜0.05);FMPV在急性CI组和陈旧CI组明显高于正常组(P＜0.01),FMPV/Amax、Fg浓度在陈旧CI组高于正常组(P＜0.01, P＜0.05);三组中Fg浓度、FMPV、Amax及FMPV/Amax与Bβ-455基因型无相关性;陈旧CI中Bβ-854变异型组Fg浓度、FMPV及Amax明显高于野生型组(P＜0.01);以Fg浓度、FMPV、Amax为因变量的多元逐步回归分析均筛选出Bβ-854基因型.结论:FgBβ-455基因多态性对血浆Fg浓度和分子聚合活性的表达没有明显的影响,Bβ-854位点基因多态性可能参与调控血浆Fg浓度和血浆纤维蛋白单体总体聚合功能的表达,但对血浆Fg分子聚合活性表达没有明显的影响,且Bβ-854变异型人群可能是脑梗死疾病的遗传易感人群,有脑梗死病史患者的血浆Fg浓度和分子聚合功能增高程度可能比急性期患者更严重.     

纤维蛋白原Bβ基因启动区单核苷酸多态性及连锁不平衡分析

目的　探讨纤维蛋白原 B(fibrinogen,FGB)基因启动区 - 14 8C/ T、- 4 5 5 G/ A、- 85 4 G/ A3个位点单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism,SNP)在中国南方汉族人群的分布特征及连锁不平衡关系。方法　应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性技术结合 DNA测序分析检测 377名中国南方汉族人 FGBβ基因型和等位基因的分布频率 ,群体数理遗传学方法分析 FGBβ 3个基因位点 SNP的遗传平衡吻合度和相互间连锁不平衡关系。结果　 3个 FGBβ SNP位点等位基因频率分布符合 Hardy-Weinberg平衡。检出了 FGBβ3个位点 SNP的共 9种基因型 ,- 14 8CC、CT、TT基因型频率分别为0 .5 97、0 .35 8和 0 .0 4 5 ;- 4 5 5 G/ A SNP各基因型频率与 - 14 8C/ T SNP相同 ;- 85 4 GG、GA、AA基因型频率分别为 0 .82 0、0 .178和 0 .0 0 2。各 SNP位点的少见型等位基因频率分别是 0 .2 2 4 (- 14 8T)、0 .2 2 4 (-4 5 5 A)、0 .0 92 (- 85 4 A) ;常见型等位基因频率分别为 0 .776 (- 14 8C)、0 .776 (- 4 5 5 G)、0 .90 8(- 85 4 G)。男女性别间各基因型和等位基因分布频率差异无显著性 (P>0 .0 5 )。经连锁不平衡检验 ,- 14 8C与 - 4 5 5 GSNP为完全一致型 ,- 85 4 G/ A与 - 14 8C/ T、- 4 5 5 G/ A为随机分布。结     

纤维蛋白原及相关基因多态性与脑梗塞类型的关系

目的 研究纤维蛋白原（fibrinogen，Vg）浓度、分子聚合功能及FgBβ—148、448基因多态性与脑梗塞类型的关系。方法 采用病例对照研究，应用聚合酶链反应-限制性酶切法进行基因多态性分析，并测定血浆Fg浓度及其分子聚合功能参数。结果 FgBβ-148变异基因型人群脑动脉主干支梗塞组血浆Fg浓度高于脑动脉穿通支梗塞组及对照组；448变异基因人群脑动脉主干支梗塞组Fg浓度、纤维蛋白单体聚合速率／最大吸光度、纤维蛋白单体聚合速率高于对照组，Fg浓度高于脑动脉穿通支梗塞组。结论 FgBβ-148、448基因型发生变异后可通过影响Fg浓度而使此人群发生脑动脉主干支梗塞组的危险性升高。     

The association of combined alpha and beta fibrinogen genotype on plasma fibrinogen levels in smokers and non-smokers.

OBJECTIVE--To determine in healthy men: (1) whether an extended genotype of the fibrinogen gene cluster using the G/A-455 and the BclI polymorphism of the beta fibrinogen gene and TaqI of the alpha fibrinogen gene explains a significantly larger proportion of variance in plasma fibrinogen levels in either smokers or non-smokers than a single polymorphism (G/A-455); (2) whether there is any evidence for genotype-smoking interaction in the determination of fibrinogen levels. DESIGN--A cross sectional study of healthy, white men recruited at the screening for entry into the Thrombosis Prevention Trial. SETTING--The subjects were drawn from four general practices in the United Kingdom. RESULTS--The frequency of the rare alleles in the sample was 0.19 for the G/A-455 polymorphism (A-455), 0.15 for BclI (B+), and 0.27 for TaqI (T+) alleles. BMI and age made significant contributions to the variance in plasma fibrinogen levels only in non-smokers of 5.4% and 2.3% respectively and, in the group as a whole, smoking accounted for 6.6% of the variance. In the non-smokers, of the individual polymorphisms only the G/A-455 showed a significant association with plasma fibrinogen levels (p = 0.03). The mean fibrinogen in non-smokers homozygous for the G-455 allele was 2.54 g/l v 2.85 g/l in those homozygous for the A-455 allele, with the polymorphism explaining 3.6% of the variance in plasma fibrinogen levels in this group. On investigation of the association of fibrinogen levels with combined genotypes, the most significant effect was seen with the combination of the G/A-455 and TaqI polymorphisms, with those with no "fibrinogen raising alleles" having a mean fibrinogen of 2.57 g/l v 3.10 g/l for those with four "fibrinogen raising alleles" (p = 0.0036), and this combination explained 8.9% of the variance in plasma fibrinogen levels (p < 0.005). Although the contribution to variance was greater with the G/A-455/TaqI combination than the G/A-455 polymorphism alone (8.9% v 3.6%), this did not reach significance (p = 0.09). By contrast, in the smoking group, the only significant contribution to the difference in plasma fibrinogen levels was the G/A-455 genotype alone which, after adjustment for BMI and age, contributed 3.8% to the variance (p < 0.05). No interaction was shown between smoking and genotype. CONCLUSION--These data suggest that in non-smokers an extended genotype using the G/A-455 beta fibrinogen gene polymorphism and the TaqI alpha fibrinogen gene polymorphism explains a larger proportion of the variance in plasma fibrinogen levels than any one polymorphism alone, but that smoking has an overriding effect so that other variables such as age and BMI make little additional contribution.     

纤维蛋白原Bβ多态基因FGB-455G/A多态性与动脉粥样硬化性脑梗塞的关系

目的　探讨纤维蛋白原 (fibrinogen ,FGB )Bβ多态基因FGB 45 5G/A多态性在中国汉族人群中的分布及其与动脉粥样硬化性脑梗塞 (atheroscleroticcerebralinfarction ,ACI)的关系。方法　应用聚合酶链反应和限制性内切酶片段长度多态性技术检测了 13 2例ACI患者和 14 8名年龄、性别相匹配的正常对照者的Bβ基因FGB -4 5 5G/A多态性 ,比浊法测定血浆纤维蛋白原水平。 结果　血浆纤维蛋白原水平在ACI组显著高于正常对照组 (P <0 .0 0 1)。各组内A等位基因携带者血浆纤维蛋白原水平显著高于GG基因型者 ,且更易受吸烟等环境因素影响。Bβ基因FGB -4 5 5G/A多态性分布在患病组和对照组均符合Hardy Weinberg平衡定律。A等位基因频率在ACI组 ( 0 .2 5 8)显著高于正常对照组 ( 0 .15 2 ) (P <0 0 5 )。Logistic回归分析发现 ,存在此突变位点者发生ACI的危险提高了 65 .3 %。结论　Bβ基因FGB -4 5 5G/A多态性中的A等位基因可能是中国人缺血性脑血管疾病的遗传易感标志之一。     

FgBβ1689T/G、I6I/D、345C/T、HinfIA/C基因多态性及其单体型与Fg功能表达和脑梗死的关系

目的分析FgBβ1689T/G、I6I/D、345C/T和HinfIA/C多态性位点的单体型人群分布特征和脑梗死疾病的关系及其对血浆Fg浓度和分子活性等功能表达的影响。方法选取开滦集团职工1 021人,均留取清晨空腹静脉血测定血糖、尿酸等生化指标及Fg浓度、FMPV/Amax等反映Fg分子聚合功能的指标,并进行基因型。结果 4个多态性位点的等位基因、基因型及其H1、H4、H5、H7单体型的频率在有和无脑梗死组之间无差异性(P>0.05)。以有无脑梗死为因变量的Logistic回归分析显示,性别、饮酒史、口服阿司匹林、高血压病、DBP、BMI、GLU是脑梗死的影响因素。结论 4个多态性位点及其常见单体型均与脑梗死及血浆Fg浓度和分子功能的表达没有明显的直接联系,但阿司匹林可以与H5单体型相互作用,而降低血浆Fg浓度及其分子活性的功能表达。