维生素C对柯萨奇B_3病毒感染的心肌细胞的保护作用研究

观察维生素Ｃ对柯萨奇Ｂ３（ＣＶＢ３）病毒的复制和对病毒感染心肌细胞的影响，结果表明：维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）对ＣＶＢ３感染的心肌细胞具有保护作用，加ＶｉｔＣ培养２４ｈ后，随时间延长，保护作用越来越明显（Ｐ＜０．０５）；实验结果还表明：ＶｉｔＣ在细胞外并无直接灭活病毒作用，而是作用于细胞，影响病毒的复制，从而使心肌细胞得到保护。     

IL-18对感染柯萨奇B3病毒乳鼠心肌细胞的保护作用

目的　研究IL- 18抗柯萨奇B3 病毒(Coxsackie B3 virus, CVB3) 的作用。方法　将心肌细胞分为4 组。感染组: 用CVB3感染心肌细胞; 干预组: 心肌细胞感染病毒后加入IL- 18 (4~30 ng/ml); IL -18 组: 正常心肌细胞加入IL- 18 (8 ng/ml); 对照组: 正常心肌细胞。观察培养心肌细胞病变(CPE) 及心肌酶谱乳酸脱氢酶(LDH) 和磷酸肌酸激酶(CK) 的变化。并进行IL 18最大无毒剂量实验。结果　感染组感染病毒后第2、5 天心肌细胞病变程度较其余3组明显, LDH和CK浓度明显升高, 与其余3 组比较差异有极显著性意义(P<0 .01)。IL -18 浓度≥40ng/ml对正常心肌细胞有毒性作用; 在4~20 ng/ml范围内对感染心肌细胞具有保护作用。结论　IL- 18 可以抑制CVB3对心肌细胞的损伤, 对CVB3感染的心肌细胞有保护作用。     

黄芪皂甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的治疗作用

目的:探讨黄芪皂甙对BALB/c小鼠柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎的治疗作用。方法:雄性BALB/c小鼠腹腔接种CVB3,制成急性病毒性心肌炎模型,接种1 h后腹腔内注入黄芪皂甙5.64×10-3 mg/g,1次/d ×7 d,观测小鼠存活率、血浆乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(GOT)、体温、心肌病理变化和心肌病毒滴度的影响。结果:黄芪皂甙治疗组比病毒感染组存活率明显增高,血浆LDH和GOT明显降低,体温保持正常,心脏质量/体质量值显著降低,心肌病理变化减轻,心肌匀浆病毒滴度降低(P＜0.05)。结论:黄芪皂甙有治疗病毒性心肌炎的作用。     

红芪提取物(HE)对亲心肌柯萨奇B_3病毒(CVB_(3m))感染的作用初探

体外试验表明HE具有明显抑制CVB_(3m)繁殖和保护病毒感染细胞的作用。体内试验表明HE对CVB_(3m)感染小鼠具有减缓死亡、延长存活时间、保护其不得心肌炎或减轻心肌炎病变的作用。提示HE在控制病毒感染中起重要作用。     

牛磺酸对培养大鼠心肌细胞感染柯萨奇B_3病毒的影响

[目的 ]探讨牛磺酸对由柯萨奇B3 病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 ,为该药的临床应用提供理论依据 .[方法 ]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种10 3TCID5 0的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]牛磺酸明显减轻感染柯萨奇B3 病毒心肌细胞的病变 ,使细胞搏动增强 ;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性 ,降低乳酸脱氢酶活性 ;抑制心肌细胞感染柯萨奇B3 病毒后导致的乳酸脱氢酶和谷草转氨酶释放 .牛磺酸提高正常心肌细胞和感染柯萨奇B3 病毒的心肌细胞存活率 ,其作用具有剂量依赖性 .[结论 ]牛磺酸对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠搏动心肌细胞具有一定的抗病毒和保护心肌细胞的作用     

薄芝醇提取物(GE)抗亲心肌柯萨奇B_3病毒(CVB_(3m))感染的作用初探

体外试验表明GE具有明显抑制CVB_(3m)繁殖和保护病毒感染细胞的作用。体内试验表明GE对CVB_(3m)感染小鼠具有减缓死亡、延长存活时间、保护其不得心肌炎或减轻心肌炎病变的作用。提示GE在控制病毒感染中起重要作用。     

贯众水提取液对感染柯萨奇B_3病毒的培养大鼠心肌细胞的影响

[目的 ]探讨贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 .[方法 ]实验取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种 10 3 TCID50 的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]贯众水提取液和炙甘草汤的同时加药组和 1h后加药组大鼠心肌细胞释放的乳酸脱氢酶和天冬氨酸转氨酶活性明显降低 ,感染 12h后加药组效果明显减弱 ,而 2 4h后加药组则无效 .[结论 ]贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有抗病毒和保护作用 ,应早期应用     

牛磺酸对增减大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒的影响

目的 探讨牛磺酸对由柯萨奇Ｂ３病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用,为该药的临床应用提供理论依据。方法 取新生ＳＤ大鼠的乳鼠心室肌肌制备博动心肌细胞,培养４８ｈ后接种１０＾３ＴＣＩＤ５０的柯萨奇Ｂ３病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。结果牛磺酸明显减轻感染柯萨奇Ｂ３病毒心肌细胞的病变,使细胞博动增强;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性;抑制心肌细胞感染柯萨奇Ｂ３病毒后导致的乳酸脱     

黄芪对柯萨奇病毒B3感染小鼠心肌线粒体结构及离子泵活性的影响

目的 :观察柯萨奇病毒B3 (CVB3 )感染小鼠心肌线粒体结构和离子泵活性的变化 ,以及黄芪的治疗作用。方法 :雄性Balb/c小鼠随机分为CVB3 感染组、CVB3 感染加黄芪治疗组和对照组 ,比较线粒体超微结构及线粒体Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶活性。结果 :感染组线粒体结构破坏 ,Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶活性下降。黄芪治疗组线粒体结构破坏较轻 ,Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶活性较感染组高。结论 :CVB3 感染早期即可见心肌线粒体结构破坏 ,离子泵活性下降。黄芪可提高离子泵活性 ,稳定心肌线粒体膜     

水飞蓟宾对培养心肌细胞感染CoxSackie B5病毒的保护作用

本文介绍用微孔培养板取代培养瓶培养新生大鼠心肌细胞,并用400 TCI_(50) 0.05 ml/孔CoxsackieB_5病毒感染心肌细胞.在感染后1,6、24及36h分别加入水飞蓟宾,观察到用水飞蓟宾后培养液中LDH、GOT均低于病毒对照组,感染后DNA合成率明显高于病毒对照组,以及96 h受感染细胞培养液中病毒滴度(Lg 3.95 TCID_(50))明显低于病毒对照组(Lg 6.95 TCID_(50)).本实验结果提示水飞蓟宾对Coxsackie B_5病毒感染培养的心肌细胞有明显保护作用,尤其是在感染后1～6 h给药,效果更好。     

病毒性心肌炎细胞感染模型的建立

目的 建立病毒性心肌炎细胞感染模型。方法 以柯萨奇Ｂ３ｍ病毒感染新生ＳＤ大鼠的培养心肌细胞,观察感染后细胞病变、搏动情况及超微结构的变化,检测培养液中心肌酶的改变,测定ＤＮＡ含量。结果 培养的ＳＤ大鼠搏动心肌细胞感染柯萨奇Ｂ３ｍ病毒后,逐步出现细胞病变,细胞停止搏动,电镜下可国胞线粒体肿胀,肌原纤维紊乱,Ｚ线模糊,髓质体增多,细胞周期分析显示细胞受阻于Ｇ１期。结论 该模型可作为体外研究病毒性心肌炎     

黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的研究

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外黄芪诱导分化为神经元样细胞.方法 通过密度梯度离心从大鼠骨髓中分离有核细胞进行培养,观察细胞的形态和生长情况,分离纯化,传代扩增.采用含黄芪的无血清L-DMEM诱导分化为神经元样细胞,观察细胞形态变化,以免疫组织化学染色方法检测分化细胞中巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.用RT-PCR方法半定量分析相关基因neurogenin-1(Ngn-1)和Wnt-1基因在诱导过程中的表达.结果 经传代后,骨髓间充质干细胞呈纤维细胞样,有较强的增殖能力.经黄芪诱导后,细胞形态发生改变,nestin、NSE和GFAP表达阳性,分化为神经元或胶质细胞样细胞.Ngn-1和Wnt-1基因在黄芪诱导后明显上调.结论 大鼠骨髓间充质干细胞可以体外分离、培养,并在黄芪诱导下向神经元样细胞分化.Ngn-1和Wnt-1基因在其分化过程中起正调控作用.     

复方中药心复康抗柯萨奇B组3型病毒的实验研究

本文采用组织培养法和染料摄入法，观察研究了复方中药制剂心复康对ＨｅＬａ细胞生长以及对柯萨奇Ｂ组３型病毒（ＣＢＶ３）增殖的影响。结果表明，高浓度心复康（稀释度＜１：４）对ＨｅＬａ细胞生长有毒性作用，中低浓度（稀释度＞１：８）对细胞生长无毒性作用，１：６４稀释时似具有促进细胞生长作用。中浓度心复康对ＣＢＶ３增殖有明显抑制作用。比较心复康作用细胞和病毒的不同环节，提示心复康除具有保护细胞减轻病毒感染功能     

黄芪注射液对大鼠精原干细胞增殖作用的影响

目的：研究黄芪注射液对体外培养的精原干细胞增殖过程中所起的调控作用;建立完善的精原干细胞体外培养体系,为精原干细胞的体外大量扩增提供技术和方法,为治疗男性不育等提供相关技术.方法：选用9日龄的SD大鼠睾丸,应用不连续Percoll梯度液分离纯化精原干细胞,并应用选择性贴壁法进一步纯化精原干细胞;细胞计数法研究不同浓度（0、5、10、20、50、100 g/L）黄芪注射液对精原干细胞增殖的效应;MTT法研究不同浓度黄芪注射液对精原干细胞增殖的效应.结果：细胞计数法结果显示,与对照组相比,黄芪注射液对精原干细胞有增殖作用（P﹤0.01）.MTT结果也显示实验组比对照组细胞数量均显著增多（P﹤0.01）.结论：黄芪注射液能够促进精原干细胞的增殖.     

血清培养对大鼠精原干细胞生长周期的影响

目的探讨血清培养对大鼠精原干细胞生长周期的影响。方法采用percoll分离及差速贴壁法纯化精原干细胞.抗端粒酶逆转录酶免疫组化进行鉴定，用流式细胞仪对细胞生长周期进行判断。结果在有血清的培养基中培养的精原干细胞，其OD值逐渐升高（P〈0．05）；精原干细胞DNA合成期（S期）含量的增多。结论抗端粒酶逆转录酶免疫组化可作为鉴定精原干细胞提供较为充分的依据；血清能促进精原干细胞的体外增殖。     

柯萨奇B3病毒mAb对心肌细胞形态及多种酶代谢的影响

目的 通过心肌细胞形态学及培养液中多种酶的变化，探讨柯萨奇B3病毒mAb对体外培养心肌细胞的作用。方法 应用间接免疫荧光法将培养小池中用冷丙酮固定的心肌细胞与自备的26种柯萨奇B3病毒mAb(CVB3-mAb)进行反应；并筛选出2种与大鼠心肌细胞结合的阳性mAb(2A3,2G12)，进一步与体外培养搏动的大鼠心肌细胞作用，观察mAb-大鼠心肌细胞培养液中心肌酶的改变，搏动百分比及细胞病变。结果 荧光显微镜下观察，有12本可与大鼠心肌细胞纤维结合，而另外14种无此结合反应。筛选出的2种CVB3－mAb加入搏动的大鼠心肌细胞中，取其不同时间细胞培养液检测。与对照组比较，心肌细胞培养液中心肌酶（CK，CK－MB，LDH，LDH－1，HBDH）及肌钙蛋白I（cTnI)等均增高（P＜0．05），并可引起心肌细胞形态改变。结论 部分病毒抗体可引起心肌细胞形态学及培养液中多种酶的改变，是引起心肌细胞进行性损伤的重要原因。     

黄芪注射液对培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的保护作用

目的研究黄芪注射液抗培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的作用。方法采用培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧复氧模型,实验分为六组:A正常对照组,B缺氧组,C黄芪20组,D黄芪100组,E黄芪200组,F黄芪400组。黄芪各组缺氧过程中给予不同浓度黄芪,缺氧4 h,复氧2 h。比较缺氧复氧前后心肌细胞存活率,培养液中心肌酶含量。结果各组缺氧前后谷草转氨酶(GOT)均有差异。复氧后2 h,B、C、D组培养液中心肌酶含量均有不同程度升高(P<0.05)。E、F组GOT值较基础值降低(P<0.05)。与正常组比较,各组细胞经过缺氧复氧后,存活数均有不同程度下降(P<0.01)。与缺氧复氧组比较,加入黄芪保护的黄芪20,黄芪100,黄芪200组均优于单纯缺氧复氧组。黄芪200组存活率最高(P<0.01)。结论黄芪能够减轻培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤。     

大蒜多糖对病毒性心肌炎小鼠心肌酶的影响

目的 探讨大蒜多糖对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌酶的影响。方法 采用BALB/C小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型组、大蒜多糖I组、大蒜多糖Ⅱ组、大蒜多糖Ⅲ组和黄芪组。注射病毒1小时后给药，连续7天，于第8天处死存活鼠取材。观察小鼠存活率及心肌病理变化，测定血清心肌酶及心肌组织中的病毒滴度。结果 大蒜多糖治疗组与模型组相比小鼠存活率明显增高，心肌组织病理损伤减轻，血清心肌酶含量和心肌组织中病毒滴度明显降低。结论 大蒜多糖对实验性小鼠病毒性心肌炎具有治疗作用。