尿中多胺的毛细管电泳激光诱导荧光测定法

目的：建立高效毛细管区带电泳(CZE)激光诱导荧光(LIF)测定人尿中多胺(POL)的新方法。方法：样品用5mmoL／L的HClO4分离蛋白，样品中多胺与异硫氰酸荧光素(FITC)完成衍生反应后，用四甲基乙二胺(TEMED)作内标，在15mmol／L的硼酸盐缓冲液(pH8．5)中，运用毛细管区带电泳进行色谱分离，以激光诱导荧光测定法测定多胺。结果：多胺测定在10-200μg／L范围内具有良好的线性关系(r=0．996)，最低检测限为16μg/L，日内变异系数(CV)3.51％-4．61％，日间变异系数(CV)3．74％-4．83％，方法平均回收率为96.00％-99．33％．结论：本方法简便、快速、定量可靠，可用于临床实验室测定人尿中多胺水平。     

毛细管区带电泳测定尿17-羟皮质类固醇

目的 :应用高效毛细管区带电泳 (CZE)技术分离和检测人尿内 1 7-羟类皮质类固醇 (1 7-OHCS) ,以解决微色谱柱 -分光光度测定尿 1 7-OHCS时 ,多酚类化合物对测定的干扰。方法 :标本用活性高岭土吸附尿内色素 ,以茶碱作内标 ,中性苯乙烯 -二乙烯苯树脂微色谱柱吸附尿中 1 7-OHCS。乙醇解吸附 ,采用毛细管区带电泳进一步分离并测定。结果 :运用CZE法分离了人尿 1 7-OHCS ,皮质醇浓度在 2～ 5 0mg .L- 1 范围内具有良好的线性关系 (r=0 .994) ,方法平均回收率 96 .1 7% ,日内及日间CV均小于 5 % ,最低检测限度为 0 .3mg .L- 1 。结论 :与微色谱柱 -分光光度法相比 ,CZE法检测尿内 1 7-OHCS无干扰 ,方法简便、快速、可靠。     

毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置的研制及应用

目的　自行组建高效毛细管电泳 -激光诱导荧光分析装置。方法　以波长 5 4 3.5 nm He- Ne激光为激发光源 ,滤色片 -单色仪分光 ,光电倍增管检测 ,用计算机采集和处理电泳图谱。结果　优化了毛细管电泳 -激光诱导荧光检测装置的设计和分析参数 ,用该装置获得了高信噪比毛细管电泳谱。对罗丹明类荧光试剂 (Sulforhdam ineB)溶液的检出限为 10 - 9m ol/ L,线性范围为 1× 10 - 6～ 1× 10 - 9mol/ L。采用该装置检测了分枝杆菌 DNA的 PCR扩增产物、酶切产物以及人血清白蛋白。结论　所组建的高效毛细管电泳 -激光诱导荧光分析装置结构合理 ,灵敏度高 ,成本低、光路校准方便 ,分离效能明显高于常规琼脂糖电泳 ,能作为研究生物样品中 DNA片段和蛋白质含量的有效检测手段。     

羟丙基β环糊精毛细管电泳法测定1,2-二苯基乙二醇的对映体过量值

目的:建立毛细管电泳法(CE)测定(E)-1,2-二苯乙烯不对称二羟化反应产物1,2-二苯基乙二醇对映体过量(e.e.%)值的新方法.方法:以HP-β-CD为手性选择剂,采用毛细管区带电泳法研究背景电解质浓度、pH值、环糊精浓度、分离电压、温度等参数对1,2-二苯基乙二醇对映体分离的影响,同时对该合成样品进行光学纯度检查,并与HPLC测定结果作比较.结果:在200 mmol/L硼酸缓冲液(pH=9.8),15 mmol/L HP-β-CD,15 kV分离电压、柱温20℃的基本优化条件下,1,2-二苯基乙二醇对映体得到基线分离,Rs达到3.35.同时,该合成样品分析结果表明,4批样品的e.e.%测定值与HPLC法结果相一致.结论:该CE方法简单、准确,可用于该1,2-二苯基乙二醇的手性拆分和e.e.%值的测定.     

血清低密度脂蛋白胆固醇电泳法测定及临床应用

目的 :对一种新型的琼脂糖凝胶电泳加胆固醇酶染色法定量分析低密度脂蛋白胆固醇 (L DL C)含量的方法进行评价 ,并探讨了与临床常用 L DL C均相测定法的相关性。方法 :采用 Helena REP全自动快速电泳系统分离血清 L DL C,然后结合胆固醇酶染色法测定 L DL C的含量 ,分析该法的精密度、准确度和干扰因素及正常参考范围 ,并将该法与临床常用的 L DL C均相测定法进行比较。结果 :电泳法测定 L DL C的批内 CV为 3.1%～ 4 .5 %、批间 CV为3.7%～ 5 .4 % ,检测线性范围为 0 .85 mm ol/ L～ 10 .10 mmol/ L,该法基本不受黄疸、溶血干扰 ,L DL C的回收率 93.7%～ 95 .5 %。电泳法 (X)与 L DL C均相测定法 (Y)测 L DL C的回归方程为 Y=0 .988X+0 .2 0 6 (Y=0 .989) ,参考范围为 1.6 8mmol/ L～ 2 .97mmol/ L。结论 :电泳法测定 L DL C的值与临床常用 L DL C均相测定法相关 ,电泳法能完全地分离出 L DL C带 ,克服均相测定时非低密度脂蛋白的胆固醇反应引起的误差 ,并能同时分离测定 VL DL- C、L DL- C、HDL- C和 L p(a) - C,操作简便 ,给临床提供快速准确的实验数据     

四倍体板蓝根中五种有机酸成分的毛细管电泳分离分析

选择毛细管区带电泳分离模式 ,以肉桂酸为内标建立了适合板蓝根药材中抗内毒素活性成分五种有机酸优化分离与定量分析的毛细管电泳方法。电泳分离条件 :毛细管 4 0 cm× 50 μm,运行缓冲液 p H9.5磷酸二氢钠 -硼砂 ( 50 mmol/L∶ 1 2 .5mmol/L,内含 1 6mmol/Lβ-CD) ,压力进样 2 0 psi× s,操作电压 1 8k V ( )→( -) ,柱上在线检测 UV2 0 0 nm,毛细管柱温 2 5℃     

儿茶酚胺和二羟苯乙酸的区带毛细管电泳测定法

目的　建立儿茶酚胺和二羟苯乙酸 (Dopac)的毛细管电泳检测方法。　方法　区带毛细管电泳测定儿茶酚胺和 Dopac分离缓冲液为含 5 7mm ol/ L Na H2 PO4,0 .2 m mol/ L EDTA,1.2 mmol/ L HSA和 8%甲醇的缓冲溶液 p H =3.2 ,紫外检测波长为 2 0 0 nm。　结果　儿茶酚胺和 Dopac的分离效果和重现性良好 ,灵敏度可达 5× 10 - 9g/ ml,在 0 .0 1～ 0 .32 μg/ m l浓度范围线性关系好。　结论　本方法用于儿茶酚胺和 Dopac的分析具有快速、简便、耗材少的优点。     

毛细管电泳与微流控芯片电泳快速检测粪便中腺病毒的方法建立

目的 建立粪便中腺病毒的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光快速检测方法。方法 采用试剂盒法提取粪便中腺病毒DNA,选择腺病毒六邻体基因保守区域进行PCR扩增反应。PCR产物分别用高灵敏度的SYBR Gold和SYBR Orange核酸荧光染料进行标记,在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下分离,采用激光诱导荧光检测特异性PCR扩增产物。结果 腺病毒扩增产物在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下可分别于9 min和6 min内完成检测。将PCR扩增产物测序,并与NCBI基因库中核酸序列比对,结果表明所选用的扩增序列特异性良好。商品化DNA Marker毛细管电泳和微流控芯片电泳对目标DNA片段bp值求得的日内精密度分别为1.14%～1.34%和1.18%～1.48%,日间精密度分别为1.27%～2.76%和2.85%～4.06%。毛细管电泳-激光诱导荧光法和微流控芯片电泳-激光诱导荧光法检测腺病毒的灵敏度分别为2.33×10² copies/mL和2.33×10³ copies/mL。两种方法用于实际粪便样品测定,准确度高。结论 本研究建立的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光检测方法能够快速、灵敏、准确地检测出粪便中的腺病毒。     

微量荧光法在苯丙酮尿症诊治中的应用

目的 :探讨微量荧光法定量苯丙氨酸在苯丙酮尿症 (PKU)诊治中的应用。方法 :对芬兰 L absystem s公司生产的新生儿苯丙氨酸定量试剂盒及设备进行方法学鉴定 ,并测定 194 7例新生儿和 2 8例经典苯丙酮尿症患儿及 8例持续性高苯丙氨酸血症患儿末梢血中苯丙氨酸 (Phe)水平观察其实用性。结果 :经实验方法学鉴定 ,本法高、中、低各浓度批内平均变异系数 (CV)为0 .0 36 ,0 .0 6 9,0 .0 6 8,批间平均变异系数 (CV)为 0 .12 4 ;最低检测极限为 31μmol/ L ;平均重现率为 98.4 %。新生儿血苯丙氨酸水平正常参考范围 :31～ 12 0 μmol/ L。 2 8例经典苯丙酮尿症和 8例持续性高苯丙氨酸血症患儿血苯丙氨酸平均含量分别为 186 7μmol/ L(s=4 0 9.8)和 76 9μmol/ L(s=2 2 6 .2 ) ,三者间有显著性差异 P<0 .0 0 1。患儿治疗前后苯丙氨酸平均含量有明显差异 P<0 .0 0 1。结论 :微量荧光法定量准确操作简便适于 PKU诊治观察     

无吸收火焰光度法测血清（尿）钠

报告了一种高灵敏度、高精确度、简便、实用的测定血清(尿)钠无吸收火焰光度法。探讨了钠原子无吸收条件下的最大进样浓度和共存物质的干扰。本法进样的线性范围为0～0.3 mmol/L;标准曲线线性范围为0～0.3mmol/L乘以样品稀释倍数;回收率为100.2%;批内CV=1.02%;批间CV=1.37%;常规条件下CV=1.47%。     

高效毛细管区带电泳测定内毒素

目的 :应用高效毛细管区带电泳 (CZE)测定脆弱类杆菌中的内毒素 (LPS) ,且对制备流程进行监控和对产品 (LPS)纯度进行检测 ,以便快速、高质量地提供科研用的内毒素。方法 :在样品中加入茶碱作内标 ,运用CZE在 30mmol·L-1的硼酸盐缓冲液 (pH 8.0 )里分离测定LPS。毛细管柱内径 75 μm ,长 5 7cm。电压 2 5kV ,电流 16 2 μA ,检测波长 2 30nm。结果 :首次在国内运用CZE分离和测定了从细菌中提取的内毒素 ,LPS浓度在 1～ 5 0mg·L-1范围内具有良好的线性关系 (r =0 .996 ) ,方法平均回收率为 99 0 7%～ 10 1 0 0 % ,日内及日间变动系数 (CV)均小于 5 % ,最低检测限为 1 0mg·L-1。结论 :与鲎试剂法或凝胶电泳法相比 ,本法不受热源干扰 ,方法简便、快速、定量可靠 ,能即时监控纯化流程 ,是目前最先进的检测LPS的方法     

高效液相色谱法测定尿样中维生素C、B1和B2

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定尿样中维生素C、B1和B2浓度.方法:以Phenomenex Synergi HydroRP80A(250 mm× 4.6 mm,4μm)为色谱柱,甲醇为流动相A,50 mmol/L乙酸铵溶液(含5mmol/L辛基磺酸钠)为流动相B,梯度洗脱;检测波长:266nm;流速:0.8mL/min;柱温:30℃;尿样经离心过滤后直接进样5μL至HPLC检测.结果:维生素C、B1和B2的线性范围分别为1.3～250.0,0.3～50.0和0.1～25.0 μg/mL,相关系数均大于0.99;回收率分别为98.1％,98.8％和98.7％.结论:该法可用于尿样中3种维生素的同时检测,简便快速,结果准确.     

高效毛细管区带电泳测定内毒素

OBJECTIVE: To detect lipopolysaccharides (LPS) in frangibility bacilli, control the procedure of LPS preparation, examine the ally of the product by high performance capillary zone electrophoresis (CZE), and obtain rapidly high alloy of LPS for scientific research. METHODS: Theoptyline was added to the sample as an internal standard. The LPS was separated and detected by CZE in sodium tetraborate-borate buffer. The concentration of the buffer was 30 mmol.L-1 (pH 8.0); the diameter of the capillary column was 75 microns, and the length was 57 cm; the CZE operative voltage was 25 kV, the electric current was 112 microA, and the detecting wavelength was 230 nm. RESULTS: CZE was first internally used to separate and detecte LPS in bacillus. The LPS had a good linearity in the range of 2-30 mg.L-1 (r = 0.996). The average recovery rate was 99%-101%, the in-day and day-to-day coefficients of variation (CV) were less than 5%, and the minimum detectable quantity was 1.0 mg.L-1. CONCLUSION: Compared with the limulus test (LT) and gel electrophoresis, this method can resist heat source interference and is more simple, rapid and accurate. Moreover, it can control the preparative process of LPS immediately, and may be an advanced method to determine LPS.     

HPCE法测定甲倍霜中甲硝唑的含量

目的:考察高效毛细管电泳法(HPCE)在甲硝唑定量分析中的应用。方法:通过优化电泳条件,采用HPCE区带电泳法(CZE)对甲倍霜中甲硝唑进行含量测定。以40 mmol/L Tris-H3PO4为缓冲液,电动进样10 kV×20 S,分离电压为+24 kV,紫外300 nm检测,分离柱温25℃。结果:以HPCE法测定甲硝唑对照品的保留时间为:8.17 min;标准曲线为:y=0.0394x+0.0078(r=0.9995);线形范围为:1.25~75.00μg/mL;批内RSD为:1.35%~2.01%,批间RSD为:3.11%~4.62%;甲硝唑平均含量为标示量的97.30%。结论:HPCE法取样量小,快速方便,结果可靠,可用于甲倍霜的含量测定。     

HPLC紫外检测法测定血浆甲磺酸瑞波西汀浓度

目的建立测定血浆甲磺酸瑞波西汀浓度的高效液相色谱检测法。方法以麦普替林为内标,取血浆样本1mL,用饱和Na2HPO4碱化后以重蒸乙醚5mL提取,再用0.2mol.L-1盐酸0.2mL反提取,80℃～100℃热水浴下氮气吹干盐酸层,用50μL流动相重组后进样。采用InertsilODS-3柱(GLSciense,5μm,4.6mm×150mm)进行分离。流动相为乙腈-50mmol/L磷酸钠缓冲液(pH=6)(40:60,v/v),流速为0.6mL.min-1,紫外检测波长210nm。结果瑞波西汀对内标的峰高比与血浆甲磺酸瑞波西汀浓度直线相关,相关系数r=0.9997,线性范围3.12～200ng.mL-1。甲磺酸瑞波西汀的最低检测限0.5ng,最低检测浓度2ng.mL-1,提取回收率在82.50%～86.08%之间,批内和批间RSD分别为2.02%～5.33%和3.83%～8.50%。结论本法具有较高的灵敏度、精密度和特异性,适用于甲磺酸瑞波西汀的药代动力学和治疗药物监测的研究。     

超滤-HPLC法测定注射用多西他赛脂质体的含量和包封率

目的测定注射用多西他赛脂质体的含量和包封率。方法:用乳化挥散法制备多西他赛脂质体;采用超滤法分离脂质体中的游离药物;用HPLC法测定脂质体的含量及包封率:采用Agilent Tc-C18柱(4.6mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水(体积比35∶40∶25),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为233 nm,柱温为室温。结果:超滤法能很好地把脂质体和游离药物分离,超滤膜空白回收率为96.5%,加样回收率为98.3%;在所选色谱条件下,辅料不干扰多西他赛的含量测定,多西他赛在3～300μg.mL-1范围内线性关系良好,加样回收率在97.06%～102.19%之间,多西他赛脂质体含量为3.87 mg.mL-1,包封率为99.26%。结论:该方法方便、快捷,可以用于多西他赛脂质体含量和包封率的测定。     

同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱快速测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁的研究

  目的  建立尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱的快速测定方法。  方法  离心后的尿样上清液加入15N₅-8-羟基脱氧鸟苷、D₃-可替宁两种内标,以3 mmol/L甲酸铵水溶液稀释5倍,经0.22 μm水系滤器过滤后,引入液相色谱-串联质谱法（ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）分析。以ACQUITY UPLC? BEH HILIC色谱柱（50 mm×3.0 mm, 1.7 μm）分离,3 mmol/L甲酸铵水溶液与乙腈为流动相(10∶90) 等度洗脱,柱温40 ℃,流速0.3 mL/min;质谱以电喷雾电离源（electrospray ionization, ESI）+扫描多反应监测模式检测,内标法定量。  结果  8-羟基脱氧鸟苷和可替宁在各自线性范围内线性良好,方法检出限分别为0.064 μg/L和0.035 μg/L;定量限分别为0.21 μg/L和0.12 μg/L;加标回收率分别为92.6%～102.0%和102.0%～106.0%。采用所建立的方法测定实际尿样,并通过40例样本统计分析发现,主、被动吸烟者的烟草烟气暴露量、烟草特有亚硝胺摄入量存在差异（P<0.05）,NNAL和可替宁含量在主动吸烟者尿样中含量更高;主、被动吸烟者的烟草烟气暴露与烟草特有亚硝胺暴露呈正相关（其相关系数r分别为0.487和0.786,P<0.05）。  结论  本研究成功建立同时测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁含量的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱法,该方法前处理简单、快速,通过同位素内标校正,定量灵敏准确,能够满足批量分析的需求。     

反向高效液相色谱测定法同时测定人血浆中5种镇静催眠药浓度

目的：建立人血浆中地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑的反向高效液相色谱测定法（RP-HPLC）。方法：以血浆为基质,配制含有5种镇静催眠药的混合标准品,取1 mL样品加入50 mg/L卡马西平10 μL为内标,乙酸乙酯萃取后用100 μL流动相溶解,进样20 μL,通过高效液相色谱仪检测人血浆基质中5种镇静催眠药浓度。色谱条件：色谱柱为C18柱（4.6 mm×250 mm）,柱温30 ℃,流动相为甲醇:水（65∶35）,流速1.0 mL/min,紫外检测波长为230 nm。结果：地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑在5～1 200 μg/L 范围内线性关系良好(r≥0.9966, P<0.05) ,加样回收率在95.5%~105.6%,萃取回收率均在75%以上,日内及日间变异相对标准偏差(RSD)均小于10%（n=5）。 结论：RP-HPLC方法简便、准确、灵敏,适用于人血浆中地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑的血药浓度的同时检测。     

氢化物原子荧光法测定生姜中的硒

目的:探讨原子荧光光度计测量生姜中硒含量的可行性.方法:采用自动进样器,用氢化物原子荧光法测定普通生姜和富硒生姜中的硒含量.结果:普通生姜中硒含量平均为0.50×10-2mg/kg,而富硒生姜中硒的平均含量可达到1.16×10-2mg/kg;线性范围0～10 μg/L,检出限为0.019 μg/L,精密度为1.2％,回...