电针“太阳”透“百会”对PTZ致痫大鼠海马pCREB及NSE的影响

摘要：目的：观察电针透刺“太阳”透“百会”对戊四氮( PTZ) 致痫大鼠行为学、海马内pCREB及NSE表达情况,探讨其抗痫的机制。方法：采用随机分组将32只大鼠动物分成空白组、模型组、西药组及电针透穴组,每组各8只。除空白组外,采用戊四氮（PTZ）腹腔注射将其余24只大鼠制备为癫痫模型。记录各组大鼠一般状态、行为学改变等情况,免疫组化法及Western-blot检测海马组织pCREB及NSE表达变化情况。结果：模型组、西药组及电针透穴组与空白组比较,体质量明显降低;模型组大鼠海马组织的pCREB及NSE阳性细胞数及细胞核蛋白浓度明显升高,具有显著性差异(P＜0.05);与模型组比较,西药组、电针透穴组大鼠的体质量均明显增加、痫性发作潜伏期延长、高等级痫性发作减少,差异具有显著性差异(P＜0.05);与模型组比较,电针透穴组pCREB及NSE阳性细胞数及细胞核蛋白浓度明显降低,具有显著性差异(P＜0.05)。结论：头部电针透穴可改善PTZ致痫大鼠一般状态,减轻痫性发作,延长发作潜伏期,可降低海马组织pCREB及NSE表达,其抗痫机制可能通过减轻神经元损伤实现。     

草果知母汤加减方及其拆方对点燃大鼠脑内GABA和GABAAR mRNA的影响

目的观察草果知母汤加减方及其拆方抗痫作用机制中是否有改变脑内GABA和GABAAR mRNA表达的作用。方法采用戊四唑（PTZ）点燃大鼠模型,应用免疫组织化学法观察GABA在脑内的分布,用原位杂交法定量分析脑内GABAAR的表达。结果草果知母汤加减方及其拆方治疗4周后,点燃大鼠海马CA1区和皮层GABA阳性神经元分布及GABAAR mRNA含量均明显升高,与模型对照组比较有显著差异。结论草果知母汤加减方及其拆方能加强脑内GABA阳性神经元分布及其受体表达,从而能够抑制癫痫发作。     

点燃癫痫模型基因的差异表达及草果知母汤对其影响

目的 筛选与点燃癫痫模型发病及单果知母汤发挥疗效相关联的基因。方法 使用mRNA昼N差异显示技术（DDRT-PCR）,筛选差异基N务带,并使用Northern印记杂交排除假阳性。结果 正常对照组、模型组、中药组存在110条差异条带,其中11务基因表达有明显差异的片段在正常对照组不存在,但出现在模型组,又在治疗组消失,说明这11条基因是与癫痫发病和治疗密切关联的基因。经NCBI美国国家基因库检索,这11条基因中的7条为同源基因,有4条基因片段为功能未知的新基因,其中3条新基因经Northern印记杂交排除了假阳性的可能,已经在GeneBank进行了注册,注册号分别CK325391、CK325392、CK325393、CK325394。结论 草果知母汤可能通过影响海马组织部分基因片段的表达而起到治疗癫痫模型的作用。     

平痫冲剂对戊四唑致痫大鼠颞叶谷氨酸受体和γ-氨基丁酸受体的影响

目的探讨平痫冲剂抗癫痫的作用机制。方法腹腔注射戊四唑制成慢性癫痫模型,通过免疫组织化学方法和显微图像分析技术检测大鼠颞叶的谷氨酸受体(NMDAR1)和γ-氨基丁酸受体(GABA-ARα1)免疫反应的阳性细胞数(n)、阳性细胞面积比(Aa%)及阳性细胞积分吸光度(IA)。结果对于NMDAR1,模型组(B组)同正常对照组(A组)比较,颞叶NMDAR1的n、Aa%上升,阳性细胞积分吸光度(IA)增加(P<0.01);而西药治疗组(C组)、中药组(D组)与B组比较,颞叶的NMDAR1的n、Aa%都有不同程度的下降,IA也有不同程度的减少(P<0.01,P<0.05)。对于GABA-ARα1,B组同A组比较,颞叶GABA-ARα1的n、Aa%下降,IA降低(P<0.01);而C组、D组与B组比较,颞叶的GABA-ARα1的n、Aa%都有不同程度的增加,IA也有不同程度的升高(P<0.01,P<0.05)。结论平痫冲剂抗癫痫的作用机制可能是通过抑制颞叶兴奋性;经递质受体NMDAR1的活性与表达,并激活其抑制性;经递质受体GABA-ARα1的活性与表达,从而降低大脑皮质的兴奋性,有效抑制癫痫的形成及发展。     

草果知母汤对PTZ慢性诱导癫痫模型大鼠行为及皮层脑电图的影响

目的:探讨癫痫形成中不同时间段大鼠惊厥行为、皮层脑电图的变化规律及草果知母汤对癫痫大鼠惊厥行为、皮层脑电图的影响。方法:选用SD大鼠,以PTZ慢性诱导癫痫模型,中、西药组分别灌胃草果知母汤和苯巴比妥,综合电生理学、行为学等检测技术,动态观察各组大鼠在癫痫形成中的惊厥行为变化规律及皮层脑电变化规律。结果:行为学观察发现,模型对照组自第2周开始出现惊厥行为表现,并随点燃周次的增加,惊厥行为等级不断增高,与中、西药治疗组比较,至第3周显示出明显差异,并有不断增强的趋势,而中、西药治疗组间比较,各时间段未见明显差异;皮层脑电检测发现,脑电变化与行为变化同步,模型对照组与中、西药治疗组比较,痫波的发生频率较高、持续时间较长,而中、西药治疗组间相同时间段痫波发生频率、持续时间相当。结论:草果知母汤对癫痫形成中不同时间段惊厥行为及痫性放电具有良好的阻断作用。     

小儿抗痫胶囊对癫痫大鼠脑内γ-氨基丁酸、谷氨酸含量影响的实验研究

[目的]进一步从调节γ-氨基丁酸(GABA)代谢的角度探讨小儿抗痫胶囊的作用机制。[方法]采用高效液相色谱-紫外检测法,观察大鼠大脑皮质、双侧海马的γ-氨基丁酸含量和谷氨酸(GLU)含量的变化。[结果]戊四唑点燃癫痫大鼠脑内GABA的含量降低,GLU含量升高;经小儿抗痫胶囊治疗后,中药高剂量组皮质、海马GABA含量较模型组均有显著升高,中药高剂量组皮质、海马GLU含量均显著低于模型组,表明小儿抗痫胶囊有良好增加模型大鼠脑内GABA含量,降低GLU含量而抗惊厥的作用;而中药高剂量组与低剂量组比较有显著性差异,表明小儿抗痫胶囊对GABA、GLU含量的影响还与剂量显正相关。[结论]小儿抗痫胶囊能显著抑制大鼠戊四唑点燃发作,其疗效与药物剂量呈正相关,作用机制可能与其降低大脑GLU含量,增加大脑GABA含量,影响GABA代谢有关。     

草果知母汤在阻断PTZ点燃癫痫模型中对大鼠脑内c-fos、c-junmRNA表达的影响

目的：探讨草果知母汤抗痫作用的分析生物学机制。方法：选用ＳＤ大鼠以戊四唑（ＰＴＺ）诱导产生癫痫动物模型，应用分子原位杂交技术观察草果知母汤对ＰＴＺ点燃癫痫大鼠脑内ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因表达的影响。结果：ＰＴＺ点燃癫痫大鼠脑内ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因表达明显增强，草果知母汤能明显阻断其表达，并显示出良好的抗痫作用。结论：草果知母汤的抗痫作用机制可能与降低脑内ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因表达水平有     

抗痫增智胶囊对戊四唑点燃大鼠海马苔藓纤维发芽的干预作用

目的:探讨中药抗痫增智胶囊对戊四唑致痫大鼠海马苔藓纤维发芽的干预作用。方法:运用戊四唑点燃法,复制癫痫大鼠模型。实验大鼠随机分为中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、丙戊酸镁组、模型组、正常对照组。造模成功分别灌药28天后应用Timm染色法观察各组大鼠海马苔藓纤维发芽的情况。结果:Timm染色结果显示模型组大鼠海马CA3始层及齿状回分子层苔藓纤维发芽明显增多,其单位面积的密度百分比显著高于正常对照组(P<0.05)。抗痫增智胶囊高、中剂量组的发芽密度百分比低于模型组(P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.05)。结论:抗痫增智胶囊对海马CA3区及齿状回苔藓纤维发芽有较强的干预作用。     

乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠诱发记忆 再现障碍的作用机制

目的:研究乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠记忆再现障碍的作用及其可能的机制.方法:将SD大鼠随机分为4组:戊四唑点燃模型组(模型对照组),低剂量乌灵菌粉(0.3g· kg-1,ig)组,高剂量乌灵菌粉(0.6g· kg-1,ig)组和空白对照组.大鼠在放射状八臂(四臂放食物)迷宫训练成功后,隔日腹腔注射亚惊厥剂量(35 mg· kg-1)的戊四唑共12次.乌灵菌粉在每次注射戊四唑前0.5h灌胃.完全点燃后在同一迷宫中测记忆的再现过程.应用Western免疫印记法测定磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CERB)的水平,脑病理切片采用HE染色,在光学显微镜下计数海马完整神经元.结果:慢性癫痫大鼠在八臂迷宫中的参考记忆和工作记忆再现能力均受损,乌灵菌粉表现出改善作用.慢性癫痫导致大鼠海马p-CREB表达下降,海马CA1区和CA3区神经元破坏,乌灵菌粉逆转了海马的p-CERB表达水平的下降,保护了海马的神经元.结论:乌灵菌粉能改善癫痫诱发的记忆再现障碍,其作用可能与提高脑内p-CERB的表达及对海马神经元的保护有关.     

草果知母汤对点燃癫痫模型鼠大脑NMDA受体基因表达的影响

目的：探讨草果知母汤抗癫痫机理是否包含着脑组织ＮＭＤＡＲ１ ｍＲＮＡ表达的变化。方法：采用戊四唑点燃癫痫模型，利用分子生物学原位杂交法定量分析ＮＭＤＡＲ１ ｍＲＮＡ的表达。结果：草果知母汤治疗４周后，点燃模型鼠海马组织ＣＡ１，ＣＡ２，ＣＡ３区ＮＭＤＡＲ１ ｍＲＮＡ含量明显降低，与模型对照组比较有显著性差异；而西药抗癫灵组无明显变化。     

不同配伍柴郁温胆汤对抑郁模型大鼠海马CREB和BDNF表达的影响

目的观察柴郁温胆汤及其不同配伍组合对抑郁模型大鼠海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法健康雄性SD大鼠70只,随机分为正常组、模型组、复方组、化痰组、调气血组、养心脾组和马普替林组。除正常组外,各组采用孤养加慢性轻度不可预见性刺激方法建立大鼠抑郁模型,从应激第2天起分别灌胃给药至实验第23天。采用免疫组化法检测大鼠海马CA3区CREB和BDNF的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠海马CREB和BDNF表达的总面积、阳性细胞数和平均光密度均明显降低(P<0.01)。与模型组相比,复方组、化痰组、马普替林组能够显著上调大鼠海马CREB和BDNF表达(P<0.05或P<0.01);养心脾组能够提升CREB表达的总面积和阳性细胞数(P<0.05);调气血组能够提升BDNF表达的平均光密度(P<0.05)。结论柴郁温胆汤能够明显上调大鼠海马CREB和BDNF表达,其中以化痰药的配伍组合作用较明显。