高血压性脑出血周围脑组织超微结构及脑水肿发生机制研究

目的:高血压性脑出血后周围脑组织超微结构变化,基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)表达在高血压性脑出血后(早期)脑水肿发生中的作用。方法:应用免疫组织化学方法检测高血压性脑出血患者出血后6h,12h,24h,48h,72h,120h,1W,2W血肿周围脑组织中MMP-2、MMP-9的表达,透射电镜下观察,血肿周围脑组织超微结构变化。结果:研究表明在高血压性脑出血患者血肿周围有脑水肿发生,正常对照组中未发现明显的MMP-2,MMP-9阳性表达,而在高血压性脑出血组出血24 h内MMP-2及MMP-9则见明显表达(P<0.01)。结论:MMP-2及MMP-9在脑出血患者血肿周围脑组织的表达增高与高血压性脑出血后脑水肿的发生具有密切的关系。     

实验性大鼠脑出血灶周围区细胞因子白细胞介质-1βmRNA和蛋白的动态变化

目的观察大鼠脑出血血肿周围组织白细胞介素-1β（IL-1β）表达的动态变化。方法用Ⅶ型胶原酶立体定位法制备大鼠尾状核出血动物模型，采用逆转录多聚酶链反应检测血肿周围组织IL-1βmRNA的表达；采用免疫组织化学SP法和酶联免疫吸附法观察脑出血灶周围区IL-1β在出血后不同时间点的表达变化。结果脑出血后血肿周围IL-1βmRNA和IL-1β反应阳性细胞和IL-1β浓度在发病早期（4h内）即明显升高，24h达到峰值，3d后开始下降，7d仍有少量表达，与脑出血后脑水肿的变化趋势相一致。结论IL-1β可能参与了脑出血后的脑水肿形成以脑水肿周围组织的继发性炎性损伤，在脑出血后采取有效的抗炎性细胞因子治疗可能减轻血肿周围组织的水肿和继发性损伤。     

大鼠脑出血后血肿周围脑水肿与 Mip1 表达的关系

摘要： 目的 通过分析大鼠脑出血（ICH）后血肿周围脑组织中 Mip1 的表达, 探索 Mip1 对脑水肿的保护作用。 方法 90 只雄性 SD 大鼠随机分为假手术组（n=15）和 ICH 组（n=75）, ICH 组再根据造模后脑出血时间均分为 ICH 6 h、 12 h、 1 d、 3 d 和 7 d 组。应用自体股动脉血液建立大鼠尾状核脑出血模型。于上述时点断头处死大鼠, 取血肿 周围脑组织。采用 HE 染色观察血肿周围脑组织病理形态学变化, 干/湿质量法测定脑含水量 （BWC）, 免疫组化法检 测 Mip1 蛋白的表达。结果 脑出血后血肿周围区域神经元胞体明显变小, 胞浆淡染, 胞质内尼氏体明显减少, 细胞 周围出现水肿裂隙, 而假手术组脑组织神经细胞形态未见明显变化。脑出血 6 h 后脑含水量逐渐增高, 在 3 d 时达 高峰 （均 P＜0.05）, 7 d 时大致恢复正常 （P＞0.05）。大鼠脑出血后脑组织血肿周围有大量胞质或胞核呈棕色的 Mip1 阳性细胞分布, 脑出血 6 h 后 Mip1 蛋白表达水平较假手术组明显升高（均 P＜0.05）, 至 7 d 时大致恢复正常（P＞ 0.05）。结论 脑出血后血肿周围脑组织中 Mip1 高表达, 并与脑水肿进展趋势基本一致, 提示活化的 Mip1 可能参与 出血性脑水肿的病理过程。     

脑出血血肿周围脑组织基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的表达及其病理意义

目的探讨脑出血患者血肿周围脑组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达及其病理意义。方法选择不同时段行血肿清除术的脑出血患者37例分为3组：超早期组（〈8h）12例，早期组（8—48h）15例，延期组（〉48h）10例。选取手术过程中获得的血肿周围脑组织作为实验标本，采用免疫组化方法检测MMP-2和MMP-9表达的变化。结果MMP-9在脑出血超早期组已有明显表达，早期组达到高峰，延期组有所下降但仍明显高于超早期组。MMP-2在早期组才有明显的表达，延期组持续增多，达到高峰。MMP-2表达与MMP-9表达之间无相关性（r=0．07，P〉0．05）。结论脑出血血肿周围脑组织中存在MMP-2和MMP-9的表达，MMP-9在急性期参与了脑水肿、炎症反应等病理过程，而MMP-2在脑出血后期可能参与了脑组织的损伤修复。     

实验性幼鼠脑出血后脑水份和ATP含量变化的研究

目的：为了观察脑出血后,其周围脑组织的水肿和能量代谢变化情况。方法：取3天龄幼鼠新鲜未肝素化自体动脉血注入鼠尾状核,建立幼鼠脑出血模型。用干湿重法和陈克明法分别在4h、12h、24h测定出血周围脑组织水份含量和ATP含量。结果：脑出血早期（4h）有明显的脑水肿,而ATP含量到中晚期（24h）才明显下降。本研究表明,幼鼠脑出血后,出血周围组织能量代谢障碍滞后于脑组织水肿12～24h,而脑出血早期局部组织水肿在能量代谢障碍中起重要作用,脑水肿可能是能量代谢障碍进展的后果之一。     

醒脑静注射液联合依达拉奉治疗急性脑出血疗效观察

目的：观察醒脑静注射液联合依达拉奉治疗急性脑出血的临床疗效。方法：88例急性脑出血患者随机分为观察组和对照组各44例。两组均给予常规基础治疗,在此基础上,对照组予依达拉奉注射剂30 mg＋0.9%氯化钠注射液500 ml,ivd（30 min内滴完）,bid;观察组在对照组基础上再加用醒脑静注射液10 ml＋5.0%葡萄糖注射液250 ml,ivd,qd。治疗4周后观察两组患者治疗前后NIHSS评分、格拉斯哥昏迷（GCS）评分,脑水肿和脑血肿体积,高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）水平等指标变化,记录两组药品不良反应发生情况。结果：治疗后,两组患者GCS评分均明显提高（P〈0.05）,NIHSS评分明显下降（P〈0.05）,且观察组优于对照组（P〈0.05）。治疗后两组患者脑水肿和脑血肿体积明显缩小（P〈0.05）,但两组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组治疗后hs-CRP、IL-6水平均有明显下降（P〈0.05）,且观察组下降较对照组更明显（P〈0.05）。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：醒脑静注射液联合依达拉奉治疗急性脑出血效果较单用拉达拉奉更为理想。     

HPV16-E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及临床应用

目的：探讨16型人乳头瘤病毒（HPV16）E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及其意义。方法：选择2009年12月～2010年12月于本院妇科门诊检查后临床诊断为宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈癌、宫颈正常的患者,分别为12例、20例、27例、10例,采用免疫组化SP法检测病变组织标本HPV16-E6蛋白表达情况。结果：HPV16-E6蛋白在正常宫颈上皮、宫颈炎、CIN、浸润性宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为0（0/10）、33.3%（4/12）、45.0%（9/20）、66.6%（18/27）,组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。病变组织的HPV16-E6蛋白阳性表达率显著高于正常宫颈组织（P〈0.05）,其中宫颈癌的阳性表达率最高,显著高于宫颈炎和CIN。结论：HPV16-E6蛋白表达与宫颈病变有重要联系,HPV16-E6蛋白的检测可以作为宫颈癌前病变转归的指标。     

兔脑出血灶周缺氧诱导因子-1α、IL-6表达的实验研究

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible facor-1α，HIF-1α）、IL-6在脑出血灶周的表达，并探讨其表达的意义。方法 家兔28只，分为A、B、C、D4组，A组4只为对照组，B、C、D各8只，采用不同量的新鲜动脉血制作脑出血模型。应用免疫组化技术检测家兔脑出血模型灶周脑组织中HIF-1α、IL-6的表达。结果 各组脑出血灶周组织中HIF-1α、IL-6的表达有显著意义（P〈0．05）。结论 脑出血灶周存在HIF-1α、IL-6表达，为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据；HIF-1α可能具有神经细胞保护作用。     

三七总皂甙对脑出血大鼠血肿周围核转录因子κB表达的影响

目的研究三七总皂甙对大鼠脑出血后核转录因子”B（NF-κB）表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、脑出血模型组、三七总皂甙治疗组，采用VⅡ型胶原酶注入大鼠右侧苍白球制备脑出血模型，每组分别在术后6、24、48、96 h 4个时点收取脑组织标本，免疫组化检测NF-κBp65蛋白表达，同时测量脑组织含水量。结果正常组和假手术组比较，大鼠脑出血后脑组织NF-κBp65表达以及脑组织含水量显著增高（P〈0．01）；与脑出血模型组比较，三七总皂甙治疗组NF-κBp65水平（P〈0．01）及脑组织含水量（6hP〈0．05，24、48、96hP〈0．01）均显著降低。结论三七总皂甙可以抑制脑出血后NF-κB表达，这可能是三七总皂甙减轻脑出血后脑水肿的机制之一。     

脑出血大鼠血肿周围脑组织Mg~（2＋）水平、MDA含量与脑水肿的关系

目的：观察镁离子（Mg2＋）以及丙二醛（MDA）、在大鼠脑出血血肿周围脑组织中的表达。探讨Mg2＋及脂质氧化与脑水肿的关系。为丰富脑出血后脑水肿治疗奠定一定理论基础。方法：采用干湿重法、酶联免疫吸附法,火焰原子吸收法测50只脑出血模型组大鼠和50只假手术对照组大鼠血肿周围脑组织中含水量、Mg2＋以及MDA水平。结果：（1）脑出血组各时间点脑组织Mg2＋含量均低于对照组（P〈0.05）。脑出血组Mg2＋含量3d达最低,5d升高,5d与7d差别不显著。（2）脑出血组各时间点脑组织MDA含量均高于对照组（P〈0.05）。脑出血组MDA水平于3d达高峰,5d降低,5d与7d差别不显著。（3）脑出血组各时间点脑组织含水量均高于对照组（P〈0.05）。脑出血组脑组织含水量3d达高峰,5d下降,5d与7d差别不显著。结论：①大鼠脑出血血肿周围脑组织脂质氧化指标：MDA水平于血肿初期升高,3d达高峰,5d降低,5d与7d差别不显著。②大鼠脑出血血肿周围脑组织Mg2＋水平于血肿初期降低,3d达最低,5d升高,5d与7d差别不显著。③大鼠脑出血血肿周围脑组织Mg2＋水平与MDA及脑水肿程度呈负相关。     

新型水蛭肽嵌合蛋白治疗脑出血后脑水肿的实验研究

目的探讨新型基因工程药物水蛭肽嵌合蛋白（TNHH）对大鼠脑出血后脑水肿的治疗作用及其机制。方法将96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、TNHH组,以自体血注入大鼠尾状核方法建立脑出血模型,假手术组只进针不注血。TNHH组静脉注射TNHH（2mg／kg）,分别于造模前30min及造模后每12h给药1次。于6,24,72,168h时分别用Longa标准测定神经功能缺损,干、湿重法检测脑含水量,分光光度法测定脑血肿周围脑组织髓过氧化物酶（MPO）活性。结果与假手术组相比,脑出血模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、MPO活性均显著增高（P〈0．05或P〈0．01）;与脑出血模型组相比,TNHH组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、MPO活性显著下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论TNHH对大鼠脑出血后脑水肿有治疗作用,其机制可能与抑制凝血酶活性、降低中性粒细胞浸润有关。     

依达拉奉对脑出血患者血清白介素-6和基质金属蛋白酶-9水平的影响及疗效分析

目的：探讨依达拉奉对脑出血患者血清白介素-6（IL-6）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的影响及其对脑出血的脑保护机制。方法：高血压性脑出血（ICH）患者100例,随机分为治疗组50例和对照组50例。对照组采用西医常规治疗,治疗组在此基础上加用依达拉奉治疗,连续给药2周。两组均记录NIHSS评分、BI指数,计算治疗前后水肿强度,检测血清NO、IL-6、MMP-9水平。结果：治疗后治疗组水肿程度低于对照组（P〈0.01）,治疗组NIHSS评分明显低于对照组（P〈0.01）,BI评分较对照组明显提高（P〈0.01）,治疗组血清NO、IL-6、MMP-9含量均明显低于对照组（P〈0.01）。结论：依达拉奉具有减轻脑出血后炎症反应、清除自由基、抗脑水肿、保护脑细胞作用。     

血浆肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6与高血压性脑出血脑水肿的相关性研究

目的 探讨急性高血压性脑出血患者血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平与脑水肿的相关性.方法 对高血压性脑出血患者62例(观察组)和健康体检正常者50例(对照组)采用酶联免疫法( ELISA)定量法检测高血压脑出血组治疗前和治疗后1d、3d、7d、14 d五个时间段和对照组血浆TNF-α、IL-6的表达,比较两组血浆中TNF-α和IL-6含量;用CT测量高血压脑出血组水肿体积.分析高血压脑出血组血浆中IL-6、TNF-α的含量与血肿体积的相关性.结果 观察组治疗前血浆TNF-α和IL-6含量分别为(15.62±9.49)μg/L、(67.47±6.31)ng/L,均高于对照组的(8.28±3.36) μg/L、(31.02 ±3.51 )ng/L(t=9.17、64.28,均P=0.01).经Spearman相关性分析显示,观察组TNF-α和IL-6水平与血肿周围体积均呈明显正相关(r =0.934,P =0.02;r =0.922,P =0.026).结论 血浆TNF-α、IL-6在高血压性脑出血后表达水平上调,TNF--α、IL-6可能参与了脑水肿的形成.     

注射用阿魏酸钠对胶原酶致大鼠脑出血模型的治疗作用及机制研究

目的：探讨注射用阿魏酸钠注射液治疗急性脑出血大鼠的效果及其治疗机制。方法：108只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组、急性脑出血（ICH）模型组及阿魏酸钠干预组3组,每组按ICH造模后或假手术后不同时间又均分为2、6、24、487、2 h、1周,6个亚组。阿魏酸钠干预组每天生理盐水3 mL稀释注射用阿魏酸钠,按100 mg/kg剂量腹腔注射,模型组只注射生理盐水。连续注射7 d。观察大鼠神经行为学变化、检测脑含水量,RT-PCR半定量检测水通道蛋白-4（AQP4）mRNA表达,测定血浆内皮素（ET）含量变化。结果：治疗前,ICH模型组及阿魏酸钠干预组Longa评分均较假手术组显著升高,在6~48 h间,阿魏酸钠干预组动物的评分比模型组显著降低（P〈0.05）;自造模后6 h起至1周,阿魏酸钠干预组动物的肢体对称试验评分比模型组显著降低（P〈0.05）;在24 h~1周间,阿魏酸钠干预组动物的平衡木评分比模型组显著降低（P〈0.05）;阿魏酸干预组能够明显抑制48和72 h时动物脑水肿程度（P〈0.05）;注射用阿魏酸钠干预组在造模后72 h的mRNA表达较模型组降低的趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）;注射用阿魏酸钠干预组能显著降低造模后6~72 h的血浆ET水平（P〈0.05）。结论：阿魏酸钠治疗脑出血具有较好的改善神经行为学及对抗脑水肿的作用,其机制与降低ET的生成有关。     

依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织细胞凋亡及P38MAPK蛋白表达的影响

目的:探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织细胞凋亡及P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)蛋白表达的影响。方法:将Ⅶ胶原酶注入大鼠苍白球内诱导建立脑出血模型,2h后将大鼠分为脑出血组、依达拉奉治疗组、假手术组和正常对照组。前3组分别腹腔注射生理盐水(NS)、依达拉奉3mg·kg-1和NS每天1次、最长连续7d,最后一组不作任何处理。分别于建模后3、6、12h及1、2、3、5、7d断头取脑制作切片,分别用TUNEL法及免疫组化法检测各时间点细胞凋亡数及P38MAPK蛋白表达的变化。结果:建模后血肿周围组织存在细胞凋亡并于2～3d达高峰,3h后可见P38MAPK蛋白表达,并于1d后达高峰;与脑出血组比较,依达拉奉治疗组于脑出血后6h～7d血肿周围组织细胞凋亡数及P38MAPK蛋白表达均减少(P<0.05或P<0.01);正常对照组未见凋亡阳性细胞,假手术组术后偶见凋亡阳性细胞,均可见少量p38MAPK蛋白表达。结论:依达拉奉可抑制脑出血后血肿周围组织细胞凋亡,此作用可能与其下调P38MAPK蛋白表达有关。     

大鼠脑出血后血肿周围TIMP-1的表达及与脑水肿的关系

目的观察大鼠脑出血后血肿周围组织基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达,探讨TIMP-1与脑出血后脑水肿的的关系。方法采用自体血注入法建立大鼠脑出血模型,分别用Western blot方法检测血肿周围组织的TIMP-1的表达,伊文思蓝(EB)测血脑屏障(BBB)通透性,干湿重法测组织含水量,并与对照组相比较。结果血肿周围组织的组织含水量和EB含量均48 h达到高峰,且二者呈正相关。TIMP-1在脑出血后12～36 h表达减低,且在脑出血后1～24 h时TIMP-1的表达与组织含水量以及EB含量都呈负相关。结论大鼠脑出血后血肿周围组织存在TIMP-1的表达下调,其可能促进了脑出血后早期脑水肿形成。     

脑出血大鼠脑组织缺氧诱导因子的动态变化及促红细胞生成素对其的影响

目的探讨实验性脑出血大鼠脑组织中缺氧诱导因子（HIF-1α）在脑出血后不同时间点的动态演变过程及促红细胞生成素（EPO）对其影响。方法应用自体血脑内注射法建立脑出血大鼠模型并随机分为假手术组、脑出血非干预组及脑出血EPO干预组,应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间及组别血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况。结果大鼠脑出血后HIF-1α蛋白阳性表达率在72 h内随时间进行性增加,并于出血后72 h达到高峰,此后HIF-1α蛋白表达的阳性率逐渐下降,脑出血EPO干预组较脑出血组各时间点HIF-1α蛋白阳性率明显减少,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论脑出血后HIF-1α表达存在一定变化规律,EPO能显著减少HIF-1α表达。     

原始脑出血评分量表在脑动静脉畸形脑出血预后评估中的应用

目的：评价原始脑出血量表在预测脑动静脉畸形脑出血患者预后中的可行性。方法：收集徐州医学院附属医院2005—2012年76名脑动静脉畸形出血患者,并取得人口学、影像学等临床资料。采用改良的Rankin Scale法对3个月时的临床结果进行评估。当结果不良（mRS≥3）时,使用最大的Youden指数区分与预测准确性相关的年龄及出血量的分界值。脑动静脉畸形-脑出血评分量表在olCH量表的基础上使用了新的年龄和出血量的分界值,应用受者作用特征分析法评价两者的预测能力。结果：①患者平均年龄为（31±18）岁,平均脑出血量为（24±10）m1。随访3个月时,2例（2．5％）患者死亡,14例（18％）恶化。②以出血量35ml、年龄37岁作为预测结果差的最佳分界值,AVM—ICH及olCH两个量表曲线下面积为0．922和0．885,均有较为准确的预测性（P=0．153）,两者具有相接近的灵敏度（P=1．00）,但前者特异性较高（P〈0．05）。结论：oICH量表可较为准确地预测脑动静脉畸形破裂所致脑出血的不良结果,对其年龄和脑出血量的分界值进行简单调整可提高该评分的效果,并能在一定程度上防止对不良结果的风险估计过高。     

实验性脑出血大鼠缺氧诱导因子-1α的表达与脑水肿及细胞凋亡的相关性研究

目的研究脑出血(ICH)血肿周围缺血半暗带区缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达及与脑水肿和细胞凋亡的关系。方法采用自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,应用免疫组织化学方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况,并应用干湿比重法测定脑组织含水量及应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞。结果脑出血后血肿周围缺血半暗带区HIF-1α蛋白表达与脑水肿呈正相关(r=0.466,P<0.01),与细胞凋亡呈正相关(r=0.195,P<0.05)。结论缺血半暗带区脑组织中HIF-1α表达与细胞凋亡和脑水肿呈正相关。