电针联合强制性运动对脑缺血大鼠神经功能及GFAP表达的影响

目的 探讨脑缺血后电针联合强制性运动疗法促进神经功能恢复的作用及机制。方法 用线栓法建立MCAO模型,随机平均分为模型组、强制性运动(constraint-induced movement therapy,CIMT)组、电针组和电针联合强制性运动组,每组再随机平均分为5个亚组。同时设立假手术组,分别行相应治疗,并于相应时间点进行神经功能缺损评分,并采用免疫组织化学方法观察每个时间点脑梗死灶周围胶质纤维酸性蛋白(glial fibeillary ascid protein,GFAP)的表达。结果 造模后7、14、21、28 d时电针联合强制性运动组大鼠神经功能缺损评分明显降低,与模型组、CIMT组和电针组比较差异有统计学意义(P<0.01);在28 d和35 d时,CIMT组、电针组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),在缺血后7 d、14 d、21 d和28 d时,电针联合强制性运动组GFAP表达量明显低于CIMT组和电针组(P<0.05)。结论 电针联合强制性运动可抑制脑梗死灶周围GFAP的表达,改善大鼠神经功能,可能与缺血损伤神经元的再生和修复有关。     

不同穴位电针对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围皮质GAP-43表达的影响

目的:比较督脉取穴法("人中"、"百会"穴)和背俞穴取穴法("肝俞"、"肾俞"穴)抗急性脑缺血损伤的效果.方法:成年健康雄性SD大鼠80只,采用线栓法造成右侧大脑中动脉阻断(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型后,随机分为假手术组(n=5)、模型组(n=25)、电针人中+百会...     

首乌仙海片对缺血性卒中模型大鼠脑组织GFAP、GAP- 43表达的影响

目的 研究补益肝肾中药首乌仙海片对大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠星形胶质细胞活性及神经轴突生长的作用.方法 12周龄雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组8只、模型组16只和中药组16只.模型组和中药组按Tamura法制成MCAO模型,假手术组大鼠行相同的开颅术而不凝闭大脑中动脉,于造模成功后6 d,中药组灌胃给予首乌仙海片9 g/kg,余2组分别灌胃给予等量生理盐水.假手术组大鼠于灌胃1周后,其余2组大鼠分别于灌胃1周、2周末各处死8只,断头取脑,ABC法染色,采用免疫组化法,进行脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经生长相关蛋白质(GAP- 43)的测定.结果 中药组给药1周时,GFAP的表达较同期模型组与假手术组均有显著增强(P<0.01),中药组给药2周时,GFAP的表达较给药1周时及同期模型组与假手术组均显著增强,差别均有高度统计学意义(P<0.01).中药组治疗2周时,梗死灶周围区GAP- 43表达明显增高,与其他2组比较差别有高度统计学意义(P<0.01).相关性分析表明,中药组灌胃2周时,GFAP与GAP- 43在大鼠脑组织中的表达具有相关性,r=0.75,P=0.031 9,GAP- 43表达随GFAP表达的上调而增强.结论 首乌仙海片可诱导缺血性卒中后神经功能重塑,与该药改善星形胶质细胞活性,促进神经轴突的再生有关.     

康复训练对脑梗死大鼠脑GAP-43表达的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠脑的生长相关蛋白（GAP－43）表达的影响。方法：SD大鼠采用光化学法制成脑梗死模型后,随机分康复组,制动组,自由组及正常组,每组大鼠在1,3,7,14,21,28d取脑组织免疫组化染色,以观察脑梗死大鼠各组不同时期脑的GAP－43表达。结果：1,3,7,14d脑梗死周边区可见GAP－43阳性细胞,21,28d时梗死周边GAP－43阳性细胞逐渐减少,康复组较制动组在7,14d明显增加,尤以胼胝体为。结论：康复训练可引起损伤周边区GAP－43表达的变化。提示该区有促进神经新生枝芽的生长作用。     

雌激素对脊髓损伤大鼠运动功能及GAP-43表达的影响

目的 探讨雌激素对脊髓损伤(SCI)大鼠运动功能和损伤区域生长相关蛋白-43 (GAP-43)表达的影响。方法 72只雄性SD大鼠按随机数表法分为假手术组(A组)、生理盐水模型组(B组)、雌激素组(C组)，每组24只，B组、C组制作SCI模型，B组等量生理盐水腹腔注射，C组雌激素腹腔注射。术后3 d、1周、2周、3周检测BBB评分和Rivlin斜板试验。术后3 d、1周、2周、3周时间点处死大鼠取脊髓组织，行免疫组织染色观察GAP-43的表达情况。结果 A组大鼠术后3 d、1周、2周、3周BBB评分分别为(20.48±0.57)分、(21.00±00)分、(21.00±00)分、(21.00±00)分，B组分别为(3.18±0.12)分、(4.28±0.15)分、(6.93±0.50)分、(8.95±0.34)分，C组分别为(3.27±0.15)分，(9.67±0.30)分、(14.06±0.69)分、(16.46±0.39)分，术后3 d、1周、2周、3周比较，A组明显高于B组和C组，C组术后1周、2周、3周明显高于B组，差异均有统计学意义(P<0.05);A组大鼠术后3 d、...     

脑缺血再灌注大鼠GAP-43和RhoA蛋白表达及NEP1-40对其的影响

目的 观察侧脑室注射NEP1-40对脑缺血再灌注大鼠轴突再生、患肢功能恢复和RhoA信号通路活动的影响,探讨其可能的机制.方法 将60只成年雄性SD大鼠分为假手术组、脑缺血对照组、侧脑室注射PBS组和侧脑室注射NEP1-40组;采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型;用Western blot方法检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白(GAP-43)和RhoA蛋白表达;用Montoya设计的"楼梯测试"方法对患肢运动功能进行测试.结果 ①侧脑室注射NEP1-40组大鼠缺血灶周边脑组织GAP-43在术后7 d和14 d均高于脑缺血对照组和侧脑室注射PBS组,以术后7 d最显著.②侧脑室注射NEP1-40组大鼠缺血灶周边脑组织RhoA在术后各时相点显著低于脑缺血对照组和侧脑室注射PBS组.③侧脑室注射NEP1-40组大鼠在术后各时相点"楼梯测试"结果显著高于脑缺血对照组和侧脑室注射PBS组.结论 NEP1-40能够促进脑缺血再灌注大鼠损伤后轴突再生和运动功能恢复,其机制可能与抑制RhoA信号通路活动有关.     

意向运动疗法对大鼠脑缺血再灌注损伤后NT-3及GAP-43表达的影响

目的观察意向运动疗法对脑缺血再灌注损伤后缺血区脑组织NT-3及GAP-43蛋白表达的影响,探讨意向运动疗法对神经再生和修复的作用。方法运用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,随机分为大脑中动脉栓塞模型组(MCAO组)、饲养环境改变组(EM组)、意向运动疗法组(WM组),再灌注后3、7、15 d 3个时间点进行神经功能缺损评分、免疫组化法检测脑缺血区脑组织NT-3、GAP-43蛋白的表达。结果再灌注15 d时WM组神经功能缺损评分显著低于MCAO组及EM组(P<0.05);再灌注7、15 d时WM组的NT-3及GAP-43蛋白表达均显著高于MCAO组和EM组(P<0.05);EM组与MCAO组比较:NT-3及GAP-43蛋白的表达无明显差异(P>0.05);NT-3与GAP-43蛋白的表达变化呈正相关。结论意向运动疗法可促进脑缺血再灌注损伤大鼠缺血区脑组织NT-3、GAP-43蛋白的表达,可能与缺血损伤神经元的再生和修复有关。     

意向运动疗法对大鼠局灶性脑缺血后GFAP和SYP表达的影响

目的探讨意向运动疗法对大鼠局灶性脑缺血2 h后再灌注缺血周围脑组织GFAP和SYP表达的影响及其对神经再生修复作用的可能机制。方法采用线栓法建立(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,缺血2 h后进行再灌注;再灌注24 h后根据Longa神经功能缺损评分选择实验模型,随机分为模型组(MCAO组)、环境改变组(environmental modification,EM)、意向运动组(willed movement,WM),每组再分为3、7、15 d三个亚组;大鼠处死前再进行Longa评分;通过免疫组织化学及免疫荧光观察缺血周围脑组织GFAP和SYP的表达。结果再灌注15 d时,WM组大鼠神经功能缺损评分低于MCAO组、EM组(P<0.05);再灌注7、15 d时,WM组大鼠GFAP和SYP的表达量均高于MCAO组、EM组(P<0.05);MCAO组与EM组比较:任一时间点的GFAP和SYP表达均无统计学差异(P>0.05)。结论意向运动疗法促进了MCAO大鼠神经功能缺损的恢复;可能与其促进缺血周围脑组织GFAP和SYP的表达有关。     

半导体激光照射对大鼠神经损伤后脊髓GAP-43表达的影响

目的　研究 1 5m W半导体激光照射对大鼠损伤坐骨神经后脊髓中神经生长相关蛋白 (growth associated pro-tein,GAP-4 3 )表达的影响 .方法　 96只雄性 SD大鼠制成坐骨神经损伤模型 ,1 5m W半导体激光照射神经损伤部位 ,免疫组化方法观察脊髓内 GAP-4 3表达的变化 .结果　 1 wk内激光照射组和对照组无明显差异 .第 2周和第 4周时激光照射组脊髓内 GAP-4 3表达明显高于对照组 .第 8周时激光照射组较对照组脊髓内 GAP-4 3表达稍低 .结论　 1 5m W半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中 GAP-4 3表达的变化 ,有促进完成神经再生的作用 .     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠运动功能及神经可塑性的影响

目的：观察电针后局灶性脑缺血再灌注（MCAO/R）模型大鼠运动功能恢复情况和脑组织GAP-43、SYN表达的变化,探讨缺血再灌注后脑损伤电针干预的神经可塑性机制。方法：60只健康成年雄性SD（Spraguer-dawley）大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组20只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型（MCAO/R）。电针刺激在造模成功3 h内开始,电针组针刺双侧内关、水沟、三阴交及百会穴,留针30 min,每天针刺1次。假手术组和模型组,不进行任何干预治疗。各组大鼠在7、14 d两个时间点取10只进行运动功能评估及免疫组化SP法观察GAP-43、SYN的表达。结果：运动功能评分：假手术组大鼠无神经功能缺损症状。模型组和电针组比较,7 d时,运动功能评分无明显差异（P〉0.05）,14 d时,电针组大鼠运动功能恢复明显优于模型组（P〈0.05）。免疫组化：假手术组各时间点切片中没有GAP-43阳性细胞表达。大鼠脑梗死后7 d,模型组脑缺血组织周围出现GAP-43阳性细胞,14 d时减少,与假手术组比较差异均有极显著性（P〈0.01）。电针组GAP-43阳性细胞表达在各时间点较模型组显著增加,差异有极显著性（P〈0.01）。假手术组可见SYN表达,大鼠脑梗死后7 d,模型组脑缺血区SYN表达较假手术组减少,模型组SYN表达14 d开始上升,但与假手术组比较明显减少,差异有显著性（P〈0.05）。电针组SYN表达在各时间点较模型组显著增加,差异均有显著性（P〈0.05）。结论：电针可促进局灶性脑梗死大鼠运动功能的恢复,其机制可能与增强脑缺血区周围皮质突触素和GAP-43的表达,增强神经可塑性有关。     

通督调神电针法对脑梗死模型大鼠GAP-43表达的影响

目的 观察通督调神电针法对脑梗死模型大鼠GAP-43表达的影响,探索其对神经功能再塑的影响机制,为临床运用通督调神电针法治疗脑梗死提供实验依据。方法 SPF级雄性大鼠64只,体质量250～280g,采用随机数字法随机分为4个大组,每组16只大鼠。每个大组再随机分为2个亚组,选取7d和14d两个时间点,每组8只。用电凝法制备脑梗死模型。电针组针刺主穴为百会、水沟、大椎、神庭,每天针刺1次,留针30min。模型组、假手术组、正常对照组予以同一时间捆绑固定不予针刺处理。最后免疫组化法观察每组大鼠7d、14d两个时间点梗死灶周围GAP-43阳性细胞的表达,采用JD801形态学图像分析系统进行分析,并对结果进行统计学分析。结果 正常对照组和假手术组中无GAP-43阳性细胞,模型组在7d和14d两个时间点与假手术组比较有极显著意义（P<0.01）;模型组与电针治疗组比较,在7d和14d两个时间点电针组的GAP-43的阳性细胞均较模型组多,且两组差别有极显著意义（P<0.01）。结论 通督调神电针法可促进各时间点脑梗死大鼠脑组织内GAP-43的表达。     

神经节苷脂对脑外伤大鼠大脑皮质和海马区GAP-43表达的影响

目的观察神经节苷脂（GM1）对脑外伤大鼠大脑皮质和海马区神经生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响,探讨GM1促进脑外伤神经修复的可能机制。方法选择出生10周雄性SD大鼠200只,随机分为假手术组60只,无脑外伤,术前腹腔注射生理盐水3 d。脑外伤模型140只,分为模型组70只,术前腹腔注射生理盐水3 d;GM1组70只,术前腹腔注射GM13 d。应用酶联免疫法检测大鼠大脑顶叶皮质和海马区GAP-43于0～24 h不同时间点的表达情况,并在术后1～5 d不同时间点进行行为学检测。结果 （1）GM1组大鼠大脑顶叶皮质0～16 h和海马区0～24 h GAP-43的表达均明显低于模型组（P〈0.01）,而与假手术组比较,大鼠顶叶皮质区8～24 h GAP-43的表达,差异有统计学意义（P〈0.01）。（2）GM1组大鼠大脑顶叶皮质GAP-43的表达,术后随着时间的增加而升高,至24 h已达模型组水平。（3）假手术组的行为学表现1～5 d均优于模型组和GM1组（P〈0.01）,GM1组在术后2～5 d运动能力逐步增强,行为学表现优于模型组（P〈0.05）。结论预防性使用GM1有效地促进大鼠大脑皮质GAP-43的表达升高,降低脑外伤大鼠脑损伤程度,从而发挥其对实验性脑外伤大鼠的神经保护作用。     

白脉软膏对脑缺血大鼠脑组织p38 MAPK及GAP-43蛋白表达影响的实验研究

目的通过观察脑缺血后白脉软膏对大鼠脑组织p38MAPK及GAP-43蛋白表达的影响,探讨白脉软膏对脑组织的神经保护作用。方法60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组、白脉干预组,大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,分别于1、3、7、14d处死动物,采用免疫组织化学法观察各组脑组织p38MAPK和GAP-43蛋白的表达。结果p38MAPK缺血组的表达在7、14d分别为178．2±18．7、164．8±21．5,显著高于白脉组的153．2±21．9、120．2±18．6（P〈0．01）;GAP-43白脉组的表达在7、14d分别为62．2±6．4、55．0±7．6,也显著高于缺血组的35．7±4．0、33．0±3．7（P〈0．01）。结论白脉软膏可调节脑缺血后p38MAPK和GAP-43的表达,并与损伤时间的变化有一定相关性,提示白脉软膏可能与损伤后神经元的再生、修复有关,有进一步研究的价值。     

复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后GFAP表达的影响

目的研究复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达的影响。方法实验采用90只清洁级SD大鼠,随机分为6组（每组15只）：假手术组（Sham组）,模型组（I/R组）,复方蒲黄大剂量组（PHH组）,复方蒲黄中剂量组（PHM组）,复方蒲黄小剂量组（PHL组）,脑血栓片组（NXS组）。采用右侧颈总动脉夹闭手术,建立大鼠脑缺血再灌注模型,分别在术后6 h、24 h、72 h,运用TTC染色计算脑梗死体积,运用免疫组化方法检测脑组织GFAP的动态变化。结果GFAP的表达呈现随时间增加而增长,与I/R组相比较,PHH组、PHM组在术后24 h、72 h表达增长显著增加（P〈0.05）。结论复方蒲黄颗粒能够有效减小大鼠脑缺血再灌注后脑梗死体积,调节脑缺血再灌注损伤后GFAP蛋白表达,以大、中剂量作用最为显著,这可能是本方对全脑保护的重要疗效机制之一。     

川芎嗪对宫内生长受限幼鼠生长发育及脑损伤GAP-43蛋白表达的影响

目的:研究钳夹子宫血管致宫内生长受限幼鼠(FGR)脑神经相关生长蛋白-43(GAP-43)的表达及川芎嗪对FGR幼鼠及脑海马GAP-43蛋白表达的影响。方法:通过钳夹子宫血管30 min建立FGR模型,测出生当天及生后7 d假手术组、模型组、川芎嗪低剂量组及川芎嗪高剂量组幼鼠的体重、脑重、肝重,应用免疫组化方法观察川芎嗪对FGR幼鼠脑海马GAP-43蛋白表达的影响。结果:出生当天,模型组幼鼠的体重、脑重、肝重、GAP-43蛋白的表达均明显低于假手术组(P<0.01);川芎嗪低剂量组体重、脑重、肝重、GAP-43蛋白的表达与模型组无显著差别(P>0.05),川芎嗪高剂量组体重、脑重、肝重、GAP-43蛋白的表达明显高于模型组(P<0.01)。生后7 d,4组幼鼠体重无明显差异(P>0.05),但模型组的脑重、肝重及GAP-43蛋白的表达仍显著低于假手术组及川芎嗪高剂量组(P<0.05);同川芎嗪低剂量组无显著差异。结论:足够剂量的川芎嗪对钳夹子宫血管致FGR幼鼠脑组织有明显的保护作用。     

姜黄素对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用及GAP-43蛋白表达的影响

目的 观察姜黄素对阿尔茨海默病(AD)细胞模型的保护作用及其对生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响.方法 以Aβ25~35作用于原代培养大鼠海马神经元,建立AD细胞模型,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;实验分为空白对照组、模型组、10和20μmol/L姜黄素组,采用流式细胞术检测姜黄素对凋亡的影响;采用免疫细胞化学分析观察细胞突起生长情况,计算GAP-43阳性细胞率;采用Western印迹法检测GAP-43蛋白的表达.结果 与模型组比较,姜黄素能显著减轻Aβ25~35的毒性损伤,神经元细胞存活率升高,凋亡率下降(P<0.01);可显著增加平均突起长度,增高GAP-43阳性细胞率和GAP-43表达(P<0.05或P<0.01).结论 姜黄素对AD细胞模型有保护作用,其机制可能与上调GAP-43的表达有关.     

糖尿病早期大鼠背根神经节IGF-I与GAP-43 mRNA的表达

目的:观察糖尿病早期(2周)大鼠背根神经节中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)与生长相关蛋白-43(GAP-43)基因的表达变化以及胰岛素对其的影响。方法:按60mg/kg予SD大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素制备胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型,然后将造模成功的大鼠随机分成模型组与治疗组,治疗组于造模成功后第2天开始皮下注射胰岛素进行治疗,qd。2周后取各组大鼠背根神经节(DRG),Trizol法提取总RNA,应用RT-PCR法测定IGF-I与GAP-43 mRNA的表达。结果:在糖尿病早期大鼠DRG中,IGF-I,GAP-43 mRNA的表达显著下调,胰岛素能明显上调IGF-I mRNA的表达,对GAP-43 mRNA的表达有上调趋势。结论:在早期糖尿病DRG中IGF-I,GAP-43 mRNA表达下调,参与了糖尿病外周神经病变的发生发展。     

大鼠坐骨神经切断后相应脊髓节段中GAP-43表达的变化

目的 探讨成年Wister大鼠在坐骨神经切断后GAP-43于相应脊髓节段前角运动神经元内的表达变化.方法 选取健康成年雄性Wister大鼠60只,随机分为坐骨神经切断组和对照组,分别于术后1、2、4、8、12、16周处死后取其L4～L6脊髓,利用免疫组织化学技术检测GAP-43在相应脊髓节段中的表达变化,并利用影像分析系统进行统计学分析.结果 在对照组中GAP-43表达呈阴性,随着时间的变化无明显改变.坐骨神经切断组与对照组在不同时相中的变化:1周时对照组中胞体内GAP-43有明显表达,2周达到高峰,4～8周时呈下调趋势,9～16周时GAP-43在神经元中仍有表达.结论 坐骨神经切断可导致成年大鼠相应脊髓阶段中前角运动神经元GAP-43表达明显增加,表明周围神经损伤后,神经元的再生能力增强,但并不能长时间持续.     

新生鼠脑缺血预处理后海马CA1区GAP-43的表达

目的:观察新生Wistar鼠脑缺血再灌注后海马CA1区生长相关蛋白43(GAP-43)的表达和意义. 方法:通过阻断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉45 min制备脑缺血模型,设置假手术组、缺血再灌注组和预缺血-缺血再灌注组. 采用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测三组新生鼠不同时点海马CA1区脑组织GAP-43的动态变化及三组光镜下脑组织病理改变. 结果: ①脑组织病理改变:假手术组大鼠无异常病理改变,缺血再灌注组神经细胞变性、坏死,预缺血组-病理损伤较缺血再灌注组轻. ②GAP-43表达:缺血再灌注组海马GAP-43表达在再灌注后24 h时开始增高,7 d达高峰,至14 d与假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.05);预缺血-缺血再灌注组GAP-43表达较缺血再灌注组增加更明显,与假手术组和缺血再灌注组比较均差异有统计学意义(P＜0.05). 结论: 新生鼠脑缺血预处理可减轻再次严重脑缺血对神经细胞的损伤,脑缺血预处理后海马CA1区GAP-43表达和合成增加,GAP-43表达增加可能与神经元再生和轴突重塑有关,是脑缺血后神经细胞内源性代偿机制之一.     

Propentofylline对大鼠脊髓损伤后GFAP蛋白表达的影响

目的观察急性脊髓损伤后propentofylline干预对星形胶质细胞GFAP蛋白表达变化的影响。方法取SD大鼠60只随机分为2组（n=2）：药物干预组、对照组。用Allen法建立急性脊髓损伤动物模型,药物干预组SD大鼠腹腔注射propentofylline,对照组腹腔注射等体积生理盐水,用免疫组化染色的方法和组织扫描光度测定法观察脊髓GFAP蛋白表达的变化。结果对照组损伤边缘区GFAP细胞数目增加、胞体肥大,GFAP表达增强,干预组propentofylline干预后,GFAP表达增强被抑制,胞体肥大程度减轻,GFAP阳性细胞数减少。结论在急性脊髓损伤后,propentofylline对脊髓损伤后的的星形胶质细胞的活性具有明显的调节作用。