模拟缺血对左心室心肌细胞瞬间外向钾电流跨壁异质性的影响

目的研究模拟缺血对左心室心肌细胞瞬间外向钾通道电流(Ito)的跨壁异质的影响。方法采用膜片钳全细胞模式记录左心室3层心肌细胞的Ito,并观察模拟缺血对心肌Ito跨壁异质性的影响。结果左心室3层细胞的Ito电流存在异质性,表现为心外膜层(Epi)的Ito电流密度-电压关系(I-V)曲线最高,测试电压 70mV的Ito电流密度Epi明显大于中层细胞(M)和心内膜细胞(Endo),Epi、Endo和M的Ito电流密度分别为113.06±16.32(n=10),30.12±6.58(n=9)和51.43±5.68 pA/pF(n=8)。3层细胞的Ito失活无明显差异,M细胞的Ito失活后再恢复最慢。模拟缺血后,Epi的Ito I-V曲线呈时间依赖性下移,Endo呈时间依赖性上移,M细胞先上移然后下移;M细胞的Ito失活曲线左移,而Epi和Endo右移;模拟缺血3层细胞的Ito失活后再恢复无明显差异。结论左心室心肌细胞的Ito存在跨壁异质性;模拟缺血缺氧增加了兔左心室Ito的跨壁异质性。     

奎尼丁对大鼠右心室肌细胞瞬间外向钾电流抑制作用的研究

目的:探讨奎尼丁对大鼠右心室肌细胞复极1期末4-氨基吡啶敏感的非钙依赖性瞬间外向钾电流(Ito1)的抑制作用,以期为Brugada综合征所致恶性心律失常的临床治疗提供必要的线索和思路.方法:酶解和分离单个大鼠右心室肌细胞,在全细胞钳制条件下,观察不同浓度的奎尼丁对大鼠右心室肌Ito1的抑制作用.结果:1在刺激频率为0.2Hz、35℃和去极化试验电压70mv水平,奎尼丁能在临床相关的治疗浓度范围内呈浓度依赖性有效地抑制大鼠Ito1激活离子流.2奎尼丁在试验所给药物浓范围内均不改变Ito1离子流的电压依赖性失活过程.3奎尼丁也不影响Ito1离子流从失活状态恢复.结论:在临床相关的治疗浓度范围内奎尼丁对Ito1激活离子流具有明显抑制作用.     

双异丙吡胺对犬右心室心外膜下细胞瞬间外向钾电流抑制作用的研究

目的：探讨双异丙吡胺对犬右心室心外膜下（Epi）细胞复极1期末4-氨基吡啶敏感的非钙依赖性瞬间外向钾电流（Ito1）的抑制作用，以期为临床药物治疗Brugada综合征等起源于右心室的恶性心律失常疾病提供必要的证据。方法：酶解分离犬右心室Epi单个心肌细胞，在全细胞钳制条件下，观察双异丙吡胺对犬右心室Epi细胞Ito1离子流的抑制作用。结果：（1）在刺激频率为0．2Hz、37℃和去极化试验电压＋70mv水平，在临床相关的治疗浓度范围内双异丙吡胺呈浓度依赖性有效地抑制犬Ito1离子流而无电压依赖性。（2）当刺激频率超过1Hz时，双异丙吡胺对Ito1离子流的抑制作用具有明显的快频率应用依赖性。（3）双异丙吡胺对Ito1离子流的抑制作用依赖于去极化试验电压脉冲提示双异丙吡胺属于通道开放状态阻滞剂。结论：在临床相关的治疗浓度范围内双异丙吡胺能以浓度依赖性方式抑制犬右心室Epi细胞的Ito1离子流，恢复Epi细胞间Ito1离子流的均衡性，因而对Brugada综合征等疾病所致的、以2相折返为基础的恶性心律失常可能有预防作用。     

氯胺酮对大鼠海马神经元瞬间外向钾电流的抑制作用

目的：观察氯胺酮对大鼠海马锥体神经元瞬间外向钾电流（I_A）的影响。方法：酶消化法急性分离Wistar大鼠海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术测定I_A。加用不同浓度（10、30、100、300和1 000 μmol/L）氯胺酮后,计算I_A抑制率,建立氯胺酮的浓度-效应曲线,选择30 μmol/L氯胺酮作I_A稳态激活（及失活）曲线。结果：10 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度无影响;30、100、300和1 000 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度抑制率分别为（11±2）%、（22±3）%、（45±5）%和(53±5)%。IC₅₀为（130±24）μmol/L, Hill系数为1.19±0.56。30 μmol/L氯胺酮使激活曲线的半数最大激活膜电位（V _{1/ 2}）从（-8.70±0.13） mV 移动到 （-11.2±2.10） mV (n=8, P<0.05), K从（15.0±4.6） mV移动到（17.6±5.7）mV (n=8, P>0.05);失活曲线的V _1/2从（-75.53±7.98） mV移动到（-91.94±11.85） mV（n=8, P < 0.05）,K从（10.5±2.2） mV移动到（8.0±1.2） mV（n=8, P>0.05）。30 μmol/L氯胺酮使I_A的激活和失活曲线均向超极化方向明显移动。 结论： 临床浓度的氯胺酮能够同时加速I_A的激活和失活过程,但加速I_A失活的能力大于其加速I_A激活的能力。氯胺酮对中枢神经系统的作用可能与I_A抑制有关。     

儿童法乐四联症的治疗

自１９９１年９月至１９９５年９月对４６例法乐四联症儿童施行根治术，年龄３－１４岁，手术死亡４例，病死率８．７％。讨论了经右房或右房右室相结合径路修补室缺，较小的右室流出道切口疏通右室流出道，尽量保护肺动脉瓣的完整性，体外循环技术的改进等综合措施，是近几年降低手术死亡率的主要措施。     

兔左右心室心外膜下细胞瞬间外向钾电流的异质性

目的:研究兔左心室和右心室心外膜下(epi)细胞复极1期瞬间外向钾电流(Ito1)的异质性。方法:以酶解分离方法获得兔左、右心室epi细胞,应用膜片钳全细胞记录技术定量观察左、右心室epi细胞Ito1的电压依赖性和峰值密度。结果:左、右心室epi细胞的Ito1均呈明显的电压依赖性。在测试电压为0mV和+60mV时,左、右心室epi细胞峰值Ito1密度分别为1.57pA/pF、5.52pA/pF(左心室)和2.44pA/pF和8.99pA/pF(右心室),并且在+10mV至+60mV的测试电压范围内,右心室epi细胞峰值Ito1密度均显著高于左心室epi细胞(P<0.05或P<0.01)。结论:兔右心室epi细胞峰值Ito1密度显著高于左心室epi细胞,这种电异质性分布可能为Brugada综合征等疾病致恶性心律失常的重要离子基础之一。     

房颤患者心房肌瞬间外向钾电流表达的变化

目的:心房有效不应期缩短是使房颤持续的重要原因之一.Ito电流是复极化早期重要的外向电流.此电流活动增加,可使心房动作电位时程及有效不应期缩短.本研究观察房颤患者Ito电流mRNA表达的变化,从分子水平探讨房颤发生的机制.方法:26例行开胸心脏手术的患者,取右心耳50mg.分为两组:窦性心律组15例;持续房颤组11例.采用逆转录聚合酶链反应的方法测定两组患者瞬间外向钾电流mRNA表达的变化.结果:持续房颤患者左心房内径明显较窦性心律患者大[(51.18±9.12)mm比(34.27±4.06)mm,P＜0.01].房颤患者Ito 1(Kv4.3a)基因表达明显减少[(0.91±0.20)比(0.33±0.07),P＜0.01].结论:Kv4.3a基因表达下调可延长心房肌的动作电位时程及有效不应期,房颤患者此基因表达的下调可能是其对抗房颤引起均动作电位时程缩短的一种自适应现象.     

急性心肌梗死1周和8周后心室肌细胞瞬间外向钾电流的变化

目的探讨急性心肌梗死后心外膜梗死区心肌细胞瞬间外向钾电流的变化 ,以及心律失常的发生机制。方法采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型 ,应用膜片钳全细胞记录方法 ,记录急性心肌梗死后 1和 8周心外膜梗死区心肌细胞瞬间外向钾电流的变化。结果瞬间外向钾电流密度 ( 6 0mV)的对比显示 :梗死后 1周组和梗死后 8周组均显著低于对照组 (P均 <0 .0 1) ,但梗死后 8周组较梗死后 1周组有明显增高 (P <0 .0 5 )。结论急性心肌梗死可引起心室肌细胞瞬间外向钾电流密度下降 ,从而导致动作电位平台期延长 ,复极异常 ,可能是导致急性心肌梗死后出现折返性室性心律失常的原因 ;在急性心肌梗死后 8周这种电生理异常有恢复趋势。     

近五年儿童法乐四联症治疗体会

自１９９５年元月～２０００年元月对８１例法乐四联症儿童施行根治术，年龄３．５～１４岁，手术死亡２例，死亡率２．５％。作者认为体外循环技术的提高、手术方法的改进、术后监护治疗的得当等综合措施，是近年法乐四联症手术死亡率得以降低的原因。     

大鼠肺动脉平滑肌细胞的外向钾电流及四乙基铵对此电流作…

以全细胞膜片钳制技术观察大鼠肺支浃滑肌细胞外向钾电流的基本特性及四乙基铵（ＴＥＡ）对其作用的量效关系。结果表明：１．将细胞电位钳制在－５０ｍＶ，当指令电位大于－５０ｍＶ时，可以记录么电压依赖性的外向钾电流；２．当指仿电位为＋７０ｍＶ时，在１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ和１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ各尝试伯四乙基铵可使外向钾电流分别降低４８．３７％、４１．２１％、２２．１５     

胎儿法洛四联症的超声心动图诊断价值

目的：法洛四联症（ tetralogy of fallot, TOF）是一种紫绀型先天性心脏病,其结构复杂,诊断率低。文中研究胎儿TOF的超声心动图表现,探讨其诊断及应用价值。方法通过对南京市妇幼保健院2010年1月至2012年12月期间5791名具有高危因素的孕妇进行胎儿超声心动图检查,发现99例TOF并对其超声心动图特征,并进行总结分析。结果胎儿超声心动图诊断99例TOF,其中合并肺动脉闭锁11例、完全性房室间隔缺损2例、永存左上腔静脉4例。胎儿TOF的主要声像图特征是室间隔缺损、主动脉骑跨和肺动脉狭窄。联合应用四腔心切面、心室流出道切面及三血管切面进行胎儿超声心动图检查诊断出TOF 99例,经周期性复查均明确诊断。其中68例经尸检或产后手术证实,12例引产后拒绝尸检,19例失访。结论胎儿超声心动图是诊断胎儿TOF的有效手段,具有高灵敏度和特异度。     

小儿法洛四联症的外科治疗

目的：总结51例小儿法洛四联症外科治疗的临床经验。方法：2002年1月～2008年1月,连续行小儿法洛四联症根治术51例,患者平均年龄（6．24±3．35）岁,平均体重（19．88±6．48）kg。结果：全组术后早期死亡2例,死亡率3．9％,死亡原因为低心排综合征和灌注肺。术后并发低心排综合征3例,灌注肺2例,室缺残余分流2例,胸骨感染二开1例,胸腔积液1例。结论：充分解除右室流出道梗阻,合理加宽肺动脉是手术成功的关键。自体心包补片加宽右室流出道及肺动脉,能够有效解决流出道梗阻及肺动脉狭窄,并可预防残余梗阻的发生。合理的转流技术能有效地保护肺功能,减少术后并发症的发生。     

CPUHY002对大鼠心肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的观察一种新合成的磷酸二酯酶Ⅲ(PDEⅢ)抑制剂CPUHY002对大鼠心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法采用全细胞膜片钳技术考察CPUHY002对急性分离大鼠心肌细胞和H9c2细胞系Ito的作用。结果在+50 mV下,CPUHY002对急性分离细胞和H9c2细胞系的Ito呈浓度依赖性抑制,其半数有效抑制浓度(IC50)分别为0.98μmol/L和0.91μmol/L;1μmol/L CPUHY002可使I-V曲线明显下移,Ito峰值分别下降(39.10±2.30)%和(47.32±2.06)%,激活曲线右移,失活曲线左移(未见于H9c2),恢复曲线无显著变化。结论 CPUHY002可浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞Ito。     

Effect of CPUHY002 on transient outward potassium current in rat ventricular myocytes

目的 观察一种新合成的磷酸二酯酶Ⅲ(PDEⅢ)抑制剂CPUHY002对大鼠心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响.方法 采用全细胞膜片钳技术考察CPUHY002对急性分离大鼠心肌细胞和H9c2细胞系Ito的作用.结果 在+50 mV下,CPUHY002对急性分离细胞和H9c2细胞系的Ito呈浓度依赖性抑制,其半数有效抑制浓度(IC50)分别为0.98 μmol/L和0.91 μmol/L;1 μmol/L CPUHY002可使I-V曲线明显下移,Ito 峰值分别下降(39.10±2.30)% 和(47.32±2.06)%,激活曲线右移,失活曲线左移(未见于H9c2),恢复曲线无显著变化.结论 CPUHY002可浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞Ito.     

小儿肺动脉瓣下室间隔缺损型法洛四联症的外科治疗

目的 探讨小儿肺动脉瓣下室间隔缺损型法洛四联症的解剖特征和手术方法。方法 对37例小儿肺动脉瓣下室间隔缺损型法洛四联症采用体外循环心内直视法洛四联症根治术，并与普通四联症作比较。结果 该四联症无圆锥隔，肺动脉瓣环和主动脉瓣环直接相连接，右室流出道梗阻以右室游离壁肥厚为主，需用补片加宽石室流出道以解除其梗阻者占97.3%，而普通四联症需补片加宽解除石室流出道梗阻者占76.01％（P＜0.01）；术后发生低心排综合征5例，3d即控制，住院死亡1例（2.70%）。结论 该四联症室间隔缺损修补须防止左室流出道狭窄，宜补片加宽右室流出道以解除其梗阻，而不宜过多切除肥厚肌束。     

卡维地洛对大鼠心室肌细胞Ito电流影响的实验研究

目的探讨卡维地洛对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的作用.方法采用胶原酶酶解法分离得到大鼠单心室肌细胞;采用膜片钳全细胞技术记录灌流卡维地洛前后Ito电流的变化.结果灌流0.1 mM及1.0 mM卡维地洛后,Ito电流密度分别为(pA/pF)(5.06±1.98),(3.91±0.66),P＜0.05;不同去极化电压水平Ito电流值也有明显减小,Ⅰ-Ⅴ曲线向下方移位.结论卡维地洛对大鼠心室肌细胞Ito电流具有抑制作用,此抑制作用呈浓度依赖趋势.     

镁离子对低氧心肌保护作用的离子通道机制探讨

探讨Ｍｇ２＋对低氧心肌细胞保护作用的离子通道机制。方法采用膜片钳全细胞记录技术及细胞内透析的方法观察低氧时Ｍｇ２＋对心肌细胞钾电流、钙电流、Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换电流及短暂性内向电流的调节作用。结果对１０个细胞观察显示常氧时细胞内１０ｍｍｏｌ／ＬＭｇ２＋对动作电位无明显影响，但可显著抑制低氧时动作电位时程的缩短（Ｐ＜０．０５），同时细胞内Ｍｇ２＋对１０分钟低氧引起的外向性钾电流有明显的抑制作用，对１０个细胞观察显示除极至０ｍＶ时其电流值从对照的２１３０±２４３ｐＡ降至１１８９±２１１ｐＡ，Ｐ＜０．０１；在常氧时细胞外１０ｍｍｏｌ／ＬＭｇ２＋对Ｎａ＋、Ｃａ２＋交换电流有部分抑制作用，细胞外Ｍｇ２＋可显著降低复氧早期短暂性内向电流的诱发率。结论细胞内Ｍｇ２＋可抑制低氧心肌细胞Ｋ＋外流，并对维持细胞内高钾及心肌细胞膜的正常兴奋性有重要意义。而细胞外Ｍｇ２＋对防止心肌缺血再灌流引起的钙超载有一定的作用。     

Ultrastructural alterations of right and left ventricular myocytes in tetralogy of Fallot

We examined the ultrastructure of right and left ventricular myocardial biopsies obtained prior to cardiopulmonary bypass in fourteen patients undergoing total correction of tetralogy of Fallot (TOF). Twelve patients were undergoing primary one-stage repair and two patients had had a previous Blalock-Taussig shunt operation. The ages of the patients ranged from 3 to 35 years. In left ventricular (LV) myocytes, the sarcolemma often formed pouches filled with mitochondria and the muscle fibers showed a disoriented arrangement. In addition, the myofibrils showed hypercontraction and the Z-bands were thickened; the degree of the myofibril contraction was more severe than that in right ventricular (RV) myocytes. These ultrastructural findings are similar to those observed in myocytes under hypoxic conditions. The number of lysosomes in LV myocytes, but not in RV myocyte increased in the older patients. While we have not established a causal relationship between the ultrastructural findings and clinical features in our cases, our observations are consistent with the possibility that early total correction of TOF may be required to prevent the development of hypoxic changes and degeneration of heart muscle.     

40例儿童法洛四联症根治术的体外循环管理

目的探讨儿童法洛四联症(TOF)的体外循环(CPB)管理方法。方法回顾我科自2003年3月至2004年11月进行的40例儿童TOF根治手术的CPB情况,包括血液稀释、灌注方式、心脑肺保护等。结果CPB时间50～178(110.9±26.5)分钟(min),主动脉阻断(ACC)时间36～151(79.6±23.6)min.主动脉开放(CCR)后38例心脏自动复跳,自动复跳率95%。常规应用多巴胺支持撤机,停机顺利。38例采用中低温中低流量灌注,2例采用深低温低流量CPB,CPB中尿量50～1000(324.7±268.9)毫升(ml)。全部应用改良超滤(MUF)7～15(11.2±2.2)min,滤出液500～1000(651.4±110.3)ml,超滤后红细胞压积(HCT)升至35%～40(36.6±1.4)%。术后呼吸机支持时间2.5±99.8(12.4±25.5)小时(h),重症监护室(ICU)停留时间1～8(2.2±0.5)天(d),无死亡病例。结论儿童TOF手术的CPB管理是手术成功的一个重要方面,我们认为:应采用适中的血液稀释和胶体液预充、选择与外科手术相配合的灌注方式、应用MUF、注意术中心脑肺保护。