全自动细胞处理系统制备冰冻红细胞的关键控制点及效果评价

目的 应用ACP 215全自动细胞处理系统制备冰冻红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞,观察冰冻解冻去甘油红细胞的质控指标,就其制备过程中的关键控制点、制备工艺及制备效果进行评价.方法 随机取40袋2～6℃保存6d以内的悬浮红细胞用ACP 215全自动细胞处理系统制备冰冻红细胞,-80℃冰箱保存,37℃融化,再用ACP 215全自动细胞处理系统制备冰冻解冻去甘油红细胞.解冻红细胞洗涤前后留取样本检测冰冻解冻去甘油红细胞质量.结果 红细胞回收率(86±5)%,游离血红蛋白浓度(0.27±0.16)g/L,体外溶血试验(6.76±6.9)%,甘油残余量(0.12±0.08)g/L,残留血小板量(0.03±0.02)%,残留白细胞量(0.24±0.25)%,细菌培养试验阴性.结论 ACP 215全自动细胞处理系统可全程自动化无菌制备冰冻红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞,方法操作简便,高效,产品质量稳定,更有效地保障了临床输血安全.     

ACP 215型血液处理仪制备冰冻红细胞的方法学评价

目的应用ACP 215型血液处理仪制备甘油化红细胞、去甘油化红细胞,观察去甘油化红细胞的质控指标,并对操作方法和制备效果进行评价。方法随机取10袋红细胞悬液(2U/袋),于采血后10天应用215型血液仪处理制备甘油化红细胞,-70℃冰箱保存30天,37℃融化,再应用215型血液处理仪制备去甘油化红细胞。解冻红细胞洗涤前后留取样本检测冰冻红细胞质量。结果红细胞回收率(84±4)%,游离血红蛋白浓度(0.31±0.12)g/L,体外溶血试验(33±15)%,甘油残余量(6.3±2.4)g/L。细菌培养试验阴性。结论ACP 215型血液处理仪可全程自动化无菌制备冰冻红细胞,人为操作误差小,产品质量保证,值得推广。     

深低温保存Rh阴性红细胞冰冻解冻的质量控制

目的探讨深低温保存Rh阴性红细胞冰冻、解冻的质量控制措施。方法使用高浓度甘油添加到Rh阴性血红细胞中,置-65℃以下冰柜冰冻保存。临床需要时37℃水浴复苏红细胞,洗涤过程采用9%／6Nacl洗涤溶液、羟乙基淀粉盐溶液、0．9％Nacl溶液,遵循梯度洗涤方法。结果质控抽检60U冰冻解冻去甘油红细胞回收率（84．4±4．6）％,悬浮红细胞上清血红蛋白含量（O．68±0．26）g／L,体外溶血试验（22．19±4．2）％。残留甘油含量（4．96±0．86）g／L。结论冰冻解冻去甘油洗涤红细胞各项指标均达到国家规定的质量标准,临床输用效果良好。     

深低温保存Rh阴性RBC的质量控制

目的:确保深低温保存Rh阴性红细胞(RBC)解冻后的质量。方法:用ACD抗凝,4℃保存6 d内Rh阴性RBC悬液加入57.1%(g/v)甘油处理后,置-80℃冰冻保存,可以保存10年。临床需要时在39℃水浴中解冻复苏RBC,M115型红细胞洗涤系统洗涤,用生理盐水悬浮RBC。结果:33袋冰冻解冻RBC去甘油后RBC回收率为(80.24±6.19)%,游离血红蛋白浓度为(0.71±0.23)g/L,甘油残留量平均为3.79g/L,体外溶血实验血红蛋白增加率为21.66%。结论:冰冻解冻去甘油红细胞各项指标均达到国家规定的质量标准,临床输用效果良好。     

200例冰冻红细胞制备过程分析

目的 应用全自动血细胞处理仪对红细胞进行甘油化和去甘油化制备操作,分析影响质量指标的因素.方法 应用ACP215全自动血细胞处理仪制备冰冻红细胞,-80 ℃深低温冰箱保存,经37 ℃循环水浴复融,检测冰冻解冻去甘油红细胞质量.结果 制备200例冰冻解冻去甘油红细胞,各项指标均符合国家质量标准.结论 应用ACP215全自动血细胞处理仪进行红细胞的甘油化和去甘油化,操作简便,产品质量稳定,能有效保证临床输血的及时、安全.     

不同保存时间的悬浮红细胞制备冰冻红细胞质量分析

目的检测贮存期7-9d的血液,制备冰冻解冻去甘油虹细胞是否能达到GB18469的标准与贮存期为6d以内的血液制备的冰冻解冻去甘油虹细胞质量差异。方法报废悬浮缸细胞（以ALT及anti-TP阴性制品为主）,（4±2）℃保存期6d内及7-9d的虹细胞悬液各20U制备冰冻虹细胞及去甘油化解冻虹细胞进行质量检测,并做质量比较,观察缸细胞回收率、游离血缸蛋白、残留甘油、体外溶血试验等指标。结果贮存期6d和贮存期7-9d红细胞悬浮制备冰冻解冻去甘油虹细胞质量检测结果无差别,无统计学意义,质量均达到GB18469标准。结论本站对缸细胞悬液贮存期延长制备冰冻解冻去甘油缸细胞,能减少浪费Rh（D）血液资源,满足临床患者急诊需求,减轻工作人员的工作强度。     

M115机洗冰冻红细胞高渗洗涤液用量与流速对红细胞回收率的影响

目的探讨解冻去甘油红细胞机洗过程中高渗盐洗涤液的用量和流速与回收率的关系。方法冰冻红细胞制备通常将冷冻保护剂(甘油)加入红细胞后在-80℃以下保存，洗涤前先把红细胞解冻，然后用糖水洗涤去甘油，再把洗涤的红细胞悬浮在生理盐水溶液内即可。结果高渗盐的用量和流速直接影响红细胞的回收率。结论利用M115机洗解冻去甘油红细胞时，必须严格控制12％NaCl液的用量和流速，才能使红细胞得到较高的回收率。     

新型微波解冻装置解冻冰冻红细胞的方法学评价

目的应用新型微波解冻装置解冻冰冻红细胞,检测质量控制指标,并对新型微波解冻装置和红细胞制备效果进行评价。方法应用新型微波解冻装置解冻以甘油为保护剂-80℃保存的红细胞,用不同浓度的洗涤液洗涤去除甘油,以红细胞回收率、游离血红蛋白含量、残余甘油含量、体外溶血试验和无菌试验为质量检测控制项目。结果新型微波解冻装置能快速冰冻红细胞,解冻后红细胞质量指标均达到《全血及成分质量要求》（GB18469-2001）的要求,在红细胞回收率方面有明显提高,并且缩短了制备时间。结论新型微波解冻装置能快速解冻冰冻红细胞,质量符合标准,为解决血液长期储存、保障供血和稀有血型患者输血及自身输血提供了新的方法和手段,特别在野战、自然灾害等特殊条件下急救能发挥作用,值得推广应用。     

渗透压法检测冰冻解冻去甘油红细胞甘油残留量的可行性

目的 探讨渗透压法检测冰冻解冻去甘油红细胞甘油残留量的可行性.方法 用生理盐水、氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇-磷酸二氢钠(MAP)液、血浆等不同介质溶液制备成含不同甘油浓度的洗涤红细胞,以模拟冰冻解冻去甘油红细胞,用渗透压仪测定其渗透压值,进行线性回归处理与相关系数的计算;并进行溶血干扰试验及重复性试验.结果 渗透压值与甘油含量之间有很好的线性关系,但相同浓度的甘油在不同介质溶液(生理盐水、MAP液、血浆)悬浮的洗涤红细胞中的渗透压值有差异,生理盐水、MAP液、血浆悬浮的甘油浓度为10 g/L的洗涤红细胞的渗透压值分别为434、467、461 mmol/kg.游离血红蛋白在1.466～7.713 g/L时,渗透压测定值的差异无统计学意义.结论 渗透压与甘油含量之间有良好的线性关系,溶血对渗透压测定影响小,可用于冰冻解冻去甘油红细胞的甘油残留量检测,且操作简单、快捷,但测定时应考虑制品的悬浮介质.     

全自动细胞处理系统与手工法制备冰冻解冻去甘油红细胞效果研究

目的探讨全自动细胞处理系统与手工法制备冰冻解冻去甘油红细胞制备效果。方法对2016年6月～2017年8月40袋原料血冰冻红细胞按照洗涤方法的不同分为手工对照组和全自动试验组,每组20袋,试验组采用全自动细胞处理系统制备冰冻解冻去甘油红细胞,对照组采用手工开放式洗涤法进行制备。对试验组和对照组制备的产品进行红细胞产品容量(mL)、血红蛋白含量(g/袋)、游离血红蛋白含量(g/L)、白细胞残留量(×107个/袋)、甘油残留量(g/L)、红细胞回收率(%)及无菌试验等指标的检测分析。结果两组洗涤法制备的冰冻解冻去甘油红细胞产品各项质量指标均符合国家相关规定标准要求,试验组中血红蛋白含量、红细胞回收率明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);游离血红蛋白含量、甘油残留量等指标均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。试验组与对照组在容量、白细胞残留量质量指标方面基本一致,差异无统计学意义(P0.05)。结论全自动细胞处理系统可有效保证临床对Rh(D)阴性患者的紧急抢救用血,为患者抢救生命赢得时间,同时也可减少因手工开放操作而引起的血液细菌污染的可能性,提高采供血机构工作人员工作效率,提升冰冻解冻去甘油红细胞的产品质量,从而确保血液质量和临床用血安全。     

RH（一）红细胞洗涤去干甘油的制备过程及体会

随着临床成分输血的广泛发展,以及卫生部《临床输血技术规范》的实施,临床上对RH（一）血的需求量也在增加,但因无偿献血人群RH（一）比例偏低。亚洲人中不足10％,4℃保存的时间短,一方面满足不了临床应用,另一方面极易造成过期作废,为了更好地满足临床对RH（一）血的需求,甘油化红细胞-80℃储存方法是目前长期保存RH（一）红细胞的最佳保存方法。     

Frozen Red Blood Cells in Transfusion

Red blood cells (RBCs) can be cryopreserved with shelf life of 10 years. However, shelf life of deglycerolized RBCs in conventional open system is just 24 hours, resulting in sporadic use of Frozen RBC (FS-RBC). Recently Naval Blood Research Laboratory (NBRL) method using ACP 215 (ACP^™ 215 Haemonetics Cell Processing System) has been introduced, where shelf life of deglycerolized RBC is 14 days. FS-RBC unit is prepared from single blood donation, which needs to be glycerolized and deglycerolized. NBRL method using ACP 215 in FS-RBC is described. Deglycerolized unit weighed between 325–350 gm with haemoglobin of 15–18 gm/dl and freeze- thaw- wash RBC recovery of 87%. Transfusion of deglycerolized RBC offered advantages such as elimination of need of crossmatching in emergent situations and reduction of transfusion reactions. FS-RBC by NBRL method using ACP 215 has advantages such as long shelf life, meeting unexpected high blood demand in mass casualties situations or availability of rare blood group requirement of individual patient. FS-RBC can be a potential candidate for Indian Armed Forces Blood programme for uninterrupted blood supply during peace and war.Key Words: Frozen red blood cell, Cryopreservation, Blood transfusion, Armed forces blood programme     

血标本存放时间对血细胞检测结果的影响

目的:探讨室温下正常及病理水平血标本存放时间对全自动血细胞分析检测结果的影响。方法:选取40名体检健康人员(对照组)以及20例血液疾病患者(血液病组)血标本,在20 min内检测,然后分别测定室温(25±0.5)℃放置8、9、10、11、12和24 h血细胞参数值。以20 min内测定结果为对照,所有时间点测定结果与之比较。结果:血小板(PLT)、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞变化差异有统计学意义(P<0.05);各测定值与对照组相比,PLT呈下降趋势,11 h后差异有统计学意义(P<0.05),24 h时降低明显;对照组血标本检测结果中,WBC分类变化显著,表现为中性粒细胞比例降低,淋巴细胞比例及单核细胞比例升高(P<0.05);血液病组血液标本检测结果中,RBC、PLT均出现明显降低(P<0.05)。结论:应用全自动血细胞分析仪检测室温放置10 h内标本,重复性较好,结果可靠,可为临床样本检测、复查核对,提高分析前质量控制提供科学依据。     

应用负平衡超滤对婴幼儿含血预充液进行生理化调整的临床研究

目的本研究旨在体外循环（CPB）前应用负平衡超滤（UF）技术对预充库存悬红细胞（悬红）的婴幼儿预充液进行超滤和通过恒温36℃的变温水箱对其进行保温,从而使调整后含库存悬红预充液的血气指标、血糖、乳酸、离子水平以及温度更接近婴幼儿的生理水平。方法随机选取20例10 kg以下婴幼儿在CPB下行心脏手术的循环管路。所有CPB管路均采用一致的配套管道、动脉滤器、超滤器和婴幼儿膜式氧合器。预充均采用150200 ml悬红、500 ml勃脉力、10 g白蛋白、5%碳酸氢钠20 ml。在预充排气同时通过变温水箱维持预充液温度在36℃,在含血预充液混合10 min后利用已连接好的CPB管路上的超滤器对其进行超滤。并分别抽取库存悬红、混匀后10 min（超滤前）、超滤结束后的含血预充液样本,通过分析比较库存悬红、超滤前、后含血预充液的血气指标和离子水平的变化。结果与库存悬红相比,超滤前的含血预充液中K＋、血糖、乳酸、血气的各项指标均有明显改善（P〈0.05）;与超滤前相比,超滤后含血预充液的离子成分、血糖、乳酸、红细胞比容和胶体渗透压等各项指标均有明显改善（P〈0.05）。结论应用超滤的方法处理含库存悬红的预充液并对其进行保温,能有效降低其中的有害成分,使含血预充液的K＋、血糖、乳酸以及血气的各项指标趋于生理化,能减少CPB早期因预充库存悬红的不良成分对婴幼儿血流动力学、离子水平等的影响。     

不同条件影响冷冻血小板质量的研究

目的探讨不同条件制备冷冻血小板质量的影响因素并分析其原因。方法冷冻血小板融化后室内温度下放置于玻璃或瓷砖冷面介质、导热慢的木板或毛巾等介质和（22±2）℃震荡介质中保存,观察冷冻血小板融化复苏后纤维蛋白及絮状不可逆聚集物析出的情况以及冷冻的温度和不同速冻方式对血小板质量的影响。结果冷冻血小板融化后放置于导热性能良好介质,保存血小板纤维蛋白及絮状不可逆聚集率为100％,导热慢的木板或毛巾介质和（22±2）℃震荡保存血小板纤维蛋白及絮状不可逆聚集率为0％,冻结与解冻温差不同,纤维蛋白及絮状不可逆聚集的发生率差异有统计学意义（x2=547．69,P〈0．01）。结论冷冻血小板融化后于（22±2）℃震荡保存冷冻血小板质量更好,所有过程均不可放置冷面介质暂存。     

Frozen red blood cells in transfusion

Red blood cells (RBCs) can be cryopreserved with shelf life of 10 years. However, shelf life of deglycerolized RBCs in conventional open system is just 24 hours, resulting in sporadic use of Frozen RBC (FS-RBC). Recently Naval Blood Research Laboratory (NBRL) method using ACP 215 (ACPTM 215 Haemonetics Cell Processing System) has been introduced, where shelf life of deglycerolized RBC is 14 days. FS-RBC unit is prepared from single blood donation, which needs to be glycerolized and deglycerolized. NBRL method using ACP 215 in FS-RBC is described. Deglycerolized unit weighed between 325–350 gm with haemoglobin of 15–18 gm/dl and freeze- thaw- wash RBC recovery of 87%. Transfusion of deglycerolized RBC offered advantages such as elimination of need of crossmatching in emergent situations and reduction of transfusion reactions. FS-RBC by NBRL method using ACP 215 has advantages such as long shelf life, meeting unexpected high blood demand in mass casualties situations or availability of rare blood group requirement of individual patient. FS-RBC can be a potential candidate for Indian Armed Forces Blood programme for uninterrupted blood supply during peace and war.     

Comparative study of automated cryopreservation of red blood cells

Background

Strategic blood reserves are an important component in meeting blood needs and this can be accomplished through the establishment of a frozen blood program.

Methods

One hundred units of packed RBC were glycerolized using the Haemonetics ACP 215 automated cell processor and placed in a −86 °C deep freezer for freezing and storage. Product weight, hematocrit, RBC count, WBC count and hemoglobin were recorded prior to freezing. Twenty five bags were thawed and deglycerolized after every three months starting at one year from the date of first glycerolization In addition to the earlier parameters the bags were assessed for supernatant osmolality, pH, supernatant hemoglobin, ATP levels and supernatant potassium and from these red cell recovery, percentage hemolysis, supernatant glycerol and red cell viability were estimated. All tests were repeated at the end of 7 and 14 days.

Results

The mean red cell recovery was found to be 86.12% on Day 0 and 84% on Day 14. All the bags showed residual glycerol and pH within the acceptable limits upto Day 14. Percentage hemolysis, Mean ATP levels and mean supernatant potassium levels were within acceptable limits upto Day 14. All the units were sterile upto Day 14.

Conclusion

The data in this study showed that the red cells which were glycerolized using the automated platform ACP 215, frozen at −80 °C for more than a year and deglycerolized again using the ACP 215 had excellent viability while being stored at 4 °C during the 14 days of post-thaw storage.     

Comparative study of automated cryopreservation of red blood cells

Background

Strategic blood reserves are an important component in meeting blood needs and this can be accomplished through the establishment of a frozen blood program.

Methods

One hundred units of packed RBC were glycerolized using the Haemonetics ACP 215 automated cell processor and placed in a −86 °C deep freezer for freezing and storage. Product weight, hematocrit, RBC count, WBC count and hemoglobin were recorded prior to freezing. Twenty five bags were thawed and deglycerolized after every three months starting at one year from the date of first glycerolization In addition to the earlier parameters the bags were assessed for supernatant osmolality, pH, supernatant hemoglobin, ATP levels and supernatant potassium and from these red cell recovery, percentage hemolysis, supernatant glycerol and red cell viability were estimated. All tests were repeated at the end of 7 and 14 days.

Results

The mean red cell recovery was found to be 86.12% on Day 0 and 84% on Day 14. All the bags showed residual glycerol and pH within the acceptable limits upto Day 14. Percentage hemolysis, Mean ATP levels and mean supernatant potassium levels were within acceptable limits upto Day 14. All the units were sterile upto Day 14.

Conclusion

The data in this study showed that the red cells which were glycerolized using the automated platform ACP 215, frozen at −80 °C for more than a year and deglycerolized again using the ACP 215 had excellent viability while being stored at 4 °C during the 14 days of post-thaw storage.     

库血预处理对婴幼儿体外循环血气指标影响的研究

目的探讨库血(库存悬浮红细胞)预处理对婴幼儿体外循环(ECC)各项血气指标的影响。方法 40例体重10~15 kg、预充液需加入库血、拟在ECC下行简单先天性心脏病矫治手术的患儿,随机分为库血预处理组(P组)和对照组(C组),每组各20例。P组于ECC预充、排气后将库血1 U、肝素1 250 U加入储血罐,水箱38℃保温、血流通气比1∶0.5下行零平衡超滤[以复方电解质注射液(勃脉力A)为洗脱液],超滤出液体300 ml。C组仅在排气结束后将库血加入、混匀不予其它处理。分别于麻醉诱导后(T1)、ECC前(T2)、升主动脉阻断5 min后(T3)、停止ECC前(T4)、转入ICU前(T5)五个时点抽取动脉血气,记录各项血气指标:pH、二氧化碳分压(PaCO2)、氧分压(PO2)、碱剩余(BE)、乳酸(Lac)、血糖(Glu)、血钾(K+)。结果 T1、T3、T4、T5各时点两组患者各项血气指标差异均无统计学意义(P0.05);T2时点P组PaCO2、K+、Lac、Glu浓度均降低,与C组的差异有统计学意义(P0.05);T2时点P组的pH、PO2、BE均升高,与C组的差异亦有统计学意义(P0.05)。结论①库血预处理对降低库血的有害成份,使其各项指标趋近生理化有意义。②库血预处理对改善短时间ECC患儿的酸碱平衡、内环境稳定没有影响。     

大量输血对凝血功能影响的临床分析

目的:探讨大量输血后凝血功能的变化和及时输注血浆和(或)血小板的重要性。方法:选择104例大量输血患者,分成单纯输血组、输注红细胞及输400~1 000 ml血浆组、输注红细胞及超过1 000 ml血浆组,对输注的成分血及输血前后PT、INR、APTT、FIB、血小板的结果加以分析。结果:大量输血后,患者PT、INR、APTT延长,FIB、血小板下降,单纯输注红细胞患者改变最明显,其次是输红细胞及少量血浆着,输血同时输注1 000 ml以上血浆凝血机制改变最小。结论:大量输血可使凝血功能变差及血小板降低,适当输注血浆和(或)血小板可减少改变的程度,避免出血加重。