维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影响

目的：探讨细胞分化诱导剂全反式维甲酸对人体肝癌细胞几种酶活性的影响。方法：用 １０μｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸处理 ＢＥＬ－７４０２人肝癌细胞,观察细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、酪氨酸－α－酮成二酸转氨酶（ＴＡＴ）和γ－谷氨酸转肽酶（γ－ＧＴ）活性以及甲胎蛋白（ＡＦ Ｐ）分泌量。结果：１０μｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸使反映肝细胞恶变的指标 ＡＦＰ分泌量和 γ－ＧＴ比活力明显下降（ Ｐ＜ ０．０５或＜０．０１）,ＡＬＰ比活力和反映肝细胞分化的ＴＡＴ比活力则明显升高（Ｐ＜０．０１或＜０．０５）。这些酶学指标与ＡＦＰ分泌量的变化有助于综合反映肝癌细胞的再分化。     

桂皮酸诱导白血病肝癌肺癌细胞的分化和抗肺癌细胞侵袭作用

【目的】探讨桂皮酸对人早幼粒白血病细胞 (HL 6 0 )、人肝癌细胞 (BEL 740 2 )、人肺癌细胞 (PGCL3)分化和抗PGCL3细胞侵袭的影响。【方法】用组织学方法观察各种癌细胞分化的形态学表现 ;用硝基四氮唑蓝 (NBT)还原试验定量测定HL 6 0细胞的机能分化 ;用放射免疫测定法 (RIA)测定肝癌细胞AFP分泌量 ,用酶学方法测定该细胞的鸟氨酸氨基甲酰转移酶 (OCT)、酪氨酸 α 酮戊二酸转氨酶 (TAT)、碱性磷酸酶 (ALP)和γ 谷氨酰转肽酶 (γ GT)的比活力 ;用层粘连蛋白粘附测定法、纤粘蛋白趋化迁移测定法和重建基底膜侵袭测定法测定肺癌细胞的粘附、运动和侵袭能力。【结果】 1mmol/L和 2 5mmol/L桂皮酸处理使HL 6 0细胞形态向成熟方向分化 ,NBT反应显著增强 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。 1mmol/L和 3mmol/L桂皮酸处理使BEL 740 2和PGCL3细胞出现分化改变 ,使BEL 740 2细胞AFP分泌量和γ GT比活力显著下降 (P <0 0 5和P <0 0 1) ,反映肝癌细胞分化的OCT、TAT和ALP 3种酶的比活力则显著升高 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,使PGCL3细胞软琼脂集落形成率下降 ,细胞的粘附能力下降 (3mmol/LP <0 0 1) ,运动和侵袭能力均显著降低 (P <0 0 0 1)。【结论】桂皮酸具有诱导HL 6 0、BEL 740 2和PGCL3细胞分化并有抗PGCL3细胞     

芹菜素诱导人肝癌Hep G2细胞分化

目的:研究芹菜素诱导人肝癌Hep G2细胞分化作用。方法:体外培养人肝癌Hep G2细胞,瑞氏-姬姆萨和考马斯亮蓝染色观察Hep G2细胞形态和微管蛋白排列的变化。放射免疫法检测细胞液甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP);酶促反应试剂盒检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和γ-谷胺酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)的活性;Diamondstone分光光度法测定细胞酪氨酸α-酮戊二酸转氨酶(tyrosine-α-Ketoglutaric acid transaminase,TAT)的含量。结果:10μmol/L芹菜素和全反式维甲酸处理人肝癌Hep G2细胞48小时后,细胞的形态和微管微丝由肿瘤细胞向成熟细胞分化;细胞AFP的分泌和γ-GT的合成显著降低(P<0.01);ALP和TAT的合成则显著升高(P<0.01)。结论:全芹菜素具有诱导人肝癌Hep G2细胞分化作用。     

γ干扰素对Bel-7402细胞的杀伤作用及机制研究

目的:研究γ干扰素对肝癌细胞Bel-7402的影响及对其机制进行探讨。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,用Bel-7402细胞刺激其活化增殖,采用流式细胞仪对其进行免疫表型分析。加入γ干扰素同Bel-7402细胞共培养,MTT法检测肝癌细胞的增殖情况。结果:经肝癌细胞Bel-7402刺激的外周血单个核细胞可增殖分化为抗肿瘤的细胞毒效应细胞,CD4+/CD8+细胞比例偏移,CD8+T淋巴细胞增加,比例可以占到90％以上。扩增的CD8+T淋巴细胞能够显著抑制Bel-7402细胞的生长(P<0.01)。γ干扰素(500 u/mL)的加入在效靶比20:1时,能够增强淋巴细胞对Bel-7402的增殖抑制作用(P<0.05)。低效靶比的情况下(5:1),淋巴细胞的数量对Bel-7402细胞增殖的抑制功能减弱(P相似文献   

奥曲肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽（OCT）对裸鼠人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法建立人肝癌细胞株BEL-7402裸鼠移植瘤模型,实验组皮下注射OCT100μg/kg.d-1,对照组给予相同容积的无菌生理盐水皮下注射,免疫组织化学染色检测OCT作用后裸鼠人肝癌BEL-7402组织中Bcl-2、Bax表达情况的改变,透射电镜观察OCT作用后裸鼠人肝癌BEL-7402组织超微结构的改变。结果 OCT作用后,移植瘤组织中凋亡抑制基因Bcl-2阳性表达率比对照组明显下降（P〈0.05）,凋亡促进基因Bax阳性表达率比对照组显著升高（P〈0.05）。电镜下可见OCT组移植瘤细胞表面微绒毛减少或消失,凋亡细胞多见等改变。结论 OCT能引起人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤组织中凋亡基因Bcl-2及Bax的表达发生改变,诱导组织细胞发生凋亡;OCT能引起裸鼠人肝癌BEL-7402组织超微结构发生典型的凋亡改变。     

血清GPDA,γ-GT与ALP联合检测在原发性肝癌诊断中的价值

目的：探讨联合检测甘氨酰脯氨酸二肽酶（GPDA）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）与碱性磷酸酶（ALP）血清水平，提高原发性肝癌（PHC）诊断价值。方法：GPDA，γ-GT与ALP均采用连续监测法，检测肿瘤患者328例。结善：肝癌组三项酶活性与胃癌组、肺癌组、直肠癌组及对照组比较均高于其他各组，均具有统计学意义。（P〈0．01，P〈0．05）。肝癌组三项阳性率与其他肿瘤组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：联合检测GPDA．γ-GT与ALP可提高对PHC定性诊断水平．在疗效监测方面可为临康提供有价值的资料．     

全反式维甲酸诱导HepG2细胞分化和降低软琼脂克隆形成

目的研究全反式维甲酸(ATRA)体外对人肝癌细胞株(HepG2)分化、软琼脂克隆形成的影响及其机制。方法ATRA处理HepG2,光镜下观察细胞形态,并检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、甲胎蛋白(AFP)等分化指标的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析ATRA对HepG2增殖的影响;软琼脂培养法观察HepG2的克隆形成能力;Western blot检测骨桥蛋白(OPN)表达变化。结果ATRA显著抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞分化,使代表肝细胞恶变的γ-GT比活力、AFP分泌量明显下降。ATRA可降低HepG2软琼脂克隆形成能力并使OPN表达减少。结论ATRA是HepG2有效的分化诱导剂,并可抑制HepG2增殖,其分子机制可能与OPN表达减少有关,为ATRA诱导分化治疗肝癌提供了实验依据。     

188例甲胎蛋白升高患者碱性磷酸酶与γ-谷氨酰转移酶的变化探析

肿瘤严重威胁人类健康,对肿瘤的研究在医学界备受关注,一些肿瘤标志物在临床上的应用在肿瘤的诊治中起到了重要的作用。甲胎蛋白（AFP）是人类认识较早的比较有价值的肝癌和生殖细胞瘤肿瘤标志物,至今已应用了30年。本文拟探讨AFP与酶类肿瘤标志物碱性磷酸酶（ALP）和γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）的关系，分析AFP与ALP、γ-GT在临床肝脏疾病诊治中的作用，使检验分析项目更好的应用于临床诊断。     

生长激素促进体外培养的Bel-7402肝癌细胞增殖

【目的】了解重组人生长激素（rhGH）对体外培养的Bel-7402肝癌细胞增殖的影响。【方法】应用放射性配体法了解GHR在Bel-7402肝癌细胞株的表达情况;采用肿瘤细胞计数、噻唑蓝比色法和集落形成实验了解Bel-7402肝癌细胞株在不同浓度rhGH（0、1、10、100、1000、10000ng／mL）作用下的药物敏感性,计算细胞生长率,集落形成率;并用,H—TdR渗入法了解肿瘤细胞DNA代谢情况。【结果】放射配体法发现Bel-7402肝癌细胞表达GHR,rhGH对体外培养的7402肝癌细胞的生长具有一定程度的刺激作用,表现为rhGH在100ng／mL的浓度时促进肝癌细胞的增殖较为显著,而rhGH在其它浓度时（1、10、1000、10000ng／mL）的部分时段,对肝癌细胞的增殖虽也能表现出一定程度的促进作用,但总体效果较rhGH在100ng／mL浓度时为弱。【结论】一定浓度范围的rhGH对7402肝癌细胞的增殖有促进作用,原因可能与7402肝癌细胞表达GHR有关。     

联苯双酯对人肝癌细胞株的诱导分化作用

作者运用生化和分子生物学方法，探讨了抗肝炎药联苯双酯（ＤＤＢ）对人肝癌细胞分化的影响，结果发现：生长在含有１０＾－ｍｏｌ／ＬＤＤＢ培养液中的人肝癌Ｂｅｌ－７４０２细胞，其甲胎蛋白（ＡＦＰ）的分泌量和γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）活力均明显低于培养相同天数的对照细胞，而白蛋白（ＡＬＢ）的分泌量和酷氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）活性又明显高于对照细胞。ＤＤＢ还能明显增加Ｂｅｌ－７４０２细胞环化腺苷酸     

紫花牡荆素诱导肝癌Hep G2细胞分化

目的:研究紫花牡荆素诱导人肝癌Hep G2细胞分化作用.方法:体外培养人肝癌Hep G2细胞,采用瑞氏-姬姆萨染色显微镜下测量细胞核质比,放射免疫法检测细胞上清液甲胎蛋白(AFP)水平,酶促反应试剂盒检测细胞碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷胺酰转肽酶(γ-GT)的活性;Diamond stone分光光度法测定细胞酪氨酸α-...     

川芎嗪对人肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM中P-gp表达的影响

目的观察川芎嗪（TMP）对人肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的影响,研究TMP对人肝癌多药耐药细胞BEL-7402/ADM的逆转机制。方法将人肝癌细胞耐药株BEL-7402/ADM及其亲本细胞BEL-7402分为：亲本组、耐药组、逆转组（耐药＋TMP）、阳性对照组（耐药＋维拉帕米）、二抗阴性对照组,用免疫组化SABC法和流式细胞术对照观察TMP对BEL-7402/ADM中P-gp表达的影响。结果流式细胞术结果显示耐药组显著高于亲本组（P〈0.01）;耐药＋TMP组和耐药＋维拉帕米组均显著低于耐药组和亲本组（P〈0.01）。免疫组化SABC法显示耐药组P-gp阳性表达率显著高于亲本组（P〈0.01）;TMP组、维拉帕米组的P-gp阳性表达率显著低于耐药组（P〈0.01）。结论 TMP能显著降低人肝癌多药耐药细胞BEL-7402/ADM细胞表面P-gp的表达,增加阿霉素等化疗药物对BEL-7402/ADM的细胞毒性作用,从而增加对肿瘤细胞的抑制率,提高化疗疗效。     

反义IGF-Ⅰ寡核苷酸转染对人肝癌细胞增生及凋亡的影响

为研究胰岛素样生长因子 I(IGF I)反义寡核苷酸转染对人肝癌细胞增生、分化及凋亡的影响 ,探讨寡核苷酸转染治疗肝癌的可行性 ,利用反义核酸技术 ,合成针对IGF I的寡核苷酸片段 ,利用脂质体包裹反义IGF I寡核苷酸片段瞬时转染人肝癌细胞系BEL 74 0 2细胞 ,MTT法检测细胞增生 ;放免法检测培养细胞上清中AFP、CEA的分泌量 ;采用末端标记 (Tunel)法检测细胞凋亡的变化。结果发现转染反义IGF I寡核苷酸可使人肝癌细胞系BEL 74 0 2细胞增生下降 ,AFP、CEA表达降低 ,凋亡细胞数量增多。反义IGF I寡核苷酸转染人肝癌细胞系BEL 74 0 2细胞可以降低细胞增生、减少细胞去分化并诱导肝癌细胞凋亡     

急性布鲁菌病患者强化期治疗前后肝功能的变化

目的分析急性布鲁菌病患者治疗前肝功能损伤特点及强化期治疗后肝功能变化,为临床治疗该疾病提供理论基础。方法采用单样本t检验比较71例急性布鲁菌病患者强化治疗前各肝功能指标值与参考值均数的差异;采用配对t检验分析急性布鲁菌病患者强化期治疗前后肝功能指标的变化情况。结果 71例急性布鲁菌患者中23例（32.39%）ALT升高,最高141.32U/L;12例（16.90%）AST升高,最高75.81U/L;9例（12.68%）ALP升高;10例（14.08%）γ-GT升高;15例（21.13%）TBIL升高;17例（23.94%）DBIL升高。1项及1项以上肝功能异常的患者为38例（53.52%）。71例患者强化期治疗前肝功能指标ALT、AST、ALP、γ-GT、TBIL、DBIL均数与参考值均数比较,均有统计学差异（P均〈0.05）;强化期治疗前后ALT、AST、ALP、γ-GT水平无明显变化（P均〉0.05）,但TBIL、DBIL明显降低（P均〈0.01）。结论急性布鲁菌病患者肝功能损伤较常见,经强化期治疗TBIL、DBIL恢复最快,其余指标恢复慢。     

转染SEA基因肝癌细胞中SEA和抗原呈递相关分子的表达

目的:检测转染SEA基因的BEL-7402肝癌细胞(SEA-肝癌细胞)中,SEA蛋白和抗原呈递相关分子的表达情况.方法:免疫组化检测SEA蛋白在SEA-肝癌细胞中的表达情况,流式细胞仪检测SEA-肝癌细胞HLA-ABC、HLA-DR、CD54、CD80和CD86的表达情况,并与BEL-7402肝癌细胞进行对照.结果:SEA-肝癌细胞经过多次冻存复苏和传代培养,可稳定表达SEA蛋白;BEL-7402肝癌细胞和SEA-肝癌细胞高表达HLA-ABC,部分表达CD54,基本不表达HLA-DR、CD80和CD86,SEA-肝癌细胞表面CD54表达率高于BEL-7402肝癌细胞(P＜0.01).结论:SEA-肝癌细胞经过多次冻存复苏和传代培养,仍能够稳定表达SEA蛋白,SEA-肝癌细胞表面CD54表达水平高于BEL-7402肝癌细胞.     

血清GGT、AFU、ALP及AFP检测对肝癌的临床价值

目的：探讨谷氨酰氨基转移酶（GGT）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、碱性磷酸酶（ALP）以及甲胎蛋白（AFP）对肝癌的诊断价值。方法：GGT采用速率法,AFU、ALP采用酶法,AFP用酶联免疫法,分别测定原发性肝癌组56例、转移性肝癌组64例、其他肝病组50例与正常对照组77例血清标本中GGT、AFU、ALP及AFP含量,结果均采用统计学方法分析。结果：原发性肝癌组、转移性肝癌组中GGT、AFU、ALP、AFP含量显著高于其他肝病组和正常对照组（P〈0.01）;其诊断肝癌（包括原发与转移）的阳性率分别为87.7％、78.9％、85.6％、65.3％和70.3％、45.4％、80.3％、57.3％,与其他肝病组和正常对照组阳性率比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）。四个指标联合应用对原发性肝癌和转移性肝癌的阳性率分别为97.2%和82.6%,与其他肝病组和正常对照组阳性率比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）。结论：GGT、AFU、ALP及AFP联合检测可以明显提高肝癌诊断的准确性。     

新生儿窒息血清总胆汁酸变化观察

目的分析新生儿窒息后血清总胆汁酸（TBA）变化及其临床意义。方法检测92例窒息新生儿和19例无窒息史正常新生儿的血清TBA、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）和γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）。结果窒息组血清TBA及其他肝功能指标（TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、γ-GT）,与正常对照组比较均无显著性差异（P均〉0.05）。轻度窒息组与重度窒息组比较,轻度窒息组和重度窒息组分别与对照组比较,差异也均无显著性（P均〉0.05）。结论血清TBA与新生儿窒息及其窒息程度无明显关系。     

Survivin siRNA对肝癌细胞BEL-7402的增殖与对Survivin基因及蛋白表达的作用

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)对BEL-7402细胞的生长抑制与生存素(Survivin)基因及蛋白表达的影响。方法:合成Survivin siRNA,以不同浓度转染BEL-7402细胞,MTT法测定细胞生长抑制率,RT-PCR、Western-Blot检测BEL-7402细胞Survivin mRNA及蛋白的表达差异。结果:BEL-7402细胞转染FAM荧光标记的siRNA后,细胞内有绿色荧光表达。分别以10、30、50nmol/LSurvivin siRNA转染细胞后,MTT测得的细胞生长抑制率分别为(38.80±1.71)%,(54.50±1.16)%,(66.79±1.10)%,RT-PCR测得的Survivin mRNA表达分别为0.42±0.02,0.28±0.01,0.12±0.01,Western-Blot测得Survivin蛋白表达分别为0.55±0.04,0.32±0.02,0.21±0.02,三项指标与空白对照组、阴性对照组、脂质体对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。随着Survivin siRNA浓度的增加,细胞抑制率呈上升趋势,Survivin mRNA及Survivin蛋白的表达逐渐降低,呈浓度-效应关系。结论:Survivin siRNA能抑制BEL-7402细胞的增殖与Survivin基因和蛋白表达。     

促肝细胞生长素对重度烧伤所致肝脏活性酶异常的疗效

[目的]观察促肝细胞生长素对重度烧伤所致肝脏损伤引起的酶学异常的临床治疗效果.[方法]对76例重度烧伤合并肝脏酶学异常的患者随机分为治疗组和对照组,每组38人.治疗组给予常规烧伤治疗并静脉滴注加入促肝细胞生长素80mg的5％葡萄糖注射液250 ml,1次/d,连续治疗10d.对照组仅给予常规烧伤治疗.两组均于治疗前和治疗后第5、第10天抽取患者静脉血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ- GT)、碱性磷酸酶(ALP)水平,并进行比较分析.[结果]治疗组用药前与治疗5、10d后ALT、AST、γ- GT、ALP检查结果比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组治疗前后检查结果比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗组与对照组在治疗后5d、10d分别对检测结果进行比较,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]应用促肝细胞生长素可降低烧伤后患者肝脏酶学的异常升高、减轻烧伤患者肝细胞损伤.