维甲酸对Bel-7402人肝癌细胞的诱导分化作用

目的：该研究探讨维甲酸对Ｂｅｌ－７４０２人肝癌细胞的分化诱导作用,为肝癌的分化治疗提供资料。方法：用维甲酸处理Ｂｅｌ－７４０２人肝癌细胞,观察细胞增殖、软琼脂集落形成和各项生化指标的变化。结果：１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸显著抑制肝癌细胞增殖,并使肝癌细胞软琼脂集落形成率明显减少,使代表肝细胞分化的酶乌氨酸氨基甲酰转移酶、酷氨酸－α－酮戊二酸转氨酶和碱性磷酸酶比活力明显升高于甲旧白分泌量、γ－谷氨酰转肽     

叶下珠对人肝癌细胞株Bel-7402诱导分化的影响

目的：观察叶下珠对人肝癌细胞株Ｂｅｌ－７４０２诱导分化的影响。方法：方法Ⅰ采用给家兔灌服叶下珠７天后,取其血清加至细胞培养基中进行实验,即血清药理学方法;方法Ⅱ采用直接加叶下珠提取液至细胞培养基中进行实验。应用细胞生物学方法对处理后的Ｂｅｌ－７４０２细胞进行生长曲线、克隆形成,ＡＦＰ和ＡＬＢ的合成和分泌、γ－ＧＴ活性的测定及细胞形态的观察。结果：叶下珠及其血清能够抑制细胞生长及克隆形成,减少ＡＦＰ的合成和分泌,抑制γ－ＧＴ活性,促进ＡＬＢ的合成和分泌,并呈现一定的浓度和时间依赖关系,促使细胞形态向正常方向分化。结论：叶下珠能够诱导人肝癌细胞株向正常方向分化,具有预防原发性肝癌发生的作用。     

康莱特注射液对人下咽鳞状癌细胞裸鼠移植瘤放疗敏感性影响及其机制研究

目的 研究康莱特注射液对人下咽鳞状癌细胞（FADU）裸鼠移植瘤的放射增敏作用,并探讨其对肿瘤微血管生成的影响及机制。方法 采用皮下注射法对裸鼠建立鳞状癌细胞荷瘤模型,并根据实验目的的不同随机分为对照组、单纯放射治疗组、单纯药物（康莱特注射液）治疗组及联合（放射+康莱特注射液药物治疗）组。通过测量各组裸鼠肿瘤的体积并绘制生长曲线,计算抑瘤率;采用免疫荧光检测移植瘤中CD31 的表达情况并进行计数微血管密度（NVD）;提取肿瘤组织总蛋白,实时定量PCR 和Western blot 分别检测移植瘤组织中Periostin和VEGF-C 的mRNA 和蛋白表达。结果 与单独药物治疗及单纯放疗相比,联合治疗组肿瘤体积显著减少（P＜0.05）,此时其联合指数（CI=0.83）。免疫荧光结果显示联合治疗组也能显著减少微血管密度,与对照组、单纯药物组和放疗组比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）。此外,虽然放疗和康莱特注射液单独处理也能降低移植瘤组织中Periostin 和VEGF-C 的mRNA 和蛋白表达,但两者联合后其mRNA 和蛋白表达水平进一步减少。结论 康莱特注射液可增强FADU 细胞裸鼠移植瘤对放疗的敏感性,其机制可能与影响Periostin 和VEGF-C 的表达有关。     

康莱特注射液对舌癌细胞株Tscca裸鼠抑制作用的研究

目的：探讨康莱特注射液在裸小鼠体内的抑瘤作用。方法：将体外培养的人舌鳞癌细胞株Tscca接种于裸小鼠皮下,建立移植瘤模型,观察康莱特注射液和平阳霉素对Tscca细胞移植瘤的抑瘤效果,结果：康莱特注射液和平阳霉素对Tscca细胞移植瘤的抑制率分别为79．8％和83．2％,两者无显著性差异。结论：康莱特注射液对口腔鳞癌有较好的治疗作用。     

全反式维甲酸和丁酸钠对人肝癌细胞的诱导分化作用

探讨了10μmol／L全反式维甲酸、25μmol／L丁酸钠及两者联台作用对人肝癌细胞Bel—7402的增殖和甲胎蛋白分泌量的影响，结果表明维甲酸和丁酸钠及两者联合作用均能明显抑制Bel—7402细胞的增殖，明显降低甲胎蛋白的分泌量，联合作用强于单独作用。     

c-Myc反义寡核苷酸对人肝癌Bel-7402细胞增殖的双向调节作用

目的观察c-Myc反义寡核苷酸(c-Myc ASODN)对人肝癌Bel-7402细胞增殖的双重调节作用,探讨c-Myc基因的生物学功能.方法台盼兰拒染细胞计数,CCK-8细胞检测试剂盒检测各组细胞增殖抑制率,计算单纯黄连素组及合用c-Myc ASODN后IC50.结果单纯黄连素及c-Myc ASODN均能明显抑制细胞的增殖(P＜0.05),将黄连素合用c-Myc ASODN后,细胞增殖抑制率低于单用黄连素组,但仍高于c-Myc ASODN组.黄连素作用Bel-7402细胞的IC50值在合用c-Myc ASODN后增加1.42倍.结论c-Myc基因在Bel-7402细胞细胞生长环境良好时可促进细胞的生长,在细胞生长环境不利的情况下则诱导细胞的的凋亡,抑制细胞的生长.依据环境不同,对Bel-7402细胞增殖具有不同的调节作用,c-Myc ASODN通过下调c-Myc基因的表达,在不同的环境下亦表现出不同的生物学效应.c-Myc ASODN与黄连素合用能明显降低Bel-7402细胞对黄连素的敏感性.     

康莱特注射液的药理作用与临床评价

康莱特注射液的主要成分为薏苡仁油，具有明显的抑瘤作用、免疫功能增强作用和镇痛作用。收集和查找文献资料，从药理作用、临床研究、药物不良反应等几个方面评价康莱特注射液。为其临床应用和进一步研发提供参考。     

康莱特注射液对宫颈癌疗效的临床病理研究

目的：探讨康莱特注射液对宫颈癌组织Langerhans细胞（LC）的影响。方法：61例患者随机分为治疗组32例和对照组29例,治疗组采用康莱特注射液治疗,采用免疫组化S-P法观察手术切除宫颈癌组织内LC的变化及形态特征,并与对照组比较。结果：治疗组宫颈癌组织内LC显著增多（P〈0.05）,且与癌细胞密切接触,反映对癌细胞杀伤的作用增强。结论：康莱特注射液具有抗癌作用,可改善宫颈癌患者围手术期机体的免疫功能,提高手术治愈率,延长生存期。     

人胎肝干细胞的体外诱导分化

目的 :体外分离和诱导分化人胎肝干细胞。方法 :原代分离培养人胎肝干细胞集落 ,免疫细胞化学鉴定细胞集落分子标志物的表达 ;在体外因子作用下诱导干细胞定向分化为成熟肝脏细胞 ,对其生物学特性进行初步鉴定。结果 :从人胎肝组织中成功分离表达AFP、Albumin、Cytokeratin等标志物的胎肝干细胞集落 ;在体外因子作用下肝干细胞定向分化为成熟肝脏细胞。结论 :人胎肝中同样存在具有干细胞特性的原始细胞 ,体外可定向分化为成熟肝细胞。人肝干细胞的分离培养对于肝脏发育及其病理学的深入研究奠定了良好的基础。     

中药诱导肝癌细胞分化的研究进展

中药作为治疗肝癌的一种方法,因其毒副作用较小,可以稳定或部分缩小病灶,改善肝脏功能,提高患者生活质量而受到广泛重视。研究发现中药对肝癌细胞的作用机制涉及抑制癌细胞增殖、诱导分化、诱导凋亡等方面。其中在中药诱导肝癌细胞分化方面目前已有大量的研究,中药可能通过改变     

康莱特注射液联合紫杉醇对人乳腺癌细胞的化疗增效作用

目的 探讨康莱特注射液(KLT)对紫杉醇(PTX)抑制人乳腺癌细胞增殖及侵袭能力的增效作用及其相关机制.方法 本实验以体外培养的人乳腺癌细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell法检测MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、侵袭能力,实时荧光定量(qRT)-PCR、Western blot分别检测C-myc、CyclinD1和血管内皮生长因子(VEGF) mRNA和蛋白水平变化.结果 PTX单药能有效抑制人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭能力,降低C-myc、CyclinD1和VEGF mRNA及蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);KLT呈浓度依赖地增强PTX的作用,与PTX单独用药比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 KLT具有增强PTX抗乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的作用,此作用可能与下调C-myc、CyclinD1和VEGF的表达相关.     

绿芦笋对体外人肝癌细胞生长的影响

在体外培养人肝癌细胞（ＢＥＬ－７４０２）过程中，加入自制的绿芦笋原汁和绿芦笋乙醇提取液，同时选用５－氟脲嘧啶和三尖杉酯碱作为阳性药物，观察对细胞生长的抑制作用。每天每组取３瓶细胞进行活细胞计数，连续１０ｄ并绘制生长曲线，结果表明，低浓度的绿芦笋原汁和绿芦笋乙醇提取液（２０ｍｇ／ｍｌ）能显著抑制肝癌细胞的生长。     

康莱特加同步放化疗治疗局部晚期非小细胞肺癌临床研究

目的：观察康莱特注射液（KLT）联合同步放化疗对局部晚期非小细胞肺癌的治疗效果。方法：48例局部晚期非小细胞肺癌患者,随机分为两组,综合组：25例,采用盖诺＋顺铂方案同步放化疗,放疗予常规分割,2Gy/f,总量56～60Gy,同时加用康莱特注射液200ml/d静脉滴入,21天为1个疗程,共2个疗程。对照组：23例,采用盖诺＋顺铂方案同步放化疗。2疗程后评价疗效,通过KPS评分、体重变化观察生存质量改善情况。结果：两组完全缓解率分别为20.0%和13%（P〉0.05）;有效率分别为80.0%和69.5%（P〉0.05）;综合组3级以上骨髓抑制发生率为40.0%,而对照组为69.6%（P〈0.05）;综合组3级以上消化道不良反应发生率为8.0%,对照组为34.8%（P〈0.05）;综合组无3级以上放射性肺炎发生,而对照组为4.4%（P〉0.05）;综合组3级以上放射性食管炎发生率16.0%,对照组为43.5%（P〈0.05）;综合组治疗前后KPS评分及体重评分明显高于对照组（P〈0.05）。结论：康莱特联合同步放化疗可以减轻放化疗引起的胃肠道反应,减少3级以上骨髓抑制和3级以上放射性食管炎的发生,使患者的生存质量得到改善,但从疗效分析,NP方案同步放化疗是否联合使用康莱特,无统计学差异。     

大鼠静脉注射康莱特注射液的药动学研究

目的：研究康莱特注射液在正常大鼠体内的药动学。方法：采用甘油三酯试剂盒检测康莱特注射液经尾iv后大鼠血清中外源性甘油三酯的浓度变化,外源性甘油三酯浓度为测定血样中甘油三酯扣除本底后的浓度,采用3P97药代软件计算药动学参数。C_max为实测值,AUC计算采用梯形法。结果：康莱特注射液10、5 mL/kg剂量的主要药动学参数：C_max分别为（8.532±1.031）、（5.418±0.764）mmol/L,AUC_0-t分别为（13.248±3.692）、（5.339±1.219）mmol/L?h,V_c分别为（1.030±0.131）、（0.756±0.150）L²/（kg·mol）,CL_s分别为（0.838±0.319）、（0.975±0.330）L²/（kg·mol·h）,t _1/2α 分别为（0.481±0.168）、（0.322±0.109）h,t _1/2β分别为（1.452±0.776）、（1.384±0.404）h。结论：康莱特注射液经尾iv给药后在大鼠体内的药动学过程经拟合为二室模型。     

康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响

目的 观察康莱特注射液(KLT)对Lewis肺癌小鼠模型免疫功能的影响.方法 将40只C57BL/6小鼠制成Lewis肺癌模型,随机分为模型组和KLT高、中、低剂量组,每组10只.建模第2天起,KLT高、中、低剂量组每天分别给予腹腔注射KLT 25、12.5、6.25 mL/kg,连续14 d;模型组不予任何处理.第16天,处死小鼠,称取体质量、肿瘤和脾脏质量,计算肿瘤抑制率和脾脏指数;MTT法检测脾脏中T细胞增殖活力;ELISA检测脾细胞中IL-2的表达;Western blot检测脾脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达.结果 KLT高、中、低剂量组的肿瘤抑制率逐渐降低;KLT高、中剂量组的脾脏指数高于模型组(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,KLT高、中、低剂量组脾脏中T细胞增殖活力明显升高,KLT高、中剂量组脾细胞中IL-2的表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,KLT高、中、低剂量组胞核中NF-κB蛋白表达随给药剂量增加而升高;胞质中NF-κB和IκBα蛋白表达随给药剂量增加而下降.结论 KLT在抗肿瘤的同时能通过提高T细胞增殖活力,调节IL-2、NF-κB、IκBα等因子的表达,达到增强机体免疫功能的目的.     

Effect of lidamycin on telomerase activity in human hepatoma BEL-7402 cells

Objective To investigate the effect of lidamycin (LDM) on telomerase activity in human hepatoma BEL-7402 cells under the condition of LDM inducing mitotic cell death and senescence. Methods Chromatin condensation was detected by co-staining with Hoechst 33342 and PI. Cell multinucleation was observed by Giemsa staining and genomic DNA was separated by agarose gel electrophoresis. Fluorescent intensity of Rho123 was determined for mitochondrial membrane potential. MTT assay and SA-β-gal staining were employed to analyze the senescence-like phenotype. The expression of proteins was analyzed by Western blot. Telomerase activity was assayed by telomerase PCR-ELISA. Results Mitotic cell death occurred in LDM-treated cells characterized by unique and atypical chromatin condensation, multinucleation and increased mitochondrial membrane potential. However, no apoptotic bodies or DNA ladders were found. In addition, apoptosis-related proteins remained nearly unaltered. Senescence-like phenotype was identified by increased and elongated size of cells, growth retardation, enhanced SA-β-gal activity and the changes of senescence-related protein expression. Telomerase activity markedly decreased (P<0.01) in LDM-treated hepatoma BEL-7402 cells. Conclusion Mitotic cell death and senescence could be triggered simultaneously or sequentially after exposure of hepatoma BEL-7402 cells to LDM. The decrease in telomerase activity may play a key role in the defective mitosis and aging morphology. Further investigation of detailed mechanism is needed.     

青蒿酯钠抗人肝癌（BEL—7402）与诱导凋亡

应用体内外抑瘤实验、细胞形态学观察、流式细胞仪、Westernblot实验进行检测和观察，探讨青蒿酯钠抗肿瘤作用及机制。结果表明，青蒿酯钠对人肝癌有体内、外抗肿瘤作用；诱导人肝癌细胞凋亡，可能是其抗肿瘤作用机制之一；诱导体外人肝癌细胞凋亡通过P53非依赖性途径。     

树突状细胞疫苗诱导免疫效应细胞对肝癌细胞BEL-7402的生长抑制

目的:体内外观察多种细胞因子和/或肿瘤相关抗原(tumor allogenic antigen,TAA)刺激的正常人树突状细胞(Dendritic cells,DC)诱导免疫效应细胞对BEL-7402的生长抑制.方法:体外分别用人GM-CSF、IL-4、TNF-a、BEL-7402肿瘤相关抗原(TAA)和人IL-2刺激正常人DC和去DC的单核细胞(免疫效应细胞),6 d后混合培养DC和免疫效应细胞1 d.体外实验时效应细胞分无DC刺激组(A0组)、细胞因子培养的DC刺激组(A1组)、细胞因子和TAA培养的DC刺激组(A2组).体内实验时,裸鼠分为3组:预防组(Ⅱ),于接种BEL-7402前2天给DC激活的免疫效应细胞;治疗组(Ⅲ),待全部裸鼠移植瘤长出时给DC激活的免疫效应细胞;组Ⅱ、Ⅲ于给予DC激活的免疫效应细胞后再间断给予DC培养上清液6次.对照组(Ⅰ)给等量的1640培养液.结果:体外实验中最大杀伤效率:A2组为81%,A1组为68.1%,A0组为3.5%.体内实验中:组Ⅰ和组Ⅲ第12天时12例全部发生移植瘤;组Ⅱ,观察30 d时,6例有1例发生移植瘤,观察45 d时,仍只有1例发生移植瘤,组Ⅰ、Ⅱ相差有非常显著性意义(P=0.00466);于给予DC激活的免疫效应细胞后的第45天处死所有裸鼠并称瘤体的重量,组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ两两比较相差有非常显著性意义(P＜0.01).结论:DC在抗恶性肿瘤中有重要作用.     

康莱特诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨康莱特(KLT)对人胰腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 采用MTT法观察KLT对人胰腺癌细胞株8988细胞增殖的抑制作用。采用TUNEL染色、DNA梯度电泳法和流式细胞术检测细胞凋亡改变，并以RT-PCR和Western blot检测凋亡调节基因p53和bcl-2的表达。结果 KLT能明显抑制人胰腺癌8988细胞的生长，且呈时间和浓度依赖性。KLT作用后8988细胞呈现凋亡特征，TUNEL染色可见发黄绿色荧光的凋亡细胞，DNA电泳可见典型梯形条带，流式细胞术显示凋亡细胞比例升高。RT-PCR和Western blot检测可见p53基因表达显著增加，而bcl-2基因表达减少。结论 KLT能诱导人胰腺癌细胞凋亡，其作用可能与凋亡调节基因p53的上调和bcl-2的下调有关。     

胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响

目的 了解胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响.方法 12.5 μmol/L胡桃醌作用于BEL-7402细胞24h后固定,分别行HE染色、考马斯亮蓝染色、扫描电镜及透射电镜样品制备.结果 12.5 μmol/L胡桃醌处理组细胞形态和细胞骨架发生改变.扫描电镜结果显示BEL-7402细胞胞体体积缩小,与周围细胞群脱离,表面微绒毛卷曲、畸变、小球结构逐渐增多,细胞间连接逐渐断裂,细胞间隙增宽,有凋亡小体形成.透射电镜结果显示胡桃醌作用BEL-7402细胞24 h后,细胞内质网扩大,线粒体结构疏松,胞核核仁裂解,凋亡小体形成.结论 胡桃醌能有效改变人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构,诱导细胞凋亡.