瑶药风湿骨痛喷雾剂Ⅲ的质量标准研究

目的:建立瑶药风湿骨痛喷雾剂Ⅲ的质量标准。方法:对制剂中钩吻进行薄层色谱法定性鉴别;用高效液相色谱法测定制剂中钩吻素子。结果:在薄层色谱中能检出钩吻;钩吻素子在0.199 2～3.187μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 7)。平均回收率为98.58%,RSD为1.41%(n=6)。结论:所建立的方法稳定可靠,可有效控制该制剂的质量。     

HPLC法快速检验几种含黄芩、丹参中成药

摘 要 目的: 建立几种含黄芩、丹参药材药物的高效液相色谱快速鉴别方法。方法: 通过对各药物所含药材成分进行分析,采用不同的快速提取方法制备供试溶液,建立液相色谱分析方法,确定药材的液相色谱特征图谱。结果:试验中含相同药材的不同药物均具有相同的特征色谱峰,通过特征图谱色谱峰数及相对保留时间可对所含药材进行定性鉴别,与对照品色谱峰面积的比较可计算出样品中指标成分的含量。结论:本文方法可以对不同药物中所含的黄芩、丹参药材成分进行快速鉴别,对指标成分进行快速半定量,对药物质量进行快速筛查。     

钩吻素子抗焦虑作用及其对海马区神经甾体水平的影响

目的：进一步明确钩吻素子的抗焦虑作用并探讨其对大鼠海马区神经甾体水平的影响。方法以地西泮为阳性对照药,大鼠高架十字迷宫为动物模型,评价钩吻素子的抗焦虑活性及特点;采用固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用技术测定大鼠海马区中神经甾体的含量。结果与空白对照组相比,钩吻素子不影响大鼠在高架十字迷宫中的总入臂次数（ P＞0.05）,并且能显著增加大鼠进入开臂次数和在开臂的停留时间百分率（P＜0.01）。钩吻素子处理组大鼠海马区孕烯醇酮和别孕烯醇酮含量较空白对照组显著增高（P＜0.05）。结论钩吻素子具有抗焦虑作用,其作用机制可能与提高海马区神经甾体孕烯醇酮和别孕烯醇酮水平有关。     

朱砂中添加5种色素的鉴别研究

目的：建立以薄层色谱为初筛,高效液相色谱验证相结合的方法,以补充检验朱砂药材中非法添加颜料红531、颜料红571、酸性红73、偶氮玉红、胭脂红5种色素。方法：采用薄层色谱法,硅胶G为固定相,70%乙醇为溶剂,正丁醇-乙醇-冰乙酸-水（8∶4∶2∶2）为展开剂,在可见光下检视筛查。采用高效液相色谱法（HPLC）,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为乙腈-0.02 mol·L^-1醋酸铵梯度洗脱,柱温30℃,检测波长237 nm,用二极管阵列检测器进行检测,通过与颜料红531、颜料红571、酸性红73、偶氮玉红、胭脂红对照试剂色谱峰比对加以确证,以液质联用对结果加以验证。结果：在薄层色谱和HPLC验证结果一致情况下,68批朱砂样品中,有8批样品分别含有上述1种或几种色素添加。结论：该方法简单、快速、重复性好、成本低,补充了朱砂饮片国家药品标准中的相关规定,对进一步加大对中药材中药饮片市场的监管以及开展染色掺假中药专项整治具有较强的实用性。     

中药对照药材的稳定性及期间核查

目的：为保证中药对照药材的质量稳定和质量可追溯性,使其在国家食品药品监管工作中切实有效地发挥技术支持作用,探讨研究中药对照药材稳定性期间核查的方法及方法的可行性。方法：介绍中药对照药材的特性及影响中药对照药材质量稳定性的主要因素,依据中国合格评定国家认可委员会（CNAS）发布的CNAS-CL01（即ISO/IEC 17025：2005）《检验和校准实验室能力认可准则》、《国家药品标准物质管理办法》,建立基于薄层色谱鉴别方法的稳定性期间核查技术方案及评价方法。结果：核查方案及评价方法取得了良好的稳定性评价结果,能够发现并及时处理相关问题,提高了中药对照药材的研制效率。结论：稳定性期间核查工作,是保证中药对照药材质量的重要措施。新建立的核查方法操作简捷,行之有效。     

常绿钩吻碱平衡溶解度、油水分配系数及解离常数的测定

目的 测定常绿钩吻碱(Sempervirine,SPV)在不同pH磷酸盐缓冲液（PBS）中的平衡溶解度和油水分配系数,考察常绿钩吻碱的解离常数,为常绿钩吻碱的剂型开发提供一定的依据。方法 采用超高效液相色谱法（UPLC）结合摇瓶法测定常绿钩吻碱在不同pH的PBS中的平衡溶解度和正辛醇-PBS中的油水分配系数;采用紫外分光光度法测定常绿钩吻碱的解离常数。结果 常绿钩吻碱在pH 1.2~7.4的PBS中的溶解度为285.356~557.945 mg?L^-1,油水分配系数在0.316~5.803,解离常数pKa为11.10。结论 pH值影响常绿钩吻碱平衡溶解度和油水分配系数,常绿钩吻碱的低溶解度与解离常数可能影响其体内吸收。     

UHPLC-Q-TOF-MS测定男性外用壮阳类喷剂中非法添加盐酸丁卡因

目的 建立超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法测定男性外用壮阳喷剂中非法添加盐酸丁卡因的检测方法。方法 样品采用C₁₈色谱柱分离,以0.05%甲酸水溶液和乙腈梯度洗脱,采用飞行时间质谱（TOF）和选择离子监测（Target MS/MS）模式检测。结果 经对照品确认,样品中检测出盐酸丁卡因。结论 本方法可以用于快速鉴定男性外用壮阳类喷剂中非法添加盐酸丁卡因的检测。     

麻黄止嗽胶囊质量标准的建立

摘 要 目的：提高麻黄止嗽胶囊质量标准。方法: 采用薄层色谱法鉴别制剂中细辛、五味子、川贝母、桔梗、橘红五味药材,并用高效液相色谱法测定橘红的含量。结果: 建立了细辛、五味子、川贝母、桔梗、橘红五味药材的薄层色谱鉴别法,空白样品无干扰;建立了高效液相色谱法测定橘红含量的方法,橙皮苷浓度在3.03 ～302.80 μg·ml^-1范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均加样回收率为99.80%（RSD=0.49%,n=9）。结论:该质量标准具有简便、准确的优点,可有效控制该制剂的质量。     

桑芎胶囊定性定量分析研究

目的 建立桑芎胶囊定性定量研究方法。方法 采用薄层色谱对处方中桑白皮、黄芩等药材进行鉴别,采用高效液相色谱法对处方白芷中欧前胡素进行含量测定,C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,乙腈（A）-水（B）,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1;柱温为30 ℃;欧前胡素测量波长为250 nm。结果 桑白皮和黄芩的薄层色谱鉴别方法可行,在薄层色谱中能检出桑白皮、黄芩,欧前胡素在0.038 72～0.774 4 μg范围内线性关系良好,阴性样品试验无干扰,精密度、稳定性及加样回收试验均符合要求（欧前胡素的平均回收率为98.5%,RSD=0.5%）。结论 本试验操作简便、稳定、可靠性高,可为桑芎胶囊质量标准的提高提供依据。     

红参高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立红参药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为其质量评价提供依据。方法 Sharpsil-T C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以乙腈-水为流动相梯度洗脱;柱温为30℃;流速为1.0 ml/min;检测波长为203 nm。结果 以人参皂苷Rb1为参照峰,建立10批红参的对照指纹图谱,识别出24个共有峰,其相似度均大于0.940。通过质谱推断、对照品比对确证了其中11个共有峰。结论 该方法操作简便、准确可靠、重复性较好,为红参药材的质量控制提供了有效手段。     

The active alkaloids of Gelsemium elegans Benth. are potent anxiolytics

Rationale

An increasing number of herbal products has been introduced to treat anxiety and depression. Gelsemium elegans Benth (G. elegans) is a well-known herbal plant in Asia. Four major alkaloids (gelsemine, koumine, gelsevirine, and gelsenicine) have been isolated from G. elegans. Recently, interest has arisen to investigate the pharmaceutical potential of G. elegans alkaloids in the context of neuropsychopharmacology.

Objectives

We investigated whether G. elegans alkaloids are capable of producing anxiolytic and antidepressant effects in mouse models. In particular, we examined whether the anxiolytic action of G. elegans alkaloids is due to the agonist effects of glycine receptor in the brain.

Methods

Two mouse models (elevated plus-maze and light–dark transition model) were used to examine potential anxiolytic effects. Forced swim test and tail suspension test were used to test the antidepressive action of G. elegans alkaloids. Moreover, we also explored the anxiolytic mechanisms of G. elegans alkaloids by intracerebroventricular administration of strychnine, an antagonist of glycine receptor, in the elevated plus-maze.

Results

Gelsemine, koumine, and gelsevirine, but not gelsenicine, exhibited potent anxiolytic effects in the two anxiety models. None of the four G. elegans alkaloids exerted antidepressant effects in the two depression models. None of G. elegans alkaloids impaired spontaneous motor activities. The intracerebroventricular administration of strychnine significantly antagonized the anxiolytic effects of gelsemine, koumine, and gelsevirine administrated subcutaneously.

Conclusions

Gelsemine, koumine, and gelsevirine could be developed as the treatment of anxiety-related disorders in human patients. Their anxiolytic mechanism may be involved in the agonist action of glycine receptor in the brain.     

胡蔓藤生物碱的化学研究——Ⅰ.生物碱的分离与胡蔓藤碱甲的结构

胡蔓藤(Gelsemium elegans Banth.)根的生物碱提取物,经碱性氧化铝柱,碱性硅胶干柱层析法以及离心薄层层析法,分离得到七个生物碱,根据其理化常数,光谱分析(UV,IR,¹HNMR,¹³CNMR,MS)及衍生物制备确定三个为已知生物碱gelsevirine,koumine,gelsemine,其余四个生物碱为新的氧化吲哚生物碱,分别命名为胡蔓藤碱甲(humantenmine),胡蔓藤碱乙(humantenine),胡蔓藤碱丙(humantenidine)和胡蔓藤碱丁(humantenirine)。并确定了胡蔓藤碱甲的结构为(Ⅰ)式。     

钩吻的毒性及炮制减毒研究进展

目的 综述目前钩吻毒性及其炮制减毒的研究进展。方法 通过查阅国内外文献,对钩吻的毒性成分及其减毒存效的炮制方法进行了综述。结果 钩吻的毒性研究主要以成分结构研究及药理实验为主,在减毒方面主要从炮制、配伍、新型制剂技术几个方面开展研究,并取得一定的成效。结论 目前钩吻的减毒研究仍处于比较基础的阶段,需要进一步深入研究,使钩吻减毒存效技术广泛应用在钩吻开发及临床使用中,更好地造福人类健康。     

钩吻急性毒性快速检测方法研究

目的 建立以秀丽隐杆线虫为模式生物的钩吻急性毒性快速筛选方法。方法 将线虫同步化到l4期,优化体系DMSO浓度、吐温-80用量、染毒时间,确定最优实验条件,建立以秀丽隐杆线虫为模式生物的钩吻急性毒性快速筛选方法。结果 以M9缓冲液为基本培养液,秀丽隐杆线虫在钩吻粗提物溶液中暴露LC50为39.722 mg?ml-1（95%置信限33.802-45.985 mg?ml-1）。结论 该方法简便,快速,试验周期短,样品用量少,该方法可作为钩吻急性毒性研究中钩吻毒性变化的快速判断方法。     

Antitumor activity of two gelsemine metabolites in rat liver microsomes

Gelsemine is one of the major alkaloids from Gelsemium elegans Benth., which has been used as an antitumor remedy in clinic. In this paper, metabolism of gelsemine has been investigated in vitro in phenobarbital-treated rat liver microsomes. The metabolites of gelsemine were separated and evaluated using the flash silica gel column, preparative HPLC, using NMR and MS methods. According to the spectral data, two metabolites, M1 and M2, were identified as 4-N-demethylgelsemine and 21-oxogelsemine, respectively. By the MTT method in vitro, the antitumor activities between gelsemine and its metabolites were compared in the HepG2 and HeLa cell lines. Moreover, the main metabolic pathway was further proposed.     

RP-HPLC法测定钩吻生物碱

用RP-HPLC法分离和测定了钩吻碱甲(G),钩吻碱戊(F),胡蔓藤碱丙(D)、胡蔓藤碱乙(B)及胡蔓藤碱甲(A)。用常山碱为内标。分析柱C₁₈,甲醇—水—正丁胺(78:22:0.1 V/V)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长256 nm。线性范围0.02～0.12μg,相关系数r=0.9835～0.9977,回收率95.01～99.70%。本方法简便、灵敏、重现性好,为生产及临床用药提供质量控制依据。     

中药饮片紫苏子和钩藤的耐热菌考察

目的 考察中药饮片紫苏子和钩藤中耐热菌数随加热时间增加的变化情况,为相关标准制定提供数据支持。方法 按照中国药典2020年版中药饮片微生物限度检查法（增订草案）中的方法对2种饮片进行计数方法适用性检查,然后测定不同沸水浴时间耐热菌数,分离鉴定存活的耐热菌,并进行灭活实验。结果 检验结果符合中国药典2020版通则1107（修订草案）。随着沸水浴时间的延长,耐热菌数量显著下降。鉴定结果显示耐热菌株均为芽孢杆菌属。结论 中药饮片存在一定的耐热菌污染,应建立合理的耐热菌质控标准,保障中药饮片的用药安全。     

Oxidative metabolism of koumine is mainly catalyzed by microsomal CYP3A4/3A5

1.?Gelsemium elegans Benth (Loganiaceae) is a toxic plant that can be used for committing suicide besides alleviating pains. Its anti-inflammatory and analgesic effect mainly come from its active ingredient, namely koumine. Koumine, an indole alkaloid, possesses widely pharmacological effects especially inhibition of neuropathic pain.

2.?This study aimed to investigate the metabolic profile of koumine using human liver microsomes (HLMs), selective chemical inhibitors and recombinant human CYP isoforms. Ultra-performance liquid chromatography-high-resolution mass spectrometry (UPLC-HRMS) was used to detect and identify metabolites.

3.?Four major metabolites of koumine were found after incubation with HLMs or individual CYP isoforms. The metabolic pathways of koumine included demethylation, dehydrogenation, oxidation and demethyl-dehydrogenation. Chemical inhibition study showed that the inhibitor of CYP3A4/3A5 significantly decreased (93%) the formation of koumine metabolites. Further, CYP3A4/3A5 was shown as the most efficient isoform in biotransformation of koumine, among a series of CYP isoforms tested.

4.?In conclusion, koumine was metabolized into four oxidative metabolites in HLMs. And CYP3A4/3A5 was probably the main contributor to the hepatic oxidative metabolism of koumine.     

基于国家药品评价性抽验的全国重楼饮片质量情况分析与研究

目的：通过全国中药材饮片专项抽验工作,了解重楼饮片市场整体质量现状及存在的问题,完善重楼检验标准,为监管部门提供技术支持,保障公众用药安全有效。方法：从全国19个省级行政区抽取重楼饮片样品,按照《中国药典》2015年版一部重楼项下规定开展检验工作,出具检验报告,分析检验数据以评价重楼饮片市场情况。针对检验中发现的问题,采用实地调研等方法开展探索性研究。结果与结论：本次抽验的重楼样品共计55批次,部分批次样品存在薄层色谱鉴别不合格和含量不合格问题,经探索性研究发现部分批次存在混伪品问题以及疑似为被提取后的重楼饮片问题。现行重楼标准存在薄层鉴别与含量测定指标不合理等问题。     

基于组方规律和分子靶点的雄激素性脱发治疗中药发现

目的 通过治疗雄激素性脱发（AGA）方剂的组方用药规律分析，并结合网络靶标反向查找中药，发现治疗AGA的有效中药，为处方发现提供依据。方法 以“脱发”为关键词，在中医药百科全书在线数据库（ETCM v2.0）检索古代方剂和中成药，按照排除标准进行筛选后，采用中医传承辅助系统（v2.5）开展用药频次、药性理论、关联规则等分析。利用文献检索AGA相关通路及靶点，反向查找靶点所对应的中药，对2部分中药进行交集，按照中药材对应靶点个数进行排序，在中医药整合药理学研究平台（TCMIP v2.0）收集排名前20味中药的化学成分，用Cytoscape 3.8.0软件构建“中药-成分-靶点-通路”网络图，并进行可视化。结果 分析得出传统组方中治疗脱发的高频次中药为当归、川芎、熟地黄、茯苓、附子、白术等，核心组合10个，使用频次＞10的关联规则6个。依据数据库分析富集靶点个数最多的中药为枸杞子、山药、半夏、地黄等，同时富集4条通路及雄激素受体（AR）、II型5α-还原酶（SRD5A2）基因的中药为丹参，其发挥作用的成分为丹参环庚三烯酚酮、胡萝卜苷、齐墩果醇酸、丹参醛、丹酚酸B。结论 针对AGA的中药主要以补肝血、养血滋阴类为主。丹参可能是治疗AGA的潜在有效中药材，并可能是通过丹参环庚三烯酚酮、胡萝卜苷、齐墩果醇酸、丹参醛、丹酚酸B等成分发挥作用。