反转录病毒载体介导的P27kip1促HepG2细胞凋亡简

 目的 研究反转录病毒介导的P27kip1基因过表达对HepG2细胞的影响。 方法 构建携带有人P27kip1基因的反转录病毒载体,经脂质体介导转染PA317包装细胞,G418筛选获得稳定产毒细胞株,病毒感染HepG2细胞,筛选出P27kip1阳性克隆,Western blot检测P27kip1在HepG2中的表达,并通过细胞形态学观察、MTT、FCW等方法,检测P27kip1对HepG2细胞的影响。结果 成功构建了含有人P27kip1基因的pLNCX-P27反转录病毒载体并导入包装细胞获得了稳定产毒细胞株,病毒感染HepG2后P27kip1基因可在细胞内高表达,过表达P27kip1基因的细胞生长速度受阻,较多细胞阻滞于G1期,且凋亡增多。结论 构建的pLNCX-P27载体能稳定高效地将P27kip1基因导入HepG2细胞,过表达P27kip1可抑制细胞生长,加速凋亡。     

逆转录病毒载体介导的端粒酶抑制基因促胰腺癌细胞凋亡

目的研究逆转录病毒载体介导的端粒酶反义RNA促进胰腺癌细胞Can-pan-2凋亡的作用。方法通过电穿孔法将携带正反义端粒酶RNA基因的逆转录病毒载体导入PT67包装细胞,G418筛选抗性细胞,获取稳定表达病毒的产病毒细胞株,以病毒上清感染Can-pan-2细胞,G418筛选获得稳定转染细胞集落并扩增培养,PCR鉴定端粒酶RNA基因的表达,TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性,免疫荧光化学检测不同处理组细胞的增殖情况,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡。结果两种逆转录病毒上清的滴度分别为0.95×106CFU/mL和1.1×106CFU/mL,PCR法可于约500bp处观察到目的基因的表达,反义端粒酶RNA作用后,Can-pan-2细胞端粒酶活性和细胞增殖受到明显抑制,并出现明显的细胞凋亡。结论反义端粒酶RNA可抑制胰腺癌细胞端粒酶活性,促进胰腺癌细胞的凋亡。     

病毒介导的P53低表达HepG2细胞株的建立

目的构建干扰P53的逆转录病毒载体,建立稳定低表达P53的HepG2细胞株。方法合成干扰P53基因的寡核苷酸序列插入pMSCV-hyg-U6质粒,转化受体菌DH5α,经酶切测序鉴定后瞬时转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR方法检测P53 mRNA表达水平评估干扰效果;选择干扰效果最好的重组质粒转染PT67细胞进行病毒包装,获得逆转录病毒颗粒感染HepG2细胞,通过Hygromycin筛选获得多个细胞克隆,Western blot检测P53蛋白的表达情况;选择P53表达水平最低的细胞克隆。通过5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡实验,检测P53低表达的HepG2细胞p53通路介导的细胞凋亡情况。结果经酶切和测序验证成功构建重组病毒载体;瞬时转染HepG2细胞后P53 mRNA表达下调;病毒颗粒感染HepG2细胞后P53的mRNA、蛋白表达下调;用5-FU处理后P53低表达HepG2细胞凋亡水平明显低于对照。结论成功构建了干扰P53的逆转录病毒载体,建立了P53低表达HepG2细胞株,明显阻断了P53通路依赖的细胞凋亡。     

人肝癌P57~(kip2)基因失表达的遗传不稳定性

目的探讨肝细胞癌(HCC)P57kip2mRNA表达与遗传不稳定性之间的相互关系,以探索P57kip2基因失表达的机制。方法用原位分子杂交技术检测肝癌组织中P57kip2mRNA表达,用PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法检测LOH和MSI。结果在正常肝组织未见P57kip2mRNA表达,癌周肝硬化组与肝癌组阳性表达率均为26.7%(8/30)。3个位点均未发生LOH;在2个微卫星位点发生MSI,MSI总阳性率为16.7%。D11S1760位点发生MSI与P57kip2mRNA表达有关联性(P<0.05)。结论P57kip2mRNA表达异常提示其可能在HCC发生过程中起重要作用。MSI可能是肝癌发生过程中P57kip2mRNA表达异常的原因之一。     

氧化应激诱导HepG2肝癌细胞凋亡的研究(英)

目的：直接暴露细胞于活性氧能诱导发生凋亡，本文研究氧化应激诱导HepG2肝癌细胞的死亡及其机制。方法：暴露细胞于2 mmol/L过氧化氢产生氧化应激，用DNA凝胶电泳检测细胞凋亡，用荧光染色法检测细胞线粒体膜电位变化，Western blotting检测细胞浆中细胞色素c变化，fluorometric assay kit检测caspase活性变化。结果：氧化应激作用于HepG2细胞后12 h开始发生凋亡；氧化应激作用后4 h，细胞线粒体膜电位明显下降；胞浆中细胞色素c浓度呈时间依赖性增高；氧化应激作用8 h、12 h后细胞内caspase-3、caspase-9活性分别升高6.7及3.6倍，但caspase-8活性无变化。结论：氧化应激能诱导HepG2肝癌细胞发生凋亡，其途径与线粒体通路及caspase激活有关。     

12(S)-HETE对大鼠系膜细胞和肾小球内p27~(kip1)表达的影响

目的:探讨12-脂氧化酶的活性代谢产物12(S)-HETE对系膜细胞和肾小球内p27~(kip1)表达的影响.方法:12(S)-HETE刺激的系膜细胞和皮下包埋的微型渗透泵长期持续恒速注入12(S)-HETE刺激的大鼠提取的肾小球来观察p27~(kip1)的表达.采用总蛋白量/细胞数的比值作为细胞肥大的评价指标,利用RT-PCR和Western blot方法检测p27~(kip1) mRNA和蛋白的表达.结果:12(S)-HETE刺激能够直接诱导系膜细胞发生肥大.12(S)-HETE刺激的系膜细胞内p27~(kip1)mRNA水平没有变化,而p27~(kip1)蛋白的表达明显增加.然而,在微型渗透泵持续恒速注入12(S)-HETE刺激的大鼠提取的肾小球内p27kip1mRNA水平和蛋白的表达均增加.结论:12(S)-HETE能够通过促进p27~(kip1)的高表达而参与细胞周期的调控,是引起肾小球系膜细胞和肾小球肥大、衰老的重要原因之一.     

三氧化二砷抑制人肝癌细胞P27kip1 187位苏氨酸磷酸化

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制与P27kipl第187位苏氨酸(P27Thr187)磷酸化的关系.方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,2 μmol/L As2O3处理72 h,细胞计数法检测SMMC-7721生长,流式细胞仪检测细胞周期,核质分离、Western Blot及细胞免疫荧光技术检测P27、Thr187磷酸化的P27(p-P27T187)在SMMC-7721细胞中的表达及亚细胞定位.结果 2 ttmoVL As2O3明显抑制SMMC-7721的增殖,细胞周期阻滞在G2/M期.As2O3作用后P27蛋白总量增加,p-P27T187蛋白总量减少,并伴有Cdk2及cyclinE表达下降,同时P27发生从胞质向胞核的易位,p-P27T187核内表达减少.结论 As2O3可抑制P27T187的磷酸化,诱导P27在SMMCa721细胞核中的积聚.     

慢病毒介导的融合基因SP-TAT-Apoptin对HepG2细胞的作用

目的:将已构建的SP-TAT-Apoptin融合基因真核表达载体包装成感染性慢病毒颗粒,并用病毒颗粒感染肝癌HepG2细胞,测定其诱导凋亡的效率。方法:通过脂质体Li-pofectamine TM2000将SP-TAT-Apoptin融合基因真核表达载体与其他包装质粒共同转导入293FT细胞,包装并收集感染性病毒颗粒,用实时定量PCR法测定病毒滴度,免疫荧光法检测重组慢病毒感染的293FT细胞中SP-TAT-Apoptin融合基因的表达,同时通过流式细胞术(FCM)测定慢病毒感染后HepG2细胞的凋亡率。结果:SP-TAT-Apoptin重组慢病毒感染293FT细胞后,用V5抗原单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光化学检测,示SP-TAT-Apoptin融合基因可成功表达于293FT细胞;通过Anexin-VPI法检测示SP-TAT-Apoptin融合基因慢病毒感染肝癌HepG2细胞后可引起细胞凋亡,其凋亡效率明显高于单纯脂质体转染组。结论:成功包装出可表达SP-TAT-Apoptin融合基因且具感染性的慢病毒颗粒,感染HepG2肝癌细胞后可引起其凋亡,为进一步研究融合基因SP-TAT-Apoptin体内治疗效果极其在临床中的应用奠定了基础。     

慢病毒介导NFAT基因对HepG2细胞生物学行为的影响

目的:观察人HepG2细胞转染载有NFAT-shRNA载体的慢病毒对HepG2细胞生物学行为的影响。方法:设计3种针对NFAT基因的shRNA的干扰序列及阴性对照序列,采用稳定转染的方式构建稳定转染细胞系,挑选出干扰效率最高的shRNA组用于后续实验,采用RT-PCR法检测慢病毒转染后NFAT mRNA及VEGFA mRNA表达情况,Western blot法检测NFAT蛋白及VEGFA蛋白表达量,CCK-8法检测HepG2细胞增殖情况,Transwell法检测细胞迁徙及侵袭能力。结果:3种干扰慢病毒中以shRNA103干扰效果最好。3种NFAT-shRNA干扰作用后,NFAT、VEGFA mRNA及蛋白水相对于对照组降低(P<0.05),阴性对照组未见明显变化。CCK-8结果显示干扰组细胞增殖能力较对照组受到抑制。Transwell结果显示干扰组细胞迁徙及侵袭能力较对照组均有所下降。结论:通过RNA干扰技术沉默NFAT基因后,其细胞增殖能力及迁徙侵袭能力均下降,其作用可能与调节VEGFA有关,为靶向NFAT基因治疗原发性肝癌提供相关实验依据。     

P27(Kip1)的研究进展

本文主要综述了细胞周期依赖性激酶特异性抑制蛋白 P2 7(Kip1)的基因、蛋白分子特征 ,P2 7(Kip1)蛋白的晶体结构及其和周期素、周期素依赖性激酶的作用方式 ,从而对细胞周期产生的负调控作用。以及 P2 7(Kip1)蛋白水平的调节、亚细胞定位 ,P2 7(Kip1)与凋亡的关系、临床应用价值等     

携带端粒酶反转录酶基因siRNA慢病毒载体对星形胶质细胞凋亡的影响

背景：端粒酶反转录酶对端粒酶的激活和活化有重要的作用,利用端粒酶反转录酶的慢病毒载体抑制星形胶质细胞表达对脊髓损伤修复的影响鲜见报道。目的：利用靶向大鼠脊髓源星形胶质细胞端粒酶反转录酶基因的慢病毒载体转染大鼠星形胶质细胞,并观察端粒酶反转录酶基因的慢病毒载体对星形胶质细胞凋亡的影响。方法：原代及传代培养大鼠星形胶质细胞。实验分为端粒酶反转录酶基因siRNA慢病毒载体转染组、单纯慢病毒转染组和空白组,转染后并测其转染率,且在转染后的不同时间段测量大鼠星形胶质细胞的凋亡情况。结果与结论：端粒酶反转录酶基因siRNA慢病毒载体转染组及单纯慢病毒转染组对星形胶质细胞的转染率达85%-90%。免疫荧光染色及流式细胞仪检测显示,端粒酶反转录酶基因siRNA慢病毒载体转染组在转染后24-48 h细胞凋亡率达50%-60%。在单纯慢病毒转染组及空白组细胞凋亡率并无显著改变。结果说明,携带端粒酶反转录酶基因siRNA慢病毒载体可促进大鼠脊髓星形胶质细胞凋亡。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

NDRG2基因反转录病毒载体的构建及表达

背景：NDRG2(N-Myc Downstream Regulated Gene 2)是一个新的抑癌基因,既可以增强经典抑癌通路的抗肿瘤效应,又可以对正常细胞的癌变起到监控。有关NDRG2在骨髓瘤发生中的功能和作用至今还未见报道。 目的：构建NDRG2基因反转录病毒表达载体,利用包装的病毒感染人骨髓瘤细胞系U266,检测NDRG2的表达情况。 方法：设计与合成引物,提取U266细胞的RNA,反转录和PCR扩增,经BamHⅠ和TaqⅠ双酶切,琼脂糖凝胶电泳,切胶回收进行连接转化,并再次酶切鉴定;并将构建的载体包装为反转录病毒,感染U266细胞,筛选出稳定表达NDRG2的U266细胞(U266-NDRG2)克隆扩大培养,利用Western blot实验检测筛选到的U266细胞中NDRG2的表达。 结果与结论：成功构建了携带NDRG2基因表达的重组载体pBaba-puro-NDRG2,并包装为反转录病毒,筛选到的U266细胞(U266-NDRG2)中NDRG2蛋白表达明显高于U266-cherry细胞和U266细胞。结果可见利用反转录病毒载体基因重组技术成功构建出携带相应基因的反转录病毒,为研究NDRG2在人骨髓瘤中的作用奠定了实验基础。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

脑星形细胞瘤中P27kip1、P57kip2、CyclinE表达与恶性程度及预后关系

目的探讨P27^kip1、P57^kip2、CyclinE在脑星形细胞瘤的表达情况，并结合多种临床因素探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法采用S-P免疫组化技术，检测50例脑星形细胞瘤及10例正常脑组织中P27^kip1、P57^kip2、CycLinE的表达．结果P27^kip1、P57^kip2及CyclinE在脑星形细胞瘤阳性表达随恶性程度不同有显著差异（P〈0．01）。通过Spearman等级相关分析P27^kip1与P57^kip2，CyclinE与P57^kip^2表达联系之间具有相关性（P〈0．05）。通过单因素及多因素条件Logistic回归模型表明肿瘤的病理级别、星形细胞瘤中P27^kip1、CyclinE表达是影响脑星形细胞瘤预后的主要因素。结论脑星形细胞瘤中P27~ipl，P57“”及CyclinE表达与肿瘤恶性程度相关；P27^kip1、P57^kip2及CyclinE表达两两之间具有相关性；肿瘤的病理级别、星形细胞瘤中P27^kip1、CyclinE表达可作为评价脑星形细胞瘤预后的独立指标。     

PcDNA3.0/p27~(kip1)真核表达质粒对小鼠哮喘模型Th1/Th2的影响

目的:探讨细胞周期负性调控蛋白PcDNA3.0/p27kip1重组真核表达质粒转染小鼠哮喘模型对Th1/Th2比例失衡的调节作用。方法:小鼠各10只分为A组(正常对照组)、B组(哮喘模型组)、C组(质粒治疗组)三组。用卵蛋白致敏法构建小鼠哮喘模型,以本实验室构建的PcDNA3.0/p27kip1重组真核表达质粒经静脉转染小鼠哮喘模型,36小时后Western blot检测肺组织中p27蛋白表达量;流式细胞仪分析小鼠脾CD4+、CD8+T细胞比例;ELISA检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ水平。结果:B组与A组比较,哮喘发病后肺p27蛋白表达量明显降低;脾CD4+T细胞显著增高而CD8+T细胞显著降低;血清IL-4、IL-5、IL-13水平明显升高而IFN-γ明显降低。C组与B组比较,肺p27蛋白表达量明显增加,脾CD4+T细胞比例显著降低而CD8+T细胞显著升高;血清IL-4、IL-5、IL-13水平明显降低而IFN-γ明显升高。结论:PcDNA3.0/p27kip1静脉给药可在哮喘模型肺组织中表达,并通过基因干预调控细胞周期的方式调节Th1/Th2比例失衡,为哮喘防治提出了新思路。     

反转录病毒载体介导转化生长因子β_1基因体外转染兔膝关节软骨细胞的表达

背景:将功能基因片段整合到基因载体内,再将基因载体转染入靶细胞中或转染入关节腔内,通过转基因的靶细胞持续大量分泌功能基因产物,在一个较长的时期内保持局部治疗浓度,可修复关节软骨损伤。目的:以重组反转录病毒载体介导转化生长因子β1体外转染兔膝关节软骨细胞,观察其表达情况及其对软骨细胞生物学性状的影响。方法:采用胰酶消化法分离培养兔软骨细胞。载体经PLNCX2HindⅢ/NotⅠ双酶切、去磷酸化后,与载体pDsRed2双酶切得到大的部分多克隆位点和RFP基因连接,构建PLNCX2-RFP。转化生长因子β1基因从PGEMT-TGF中扩增,经双酶切后与PLNCX2-RFP连接,构建PLNCX2-TGFβ1-RFP。包装反转录病毒载体,并检测病毒上清滴度。将培养的兔膝关节软骨细胞分组转染:对照组(不做任何转染)、转染PLNCX2组、转染PLNCX2-TGFβ1-RFP组,持续筛选2周,观察细胞变化。收集稳定转染的细胞上清液,以NO检测试剂盒检测基因转染对软骨细胞的影响,以ELISA法检测细胞培养上清液中人转化生长因子β1表达。结果与结论:重组基因PLNCX2-TGFβ1-RFP经酶切鉴定测序TGFβ1、RFP、序列均正确,表明构建成功预期的真核表达载体PLNCX2-TGFβ1-RFP。转染到包装细胞并筛选培养后,病毒滴度为1×106CFU。稳定转染软骨细胞后可观察到红色荧光,证明转染成功。持续筛选2周,散在贴壁细胞形成阳性克隆,逐渐弥漫融合,并有细胞簇出现,双核多见,细胞增生活跃。转染PLNCX2-TGFβ1-RFP组NO浓度高于对照组、转染PLNCX2组(P0.05),对照组、转染PLNCX2组间差异无显著性意义。对照组与转染PLNCX2组均无转化生长因子β1表达,转染PLNCX2-TGFβ1-RFP组转化生长因子β1质量浓度为(28.08±3.73)ng/L。提示反转录病毒载体PLNCX2介导的人转化生长因子β1能有效转染到兔膝关节软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃。     

应用RNA干扰抑制乙肝病毒X基因促HepG2细胞凋亡的作用

目的:构建靶向乙肝病毒X基因(HBX)的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并应用其体外抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用.方法:设计并构建靶向HBX的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,脂质体转染法将HBX表达载体pcDNA3.1-HBX与pSilencer3.1-shHBX共转染人肝癌HepG2细胞,培养72小时后,分别以RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测HBX的表达量.Annexin V-FITC/PI双染经流式细胞仪检测细胞的凋亡变化.结果:重组质粒pSilencer3.1-shHBX酶切鉴定和测序结果均与设计的一致.该质粒使HBX基因mRNA表达量降低了47.1%,进而使HBx蛋白表达量降低了58.9%,HBx蛋白荧光强度减弱,并使HBX 诱导的HepG2细胞凋亡率降低了52.11%.而阴性对照质粒无此作用.结论:成功构建靶向HBX shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并可应用其抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用.     

HepG2和HepG2.2.15细胞对凋亡剌激的耐受性

目的阐明ＨＢＶ对感染细胞凋亡的影响。方法ＨｅｐＧ２及其转染ＨＢＶ的ＨｅｐＧ２２１５细胞培养中,加ＭＴＸ、ＡｃｔＤ或去血清培养,以ＦＣＭ检测细胞凋亡率。结果ＨｅｐＧ２．２．１５细胞加ＭＴＸ后２４小时和４８小时,凋亡率分别为１０８％和１３３％,加ＡｃｔＤ后分别为１６８％和３７７％,去血清后第４天及第６天,分别为１３２％和１４８％;而ＨｅｐＧ２细胞加ＭＴＸ后２４小时和４８小时,凋亡率则为１２６％和６５３％,加ＡｃｔＤ后分别为４４５％和８９７％,去血清后第４天和第６天凋亡率为１９８％和２８８％。结论在上述条件下,ＨｅｐＧ２２１５细胞较ＨｅｐＧ２细胞耐受凋亡;ＨＢＶ可能抑制肝癌细胞凋亡。     

卵巢癌细胞系C-JUN激活蛋白-1与P27kip1表达的相关性

目的 探讨c-Jun激活区结合蛋白-1（Jab1）与p27kip1在卵巢癌细胞株HO-8910中的表达变化及相互关系。 方法 用血清饥饿及饥饿后释放处理HO-8910细胞,分别用Western blot及核浆分离技术检测Jab1 、p27kip1表达及亚细胞定位;用免疫沉淀方法检测Jab1与p27kip1的结合情况;脂质体介导法将Jab1基因转染HO-8910细胞,Western blot及核浆分离检测p27kip1表达。结果 血清饥饿导致HO-8910细胞生长周期停滞,p27kip1蛋白总量增加,且主要集中于胞核分布;Jab1蛋白总量减少,主要表达于核浆;血清释放后两者呈现相反的表达变化,但是p27kip1主要集中在胞质分布;p27kip1与Jab1在HO-8910细胞中存在相互结合的情况。脂质体转染Jab1后,p27kip1表达下降且定位有明显的胞质改变。结论 Jab1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1出核并影响其表达,从而参与调控HO-8910细胞的生长。     

反转录病毒载体介导Indian hedgehog信号蛋白在C3H10T1/2细胞中的表达及成骨诱导潜能

背景：目前大量研究证实Indian hedgehog(Ihh)信号通路在骨发育中发挥着重要的调控作用。 目的：克隆Ihh重组反转录病毒载体,观察Ihh在C3H10T1/2细胞中的表达及其成骨诱导效果。 方法：采用分子克隆技术将Ihh基因与增强型绿色荧光蛋白基因克隆到反转录病毒载体pSFG上,包装出假病毒转染C3H10T1/2细胞,在共聚焦显微镜下观察其绿色荧光蛋白强度及转染效率。运用Western blot方法检测Ihh蛋白的表达,观察C3H10T1/2细胞形态学变化,碱性磷酸酶染色检测成骨活性。 结果与结论：共聚焦显微镜下观察到大量的绿色荧光表达,Western blot检测结果显示Ihh基因及增强型绿色荧光蛋白基因在C3H10T1/2中呈显著共表达。在体外培养过程中,Ihh能诱导C3H10T1/2细胞形态学发生改变,增加碱性磷酸酶活性,提示Ihh具有诱导C3H10T1/2细胞向骨细胞分化的潜能。     

慢病毒载体介导下DJ-1过表达细胞模型的建立

目的构建人野生型DJ-1及其L166P突变体的慢病毒载体并探讨慢病毒载体在构建基因过表达细胞模型中的作用。方法分别构建野生型DJ-1与L166P突变型DJ-1慢病毒载体质粒。进行测序确定比对正确后,进行质粒的大量扩增与制备并转染包装细胞系HEK293T细胞,荧光法和Western blot检测野生型DJ-1与L166P突变型DJ-1在细胞系中的表达。在确定目的蛋白正确表达之后,大量转染HEK293T细胞进行包装并生产携带目的基因的慢病毒颗粒。测定病毒上清滴度后感染PC12细胞,荧光显微镜和Western blot观察GFP荧光强度以及目的蛋白的表达,确定病毒的感染效率。结果成功构建携带DJ-1野生型及其突变体的慢病毒载体。该病毒载体可以转染进入HEK293T细胞内且目的蛋白能够正确表达。LV-DJ-1与LV-DJ-1/L166P的病毒滴度分别为2×10~9TU/m L与2×10~8TU/m L。病毒上清可以高效感染PC12细胞,绝大多数细胞可表达目的蛋白。外源野生型DJ-1和L166P突变体的蛋白表达量分别是内源性含量的315%和285%。结论慢病毒感染细胞效率很高,是很好的制备基因过表达细胞的方法。通过慢病毒载体介导,本研究获得了DJ-1及其突变体的过表达细胞模型。该模型可以用于后续DJ-1功能研究。