筋脉通胶囊通过增强背根神经节Nrf2和HO-1的表达改善糖尿病大鼠的周围神经痛简

 目的观察中药筋脉通胶囊对链尿佐菌素（STZ）诱导的糖尿病（DM）大鼠背根神经节（DRG）的核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶-1（HO-1）的表达以及血浆一氧化碳（CO）含量的影响。 方法腹腔内注射STZ诱导建立DM大鼠模型,随机分为模型组、筋脉通小、中和大剂量组及硫辛酸组,并设对照组。成模后每天1次灌胃给药,持续12周。电子Von Frey仪检测机械痛阈值,免疫组化法及Rt-PCR检测DRG的Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达,并检测血浆一氧化碳血红蛋白（COHb）含量。 结果与对照组相比,糖尿病大鼠的机械痛阈值、血浆COHb含量以及DRG的Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达水平均明显下降（P＜0.01）;各治疗组的上述指标均显著回升（P＜0.01或P＜0.05）。在提高DRG的HO-1蛋白表达上,筋脉通中剂量组疗效显著优于硫辛酸组（P＜0.05）。 结论筋脉通胶囊可通过增强DRG的Nrf2、HO-1和CO表达来改善糖尿病大鼠的周围神经痛。     

中药筋脉通对糖尿病大鼠背根神经节UCP3和IGF-1表达的影响

目的观察中药筋脉通对链尿佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠背根神经节(DRG)解耦联蛋白3(UCP3)和胰岛素样生长因子(IGF-1)的表达的影响。方法将大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组(腹腔内注射STZ、筋脉通及牛磺酸治疗组)。成模后每天1次灌胃给药,持续16周。电子Von Frey仪检测机械痛阈值,免疫组化法和real time-PCR法分别检测DRG中UCP3和IGF-1蛋白及mRNA的表达。结果与正常对照组相比,糖尿病大鼠出现机械痛阈值下降,DRG中UCP3和IGF-1蛋白及mRNA表达水平明显下降(P0.01);中药筋脉通组可改善糖尿病大鼠周围神经痛阈下降(P0.01),并且能够使DRG中UCP3和IGF-1蛋白及mRNA表达水平显著回升(P0.01)。结论中药筋脉通可通过增加DRG神经组织中UCP3含量,抑制氧化应激对背根神经的损伤,并通过上调神经营养因子IGF-1的含量,促进糖尿病大鼠周围神经修复能力,而改善其痛觉异常。     

HO-1/CO系统抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞凋亡

目的 探讨血红素氧合酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)系统对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,随机分为:对照组、AngⅡ组、AngⅡ+氯化血红素(hemin)(HO-1诱导剂)组和AngⅡ+锌原卟啉-9(ZnppIX)(HO-1抑制剂)组.用real-time PCR及Western blot检测心肌细胞HO-1mRNA和蛋白的表达,比色法测定细胞培养上清液中碳氧血红蛋白(COHb)含量,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 AngⅡ组心肌细胞HO-1 mRNA、蛋白、COHb含量和细胞凋亡均明显高于对照组(P＜0.05),AngⅡ+hemin组HO-1mRNA、蛋白、COHb含量进一步升高(P＜0.05),而细胞凋亡回降(P＜0.05),但仍高于对照组(P＜0.05),AngⅡ+ZnPPIX组仅细胞凋亡湿著升高(P＜0.05),其他指标无显著变化.结论 HO-1/CO系统对AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡具有抑制作用.     

葛花总黄酮通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨葛花总黄酮(total flavonoids of Pueraria lobate,TFF)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的影响及机制.方法 雄性SD大鼠60只,利用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型.糖尿病大鼠随机分成三组:糖尿病组(DM)、TFF组(200 mg/kg)及二甲双胍组(Met,75 mg/kg,阳性对照)灌胃治疗,另取15只正常大鼠作为对照组(CON).12周后,检测各组大鼠血糖、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;HE染色检测大鼠RGC数量,免疫组织化学染色及Western blot检测大鼠视网膜ECH相关蛋白1(ECH-associated protein 1,Keap1)、核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor-2,Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达.结果 与CON组相比,DM组血糖、MDA含量、Keap1及Nrf2表达明显增加,SOD活性及HO-1表达明显下降.而经过12周治疗后上述表现均有明显改善.结论 TFF通过降低血糖,增强大鼠视网膜的抗氧化能力,保护糖尿病状态下的RGC损伤,与调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路有关.     

袖状胃减容术对2型糖尿病大鼠肝脏Nrf2介导的氧化应激反应的影响

目的观察袖状胃减容术对2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用,初步探讨其作用机制。方法 SPF级SD大鼠45只,采用腹腔注射STZ法诱导2型糖尿病大鼠模型,模型成功后随机分为2型糖尿病大鼠模型组(DM组)、袖状胃减容术干预组(SG组),假手术组(Sham组),术后连续观察8周,ELISA法检测各组大鼠肝损伤标志物ALT、AST及氧化应激细胞因子MDA、SOD、GSH表达水平,HE染色观察病理学变化,Western blot及qPCR法检测Nrf2、HO-1表达水平。结果 STZ诱导后的糖尿病大鼠,于8w后出现明显的肝功能损伤及氧化应激反应,血清ALT、AST、MDA含量明显升高,SOD、GSH含量明显降低,病理学可见肝脏组织结构模糊,肝小叶内出现局灶性坏死,部分肝细胞颗粒样变性。袖状胃减容术术后8w,SG组大鼠肝功能明显得到改善,血清ALT、AST、MDA含量明显降低,SOD、GSHSD明显升高,同时上调Nrf2、HO-1的表达水平。结论袖状胃减容术改善糖尿病大鼠机体内高糖环境下肝功能损伤,与其上调Nrf2、HO-1的表达,抑制肝脏氧化应激反应相关。     

大鼠急性一氧化碳中毒迟发性脑病模型中干预剂叔丁基对苯二酚对Nrf2 及HO-1 表达的影响

目的:初步探讨大鼠急性一氧化碳中毒迟发性脑病(DEACMP)模型中干预剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)前后脑组织海马区核因子E2 相关因子2(Nrf2)及其下游靶基因血红素加氧酶1(HO-1)的变化,从而进一步研究DEACMP 的发病机制,同时为其靶向治疗的研究提供一定的实验基础。方法:将240 只大鼠按随机数字表法分为一氧化碳中毒组(CO 组)、空气对照组(AC 组)、一氧化碳+3%乙醇组(EC 组)、一氧化碳+tBHQ 组(TC 组),再将各组大鼠按染毒后1、3、7、14、21、28 d 随机分为6 个亚组,随后用Morris 水迷宫试验观察大鼠行为学表现,免疫组织化学及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠干预剂tBHQ 前后Nrf2 及HO-1 的表达变化,TUNEL 染色检测细胞凋亡情况。结果:CO 组、EC 组、TC 组大鼠海马区Nrf2 及HO-1表达均表现为染毒后第1 天升高,3 d 达高峰,随后逐渐下降的趋势,各时间点与AC 组比较差异均有统计学意义,TC 组与CO组比较Nrf2 及HO-1 表达增高,各亚组比较差异均有统计学意义。CO 组、EC 组、TC 组大鼠与AC 组比较凋亡细胞随时间明显增多,且均表现为增高-高峰(7 ~14 d)-降低的趋势,TC 组与CO 组比较凋亡细胞(7 ~ 14 d)减少,差异有统计学意义。结论:DEACMP 的发生发展中Nrf2/ ARE/ HO-1 通路起着重要作用,tBHQ 特异性激活Nrf2 通路达到早期保护作用,有望减少或减轻DEACMP。     

血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统对感染性休克大鼠低血压形成的影响

目的：探讨血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统是否参与了感染性休克大鼠低血压的形成。 方法： 将Sprague-Dawley大鼠随机分为对照（C）组、感染性休克（SS）组、感染性休克+ZnPP-IX(SZ)组、ZnPP-IX（Z）组。连续监测MAP；并检测血中COHb的浓度，主动脉和股动脉血管组织内HO-1 mRNA、HO-2 mRNA及HO-1、HO-2蛋白水平。 结果： ①SZ组大鼠其MAP水平均高于SS组(P<0.05)；②SS组大鼠主动脉和股动脉组织内HO-1 mRNA 及HO-1蛋白水平明显高于SZ组(P<0.05)，而两组主动脉和股动脉组织内HO-2 mRNA 及HO-2蛋白水平相比无显著差异(P>0.05)；③SS组大鼠血中COHb水平明显高于SZ组(P<0.05)。 结论： 感染性休克大鼠严重低血压形成的部分原因是由于HO-1蛋白水平的上调及随后的CO浓度升高所致。     

川芎嗪通过增强糖尿病大鼠的抗氧化和抗炎作用减轻下颌下腺组织损伤

目的研究川芎嗪对糖尿病(DM)大鼠下颌下腺组织血红素加氧酶1/一氧化碳(HO-1/CO)、诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮(iNOS/NO)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响及意义。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、 DM组和川芎嗪组,每组10只。对照组大鼠不进行任何处理。DM组和川芎嗪组大鼠用高脂饮食8周并1次性腹腔注射20 g/L链尿佐菌素(35 mg/kg)复制2型DM模型。1周后,两组大鼠禁食12 h,从尾静脉抽血测空腹血糖(FBG)水平,FBG7.0 mmol/L提示造模成功。川芎嗪组采用腹腔注射川芎嗪[150 mg/(kg·d)],持续8周,期间所有大鼠都普通饮食喂养。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清FBG、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量;血气分析法测定各组动脉血CO含量;比色法检测各组血清NO、下颌下腺丙二醛(MAD)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;HE染色观察各组下颌下腺病理变化;免疫组织化学染色检测下颌下腺HO-1、 iNOS和TNF-α的表达。结果 HE显示DM组下颌下腺组织轻微萎缩,细胞排列紊乱;川芎嗪组下颌下腺病理变化明显减轻。与对照组比较,DM组和川芎嗪组的FBG、 TG和TC显著升高;CO和SOD含量均显著下降;NO和MDA含量均显著增加;HO-1表达显著下降,iNOS和TNF-α表达显著增加。与DM组比较,川芎嗪组FBG显著下降,CO和SOD含量均显著增加,NO和MDA含量显著减少;HO-1表达显著增加、 iNOS和TNF-α表达显著下降。结论川芎嗪能上调HO-1/CO表达,下调iNOS/NO、 TNF-α表达,提示川芎嗪可以通过增强机体的抗氧化、抗炎作用,对DM大鼠下颌下腺起保护作用。     

氯血红素对大鼠血管平滑肌细胞血红素氧合酶1表达的影响

目的:观察氯血红素(Hm)对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响,以探讨内源性一氧化碳(CO)抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖的分子机制。方法:体外培养Wistar大鼠主动脉VSMCs,用AngⅡ诱导其增殖,分别用血红素氧合酶1(HO-1)的诱导剂和阻断剂,以诱导和阻断HO-1的表达。通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白印迹杂交(Westernblot)检测HO-1mRNA和蛋白质的表达,酶联免疫法检测培养上清液中碳氧血红蛋白(COHb)含量,四唑氮(MTT)比色法检测VSMCs增殖。结果:Hm显著增加VSMCsHO-1mRNA及蛋白质的表达及培养上清液中COHb含量,同时VSMCs增殖活力被显著抑制。结论:HO-1mRNA及蛋白表达增加是内源性CO抗VSMCs增殖的分子生物学基础。提示HO-CO信号系统在以VSMCs增殖为特征的心血管病的发生和发展中具有重要作用。     

1型与2型糖尿病大鼠周围神经病变的比较

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导的1型与2型糖尿病大鼠周围神经病变的区别。方法 SD大鼠分组,每组各10只,腹腔注射STZ建立1型糖尿病(T1DM)模型;高脂高糖饲养6周后按体质量35 mg/kg单次腹腔注射STZ建立2型糖尿病(T2DM)模型;设立正常对照(Con)组。检测不同时间点大鼠的体质量、血糖水平。成模8周后,电子Von Frey仪检测机械痛阈值,热水甩尾试验检测甩尾潜伏期,并取坐骨神经进行病理形态学检查。结果成模后第1、8周,与对照组及T2DM组相比,T1DM组大鼠的体质量显著下降(P0. 01); T1DM组与T2DM组的血糖均显著高于对照组(P0. 01); DM组的甩尾潜伏期均较对照组延长(P0. 01),T2DM组较T1DM组延长更显著(P0. 05)。DM组的机械痛阈值均较对照组显著降低(P0. 01),T2DM组较T1DM组降低更明显(P0. 01); DM组大鼠的坐骨神经有髓神经纤维排列紊乱,轴索肿胀或皱缩,髓鞘密度不均匀,空泡变性,部分神经纤维髓鞘脱失; T2DM组的神经损害程度较T1DM严重。结论 STZ诱导的2型糖尿病大鼠的周围神经病变程度严重于1型糖尿病大鼠。     

香烟烟雾提取物通过蛋白激酶C-核因子相关因子2调节大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶1表达

 目的：探讨蛋白激酶C（PKC）-红系衍生的核因子相关因子2 (Nrf2)对香烟烟雾提取物（CSE）诱导的大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶1（HO-1）表达的影响。方法：通过CSE刺激雄性SD大鼠气道上皮细胞,使用PKC抑制剂RO318220和Nrf2 siRNA,将细胞分为对照组、CSE 3 h组、RO318220组、Nrf2 siRNA组和RO318220+Nrf2 siRNA组,用Western blotting法分别检测HO-1、Nrf2和p-PKC蛋白表达,免疫细胞化学法观察HO-1蛋白表达,逆转录－聚合酶链反应（RT-PCR）法检测HO-1 mRNA表达,免疫荧光法检测Nrf2蛋白定位,测定HO-1活性。结果：暴露CSE 3 h后,Nrf2蛋白主要表达在胞核, 胞核蛋白表达增强,p-PKC蛋白、HO-1的mRNA和蛋白高表达,HO-1活性增强。预先给予RO318220,PKC蛋白、Nrf2胞浆和胞核蛋白、HO-1的mRNA和蛋白表达均明显减弱,HO-1活性显著降低。预先用siRNA沉默Nrf2,胞浆和胞核的 Nrf2蛋白表达均减弱,HO-1活性、mRNA和蛋白水平明显降低。RO318220联合Nrf2 siRNA处理后,PKC蛋白、Nrf2胞浆和胞核蛋白、HO-1 mRNA和蛋白表达均明显降低,HO-1活性明显降低。结论：CSE通过PKC激活Nrf2,诱导Nrf2核转位,从而上调HO-1的表达水平。     

Nrf2 激动剂EGCG 对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用研究

目的:建立糖尿病及糖尿病伤口愈合障碍动物模型,研究EGCG对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用,探讨相关的免疫学机制和分子生物学机制。方法:腹腔注射STZ,检测空腹血糖,建立糖尿病小鼠模型。高糖高脂饮食长期饲养,使其处于稳定的糖尿病状态。人工制造皮肤创口,动态观察伤口愈合率,建立糖尿病伤口愈合障碍动物模型。期间,按照分组要求,应用EGCG进行药物治疗,根据伤口愈合率研究治疗效果。治疗期满,取创面皮肤进行相关指标检测。应用Western blot技术检测Nrf2、HO-1、NQO1、ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白质相对表达量;免疫组化技术检测3-NT;对各检测指标进行统计学分析,阐述EGCG治疗糖尿病伤口愈合障碍的作用机制。结果:糖尿病组伤口愈合率明显低于正常对照组(P0.01),证明糖尿病伤口愈合障碍建模成功;糖尿病小鼠EGCG治疗组的伤口愈合率明显高于非治疗组(P0.05)。糖尿病组的Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量均低于正常对照组(P0.05);ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白表达量均高于正常对照组(P0.05)。糖尿病小鼠中,EGCG治疗组Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量均高于其非治疗组(P0.05);ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白表达量均低于其非治疗组(P0.05)。免疫组化实验检测3-NT结果显示,糖尿病组3-NT阳性率明显高于Control组,证明糖尿病机体皮肤伤口处于较高水平的氧化应激状态。糖尿病小鼠EGCG治疗组3-NT阳性率明显少于其非治疗组(P0.05)。结论:Nrf2是糖尿病并发症的关键保护性因子;上调机体Nrf2表达可有效减轻糖尿病并发症;EGCG作为Nrf2激动剂具有对抗糖尿病引起的氧化应激、炎症和细胞凋亡的作用,对DNHW有明显的治疗作用。     

血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统对脂多糖性休克大鼠心脏的影响

目的:探讨血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统是否对脂多糖性休克大鼠的心脏有保护作用。方法:40只健康清洁级Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:①对照(C)组,n=10;②脂多糖性休克(S)组,n=10,10mg/kgE.coli脂多糖(LPS)稀释至0.5mL静脉注射,待其MAP下降至给予LPS前75%时,腹腔内注射1mL50mmol/L碳酸氢钠溶液;③LPS性休克 ZnPP-IX(LZ)组,n=10,休克模型的复制同②,成功后,将10μmol/kgZnPP-IX用50mmol/L碳酸氢钠溶液稀释至1mL腹腔内注射;④ZnPP-IX组(Z)组,n=10,0.5mL0.9%氯化钠溶液静脉内注射,2h后将10μmol/kgZnPP-IX稀释至1mL腹腔内注射。测定各组腹腔内注射碳酸氢钠溶液或ZnPP-IX前及后30min、60min、90min时的LVSP及±dp/dtmax;C组和Z组在静脉内注射氯化钠溶液后6h,S组和LZ组则在静脉内注射LPS6h,检测血中LDH和CK的含量,COHb的浓度及左心室心肌组织内HO-1mRNA、HO-2mRNA及HO-1、HO-2蛋白水平。结果:①LZ组大鼠的LVSP和±dp/dtmax均分别低于S组(P<0.05),其血浆中LDH、CK的含量均分别高于S组(P<0.05);S组大鼠血中COHb水平明显高于LZ组(P<0.05)。②LZ组大鼠其左心室心肌组织内HO-1mRNA表达水平及HO-1蛋白水平明显低于S组(P<0.05);而各组间左心室心肌组织内HO-2mRNA表达水平及HO-2蛋白水平均无显著差异(P>0.05)。结论:脂多糖性休克大鼠其心肌组织内HO-1的上调及随后的CO增加可能对心脏发挥着保护作用。     

褪黑素对糖尿病周围神经病变大鼠氧化应激的作用

研究褪黑素(melatonin,MEL)对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠氧化应激和神经功能及形态学的影响,并与抗氧化剂硫辛酸进行比较。链脲佐菌素诱导糖尿病(DM)大鼠模型,维持饲养8周后随机分为4组:DM对照组、褪黑素小剂量治疗组(0.5 mg.kg-1.d-1)、褪黑素大剂量治疗组(10mg.kg-1.d-1)、硫辛酸治疗组(100mg.kg-1.d-1)。造模前预设鼠龄和体重相当的正常对照组8只。MEL和硫辛酸干预治疗8周后检测各组大鼠血浆和坐骨神经抗氧化酶活性和胆质过氧化产物含量的变化,大鼠摆尾阈值、坐骨神经超微结构和神经传导速度的变化。结果显示,DM对照组大鼠血浆和坐骨神经中丙二醛(MDA)含量明显增加,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低,摆尾阈值提高,坐骨神经传导速度降低,坐骨神经出现脱髓鞘以及轴突萎缩等病理变化。MEL和硫辛酸均可显著改善上述变化。DM时自由基的损伤和抗氧化能力的降低可能在DPN的发生发展中发挥重要作用。     

糖维胶囊对2型糖尿病大鼠视网膜缺氧诱导因子-1α和核因子-κB水平的影响

目的:分析糖维胶囊对2型糖尿病大鼠视网膜缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和核因子-κB(NF-κB)水平的影响。方法:健康雄性SD大鼠45只,10只作为正常组(NC组),其余使用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型(模型组),造模成功30只。成模后将模型组大鼠分为3个亚组,每组10只。糖尿病组(DM组)给予生理盐水灌胃,格列本脲治疗组(DM+G组)给予格列本脲20mg/kg灌胃,糖维胶囊治疗组(DM+T组)给予糖维胶囊150mg/kg灌胃治疗。连续灌胃4周后,取各组大鼠视网膜观察其病理改变并检测HIF-1α及NF-κB的mRNA及蛋白表达水平。结果:显微镜下观察,NC组视网膜所有细胞层清晰整齐地排列,在DM组中,视网膜水肿,DM+G组病变较轻,DM+T组未见明显新生血管形成,视网膜水肿显著减弱,神经节层整齐排列。与NC组相比,DM组HIF-1α、NF-κB mRNA及蛋白表达均明显上调(P0.05)。与DM组比较,DM+G组及DM+T组NF-κB mRNA及NF-κB、HIF-1α蛋白表达水平明显下降,且DM+T组NF-κB、HIF-1αmRNA和NF-κB蛋白下降较DM+G组更明显(P0.05)。结论:糖维胶囊能够影响HIF-1α、NF-κB因子表达,可明显改善大鼠2型糖尿病视网膜病变,为临床中西药联合治疗糖尿病提供一定依据。     

Nrf2/HO-1在远隔缺血后处理减轻大鼠心肺复苏脑损伤中的作用

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧化酶-1 (HO-1)在远隔缺血后处理减轻大鼠心肺复苏脑损伤过程中的表达变化及意义。 方法采用随机数字表法将45只成年雄性SD大鼠分为3组：假手术组(Sham组)、模型组(Control组)、远隔缺血后处理组(RIPost组),每组15只。Control组大鼠建立窒息性心肺复苏脑损伤模型,RIPost组大鼠在自主循环恢复后行肢体远隔缺血后处理。在自主循环恢复后24 h分别采用苏木精-伊红染色、酶联免疫吸附试验检测血清神经元特异性烯醇化酶(NSE),观察脑组织的损伤情况;Western Blotting、免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR检测脑组织Nrf2、HO-1蛋白及其mRNA表达情况。 结果与Sham组相比,Control组呈急性缺血性改变,海马区神经元有明显的损伤,血清NSE含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而RIPost组病理学改变轻于Control组,血清NSE含量也较Control组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);Control组、RIPost组的Nrf2核蛋白和HO-1蛋白表达均高于Sham组,且RIPost组HO-1蛋白表达显著高于Control组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。实时荧光定量PCR显示Control组及RIPost组Nrf2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);RIPost组HO-1 mRNA的表达较Control组升高更显著,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论远隔缺血后处理可减轻大鼠心肺复苏脑损伤,其作用机制可能与上调大鼠Nrf2 /HO-1通路有关。     

Nrf2-ARE信号通路在葛根素在减轻脑部氧化应激损伤中的作用和机制研究

目的探究葛根素减轻脑部氧化应激损伤是否由Nrf2-ARE信号通路介导。方法选择成年雄性SD大鼠构建TBI模型并随机平分为模型组、假手术组及葛根素给药组。通过RT-PCR技术对Nrf2-ARE信号通路中Nrf2、OH-1、NQ01 m RNA表达水平进行检测,采用Western-blot对不同组大鼠在不同时间点脑内Nrf2蛋白表达进行测定。最后通过免疫组化及免疫荧光法对Nrf2进行细胞亚定位。结果各组大鼠Nrf2、HO-1和NQO1m RNA的表达水平中模型组与假手术组差异无统计学意义(P0.05),给药组与模型组各成分含量差别较大,差异有统计学意义(P0.05)。在不同时间点对各组Nrf2蛋白含量测定中得出,给药组能不同程度上调Nrf2蛋白表达,与同时段模型组比较差异具有统计学意义(P0.05),且给药葛根素后Nrf2从细胞质中转移到细胞核从而发生作用。结论葛根素可通过Nrf2-ARE信号通路有效减轻创伤性脑损伤所带来的氧化应激损伤。     

含硫氨基酸对糖尿病大鼠窦房结损伤的保护作用

目的　探讨补充半胱氨酸或牛磺酸对糖尿病大鼠窦房结损伤的作用。 方法　SD大鼠随机分为正常对照组（C）组、糖尿病（DM）组、糖尿病+半胱氨酸（DM+Cys）组和糖尿病+牛磺酸（DM+Tau）组。检测SOD和MDA含量;测定窦房结功能SNRT、CSNRT、SACT和IHR;检测窦房结SOD2、HO-1、NOX2、NOX4、HCN2、HCN4表达。 结果　与C组比较,DM组血SOD降低,MDA升高;SNRT、CSNRT和SACT延长,IHR减慢;窦房结SOD2、HO-1、HCN2和HCN4表达降低,NOX2和NOX4表达升高（P<0.05）。与DM组比较,DM+Cys和DM+Tau组血SOD升高;IHR增加;窦房结SOD2、HO-1、HCN2和HCN4表达升高,NOX2和NOX4表达降低（P<0.05）。 结论　补充Cys或Tau能降低STZ大鼠窦房结氧化应激损伤,增加HCN4和HCN2表达,改善窦房结功能障碍。     

肾性高血压大鼠主动脉血红素加氧酶-1表达增加

目的探讨肾性高血压时血红素加氧酶(HO)/一氧化碳(CO)系统的变化,以明确血红素加氧酶在肾性高血压发病过程中的意义及作用。方法①制作两肾一夹(2K1C)肾性高血压大鼠模型,分别于2、4、6、8周记录血压,用放免法测定血浆中血管紧张素II的含量。②分光光度比色法测定主动脉微粒体中HO的活性。③用W estern b lot方法测定主动脉HO-1蛋白的表达。结果从术后2周起,2K1C组血压明显高于假手术组(P<0.01);同时血浆AngII含量显著增加(P<0.01)。2K1C组在4周和6周时主动脉HO活性升高明显(P<0.05),但8周时有所回降,但仍高于对照组;2K1C组4周时HO-1蛋白含量明显升高,比假手术组高25.38%(P<0.05)。结论在肾性高血压大鼠,血浆AngII增高诱导了HO-1的表达增加来对抗压力负荷对血管的损害。     

缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞 HO-1 基因表达和内源性一氧化碳生成的影响

目的:研究缺氧对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞诱导型血红素氧合酶(HO-1)基因表达及内源性一氧化碳(CO)产生的影响,探讨HO-CO系统在缺氧性肺动脉高压中的作用。方法:原代培养大鼠肺内动脉的平滑肌细胞(PASMC)并传代,选用第3-5代PASMC用于实验。在培养瓶内通缺氧气体(95%N₂,5%CO₂)12、24h和48h后,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PASMC中HO-1mRNA水平,用酶联免疫检测仪测定培养基中碳氧血红蛋白(COHb)含量,放免法测定培养基中环磷酸鸟苷(cGMP)含量。结果:缺氧12、24和48hHO-1mRNA分别较正常对照组高2.7%、5.7%和27.1%(P＜0.01),培养基中COHb的含量分别较正常对照组高13.8%、31.0%和93.1%(P＜0.01),PASMC中cGMP的含量分别为正常对照组的2.7、4.0和6.8倍(P＜0.01或P＜0.05)。结论:缺氧诱导PASMC中的HO-1基因表达上调,并使内源性CO产生增多,对PASMC内cGMP浓度有调节作用。