反复种植失败患者的外周血Th17/调节性T淋巴细胞的失衡情况

目的 探讨反复种植失败(RIF)患者外周血Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)的失衡情况。方法 纳入26例RIF患者(RIF组)和27例非妊娠期且生育功能正常的女性(对照组)。于月经周期的增殖晚期,检测两组外周血单核淋巴细胞中叉头状/翅膀状螺旋转录因子P3(FOXP3)与视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)的mRNA表达量,以及CD4⁺IL-17A⁺Th17/CD4⁺T淋巴细胞比值和CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺Treg/CD4⁺T淋巴细胞比值;并检测两组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17A、IL-23蛋白水平。结果 RIF组CD4⁺IL-17A⁺Th17/CD4⁺T淋巴细胞比值及RORγt mRNA表达量均高于对照组,而CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺     

CRP、WBC、PCT、IL-6的水平及淋巴细胞亚群与儿童细菌性肺炎预后及转归的相关性

目的 探讨C反应蛋白(c-reactive protein, CRP)、白细胞计数(white blood cell count, WBC)、降钙素原(procalcitonin, PCT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和外周血淋巴细胞亚群与细菌性肺炎患儿预后及转归的相关性。方法 选取26例轻症组患儿和18例重症组患儿，分别于入院第1天，治疗第7天检测外周血中CRP、WBC、IL-6、PCT及淋巴细胞亚群的含量，根据细菌性肺炎患儿临床症状及胸部影像学评估其治愈恢复情况，采用多因素logistic回归分析预后相关因素。同时选取同期来院体检的健康儿童20例作为对照组。结果 治疗前，3组儿童血清中的CRP、WBC、PCT、IL-6水平及CD16⁺CD56⁺NK、CD3⁺T、CD4⁺T、CD8⁺T及CD4⁺/CD8⁺差异均有统计学意义(P<0.05);其中重症组患儿CRP、PCT、IL-6水平高于轻症组，CD1...     

恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的检测及临床意义

目的：研究CD4⁺CD25^high Foxp3⁺调节性T细胞(Tregs)在恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在肿瘤发病中的作用及临床意义。方法：采用流式细胞术检测61例不同分期恶性肿瘤患者PBMC中CD4⁺CD25⁺/CD4⁺CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞百分比,进一步分析CD4⁺CD25⁺及CD4⁺CD25^highT细胞中表达Foxp3⁺T细胞的百分比,并与正常对照组(n=32)进行比较。结果：与正常对照组比较,Ⅰ及Ⅱ期恶性肿瘤患者PBMC中CD4⁺CD25⁺/CD4⁺及CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞百分比均无明显变化(P>0.05),Ⅲ及Ⅳ期恶性肿瘤患者均明显增高(P<0.05),随肿瘤恶性程度增高,CD4⁺CD25⁺/CD4⁺及CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞的百分比也逐渐增高;恶性肿瘤患者CD4⁺CD25⁺ 及CD4⁺CD25^high Foxp3⁺T细胞表达水平较正常对照组均增高,组间比较差异均有显著性(P< 0.01)。结论:恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞增高可能是恶性肿瘤发病及免疫机制异常的主要原因之一,定期检测外周血中上述指标的变化,有利于了解恶性肿瘤患者的病情变化及预后判断。     

IL-36γ促进人CD8+T淋巴细胞细胞因子的分泌

目的: 探讨白细胞介素36γ（IL-36γ）是否能够增强体外培养的人CD8⁺T淋巴细胞分泌γ干扰素。方法: 经密度梯度离心法从健康人外周血分离获得外周血单个核细胞（PBMC）,经磁珠阳性选择富集纯化CD8⁺T淋巴细胞,分别用CD3单克隆抗体（mAb）+CD28 mAb,CD3 mAb+CD28 mAb+IL-12,CD3 mAb+CD28 mAb+IL-36γ以及CD3 mAb+CD28 mAb+IL-12+IL-36γ 4种因子组合刺激培养24 h和72 h。收集细胞,采用免疫荧光标记和流式细胞术分析分选富集的CD8⁺T淋巴细胞纯度以及γ干扰素的表达;采用实时PCR检测各组细胞IL-36受体（IL-36R）、γ干扰素和颗粒酶B mRNA的表达。结果： 人CD8⁺T淋巴细胞表达IL-36R;各组因子刺激的人CD8⁺T淋巴细胞形态没有明显差异;人CD8+T淋巴细胞经IL-36γ刺激后,γ干扰素、颗粒酶B mRNA表达上调;同时, IL-36γ和IL-12 具有协同刺激CD8⁺T淋巴细胞的作用。结论： IL-36γ能促进体外培养的人CD8⁺T淋巴细胞分泌细胞因子,并且与IL-12具有协同作用。     

外周血淋巴细胞亚群、NK细胞检测在诊断儿童传染性单核细胞增多症中的临床价值

目的 分析传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血中淋巴细胞亚群及NK细胞计数及比例的变化,探讨淋巴细胞亚群及NK细胞检测对IM患儿的临床意义。方法 选择2020年3月—2021年7月本院儿科收治的IM患儿21例作为IM组,同时选择同期在本院儿科就诊的其他疾病患儿20例作为对照组。比较两组患者之间CD3⁺T细胞、CD3⁺CD4⁺T细胞、CD3⁺CD8⁺T、CD19⁺B细胞及CD16⁺CD56⁺NK细胞计数和百分比的变化,并比较他们之间的差异。结果 IM组患儿CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞及CD16⁺56⁺NK细胞计数值均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),并且IM组CD4⁺T细胞/CD8⁺T细胞比值倒置;两组患儿之间CD19B+细...     

子痫前期患者胎盘组织中微RNA-210和Foxp3的表达及临床意义

目的 探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中微RNA(miR)-210、Foxp3的表达及临床意义。方法 选择2018年6月至2019年12月南阳市中心医院收治的且以剖宫产方式分娩的36例PE患者为PE组,选择同期正常妊娠孕妇35例为正常妊娠组,另选择体检健康的未妊娠女性40例为未妊娠组。采用流式细胞术检测3组受试者外周静脉血CD4⁺CD25⁺CD127^-调节性T细胞(Treg细胞)、CD4⁺辅助性T淋巴细胞(Th细胞)水平,计算CD4⁺CD25⁺CD127^-Treg细胞与CD4⁺Th细胞的比值(CD4⁺CD25⁺CD127^-/CD4⁺);采用酶联免疫吸附试验检测3组受试者血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17水平;实时荧光定量聚合酶链反应法检测PE组和正常妊娠组受试者胎盘组织中Foxp3 mRNA、miR-210表达...     

外周血淋巴细胞亚群和血清补体C3、C4在胃癌中的表达和意义

目的 探讨外周血淋巴细胞亚群分布及血清补体C3、C4水平在胃癌中的表达和意义。方法 2020年1月-2021年5月在浙江省湖州市第一人民医院行淋巴细胞亚群检测的病例中选择经病理诊断确诊为胃癌(胃癌组)和一般胃病(胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡等)的病例(胃病组)各80例;另外选择同期体检健康人群80例(正常对照组)。使用BD FACSCantoⅡ流式细胞测定仪及相关BD试剂用于检测外周血中CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD3^-CD16⁺CD56⁺细胞、CD3-CD19⁺B及CD4⁺/CD8⁺;使用免疫化学分析仪-贝克曼Immage800及其配套试剂检测血液补体C3、C4水平。结果 胃癌组仅CD3-CD19⁺B低于健康对照组(P<0.05)。胃病组CD3、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞及CD3-CD16     

IL-33诱导的小鼠过敏原非依赖性哮喘样模型肺组织免疫细胞及亚群的改变

目的 本研究旨在通过对白细胞介素-33（interleukin-33,IL-33）诱导的过敏原非依赖性哮喘样模型小鼠的观察,探索IL-33对小鼠肺组织中T、B淋巴细胞亚群,自然杀伤T（natural killer T,NKT）细胞和固有淋巴样2型细胞（type 2 innate lymphoid cells,ILC2）的生物学作用。方法 采用数字表法将小鼠随机分为氯化钠注射液（normal saline,NS）组和IL-33组,分别将NS、IL-33于1~6 d连续滴鼻,之后隔天滴鼻至18 d制备小鼠哮喘模型。采用有创肺功能检测小鼠气道高反应性;肺组织切片染色观察气道炎性反应;流式细胞术检测小鼠肺组织中T、B细胞亚群,NKT细胞和ILC2细胞数量及比例变化。结果 与NS组相比,鼻腔给予IL-33刺激可引起小鼠气道反应性增高,气道周围炎性细胞浸润和杯状细胞增生。IL-33组小鼠肺组织T细胞（CD3⁺T）及其亚群细胞数增多,Th2细胞（CD3⁺CD8^-IL-4⁺）出现优势分化,Th1/Th2细胞比例下降（P<0.01）;B细胞（CD19⁺B）及其亚群（B1a：CD19⁺CD23^-CD5⁺CD11b⁺,B1b：CD19⁺CD23^-CD5^-CD11b⁺和B2：CD19⁺CD23⁺B220⁺）以及ILC2细胞（lineage^-ICOS⁺ST2⁺）数出现明显增加（P<0.01）;NKT细胞（CD3⁺CD8^-CD49b⁺）比例无明显改变（P>0.05）。结论 IL-33可能通过直接或间接作用造成肺组织T、B淋巴细胞亚群和ILC2细胞的数量及比例改变,打破局部免疫系统平衡,引发哮喘炎性反应。     

T细胞活化谱对脓毒症患者病原菌类型的鉴别效果

目的 探讨T细胞活化谱鉴别脓毒症不同病原菌感染中的临床价值。方法 选取2020年9月至2022年6月于西安交通大学第一附属医院接受治疗的100例脓毒症患者作为脓毒症组,选取同期于门诊进行体检的37例健康志愿者作为对照组。脓毒症组根据患者入院病原学检查结果分为革兰氏阴性菌组(简称阴性菌组,46例)和革兰氏阳性菌组(简称阳性菌组,54例)。通过流式细胞仪检测患者外周血中T淋巴细胞的活化状态及其表面共刺激分子的表达情况。采用受试者操作特征(ROC)曲线评估CD38⁺HLA-DR⁺T细胞区分革兰氏阴性菌脓毒症和革兰氏阳性菌脓毒症的能力。结果 阴性菌组和阳性菌组的外周血中CD4⁺CD38⁺CD69⁺T细胞和CD8⁺CD38⁺CD69⁺T细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05),但均高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,脓毒症各亚组外周血中CD4⁺CD38⁺HL...     

忍冬藤水提物冻干粉调控共培养体系中大鼠T淋巴细胞迁移机制研究

目的 探讨忍冬藤水提物冻干粉调控共培养体系中大鼠T淋巴细胞迁移的作用机制。方法 Transwell建立大鼠外周血T淋巴细胞与大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞共培养体系，白细胞介素-1β(25μg/L)诱导细胞成炎性损伤模型，以忍冬藤水提物冻干粉(100、250 mg/L)作为干预措施，白细胞介素-1β抑制剂(25μg/L)作为阳性对照。采用高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI/MS)检测忍冬藤水提物组分，HE染色观察滑膜细胞形态改变，实时动态细胞分析技术(RTCA)检测淋巴细胞迁移指数变化，流式细胞仪检测CD3⁺CD4⁺T细胞及CD3⁺CD8⁺T细胞百分比变化，酶联免疫吸附测定(ELISA)检测共培养体系中可溶性血管内皮黏附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)浓度。结果 HPLC-ESI/MS结果显示，忍冬藤水提物冻干粉主要成分有咖啡酸、芦丁等。忍冬藤水提物冻干粉干预后，HE染色显示滑膜细胞数目减少，细胞形态发生不同程度改变，细胞呈圆形，胞质颜色深染，核区分相...