肝细胞癌和癌旁肝组织中c－myc，N－ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探针对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性．Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌旁肝细胞．作者认为，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因在肝细胞癌中均可呈较高水平表达．二者参与了肝癌的恶性转化过程并在肝癌的发生过程中相互协同以维持肝癌的恶性表型．     

r—干扰素对过度增生的血管平滑肌细胞癌基因表达的抑制作用

本实验建立了兔腹主动脉球囊扩张（ＢＡ）动物模型。以地高辛标记的ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因探针进行ＢＡ术后血管段组织的原位杂交，以生物素标记的ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ探针以经ＢＡ组织培养液刺激的、培养的血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）进行细胞的原位杂交。结果显示：（１）ＢＡ术后再狭窄的血管段中ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ－Ｎ－ｒａｓ三种癌基因表达均增高，而且表达颗粒主要分布于粥样斑块再狭窄     

mRNA—cDNA高敏感性原分子杂交技术

目的 探讨效果更加满意的核酸分子杂交技术的方法。方法 采用原位分子杂交技术结合免疫组化ＳＰ法,在人肝癌组织石蜡切片上显示ｃ－ｍｙｃ和Ｎ－ｒａｓ基因的ｍＲＮＡ。结果：ｃ－ｙｃｙ ｍＲＮＡ和Ｎ－ｒａｓ ｍＲＮＡ杂交信号呈红色,清晰可见于细胞浆内,背景浅淡,效果满意。结论：此方法与以往的原位杂交方法相比,能明显放大杂交信号,提高检测的敏感性和稳定性。     

肝细胞癌HBVDNA和癌基因表达的分子病理研究

目的：从分子水平观察肝细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和癌基因的表达情况及与发病的关系。方法：应用原位核酸分子杂交技术研究４５例原发性肝细胞癌和２５例肝硬化的石蜡切片组织中ＨＢＶＤＮＡ和ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ癌基因表达情况。结果：在肝细胞癌中见有ｎ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ表达增强，其检出率分别为６８．９％（３１／４５）和４０．０％（１８／４５），高于肝硬化组（２８．０％，８．０％）（Ｐ＜０．０５）。４０％肝细胞癌病例（１８／４５）两种癌基因同时过量表达，４５例肝细胞癌组织中有１９例存在有ＨＢＶＤＮＡ序列（４２．２％）并均具有ｎ－ｒａｓ或ｃ－ｍｙｃ过度表达。结论：两种癌基因ＨＢＶＤＮＡ可能有激活癌基因作用，肝细胞癌发生中可能起着重要的协同作用。ＨＢＶ感染与肝细胞癌发生有密切关系。     

c-myc、ras与P53基因蛋白在喉癌中的共同表达

目的：研究癌基因及抗癌基因在喉癌中的联合表达情况。方法：应用ＬＳＡＢ微波免疫组化方法,检测了ｃｍｙｃ、ｒａｓ 与Ｐ５３ 在３０ 例喉癌及癌旁粘膜,４ 例正常喉粘膜中的共同表达。结果：①ｒａｓ,ｃｍｙｃ 和Ｐ５３ 的阳性表达率在癌组织中分别为８６－７ ％（２６／３０）,９６－７％ （２９／３０）,６３－３％ （１９／３０）;癌旁粘膜分别为４３－３％ （１３／３０） ,５６－７％ （１７／３０）,１０－０％ （３／３０） ;正常喉粘膜中分别为２５－０％ （１／４） ,２５－０％ （１／４） ,０－０％ （０／４） 。癌与癌旁及正常粘膜间差异有显著性（Ｐ＜０－０５） 。②２ 种以上癌基因蛋白产物同时表达阳性者喉癌组织中有２８ 例（９３－３ ％ ）;癌旁组织中１４ 例（４６－７％ ）;而正常喉粘膜中无１ 例共同表达。③喉癌组织中,ｃｍｙｃ ＋ ｒａｓ＋ Ｐ５３,ｒａｓ ＋ ｃｍｙｃ,Ｐ５３ ＋ ｃｍｙｃ 同时表达者分别为５６－７％ ,３０－３％ ,６－７ ％ 。④３ 种基因产物的表达与喉癌的分化程度无关（ Ｐ＞０－０５）。结论：ｃｍｙｃ,ｒａｓ 及Ｐ５３ 基因的改变均参与了喉癌的发生、发展过程,三者在喉癌的发生中可能起协同作用     

肝细胞癌c-fos的表达及其与乙型肝炎病毒的关系

目的 研究肝癌组织中ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｃｏｆ ｍＲＮＡ的表达及其与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的关系。方法 采用免疫组化及原位杂交技术检测５９例肝细胞癌组织及５６例癌旁组织中ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ ＤＮＡ、ｃ－ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＡＮ的表达。结果 癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ阳性率为８７．５％（４９／５６）。肝癌组织ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为５９．３％（３５／５９）。肝细胞癌组织、癌旁肝组织ｃ－ｆｏｓ蛋白 阳性率     

p21和c—myc蛋白在肝细胞癌与癌旁肝组织中表达的对比研究

本文用连续切片免疫组化法检测了肝细胞癌及癌旁组织Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌及癌旁组织的阳性率分别为５３．３％和９６．７％；４０％和８６．７％；两者表达率均以癌旁组织为高，Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性信号形态呈浆膜和／或核型；其表达以近癌组织的癌旁肝细胞为强，肝硬变结节尤甚。本文结果进一步ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因异常激活和表达与肝细胞癌发生具有相关性的观点。     

p21和c-myc蛋白在肝细胞癌与癌旁肝组织中表达的对比研究

本文用连续切片免疫组化法检测了肝细胞癌及癌旁组织ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌及癌旁组织的阳性率分别为５３．３％和９６．７％；４０％和８６．７％；两者表达率均以癌旁组织为高（Ｐ＜０．０１）。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性信号形态呈浆膜和／或核型；其表达均以近癌组织的癌旁肝细胞为强，肝硬变结节尤甚。本文结果进一步支持ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因异常激活和表达与肝细胞癌发生具相关性的观点。     

反义C—myc寡核苷酸对人肝癌细胞SMMC—7721的生长抑制

针对Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ第二外显子起始妈ＡＵＧ及下游４个密码子设计合成了反义、正义及锚配寡核苷酸（ＯＤＮｓ）、并对合成的ＯＤＮｓ进行 硫代磷酸化修饰。在人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１培养体系中，对反义寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ）抑制细胞增殖的作用进行了研究。发现（１）与正义和错配ＯＤＮｓ相比较，反义Ｃ－ｍｙｃＯＤＮ有明显抑制人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１生长的作用；（２）该生长抑制作用随ＡＳＯＤＮ剂量增加而增     

骨肉瘤rad,c—myc和Rb基因蛋白表达

应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）检测９例人骨肉瘤ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ原癌基因和Ｒｂ抑癌基因蛋白产物的表达，研究结果表明：原癌基因ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ的蛋白表达阳性率分别为７８％（７例）、８９％（８例）。两种蛋白表达的强度无显著性差异。在９例骨肉瘤中，两种原癌基因蛋白共同表达有６例，占６７％。抑癌基因Ｒｂ蛋白阴性表达为３例，阴性表达率３３％，且都伴有Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白的阳性表达。本文研究结果提示     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌变过程中3种基因的原位表达

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌变过程中３种基因的原位表达［郑杰，武忠弼，阮幼冰等．中华病理学杂志，１９９５，２４（５）：３０９］应用原位杂交技术对大鼠肝组织在二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱癌过程中Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、Ｈ－ｒａｓ的表达进行了研究，以了解癌基因...     

γ—干扰素对过度增生的血管平滑肌细胞癌基因表达的抑制作用

本实验建立了兔腹主动脉球囊扩张（ＢＡ）动物模型。以地高辛标记的Ｃ一ｆｏｓ、Ｃ一ｍｙｃ，Ｎ一ｒａｓ癌基因探针进行ＢＡ术后血管段组织的原位杂交，以生物素标记的Ｃ一ｆｏｓ、ｃ一ｍｙｃ、Ｎ一ｒａｓ探针对经ＢＡ组织培养液刺激的、培养的血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）进行细胞的原位杂交。结果显示：（１）ＢＡ术后再狭窄的血管段中ｃ一ｆｏｓ、ｃ一ｍｙｃ、Ｎ一ｒａｓ三种癌基因表达均增高，而且表达颗粒主要分布于粥样斑块中，中膜平滑肌层颗粒稀少。正常血管段无这三种癌基因表达。（２）经ＢＡ组织培养液刺激的ＳＭＣ胞浆中充满ｃ一ｆｏｓ，ｃ一ｍｙｃ癌基因表达颗粒。Ｎ一ｒａｓ癌基因表达主要位于细胞核膜部位。未给ＢＡ组织液刺激的ＳＭＣ未见以上癌基因表达。γ—干扰素可以部分抑制其表达。     

Ras、c-myc、p~(53)癌基因蛋白在喉癌及癌旁 不同距离组织中表达的研究

研究癌基因及抗癌基因在喉癌及癌旁不同距离处的表达特点及意义。方法：应用ＬＳＡＢ微波 免疫组化法,检测了ｒａｓ,ｃ－ ｍｙｃ及 ｐ５３在 ３０例喉癌、边缘区、癌旁 ０．５ｃｍ、１．０ｃｍ、１．５ｃｍ、２．０ｃｍ处粘膜和４例正 常喉粘膜中的表达。结果;①ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３在喉癌组织中有较高的阳性表达率,分别为８６．７％（２６／３０）、９６．７％ （２９／３０）、６３．３％（１９／３０）,与癌旁及正常组织相比,差异显著（Ｐ＜０．０１）,ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ在正常组织中有低量表达,ｐ５３ 从癌旁１．０ｃｍ处开始出现表达。②两种以上癌基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织为２８例（９３．３％）,其中 ｒａｓ＋ｃ－ｍｙｃ＋ｐ５３者为１７例（５６．７％）。癌旁组织中也存在着复合表达,在正常组织中无一例联合表达。③ｒａｓ、ｃ －ｍｙｃ、ｐ５３的单独及联合表达依正常粘膜→癌旁２．０ｃｍ→１．５ｃｍ→１．０ｃｍ→０．５ｃｍ→边缘区→癌依次增高,多 数在癌旁１．０ｃｍ处与０．５ｃｍ以内处的表达存在有显著差异（Ｐ＜０．０５）。④三种癌基因产物的表达与喉癌的分化 程度无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３基因改变均参与了喉癌?     

人肝癌c─myc基因产物和HBxAg表达研究

本实验对４８例石蜡包埋人肝癌和癌旁组织的Ｐ６２￣（ｃ－ｍｙｃ）和ＨＢｘＡｇ进行了免疫组化（ＡＢＣ法）检测。结果显示，Ｐ６２￣（ｃ－ｍｙｃ）在肝癌和癌旁组织阳性率分别为８３．３％（４０／４８）和８９．６％（４３／４８），肝癌及其癌旁组织ＨＢｃＡｇ阳性率均为９３．８％（４５／４８）．在肝癌组织中Ｐ６２￣（ｃ－ｍｙｃ）与ＨＢｘＡｇ的表达呈显著正相关（Ｐ＜０．０５），这为ＨＢｘＡｇ在肝癌中作为叵式作用因子激活ｃ—ｍｙｃ癌基因提供了细胞水平的证据。ｃ－ｍｙｃ基因过度表达参与了人肝癌的发生发展过程。     

卵圆细胞在实验性肝癌发生中的作用

目的：观察诱癌过程中ｃＨａｒａｓ、ｐ２１蛋白、ＡＦＰ及ＰＣＮＡ在肝细胞及肝卵圆细胞中的表达变化。方法：用化学致癌剂３′甲基４二甲基氨偶氮苯（３′ｍｅｔｈｙ１４ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ,３′ＭｅＤＡＢ）诱发ＳＤ大鼠肝癌,通过免疫组化、原位杂交等方法检测各相关因子在肝细胞及肝卵圆细胞内的表达。结果：诱癌４周,大鼠肝内出现大量的卵圆细胞,呈ＰＣＮＡ强阳性。６～８周,部分增生的卵圆细胞ｐ２１ｒａｓ及ＡＦＰ阳性反应。原位杂交显示,诱癌的第４～８周,ｃＨａｒａｓ的阳性表达细胞呈逐渐增多趋势;１４周时,ｃＨａｒａｓｍＲＮＡ阳性表达细胞减少;至１７周,所有癌组织内显示ｃＨａｒａｓ基因表达阴性,而癌旁组织内则可见ｒａｓ基因的大量表达。结论：卵圆细胞是宿主受化学致癌剂作用后发生肝癌的始动细胞,与肝癌的发生有着密切的联系。     

c—fos蛋白在大鼠肝癌发生中的表达及意义

采用免疫组织化学ＡＢＣ法，对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ０诱发大鼠肝癌发生过程中ｃ－ｆｏｓ蛋白在肝组织中的表达进行了系统观察。结果：正常大鼠肝细胞不表达ｃ－ｆｏｓ蛋白，诱癌第４周即可见少量肝细胞呈ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达。随诱癌发展进程，肝细胞ｃ－ｆｏｓ蛋白表达逐渐增强，至诱癌中期（８－１２周），肝增生结节内部分肝于ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达。诱癌晚期（１８周），癌结节内大部分肝癌细胞亦呈ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达     

人肝癌c—myc基因产物和HBxAg表达研究

本实验对４８例石蜡包埋人肝癌和癌旁组织的Ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘＡｇ进行了免疫组化检测。结果显示，Ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ在肝癌和癌旁组织阳性率分别为８３．３％和８９．６％，肝癌及其癌旁组织ＨＢｃＡｇ阳性率均为９３．８％，在肝癌组织中Ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ与ＨＢｘＡｇ的表达呈显著正相关性，这为ＨＢｘＡｇ在肝癌中作为反式作用因子激活ｃ－ｍｙｃ癌基因提供了细胞水平的证据。     

c—myc,ras与P53基因蛋白在喉癌中的共同表达

目的：研究癌基因及抗癌基因在喉癌中的联合表达情况。方法：应用ＬＳＡＢ微波免疫组化方法，检测了ｃ－ｍｙｃ、ｒａｓ与Ｐ５３在３０例喉癌及癌帝粘膜，４例下沉喉粘膜中的共同表达。结果：①ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ和Ｐ５３的阳性表达率在癌组织中分别为８６．７％，９６．７％，６３．３％；癌旁粘膜分别为４３．３％，５６．７％，１０．０％；正常喉粘膜中分别为２５．０％，２５．０％，０．０％。癌与癌旁及正常粘膜间差异有显著     

p53、c-myc基因蛋白产物及增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的同步检测

目的为弄清Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因和细胞增殖活性与肝细胞癌（ＨＣＣ）发生发展的关系。方法应用免疫组化方法检测了３０例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因蛋白产物以及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果Ｐ５３,ｃ－ｍｙｃ基因表达率分别为４６．７％和５６７％。ｐ５３在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌组织的表达率有递增趋势;而ｃ－ｎｌｙＣ基因在三级间的表达率却无明显区别。ｐ５３与ｃ－ｍｙｃ基因的同时表达率为２３３％。ＰＣＮＡ阳性细胞的分布在ＨＣＣ中呈四种类型：散在型、边缘型、镶嵌型和弥漫型。ＰＣＮＡ标记指数与ＨＣＣ的分级相关。ｐ５３阳性的ＨＣＣ中ＰＣＮＡＬＩ为５３．８±２４．３,阴性的为３３．１±１５．７（Ｐ＜０．０５）;ｃ－ｍｐｃ基因表达阳性与阴性的ＰＣＮＡＬＩ分别为３８、７±２２．９、４２．８±２１．６（Ｐ＞０．０５）。结论ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因均与ＨＣＣ的发生、发展有关,但两者之间无依存关系;伴有ｐ５３基因突变的ＨＣＣ中癌细胞增生活跃,恶性程度高。     

人红白血病细胞株c-myc/N-ras/P_(53)mRNA的表达及其与细胞生物学特性的关系

本实验用一定浓度的苦参碱作用Ｋ５６２细胞１６ｈ, ２４ｈ,４８ｈ,采用分子生物学Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ和Ｄｏｔ Ｂｌｏｔ杂交技术分析ｃ－ｍｙｃ,Ｎ－ｒａｓ及Ｐ５３ ｍＲＮＡ在Ｋ５６２细胞诱导分化过程中表达水平改变,以探讨其表达水平与细胞生物学特性的关系。结果显示苦参碱作用Ｋ５６２细胞２４ｈ时,Ｎ－ｒａｓ基因ｍＲＮＡ表达活化;Ｐ５３－基因表达增强：作用４８ｈ时,ｃ－ｍｙｃ　ｍＲＮＡ水平表达明显受抑。说明苦参碱在诱导Ｋ５６２细胞分化启动时,能明显改变早期相关癌基因的表达。提示ｃ－ｍｙｃ,Ｎ－ｒａｓ和Ｐ５３等癌基因是一类重要的细胞增殖、分化调控因素。