CT9和CT10基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的检测肿瘤睾丸抗原CT9和CT10基因mRNA在肝细胞癌（HCC）中的表达情况。方法用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法对HCC病人的癌组织和相应癌旁组织及对照（肝硬化和正常肝组织）中CT9和CT10mRNA的表达进行了检测,随机选取每一种抗原RT-PCR呈阳性的产物4例进行DNA序列测定,结合AFP、抗HCV、HgsAg、肿瘤直径、分化程度等临床指标进行分析。结果56例HCC病人中,CY9、CT10基因mRNA阳性率分别是51．8％（29／56）和44．6％（25／56）,至少表达一种CTA者达66．1％（37／56）,表达两种者为30．4％（17／56）;电泳显示PCR产物与阳性对照大小一致;而癌旁组织中仅有CT9基因nRNA表达为阳性,阳性率为7．1％（4／56）,但表达强度明显弱于在癌组织中的表达,进一步的病理检查未发现CY9表达呈阳性的癌旁组织中有癌细胞。所测10例肝硬化和10例正常肝组织均未检测到CT9和CT10的表达。DNA测序结果表明RT-PCR产物确为CT9和CT10cDNA。CT9和CT10的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性（P〉O．05）。而在部分AFP正常（〈25ng／L）HCC病人中存在CT9和CT10基因的表达。结论CT9和CT10基因在HCC中呈高比例、高特异表达,为HCC免疫治疗提供了新的理想靶位;CT9和CT10同时在HCC中表达,为应用以这些肿瘤抗原为基础的多价瘤苗治疗HCC提供了实验依据。     

以SSX基因mRNA作为肿瘤标志物检测循环中的肝癌细胞

目的　探讨检测肝细胞癌 (HCC)患者外周血中SSX基因mRNA的临床意义。方法　以简易“降落”PCR(stepdownRT PCR)方法检测HCC患者外周血中SSX基因mRNA的表达 ,并对SSX基因的表达与临床指标和预后的关系进行了分析。结果　 4 2例肝癌患者肝癌组织中SSX基因mRNA阳性率为 85 7% (36 4 2 ) ,而癌旁组织、肝硬化组织和正常肝组织均未发现有SSX基因的表达。外周血标本中 ,有 17例可检测到SSX基因的表达 ,占 4 0 5 %。肝癌组织不表达SSX基因者以及健康志愿者的外周血中未检测到其表达。外周血中SSX基因的表达与年龄、性别、肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤大小、血清AFP水平和HBV感染无显著相关性 (P >0 0 5 )。除肝组织不表达SSX和死于并发症的 7例患者外 ,在随访 7 7± 5 4月的过程中 ,16例外周血中表达SSX基因mRNA者有 8例出现了复发和 或转移 ,其中 7例已经死亡 ,另 1例带瘤生存 ,而 19例阴性者仅 2例出现了复发和 或转移 ,二者相比差异有显著性 (P =0 0 2 8)。结论　外周血中SSX基因表达与复发、转移密切相关 ,SSX基因可作为检测HCC患者循环肿瘤细胞的标志基因。     

肿瘤-睾丸抗原在胃癌组织中的表达

目的 检测8种肿瘤-睾丸抗原(CTA)基因mRNA在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达.方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测55例胃癌患者的癌组织和相应癌旁组织中8种CTA基因mRNA的表达,30例非肿瘤患者胃黏膜组织作为对照.结果 55例胃癌组织中,表达MAGE-A1、MAGE-A3、CT9、CT10、NY-ESO-1、SSX-1、SSX-2、SXX-4基因的阳性率分别是60.0%(33/55)、30.9%(17/55)、34.5%(19/55)、12.7%(7/55)、10.9%(6/55)、23.6%(13/55)、3.6%(2/55)和27.3%(15/55),而相应的癌旁组织均为阴性.非肿瘤患者胃黏膜组织未见此8种CTA基因的表达.8种CTA基因的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、幽门螺旋杆菌感染及TNM分期无明显相关(P>0.05).结论 多种CTA基因在胃癌中呈特异性高表达,为胃癌的免疫治疗提供了新的潜在的靶位.     

肝细胞癌组织中CT9基因mRNA表达的初步研究

目的 探讨肿瘤-睾丸抗原9（CT9）基因mRNA在肝细胞癌中的表达情况。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对45例肝细胞癌患者癌组织和相应癌旁组织中CT9基因mRNA的表达情况进行检测，并对其中3例RT—PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果 45例肝细胞癌患者中，23例表达CT9mRNA，表达阳性率为51．1％，相应的癌旁组织中则均为阴性；3例DNA测序结果表明RT—PCR产物确为CT9 cDNA。CT9 mRNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无相关性（P〉0．05）。结论 CT9 mRNA在肝细胞癌中呈高比例、特异性表达，可望成为肝细胞癌免疫治疗的理想靶位。     

SSX2基因mRNA在泌尿系统肿瘤组织中的表达

目的探讨肿瘤特异性SSX2基因mRNA在肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中的表达.方法采用逆转录聚合酶链反应方法,检测26例肾细胞癌患者、27例尿路移行细胞癌患者的癌组织,及15例患者相应的癌旁组织中SSX2基因mRNA的表达.结果 26例肾癌患者癌组织中,18例(69%)SSX2 基因mRNA表达阳性;27例尿路移行细胞癌组织中,22例(81%)SSX2 基因mRNA表达阳性.癌旁组织均不表达.在肿瘤不同分期之间及不同分级之间SSX2 基因mRNA的表达差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 SSX2基因mRNA在肾癌及尿路移行细胞癌组织中高表达.     

肿瘤睾丸抗原CT10基因mRNA在肝细胞肝癌中的表达及HLA-A2限制性CTL表位的预测

目的检测CT10基因mRNA在肝细胞肝癌 (HCC)中的表达情况 ,了解肿瘤睾丸抗原CT10基因mRNA在HCC中的表达是否具有肿瘤特异性 ;对CT10HLA A2限制性CTL表位进行预测。方法用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 45例HCC患者癌组织和相应癌旁组织的CT10基因mRNA表达情况进行了检测 ,对其中 3例RT PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定 ;利用超基序法和量化基序法联合预测CT10HLA A2限制性CTL表位。结果 45例HCC患者中 ,19例表达CT10mRNA ,阳性率为 42 % ,相应的癌旁组织中结果均显示阴性 ;3例DNA测序结果表明RT PCR产物确为CT10cDNA。CT10的表达与年龄、性别、肿瘤体积、分化程度、血清甲胎球蛋白 (AFP)水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5 ) ;预测发现 9个HLA A2限制性CTL表位。结论CT10在HCC中呈高比例、特异性表达 ,可望成为HCC免疫治疗的理想靶位。     

4种肿瘤-睾丸抗原在肝细胞癌中的表达

目的 观察肿瘤睾丸(CT)抗原MAGE1、SSX-1、CTp11及HCA587基因mRNA在肝细胞癌(HCC)中的表达并探讨其对HCC免疫治疗的意义。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法对HCC患者癌组织和对照组织中的目的基因mRNA进行检测。结果在检测的105例HCC组织中,MAGE-1、SSX-1、CTp11、HCA 587基因mRNA阳性率分别是75.2％、72.4％、62.9％和56.2％:至少表达1种CT抗原者达93.3％;对照组仅有3例癌旁组织SSX-1基因mRNA表达为弱阳性。结论MAGE-1、SSX-1、CTp11及HCA 587基因mRNA在HCC中呈高比例、高特异表达,是HCC免疫治疗的理想靶位;多个CT抗原同时在HCC中表达;为HCC多价瘤苗的研制提供了实验依据。     

RhoC基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨RhoC基因与肝细胞癌 (HCC)的发生发展和侵袭转移的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)在半定量水平检测 2 5例HCC及其相对应的癌旁肝组织和 4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中RhoCmRNA的表达 ;同时采用PCR产物单链构象多态性 (PCR SS CP)银染法检测RhoC基因的突变情况。结果本组 2 5例HCC中RhoCmRNA的表达较癌旁肝组织高 ,其光密度比值分别为 1 8± 1 1和 1 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中的RhoCmRNA的表达较相对应的肝内肝癌病灶高 ,其光密度比值分别为 3 3± 0 5和 2 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;将 2 5例HCC分为RhoC基因过表达组和高表达组后发现 ,过表达组中肝癌细胞分化较差 ,静脉受侵严重 ,且以结节性肝癌居多 (P <0 0 5 ) ;而 2 5例HCC经PCR SSCP银染法分析未发现异常泳动条带。结论RhoC基因与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关 ,且可能是通过表达升高而非突变发挥作用。     

RCAS1mRNA在肝细胞癌中表达的意义

目的研究RACS1mRNA在原发性肝细胞癌中的表达并探讨其意义。方法应用SYBR GreenⅠ逆转录实时荧光定量PCR技术检测37例肝细胞癌(HCC)及癌旁组织中RCAS1mRNA的相对表达量,研究其表达与各项临床指标间的关系。结果RCAS1mRNA的表达水平与病理分级和临床TNM分期有显著相关性(P<0.05),而与病人的性别、血清AFP水平及肿瘤大小无显著相关性。结论RACS1mRNA可作为判断HCC侵袭性和进展的一个潜在指标。     

逆转录聚合酶链反应技术检测人肝癌nm23-H1基因mRNA表达

为探讨人肝癌中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１的ｍＲＮＡ表达状况,设计特异性引物,应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测分析了２０例人肝癌组织及相应癌旁肝组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达。结果 特异性引物能成功扩增ｎｍ２３－Ｈ１基因的几乎整个编码序列：２０例肝癌及癌旁肝组织的ＲＴ－ＰＣＲ结果均为阳性,ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ未发生表达缺失或较大变异现象,由此表明,本实验建立的ＲＴ－Ｐ     

肝细胞癌抗原基因在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨肝细胞癌抗原 (HCA)基因mRNA在肝细胞癌 (HCC)组织中的表达。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织及肝硬化和正常肝组织中的 4种HCAmRNA的表达进行检测 ;结合临床病理资料进行分析。　结果　 46例HCC患者中 ,HCA90、HCA51 9、HCA52 0、HCA587基因mRNA阳性率分别是 65 2 %、76 1 %、45 7%和 32 6 % ;至少表达一种HCA者达 82 6 % ;而癌旁组织中仅HCA51 9基因有 6 5 %mRNA表达为阳性。 1 0例肝硬化和正常肝组织中 4种HCA基因均不表达。 4种HCA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5)。在部分AFP正常的患者中存在HCA基因的表达。　结论　HCA基因在HCC中呈高比例、高特异性表达 ,为HCC免疫治疗提供了新的潜在靶位     

原发性肝细胞癌组织中kruppel样因子6基因mRNA突变的测定

目的　探讨kruppel样因子 (KLF) 6基因与原发性肝细胞肝癌发生、发展的关系。方法分别用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术和聚合酶链单链构象多态分析 (PCR SSCP)技术、DNA序列测定方法 ,检测 2 7例肝细胞癌患者的癌组织与癌旁组织、5例肝转移癌患者的正常肝组织中KLF6基因mRNA的表达及突变情况。结果　正常肝组织及癌旁组织中 ,只有 1例KLF6mRNA无表达 ,阳性率 97% (31/ 32 ) ;肝细胞癌组织中 ,有 4例无表达 ,阳性率 85 % (2 3/ 2 7) ,两者表达率间差异无显著性(χ2 =2 5 8,P >0 0 5 )。 2 7例肝细胞癌组织中 ,6例出现DNA片段异常泳动带 ,突变率为 2 2 % (6 / 2 7) ;14例出现信息个体 ,其中 5例 (5 / 14 ,36 % )为杂合子缺失 ,这 5例中有 3例出现DNA片段异常泳动带 ,突变比例为 3/ 5。在 2 7例癌旁组织中 1例检测出突变 ,但在检测出突变的肝癌组织的配对癌旁组织中无一例检测出突变。结论　肝细胞肿瘤存在KLF6基因突变 ,突变的起源是体细胞性的     

AURORA-A在肝恶性肿瘤中的表达及意义

目的　研究Aurora AmRNA在肝癌组织中的表达 ,探讨Aurora A基因与肝癌发生的关系。方法　采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 30例肝癌组织及 30例正常肝组织中的Aurora AmRNA。结果　Aurora AmRNA在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织 (P <0 .0 5 )。结论　Aurora AmRNA在肝癌组织中的过度表达提示Aurora A基因与肝癌的发病及发展有关。     

Id-1 mRNA在乳腺癌中的表达及与高频彩色 多普勒超声表现和病理对照

目的研究Id-1 mRNA在乳腺癌中的表达,探讨其与彩色多普勒高频超声表现及病理的关系。方法应用实时荧光定量RT-PCR检测80例乳腺癌样本中Id-1 mRNA的表达,并与乳腺癌的高频彩色多普勒超声表现进行对照分析。结果Id-1 mRNA在正常组织中表达低于癌组织（P〈0.01）;WHOⅢ级表达高于WHOⅠ级（P〈0.01）。超声显示具有毛刺征及周边高回声晕的组织,Id-1 mRNA均呈高表达（P〈0.01）;乳腺癌彩色多普勒血流显像Ⅱ～Ⅲ级中Id-1mRNA的表达高于0～Ⅰ级（P〈0.01）。结论乳腺癌的声像图表现与其病理改变密切相关,乳腺癌的彩色多普勒高频超声征象可在一定程度上反应Id-1 mRNA的表达。