CD4+T细胞因子在胆道闭锁患儿肝脏组织中的表达及其意义

目的 检测T淋巴细胞中的11种CD4+T细胞因子在胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝脏组织中的表达,以探讨其在胆道闭锁发病机制中的意义.方法 在病理的基础上,采用流式微球技术对29例BA及9例对照组患儿肝脏组织CD4+T细胞表达的11种细胞因子(IL-12p70、IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-8、IL-6、IL-4、IL-5、IL-1β、TNF-α和TNF-β)同时进行定量检测,并对其代表因子IFN-γ进行免疫组化定位分析.结果 CD4+T细胞表达的11种细胞因子中,BA组患儿肝脏组织中IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α以及Th1细胞因子总量(IL-1β、IL-2、IL-8、IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、TNF-β)与促炎因子总量(IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、TNF-β)分别为2920.69、1 106.01、152.22、12 614.22、834.18、161.29、19 504.55、19653.06,数值明显高于对照组的1 096.00、243.68、5.98、965.17、147.28、30.56、2 617.93、2 623.91,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 由CD4+Th1细胞及其细胞因子所介导的针对胆道上皮细胞的免疫炎症性疾病可能是造成胆道闭锁的主要原因之一.     

自身免疫甲状腺病患儿细胞因子的失衡及其在发病中的作用

目的探讨自身免疫甲状腺病(AITD)儿童血清、干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-4、IL-6水平变化及在AITD发病中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA法对30例弥散性毒性甲状腺肿(GD)和20例桥本甲状腺炎(HT)患儿及30例对照组患儿分别检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6水平。结果与对照组相比,GD患儿血清IL-4、6水平明显升高,IFN-γ/IL-4、TNF-α/IL-6值均明显下降(Pa<0.05);HT患儿(GD)IFN-γ、TNF-α水平、IFN-γ/IL-4、TNF-α/IL-6均显著升高(Pa<0.05),GD较HT患儿明显升高(P<0.05),IFN-γ水平HT较GD患儿显著升高(P<0.05)。HT组IFN-γ、TNF-α阳性表达明显高于IL-4、6,而GD组IL-4、6明显高于IFN-γ、TNF-α。结论GD患儿以分泌IL-4、6的Th2浸润为主,而HT患儿则以分泌IFN-γ、TNF-α的Th1浸润为主。儿童AITD的发病与Th1/Th2失衡及其分泌的Th1/Th2细胞因子密切相关。     

褪黑素对危重新生儿免疫功能影响的研究

目的观察危重新生儿免疫功能的改变及褪黑素对危重新生儿免疫功能的影响。方法2005-10—2006-10重庆医科大学儿童医院对50例危重新生儿外周血单个核细胞(PBMC)体外分别经植物血凝素(PHA)及PHA加褪黑素(melatonin,MT)刺激,均培养1h及48h,培养1h后用EMSA法检测细胞中核因子-B寡聚核苷酸(NF-κB)的含量,培养48h后用ELISA法检测IL-4、IFN-γ及TNF-α的含量。25例正常新生儿PBMC为对照(加PHA)。结果与对照组相比,危重新生儿存在NF-κB活性增高及Th1及Th2平衡紊乱,IL-4及TNF-α显著升高,IFN-γ降低;对于危重新生儿,加褪黑素激素NF-κB活性及细胞因子TNF-α降低(P<0.01),但IL-4及IFN-γ无显著变化。结论危重新生儿存在Th1及Th2功能紊乱,Th2相对优势,且NF-κB信号转导通路参与了危重新生儿的发病。MT能通过NF-κB信号转导通路改善患儿的免疫功能,但对Th1及Th2无影响。     

早期连续性血液净化在肠穿孔腹膜炎模型中改善全身炎症状况的作用

目的 观察早期连续性血液净化对幼猪肠穿孔腹膜炎诱导的全身炎症反应综合征(SIRS)的疗效,旨在探索新生儿肠穿孔腹膜炎治疗的新方法.方法 12只上海种小白猪,体重7～9 kg,雌雄不限.随机分为对照组(n=6)和治疗组(n=6).以盲肠手术穿孔诱导全身炎症反应综合征(SIRS),造模成功后治疗组行连续静脉-静脉血液透析滤过(CVVHDF)8 h.成模后,治疗2、4、8、16 h分别记录二组动物基础状态的心率、呼吸、血压、体温、外周血细胞计数和血气分析,采血检测TNF-α、IL-1β和IL-6含量.结果 所有动物经造模后4～6 h内均达SIRS标准.经分组行CVVH-DF 8h后,观察指标有明显变化的是:CVVHDF组的心率、呼吸、血压、血清TNF-α水平均较对照组明显降低(P＜0.05),而血清IL-6在CVVHDF组则较对照组升高(P=0.04).血氧分压、血细胞计数和血清IL-1β水平的变化在二组中无显著性差异.结论 本组动物实验的资料显示,在幼猪肠穿孔腹膜炎模型中,治疗的早期采用CVVHDF,可降低部分炎因子反应,对稳定SIRS动物的血流动力学有益处,但对SIRS的部分指标改善不显著.     

人巨细胞病毒感染与胆道闭锁CD4+T细胞因子的相关性研究

目的 检测胆道闭锁患儿肝脏组织中人巨细胞病毒滴度与11种CD4+T细胞因子表达水平之间的相关性,并探讨其意义.方法 分别采用荧光定量PCR和流式微球技术对29例胆道闭锁患儿肝脏组织中的巨细胞病毒滴度和CD4+T细胞表达的11种细胞因子(IL-12p70、IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-8、IL-6、IL4、IL5、IL-1β、TNF-α和TNF-β)进行定量检测,并统计两者之间的相关系数.结果 人巨细胞病毒阳性者15例(51.7%),15例胆道闭锁患儿肝脏组织中人巨细胞病毒滴度与11种细胞因子具有不同程度的相关性,其中与部分细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-4、TNF-α及TNF-β)呈强正相关,以IFN-γ的相关性最强(r=0.796),且该病毒的滴度与Th1类细胞因子总量(r=0.914)、促炎因子总量(r=0.913)及11种细胞因子总量(r=0.893)呈强正相关.结论 胆道闭锁可能是由人巨细胞病毒感染所促发,主要由CD4+Th1细胞及其细胞因子所介导的免疫炎症性疾病.

Abstract：

Objective To examine the relationship between human cytomegalovirus and CD4+ T cell's cytokines in biliary atresia. Methods HCMV titres and 11 cytokines (IL-12p70,IFN-γ,IL-2,IL-10, IL-8, IL-6, IL-4, IL- 5, IL- 1β, TNF-α and TNF-β) were assayed with Fluorescent quantitative PCR(FQ-PCR) and flowing microsphere technology respectively. The correlation coefficients were then calculated. Results Fifteen liver specimens(51.7%)were positive for HCMV. The titers of human cytomegalovirus showed different correlations with the 11 cytokines and strong positive correlation with some cytokines( IFN-γ、 IL-2、IL-1 0 、 IL-4 、 TNF-α and TNF-β), IFN-γ is the strongest one( r = 0. 796).Moreover, it shows strong positive correlation with the total of Th1 cytokines(r = 0. 914), pro-inflammatory cytokines(r = 0. 913)and the total of 11 cytokines(r= 0. 893). Conclusions The immune reaction of biliary atreisa may be triggered by the human cytomegalovirus, promoted by the CD4+ Th1 cells and their cytokines.     

早产儿外周血辅助性T淋巴细胞亚群功能特点观察

为探讨早产儿外周血辅助性T淋巴细胞(Th)亚群功能特点,以足月新生儿为对照,ELISA法检测21例早产儿外周血单个核细胞(PBMC)体外产生γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-6和IL-6水平.结果显示早产儿PBMC体外产生IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平均明显低于足月儿,尤以IFN-γ和IL-2更为突出.表明早产儿Th(包括TH1和Th2)细胞功能明显低于足月儿,但其Th1/Th2功能状态与足月儿相似,即Th2细胞功能占优势,相对强于Th1细胞亚群.     

核因子-κB介导危重新生儿免疫功能研究

目的观察危重新生儿危重状态下免疫功能改变及核因子-κB(NF-κB)在其中的作用。方法选择50例危重新生儿作为观察对象,25例健康新生儿作为健康对照组。抽取二组静脉血,分别检测其血IL-4、IFN-γ、TNF-α及NF-κB等免疫指标。结果与健康对照组比较,危重新生儿存在NF-κB活性增高及Th1及Th2平衡紊乱,IL-4及TNF-α显著升高,IFN-γ降低。结论危重新生儿存在免疫功能紊乱;NF-κB信号转导通路参与危重新生儿发病。     

先天性心脏病合并重症肺炎患儿辅助性T细胞功能的动态变化

目的 探讨儿童左向右分流的先天性心脏病合并重症肺炎时辅助性T细胞亚群Th1、Th2细胞的变化特点,为免疫干预提供依据.方法 采用病例对照研究,选取患儿75例,分为4组:先天性心脏病合并重症肺炎组30例;先天性心脏病组15例;普通肺炎组15例;对照组15例.采用流式细胞术检测细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4.结果 对照组、普通肺炎组、先天性心脏病组和先天性心脏病合并重症肺炎组之间外周血CD4+细胞表达IFN-γ水平逐渐降低、IL-4逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.01);各组间IFN-γ/IL-4分别为6.30±3.65、4.14±2.06、1.76±1.23、1.12±1.08,两者比值逐渐下降,差异有统计学意义(P＜0.01).30例先天性心脏病合并重症肺炎的患儿治疗1周后复查,大部分病例随着病情的好转,出现IFN-γ上升,IL-4下降,IFN-γ/IL-4上升,其中IL-4的下降和IFN-γ/IL-4的上升差异有统计学意义(P＜0.05).结论 儿童左向右分流的先天性心脏病合并重症肺炎时外周血CD4+细胞表达Th2型细胞因子占优势,Th1/Th2平衡失调,经治疗,病情改善,Th1/Th2的失衡状态好转.     

头孢呋辛对哮喘儿童外周血单个核细胞Th1/Th2平衡的影响

目的研究头孢呋辛对哮喘儿童外周血单个核细胞Th1/Th2平衡的影响。方法采用流式细胞术检测哮喘和健康儿童外周血单个核细胞IFN-γ和IL-4水平,以及哮喘儿童外周血单个核细胞经头孢呋辛体外干预后的IFN-γ和IL-4水平。结果与健康儿童相比,哮喘患儿外周血单个核细胞的IFN-γ和IFN-γ/IL-4比值降低,差异有统计学意义(P<0.05);哮喘患儿外周血单个核细胞在体外与头孢呋辛(100 mg/L)孵育48 h后,IL-4水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),而IFN-γ的变化无统计学意义(P>0.05);IFN-γ/IL-4比值则降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论哮喘患儿外周血单个核细胞以Th2(IL-4)占优势,Th1/Th2比值平衡失调;而头孢呋辛更加剧这一倾斜,不利于哮喘治疗。     

巨细胞病毒肝炎婴儿外周血IL-33、sST2表达及意义

目的探讨白细胞介素-33(IL-33)、可溶性致癌抑制因子2(sST2)在婴儿巨细胞病毒(HCMV)肝炎中的表达及意义。方法选取HCMV感染婴儿40例,其中肝炎组20例,其他疾病组20例;另选择同期健康婴儿20例作为对照组。采用ELISA法检测三组婴儿血浆IL-33、sST2、IFN-γ、IL-4浓度,采用流式细胞术检测外周血Th1、Th2细胞比例。结果HCMV阳性肝炎组和HCMV阳性其他疾病组患儿的血浆IL-33、sST 2、IFN-γ、IL-4浓度及Th 1、Th 2细胞比例均高于对照组,肝炎组高于其他疾病组。肝炎组和其他疾病组患儿IFN-γ/IL-4及Th1/Th2均低于对照组,肝炎组低于其他疾病组,差异均有统计学意义(P0.05)。HCMV肝炎组血浆IL-33浓度与sST2、IL-4浓度及Th2细胞比例呈显著正相关(P0.05),与IFN-γ/IL-4、Th1/Th2呈显著负相关(P0.05)。结论 HCMV肝炎婴儿存在Th1/Th2失衡,IL-33可能参与HCMV感染所致Th2优势应答和Th1/Th2失衡。     

特发性血小板减少性紫癜患儿Th亚群细胞因子的检测

目的探讨Th亚群细胞因子在儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的变化及作用。方法采用BioPlex系统和悬浮阵列技术通过荧光编码检测43例ITP患儿血清中的Th1型细胞因子TNFα、IFNγ、IL2、GMCSF和Th2相关细胞因子IL4、IL5、IL6、IL10的变化,并与20例正常儿童作对照。结果与正常健康儿童相比,ITP患儿Th1型细胞因子显著升高(P<0.01),而Th2型细胞因子显著降低(P<0.01)。结论儿童ITP发病中存在异常的淋巴细胞极化状态,是一种Th1优势的疾病。     

不同浓度地塞米松和甲泼尼龙对支气管哮喘患儿外周血单个核细胞免疫功能的影响

目的 观察不同浓度地塞米松(DEX)和甲泼尼龙(MP)对支气管哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+T淋巴细胞中2个功能性亚群(Th1/Th2)功能状态的影响.方法 选择2001年6月-2002年6月在重庆医科大学附属儿童医院就诊的15例哮喘患儿和14例健康体检儿童为研究对象.分为哮喘对照组、10-7mol·L-1DEX干预组、10-8mol·L-1DEX干预组、10-9mol·L-1DEX干预组、10-7mol·L-1MP干预组、10-8mol·L-1MP干预组、10-9mol·L-1MP干预组.清晨取其空腹静脉血5 mL,肝素抗凝,采用密度梯度离心法分离PBMC,加植物血凝素进行刺激培养,分别用10-7mol·L-1、10-8mol·L-1及10-9mol·L-1DEX或MP体外干预培养48 h.同期采集健康儿童空腹静脉血,同法分离培养.用ELISA法测定培养上清中γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10及IL-12水平,并计算不同浓度DEX或MP对PBMC分泌细胞因子的抑制率.结果 1.哮喘对照组PBMC分泌IL-4水平显著高于健康对照组(P<0.05),IFN-γ/IL-4比值较健康对照组显著降低(P<0.05),2组间IFN-γ、IL-10及IL-12水平比较差异均无统计学意义(Pa>0.05).2.DEX和MP均可明显抑制哮喘患儿PBMC分泌IFN-γ、IL-4及IL-12,但对IL-10抑制作用差;与健康对照组比较,哮喘组DEX和MP抑制PBMC分泌IL-10的作用弱,差异有统计学意义(Pa<0.05).3.DEX和MP均以浓度依赖方式抑制哮喘患儿PBMC分泌IL-4,DEX在10-9mol·L-1时有促进IL-4分泌的效应,MP在10-9mol·L-1时可抑制IL-4的分泌,二组比较差异有统计学意义(P<0.05). 若以IFN-γ/IL-4表示Th1/Th2间的平衡,则MP可恢复Th1/Th2平衡(P<0.05).结论 DEX和MP均可抑制Th1/Th2类细胞因子分泌,但MP有助于恢复Th1/Th2平衡,提示临床选择MP治疗支气管哮喘更有利.     

儿童肺炎支原体肺炎血清细胞因子变化及临床意义

目的 探讨肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿血清细胞因子水平的变化及临床意义.方法 选择2008年1月至2009年12月我院儿内科收治的MPP患儿239例为MPP组,根据病情的严重程度再分为轻症MPP组(n=152)和重症MPP组(n=87).选择同期收治的急性支气管肺炎患儿263例为非MPP组.选择同期在儿外科住院的疝气和包皮过长择期手术患儿共50例作为对照组.所有肺炎患儿均于入院第1天进行肺炎支原体抗体检测和细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF)-α、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6]检测,患儿经治疗感染恢复期重新留取血清复查以上指标;对照组留取1次血清,检测细胞因子水平.结果 MPP组和非MPP组患儿血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均高于对照组(P＜0.01);而IFN-γ、IL-4水平3组间比较差异无统计学意义(P ＞0.05);MPP组血清IFN-γ、IL-1β水平及IFN-γ/IL-4比值高于非MPP组(P＜0.01);MPP组恢复期TNF-α、IL-1β、IL-6水平和IFN-γ/IL-4比值较急性期明显降低(P ＜0.001,P＜0.05);重症MPP组血清TNF-a、IL-1β水平及IFN-γ、IL-4比值明显高于轻症MPP组(P＜0.01).结论 MPP患儿存在免疫功能紊乱,血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平及IFN-γ/IL-4比值与病情严重程度相关,可用来评估病情.     

克罗恩病和健康儿童血清细胞因子水平的病例对照研究

目的 观察克罗恩病（CD）患儿血清细胞因子水平,探讨细胞因子水平紊乱在儿童克罗恩病发病中的作用。 方法 纳入2013年1月至2015年12月在温州医科大学育英儿童医院（我院）儿内科住院的确诊CD患儿（病例组,根据CD活动度分为不同亚组）和同期在我院门诊体检的健康儿童,采用流式分析技术检测晨起空腹静脉血血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ和IL-17A的水平。 结果 病例组32例,男18例,女14例,年龄（8.5±4.3）岁,其中CD轻度活动亚组12例,CD中重度活动亚组20例;对照组30名,男18名,女12名,年龄（10±3.5）岁。病例组和对照组年龄、性别比较差异无统计学意义（P>0.05）。病例组患儿血清IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α和IL-17A水平高于对照组,血清IL-10和IFN-γ水平低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。此外,根据儿童CD活动指数（PCDAI）评分为中重度活动亚组患儿的血清IL-2、TNF-α和IL-17A水平高于轻度活动亚组患儿,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 与健康儿童相比,CD患儿存在明显的免疫相关细胞因子水平变化,而且疾病活动度不同其细胞因子水平亦有差异,提示细胞因子水平紊乱在儿童CD发病及病情的发展中有重要作用。     

Role of Interleukin-6 in Differentiating Interleukin-11 Induced Fever and Early Bacterial Infection

Objective

To evaluate the role of Th1/Th2 cytokines (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-α, IFN-γ) in differentiating interleukin 11 induced fever with C-reactive protein elevation from early bacterial infection.

Methods

A total of 74 patients were enroled in this retrospective study. Serum Th1/Th2 cytokines were determined using cytometric bead array (CBA) techniques. Whenever the patients had febrile disease or elevated CRP, systemic inflammatory signs, procalcitonin (PCT), blood culture and X-ray examination were done. The patients were assigned into infected and non-infected groups based on the clinical and laboratory findings.

Results

The CRP levels in both the groups were significantly increased, but no statistically significant difference was found (P?=?0.574). IL-6 levels of the infected group were significantly elevated with simultaneously elevated IL-10 levels in a proportion of the patients. IL-6 levels of non-infected patients were normal. IL-6 and IL-10 levels of infected patients were significantly higher than those of non-infected patients (P?=?0.005, 0.015, respectively).

Conclusions

For the patients treated with recombinant human interleukin 11 (rhIL-11), IL-6 and IL-10 measurements can be a useful adjuvant tool for the differentiation of rhIL-11 induced fever with C-reactive protein elevation from early bacterial infection.     

手足口病患儿血清细胞因子水平变化及免疫球蛋白治疗效果分析

目的：研究手足口病患儿的血清细胞因子水平的变化情况,并探讨免疫球蛋白治疗的临床意义。方法对我院2012年5月至2013年6月收治的262例手足口病患儿临床资料进行回顾性分析,将其分为普通组和重症病例组,总结HFMD患儿的临床特点,进行病原学检测,同时采用Luminex液相芯片方法检测2组患儿血清中的5种细胞因子,包括IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ,对于部分危重患儿给予免疫球蛋白治疗,并观察细胞因子水平变化。结果普通组109例,重症组153例。与普通组相比,重症组IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α明显升高（18.02 ng/L vs 22.71 ng/L、28.42 ng/L vs 53.76 ng/L、17.92 vs 42.37 ng/L、102.29 vs 207.99 ng/L,P＜0.05）,而IFN-γ在两组无统计学差异（325.51 vs 373.78 ng/L,P＞0.05）。对于符合危重病例标准的40例患者给予免疫球蛋白治疗后,检测发现IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平均明显下降（ P＜0.05）。结论手足口病重症病例存在细胞因子水平的异常变化,而静脉给予免疫球蛋白治疗可以降低细胞因子水平,可能有助于改善预后。     

支气管哮喘患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-5和γ干扰素水平检测的意义

目的 探讨支气管哮喘患儿血清IL-4、IL-5和γ干扰素(IFN-γ)水平及其在支气管哮喘发病中的作用.方法 选取30例门诊随诊的哮喘缓解期患儿作为哮喘组,30例同期健康体检儿童作为健康对照组,2组儿童均于清晨空腹取外周静脉血1.0 mL制备血清,应用ELISA法对2组儿童血清IL-4、IL-5和IFN-γ水平进行测定.结果 哮喘组患儿血清IL-4、IL-5水平均较健康对照组升高,差异有统计学意义(t= 2.48、2.63,Pa<0.05),但其血清IFN-γ水平较健康对照组显著降低(t= 3.02 ,P<0.01).结论 哮喘患儿存在Th1/Th2细胞免疫失衡,Th1免疫功能低下,IFN-γ下调可能是哮喘发病的重要原因,对哮喘有负向调节作用. 哮喘患儿同时存在Th2细胞免疫功能亢进,以IL-4、IL-5为代表的Th2免疫功能在儿童哮喘的发病中发挥正性促炎作用.