维生素E琥珀酸酯对人肝癌细胞凋亡和侵袭性

目的研究维生素E琥珀酸酯（VES）诱导体外培养人肝癌细胞凋亡以及对肝癌细胞侵袭性的抑制作用。方法自2004年至2005年7月,体外培养SMMC7721人肝癌细胞系,在培养液中加入VES共育,用等量的生理盐水作为对照组。培养6、24、48h后采用流式细胞仪检测肝癌细胞的凋亡,小孔趋化试验检测肝癌细胞的体外侵袭性变化。结果在加入VES后肝癌细胞的凋亡率与对照组相比明显增加。在48h加入VES的实验组与对照组相比,肝癌细胞的小孔趋化试验明显受到抑制。结论VES具有体外诱导人肝癌细胞系凋亡以及抑制肝癌细胞体外侵袭性的作用,是潜在的抗肿瘤因子。     

维生素E琥珀酸酯诱导MCF 7乳腺癌细胞的凋亡

目的检测维生素E琥珀酸酯（VES）对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，并分析凋亡诱导分子Fas表达的变化。方法人乳腺癌细胞株MCF-7[雌激素受体阳性，ER（＋）]以VES刺激12，24h和48h，VES浓度为5μg／mL，10μg／mL和20μg／mL，用MTT法测定VES对细胞增殖的抑制作用；以流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面Fas的表达；Western蛋白印迹法检测VES作用后Fas蛋白水平的变化。结果VES对MCF-7乳腺癌细胞具有显著的抑制作用，并表现为时间和剂量依赖关系。MCF-7乳腺癌细胞的自然凋亡率为1．2％；5μg／mL，10μg／mL和20μg／mL的VES作用48h后凋亡率分别升高至11．2％，16．4％和41．2％。VES作用后乳腺癌细胞Fas蛋白水平和细胞表面Fas表达升高。结论VES对ER（＋）乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用，并诱导细胞凋亡，其机制与细胞表面Fas表达上调有关。     

维生素E琥珀酸酯促进Fas表达和诱导胰腺癌细胞凋亡

目的:检测维生素E琥珀酸酯(VES)对胰腺癌细胞生长抑制和凋亡的诱导作用,并分析其对凋亡诱导分子Fas表达的调控作用。方法:用VES刺激人胰腺癌Bxpc-3细胞12、24或48 h,所用VES浓度分别为5、10或20 mg/L;以MTT法测定其对细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞表面的Fas表达水平,Western印迹法检测VES对Fas蛋白水平的影响。结果:VES对胰腺癌细胞具显著的生长抑制作用,并表现呈剂量与时间依赖关系。用流式细胞仪分析细胞周期的结果,未经VES处理的Bxpc-3细胞的凋亡率为1.3%;5、10及20 mg/L VES作用48 h后,凋亡率分别为10.6%、24.2%和68.7%。VES作用后,胰腺癌细胞Fas蛋白水平和细胞表面的Fas表达升高。结论:VES对胰腺癌细胞具显著的生长抑制作用并诱导胰腺癌细胞凋亡,其机制与促进细胞表面Fas表达的上调有关。     

维生素E琥珀酸酯诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的实验研究

目的：研究维生素E琥珀酸酯（VES）对非雄激素敏感的前列腺癌PC-3细胞株的凋亡诱导作用及分子机制。方法：以体外培养的PC-3细胞为研究对象,采用含不同浓度的VES培养液作用于细胞。采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞增殖活性;采用Wright—Giemsa染色、流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡并测定Fas蛋白表达水平;采用酶联免疫法检测转化生长因子口（TGF-β）的表达水平的变化。结果：VES可显著抑制PC-3细胞的生长及增殖,光镜下可见到PC-3细胞呈典型凋亡的形态学改变。FCM细胞周期分析显示G2／M期细胞增加而s期细胞明显减少,Fas蛋白和TGF-β表达明显上调。结论：VES可诱导前列腺癌PC3细胞凋亡,其作用机制可能与其上调Fas、TGF-β的表达有关。     

早期应用维生素E对急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡和胰腺组织病变的影响

目的:探讨早期应用维生素E(Vit.E)对急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺细胞凋亡和胰腺组织病变的影响.方法:将SD大鼠72只随机分为对照组、AP组和Vit.E治疗组,每组24只.经十二指肠行胆胰管逆行加压注射4%的牛磺胆酸钠,诱导大鼠AP模型.于术后3 h、6 h、12 h和24 h采取断颈方法分批处死动物,应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测胰腺细胞凋亡情况,观察各组胰腺组织的病理切片并进行组织病理学评分.结果:AP组和Vit.E治疗组术后胰腺凋亡细胞明显增多,两组在3 h和6 h的凋亡指数均无明显差异(P>0.05),而Vit.E治疗组在12 h和24 h的凋亡指数显著高于对应时相的AP组(12 h,P<0.05;24 h,P<0.01);与AP组比较,Vit.E治疗组胰腺组织病变较轻,12 h和24 h的胰腺组织病理学评分明显低于AP组(12 h,P<0.05;24 h,P<0.01).结论:早期应用抗氧化剂Vit.E能够有效地减轻AP胰腺病变的严重程度,而胰腺细胞凋亡可能是介导此过程的一个重要病理、生理改变.     

维生素E琥珀酸酯对人大肠癌荷瘤裸鼠的体内抑制作用

维生素E琥珀酸酯（vitamin E succinate,VES）是一种新的抗肿瘤药物,对肿瘤细胞有选择性的抑制作用[1].本研究通过人大肠癌荷瘤裸鼠模型的建立,探讨VES在体内抑制肿瘤的作用.     

维生素E琥珀酸酯联合化疗药物抑制大肠癌细胞增殖

本研究旨在检测维生素E琥珀酸酯(VES)联合化疗药物对大肠癌细胞的凋亡诱导作用，为临床联合用药提供依据。     

miRNA-144对肝癌侵袭性的影响

【摘要】〓目的〓探讨miRNA-144对肝癌细胞侵袭性的影响。方法〓从广东省人民医院肝癌标本库中选取52例肝癌组织标本及其对应的癌旁组织,用原位杂交技术检测miRNA-144在肝癌及相应的癌旁组织的表达情况,分析其与临床病理特征的关系,并行在线靶基因软件预测到miR-144的靶基因中有SRF。结果〓miR-144在肝癌组织中相对癌旁组织高表达,并且miR-144在肝癌组织中表达量仅与肝癌病理分级和术后早期复发有关,三大在线靶基因软件预测到miR-144的靶基因中都有SRF。结论〓筛选得到的肝癌早期复发的miRNA差异表达谱可能与肝癌的病理分级和早期复发有关。     

肺组织粗提物促进人原发性肝癌细胞移动侵袭的研究

目的　探讨宿主微环境与原发性肝癌器官特异性转移的关系。方法　利用Boyden小室侵袭实验 ,分别比较从 5只C5 7BL/6小鼠提取肺 ,肝 ,脾 ,肾组织粗提物诱导高低转移潜能的人原发性肝癌细胞株MHCC97 H、MHCC97 L移动和侵袭能力。结果　肺、肝、脾、肾组织粗提物诱导高转移细胞株MHCC97 H细胞移动侵袭的细胞数分别是 ( 18.0± 0 .9)个、( 1.7± 0 .3)个、( 1.1± 0 .3)个、( 8.6± 0 .6 )个。与肝、脾、肾组织粗提物相比 ,肺组织粗提物具有显著诱导高转移潜能的人原发性肝癌细胞株MHCC97 H移动侵袭能力 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1)。肺组织粗提物诱导人肝癌细胞株MHCC97 H、MHCC97 L移动和侵袭的细胞数分别为 ( 18.0± 0 .9)个、( 6 .0± 0 .9)个 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1)。结论　肺组织粗提物中存在某种可溶性因子促进人原发性肝癌细胞的移动侵袭能力 ,宿主微环境影响原发性肝癌器官特异性转移。     

食管癌手术对游离脂肪酸和维生素A、E代谢的影响

目的 探讨食管癌手术对脂肪和脂溶性维生素代谢产生的影响。方法 将52例食管癌患者和36例胸部良性疾病患者分成两部分,游离脂肪酸谱分析部分实验组：29例食管癌患者;对照组：19例胸部良性疾病患者。血清维生素A、维生素E（VitA、VitE）测定部分实验组：23例食管癌患者;对照组：17例胸部良性疾病患者。所有病例均分别在术前1天,术后7天和30天进行5种游离脂肪酸（FFA）分析和VitA、VitE测定。结果 术前1天实验组和对照组亚油酸、油酸、硬脂酸、VitA、VitE差别均无显著性意义（P＞0．05）;实验组软脂酸、花生四烯酸明显升高（P＜0．05）。术后7天实验组患者禁食输入脂肪乳剂后,花生四烯酸和Vit A、VitE明显低于对照组（P＜0．05）,其余4种FFA差别无显著性意义（P＞0．05）。术后30天,两组间5天FFA差别无显著性意义（P＞0．05）,而实验组患者仍停留在术后7天的低水平,显著低于对照组（P＜0．05）。结论 食管癌患者术前已存在脂肪员,术后7天在禁食期间输入脂肪乳剂是必要的,但仍不能满足患者对花生四烯酸和VitA、VitE的需求。手术30天后能正常进食的食管癌患者仍存在VitA、VitE的严重不 足,有从静脉补充的指征;而5种FFA可达到正常水平。低脂肪、高糖和高蛋白质才是合理的膳食结构。     

康莱特诱导人肝癌细胞HepG2 凋亡的实验研究

目的 探讨康莱特注射液(KLT)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制.方法 用不同浓度的KLT培养肝癌细胞HepG2,应用流式细胞仪检测HepG2凋亡细胞的发生,应用ELISA法检测相关凋亡蛋白Bcl-2的变化.结果 流式细胞术证实KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡(P＜0.01), 且具有时间、剂量依赖关系.KLT处理组HepG2细胞中Bcl-2蛋白的表达分别为(16.91±0.20)units/ml、(10.78±1.41)units/ml和(7.66±0.64)units/ml,对照组为(22.65±2.83)units/ml.结论 KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡;且KLT诱导HepG2细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达的下调对调控细胞凋亡有重要作用.     

三氧化二砷诱导肝癌细胞株凋亡的实验研究

目的明确三氧化二砷对人肝癌细胞体外生长的影响,并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法、^3H-TdR掺入法、TUNEL法、透射电镜观察及流式细胞术,观察不同浓度的三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721的生长活力、细胞凋亡、DNA合成能力的影响。结果三氧化二砷能显著地抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长,并且具有时间和剂量依赖性;发生作用后,细胞生长有明显的凋亡特征性改变;细胞DNA合成能力下降。结论三氧化二砷能有效地抑制体外肝癌细胞生长,其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关。     

VK2对肝癌细胞株MHCC97H的抑制作用

目的 观察VK2对MHCC97H细胞在生长、黏附、侵袭、凋亡以及Caspase-3活性的影响.方法 噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长;体外细胞黏附及侵袭实验检测细胞的黏附和侵袭能力;Annexin V-FITC Apoptosis Detection K和Caspase-3 Fluorescent Assay试剂盒分别检测细胞的凋亡及Caspase-3活性.结果 当VK2浓度从10-7mol/L增加到10-4mol/L时,细胞生长抑制率由12.5%增加到59.7%(P＜0.01).VK2对细胞的黏附抑制能力呈剂量依赖关系(P＜0.01);100μmol/L的VK2作用细胞3 h后,细胞对Fibronectin黏附抑制率为69.9%.作用48 h后,细胞侵袭抑制率为65.5%(P＜0.01);作用6 h后,细胞凋亡率为(28.5±1.6)%,与此同时,细胞Caspase-3活性为(226.0±6.4),与对照组(92.0±5.8)比较差异有统计学意义(P＜0.01);预先加入Caspase-3抑制剂(Z-VAD-FMK)后,Caspase-3活性无明显变化90.0±4.3(P＞0.05).结论 VK2对体外培养的MHCC97H细胞具有抑制生长、抑制黏附、抑制侵袭和诱导凋亡作用;Caspase-3参与了细胞凋亡的调控.     

鞘鞍醇激酶1对肝癌细胞凋亡特性的影响

目的：研究鞘鞍醇激酶1（SPK1）对人肝癌耐药细胞株BEL-FU凋亡特性的影响。方法：扩增并纯化携带野生型（Ad-SPK1WT）和SiRNASPK1（Ad-H1-SPK1）的重组腺病毒,以TCID50方法（I-U/ml）和快速CPE法测定病毒感染滴度;以腺病毒为载体将SPK1基因导入肝癌细胞BEL-FU;分别以酶活性检测试剂盒、MTT法检测SPK酶活性及SPK1对肝癌细胞凋亡特性的影响。结果：获得高滴度的Ad-SPK1WT腺病毒和Ad-H1-SPK1腺病毒;携带Ad-SPK1WT基因的BEL-FU细胞中SPK1酶活性增强并抑制DMS（N,N,-二甲基鞘氨醇）对BEL-FU的细胞毒作用,抑制肿瘤细胞凋亡;携带Ad-H1-SPK1基因的BEL-FU细胞中SPK1酶活性降低并增强DMS（N,N,-二甲基鞘氨醇）对BEL-FU的细胞毒作用,促进肿瘤细胞凋亡。结论：阻断SPK1作用可能成为肝癌治疗的新途径。     

人肝癌细胞株与正常肝细胞株MicroRNA差异表达谱研究

目的 建立SMMC-7721人肝癌细胞株与CCC-HEL-1人正常肝细胞株MicroRNA(miRNA)差异的表达谱,确定差异的miRNA,为进一步研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用和肝癌的治疗提供新的线索.方法 体外培养SMMC-7721人肝癌细胞株和CCC-HEL-1人正常肝细胞株.用TRIzol法提取细胞的总...     

survivin基因反义寡核苷酸对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡与细胞周期的调控作用

目的研究survivin基因反义寡核苷酸转染对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期、细胞凋亡的作用及其可能的作用机制。方法采用脂质体介导survivin基因反义寡核苷酸转染人肝癌SMMC-7721细胞,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,RT-PCR方法检测cyclin B1 mRNA的表达。结果survivin反义寡核苷酸转染后细胞内cyclin B1表达由0.36±0.03增加至0.91±0.03,同时G2-M期细胞及凋亡细胞比例分别由5.81%及0.7%明显增加至42.11%及31.35%,同时细胞超微结构呈典型凋亡样改变。结论survivin基因反义寡核苷酸转染细胞后可以通过诱导cyclinB1的表达,导致G2-M期阻滞,从而诱导细胞凋亡的发生。survivin基因反义寡核苷酸转染可以作为治疗肝癌的重要新方法。     

人肝癌细胞系HCC-9903的染色体分析

目的:运用细胞遗传学和分子细胞遗传学的方法,对人肝癌细胞系HCC-9903进行细胞遗传学分析.方法:采用G显带与荧光原位杂交相结合的方法进行了细胞遗传学检测.结果:染色体为非整倍体,有lq(i),t(6;11),4q-,6q-等,荧光原位杂交显示X染色体有不同数目的增加.结论:提示检出的染色体畸变可能与肝癌的发生、发展有关.