早期自然流产胎盘组织中人微小病毒B19的表达及其意义

目的应用组织学、免疫组化和巢式聚合酶链反应技术(PCR)对早期自然流产胎盘绒毛组织进行人微小病毒(Human parvovirus B19,简称B19)检测,探讨B19感染与早期自然流产的关系。方法采用常规HE染色、免疫组织化学和巢式PCR技术检测98例早期自然流产胎盘绒毛组织B19的表达情况。结果 98例早期自然流产胎盘绒毛组织中,常规HE染色发现4例绒毛血管中个别有核红细胞的细胞核内出现特征性B19病毒包涵体,免疫组化有6例B19 VP1/VP2蛋白表达阳性,巢式PCR分析有8例出现B19 DNA阳性条带。结果显示98例自然流产胎盘绒毛组织中共有8例检出B19病毒,总检出率为8.2%(8/98)。结论早期自然流产胎盘绒毛组织中的B19检出率较低,B19感染可能是只是导致早期自然流产的原因之一。     

甲胎蛋白及增殖细胞核抗原在自然流产中的表达及意义

目的检测自然流产患者和正常妊娠妇女羊水甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的含量及胎盘的增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)的表达,探讨AFP和PCNA与自然流产发生的关系。方法选取2008年10月至2009年12月潍坊市妇幼保健院计划生育科64例自然流产患者为研究组,其中先兆流产32例,稽留流产32例。32例正常妊娠妇女为对照组。用电化学发光法检测各组羊水AFP含量。免疫组织化学SP法检测胎盘组织PCNA的表达。结果正常妊娠组、先兆流产组及稽留流产组羊水AFP分别为(8356±607)μg/L,(7024±498)μg/L,(5638±533)μg/L,各组之间比较差异有显著性(P0.05)。正常妊娠组、先兆流产组及稽留流产组PCNA分别为(56.49±2.17)%,(48.96±1.43)%,(39.53±1.74)%,各组之间比较差异有显著性(P0.05)。3组中胎盘PCNA增殖指数与同组羊水AFP显著相关(P0.05)。结论自然流产的发生可能与AFP和PCNA的表达水平异常降低有关。     

脆性组胺三联体、增殖细胞核抗原蛋白与宫颈上皮内瘤变恶性程度的相关性研究

目的研究脆性组胺三联体（fragile histidine triad，FHIT）蛋白和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）蛋白在宫颈涂片中的表达及在宫颈癌前病变诊断中的意义。方法选取2004年6月至2005年6月在兰州大学第一医院妇科门诊宫颈计算机辅助细胞学检测涂片（computer—assisted cytology test，CCT）为低度鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）（74例）和高度鳞状上皮内病变（high—grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）（40例）的可疑宫颈病变患者114例，采用免疫组化法检测患者宫颈组织中脆性组胺三联体、增殖细胞核抗原蛋白的表达情况。结果脆性组胺三联体蛋白在正常宫颈上皮中表达，在宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）及宫颈癌中表达缺失，在宫颈上皮内瘤变Ⅰ、宫颈上皮内瘤变Ⅱ、宫颈上皮内瘤变Ⅲ及宫颈癌组织中，其表达缺失率分别为13．3％，30．0％，60．0％和71．4％。增殖细胞核抗原蛋白在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中表达升高，在宫颈上皮内瘤变Ⅰ、宫颈上皮内瘤变Ⅱ、宫颈上皮内瘤变Ⅲ及宫颈癌组织中，其阳性表达率分别为44．7％，60．0％．80．0％，85．7％，而且其染色强度明显升高。各组间脆性组胺三联体蛋白、增殖细胞核抗原蛋白表达率比较，差异有显著意义（P=0．0001）。结论脆性组胺三联体蛋白表达缺失，是宫颈癌发生的早期事件，其表达缺失程度与宫颈上皮内瘤变的分级有关，高级别的癌前病变缺失率明显增高；增殖细胞核抗原蛋白的表达，在宫颈癌前病变中逐级增高，可用于评估癌前病变的恶变潜能。     

子痫前期患者与正常妊娠胎盘中HLA-G的差异表达研究

目的 探讨人类白细胞相关抗原G(HLA-G)在子痫前期患者与正常妊娠胎盘组织中的表达差异.方法 选取24例子痫前期患者胎盘组织(实验组)及15例正常早期妊娠人工流产绒毛组织(对照组),应用RT-PCR及Western蛋白印迹技术检测两组间HLA-G蛋白的表达差异.结果 子痫前期患者胎盘组织中HLA-G基因及蛋白表达均显著低于正常流产组,差异有统计学意义(P<0.01).q结论 HLA-G在胎盘组织中的低表达可能与子痫前期的发生有关.     

自然流产患者胎盘绒毛组织肥胖基因的表达及意义

目的:探讨肥胖基因在自然流产患者胎盘绒毛组织中的表达意义。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测30例原因不明自然流产患者(实验组)及30例正常妊娠孕妇(对照组)胎盘绒毛组织中obmRNA的表达。结果:自然流产患者及正常妊娠胎盘绒毛组织中obmRNA的相对表达分别为73.4±17.5％、93.2±24.1％,两者比较有显著性差异(P<0.01)。结论:胎盘绒毛组织中obmRNA的表达减弱可能与原因不明自然流产相关。     

自然流产患者胎盘绒毛组织肥胖基因的表达及意义

目的探讨肥胖基因在自然流产患者胎盘绒毛组织中的表达意义.方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测30例原因不明自然流产患者(实验组)及30例正常妊娠孕妇(对照组)胎盘绒毛组织中obmRNA的表达.结果自然流产患者及正常妊娠胎盘绒毛组织中obmRNA的相对表达分别为73.4±17.5%、93.2±24.1%,两者比较有显著性差异(P＜0.01).结论胎盘绒毛组织中obmRNA的表达减弱可能与原因不明自然流产相关.     

精氨酸对大肠肿瘤增殖细胞核抗原、生存素表达的影响

目的探讨精氨酸(Arg)对大肠肿瘤增殖细胞核抗原和生存素表达的影响。方法将大肠腺瘤和大肠癌患者各60例随机分成两组:试验组、对照组各30例;试验组患者每日口服25%Arg120ml,对照组每日口服5%葡萄糖液120ml,连续3天。干预前、后1日内取肿瘤组织、瘤旁组织和正常大肠黏膜,观察其增殖细胞核抗原和生存素的表达。免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原(PCNA)、生存素的表达,表达结果用标记指数表示。结果试验组增殖细胞核抗原标记指数干预前、后分别为腺癌[(78.8±5.6)%,(70.5±4.7)%]、腺瘤[(60.3±6.5)%,(52.9±4.2)%]、癌旁组织[(40.2±4.4)%,(32.7±4.1)%],干预后显著低于干预前(P<0.01)。对照组干预前后差异无显著性。腺瘤瘤旁组织和两组的正常黏膜增殖细胞核抗原表达干预前后差异无显著性。试验组生存素标记指数干预前后分别为腺癌[(67.2±3.8)%,(55.7±6.3)%]、腺瘤[(80.5±6.1)%,(68.4±5.6)%],干预后显著低于干预前(P<0.01)。对照组差异无显著性。结论Arg能够抑制大肠癌和大肠腺瘤高增殖活性及凋亡抑制蛋白生存素的表达,表明Arg对大肠肿瘤的发生和发展可能具有抑制作用。     

早期自然流产患者蜕膜组织中ICAM-1/Mac-1的表达

目的 通过观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和巨噬细胞分化抗原-1(Mac-1)在早期自然流产患者蜕膜组织中的表达,探讨ICAM-1/Mac-1与早期自然流产的关系.方法 采用免疫组化方法检测早期自然流产患者35例和同期妊娠的30例健康妇女蜕膜组织中ICAM-1、Mac-1的表达,用激光共聚焦显微镜(CLSM)双标检测二者关系并加以分析.结果 早期自然流产患者蜕膜组织基质细胞ICAM-1、Mac-1蛋白表达强度高于对照组(Z=-3.056,P=0.002;Z=-2.132,P=0.033);流产组蜕膜腺体细胞ICAM-1、Mac-1蛋白表达强度略低于对照组(Z=-1.978,P=0.048;Z=-1.973,P=0.048);共聚焦显微镜下ICAM-1和Mac-1在早期自然流产组和对照组的蜕膜组织均有部分重叠表达.结论 ICAM-1和Mac-1在早期自然流产患者蜕膜组织基质细胞的高表达和腺体细胞的低表达可能与早期自然流产的发生有关.     

PTEN在体外受精-胚胎移植胎盘及胚胎组织中的表达及意义

目的：研究体外受精-胚胎移植（IVF-ET）对早期胎盘绒毛和胚胎组织中第10号染色体上缺失的磷酸和张力蛋白同源基因（PTEN）和蛋白表达的影响。方法：收集8例IVF-ET患者胚胎移植后30～45 d行减胎术的胎盘绒毛组织和胚胎组织作为IVF-ET组，10例自然妊娠行人工流产患者的早期胎盘绒毛组织和胚胎组织为对照组。采用免疫组织化学方法和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测组织中PTEN蛋白和mRNA的表达及分布差异。结果：PTEN蛋白表达于胎盘绒毛细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞的细胞膜和细胞质，广泛表达于胚胎各个胚层。IVF-ET组胎盘绒毛组织中PTEN蛋白表达量低于对照组，差异有统计学意义（t=2.325，P=0.027）；PTEN蛋白在2组患者胚胎组织中表达量差异无统计学意义（P=0.288）。PTEN mRNA在IVF-ET组胎盘绒毛组织中表达量低于对照组，差异有统计学意义（t=2.512，P=0.017），在2组患者胚胎组织中表达量比较，差异无统计学意义（P=0.371），与免疫组织化学结果一致。结论：IVF-ET技术的体外操作可能影响胎盘组织PTEN基因和蛋白的表达，但未显著影响早期胚胎组织的PTEN表达，其潜在意义有待进一步研究。     

增殖细胞核抗原在妇科肿瘤中的表达

增殖细胞核抗原在细胞增殖周期中有着重要的作用，在许多肿瘤恶变中发现增殖细胞核抗原有高表达，本文就增殖细胞核抗原在妇科肿瘤中临床分期、预后及组织分级等方面的作用做一综述     

反复自然流产患者妊娠组织中Survivin和PCNA的表达及临床意义

目的:探讨反复自然流产(RSA)患者妊娠组织中Survivin和PCNA表达的相关性及临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测30例RSA患者和25例正常妇女早孕绒毛及蜕膜组织中Survivin和PCNA的表达。结果:RSA患者妊娠组织中Survivin和PCNA表达显著低于正常妊娠组织,且两者表达呈正相关。结论:Survivin表达下降可能是RSA发生的重要原因。     

血管新生调节因子VEGF及其受体在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘中的表达

目的:研究血管新生调节因子VEGF及其受体Flt-1、KDR在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达。方法:用免疫组化方法检测妊娠30天的恒河猴上述蛋白在胎盘中的表达。结果:VEGF蛋白主要表达于胎盘绒毛和子宫内膜,在母胎界面和子宫内膜血管中显著高表达;KDR蛋白的表达模式与VEGF类似;Flt-1蛋白在两组胎盘中的表达无显著差异。VEGF和KDR在药物流产胎盘中的表达量明显低于正常妊娠胎盘。结论:VEGF、Flt-1及KDR在恒河猴妊娠早期参与子宫内膜和胎盘发育过程中的血管新生,在胎盘绒毛的浸润以及腺上皮细胞分化及其分泌等过程中也发挥着重要作用;流产药物可能通过下调VEGF和KDR蛋白的表达,影响了血管发生和胎盘发育,增加了流产机会。     

滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系

目的:探讨滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系。方法:对30例正常早孕吸宫流产病例和35例稽留流产病例的绒毛滋养层细胞进行凋亡研究。常规光镜观察细胞形态学变化;免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原PCNA、抑凋亡基因Survivin和促凋亡基因P53在细胞中的表达。结果:稽留流产组绒毛形态学结构均出现不同程度的退行性改变,绒毛细胞滋养层细胞中PCNA表达较正常早孕组明显减少,差异具有非常显著性意义(P<0.01),合体滋养层细胞PCNA少量表达;稽留流产组绒毛滋养层细胞Survivin低于正常早孕组,而P53则高于正常早孕组,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:滋养层细胞凋亡的增加可能是稽留流产发生的一个重要病理过程,其机制可能与PCNA、Survivin和P53基因的表达异常有关。     

早期自然流产妇女血小板活化因子及其受体的表达

目的:探讨血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)及其受体(PAF-Receptor,PAF-R)与早期自然流产的关系。方法:30例早期自然流产妇女(研究组)和30例同期正常早孕要求人工流产的妇女(对照组)采用ELISA法检测血清PAF的含量,采用流式细胞仪检测外周血单核细胞上PAF-R的表达,应用免疫组织化学技术检测PAF-R在子宫蜕膜组织中的表达。结果:①研究组血清中PAF含量、PAF-R在外周血单核细胞上和在子宫蜕膜组织中的表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。②早期自然流产妇女PAF-R在外周血单核细胞上和在子宫内膜上的表达呈正相关(r=0.938,P<0.01)。结论:早期自然流产妇女血清PAF水平明显降低,PAF-R在外周血单核细胞上和子宫蜕膜组织中的表达降低,可能是导致自然流产的原因之一。外周血单核细胞上PAF-R的表达可间接反映子宫蜕膜组织中PAF-R的表达情况。     

Survivin、Stat3在反复自然流产患者绒毛和蜕膜中的表达

目的:通过对反复自然流产(RSA)患者和正常早孕妇女绒毛、蜕膜中Survivin、Stat3的测定,探讨不明原因反复自然流产患者的流产病因和胚胎、胎盘的生长机制。方法:采用免疫组化法检测40例RSA患者及20例对照组的绒毛和蜕膜组织中Survivin、Stat3含量。结果:RSA患者孕早期绒毛中Survivin的表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),Stat3的表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05),二者的表达不存在相关关系(P>0.05);RSA组与对照组蜕膜中Survivin、Stat3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Survivin过表达可能与反复自然流产有关,而Stat3与反复自然流产无关。     

KISS-1蛋白和MMP-9在妊娠滋养细胞病变中的表达

目的:探讨KISS-1基因蛋白(metastin)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在妊娠滋养细胞病变(妊娠滋养细胞疾病和自然流产)中的表达及二者的相关性。方法:采用免疫组化S-P法分别检测20例正常早孕绒毛、25例自然流产绒毛、30例完全性葡萄胎、15例侵袭性葡萄胎和15例绒毛膜癌中KISS-1蛋白和MMP-9的表达。结果:KISS-1蛋白在自然流产绒毛中的表达高于正常早孕绒毛(P<0.05);侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌中的表达显著低于完全性葡萄胎(P均<0.01);在侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌中的表达与临床分期呈负相关。MMP-9在自然流产绒毛中的表达低于正常早孕绒毛(P<0.05);在完全性葡萄胎中的表达高于正常早孕绒毛(P<0.05);侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌中的表达高于完全性葡萄胎(P均<0.05);在侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌中的表达与临床分期呈正相关。在自然流产绒毛、侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌中KISS-1蛋白表达和MMP-9表达均呈负相关。结论:KISS-1蛋白和MMP-9表达的变化可能参与了自然流产和妊娠滋养细胞疾病(葡萄胎、侵袭性葡萄胎和绒毛膜癌)的发生、发展过程,在此过程中两种基因存在着相互作用。     

STAT3在正常早孕妇女与反复自然流产患者绒毛和蜕膜中的表达

目的:通过对反复自然流产(RSA)患者和正常早孕妇女绒毛、蜕膜中STAT3的测定,探讨不明原因反复流产患者的流产病因和胚胎、胎盘的生长机制。方法:采用免疫组化法检测40例RSA患者及20例对照组的绒毛和蜕膜组织中STAT3含量。结果:STAT3在RSA患者和正常妊娠妇女孕早期的绒毛和蜕膜中均高表达。RSA组与对照组绒毛中STAT3的表达差异无统计学意义(P>0.05);RSA组与对照组蜕膜中STAT3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究检测了RSA患者和正常早孕妇女绒毛、蜕膜中STAT3的表达,在胎盘形成过程中STAT3参与、促进滋养细胞的存活、生长和浸润,胚胎生长具有肿瘤的特征。STAT3在RSA患者和正常妊娠妇女孕早期绒毛和蜕膜中的表达差异无统计学意义,STAT3与反复自然流产的关系还需进一步研究。     

早期流产者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及其意义

目的:了解MMP-9和TIMP-3在早孕、先兆流产和药物流产绒毛及蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法:选取90例早孕妇女作为研究对象,其中行负压吸宫术者30例为对照组,行药物流产术者30例为药物流产组;自愿行吸宫术的先兆流产妇女30例为先兆流产组,均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测MMP-9和TIMP-3在不同早孕流产绒毛和蜕膜组织中的表达。结果:MMP-9和TIMP-3在3组绒毛的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆,蜕膜的蜕膜细胞、腺上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆呈不同程度的阳性染色。通过定量分析,药物流产组绒毛和蜕膜MMP-9的表达高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05);3组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。绒毛和蜕膜中MMP-9/TIMP-3药物流产组高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05)。结论:MMP-9表达水平的升高在流产发生过程中具有重要作用,MMP-9和TIMP-3的平衡对维持正常妊娠起重要作用。     

重组人生长激素对肠外瘘病人小肠黏膜增殖及营养状况的影响

目的:研究重组人生长激素(rhGH)对非肿瘤肠外瘘病人营养状况及小肠黏膜上皮细胞增生的影响.方法:选择8例唇状小肠外瘘病人,人院次日以1.5 REE热量行肠内营养,待7天氮平衡稳定后,每天皮下注射GH 10U,连用7天.分别于GH使用前1天、给予GH后第4、7天经瘘口活检肠黏膜,行常规病理及增殖细胞核抗原(PC-NA)检测,同时行机体组成分析、检测病人血清蛋白质等营养指标和氮平衡测定.结果:肠外瘘病人给予GH后第4、7天黏膜的绒毛高度与使用GH前1天相比有明显增加(P＜0.01).小肠黏膜细胞中PCNA表达第4、7天与使用GH前1天相比均有非常显著增加(P＜0.01).第7天与使用GH第4天相比明显增加(P＜0.05).使用GH后可使病人体重增加.病人血清清蛋白、前清蛋白、转铁蛋白、纤维连接蛋白均较使用前有明显增加.同时还能维持机体的正氮平衡.结论:应用GH能明显促进肠外瘘病人小肠黏膜增生,促进蛋白质合成,维持机体正氮平衡.     

早期自然流产绒毛糖原表达的研究

目的探讨早期自然流产绒毛糖原的表达。方法以孕39~50 d早期人工流产绒毛10例作为对照组,孕40~77 d早期自然流产绒毛30例作为研究组,采用过碘酸Shiff反应(PAS)法和阿利坚蓝染色检测中性糖原和酸性多糖的表达,进行图像分析,并做统计学处理,同时观察绒毛的形态学变化。结果研究组绒毛合体滋养层和细胞滋养层细胞内中性糖原减少(P<0. 05),酸性多糖增加(P<0. 05),酸性多糖分为高、中、低表达组,高表达组早期自然流产绒毛糖原表达高于对照组(P <0. 05),且伴有滋养层细胞形态异常,其余两组比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论早期自然流产绒毛细胞中中性糖原降低,说明胎盘糖原储存异常,胚胎发育过程中所必需的能量供应不足;酸性多糖的增高说明存在在糖原代谢异常伴有糖原的累积,酸性多糖高表达组伴有滋养层细胞形态学改变也佐证了这一点。