肺结核诊断中聚合酶链反应和多项指标联合应用

肺结核诊断中聚合酶链反应和多项指标联合应用８３００００乌鲁木齐兰州军区乌鲁木齐总医院李磊赵中苏周郁殷学军张羽阿依努尔叶江枫董雪林关键词结核，肺；聚合酶链反应中国图书资料分类号Ｒ５２１应用结核－聚合酶链反应（ＴＢ－ＰＣＲ）、痰涂片、结核杆菌纯蛋白衍化物...     

PCR快速诊断结核性脑膜炎25例

ＰＣＲ快速诊断结核性脑膜炎２５例①７１００３２西安第四军医大学西京医院苏明权马越云祝道成穆士杰姚娟关键词结核分枝杆菌；聚合酶链反应；脑膜炎中国图书资料分类号Ｒ５１本研究根据人型结核杆菌特异性基因序列设计一对引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）快速检测脑脊液...     

人肝癌细胞中端粒酶RNA的克隆及序列分析

目的：比较不同组织细胞中端粒酶ＲＮＡ（ｈＴＲ）的序列，建立以ｈＴＲ为基础的肿瘤诊断与治疗新技术。方法：采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术从人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２）中扩增出了ｈＴＲ部分ｃＤＮＡ序列，并通过电泳的方法鉴定了其特异性。通过分子克隆技术将上述产物插入Ｔ－质粒后转化入大肠杆菌ＪＭ１０９中，经聚合酶链反应（ＰＣＲ）鉴定了插入片段的特异性及方向，最后采用自动ＤＮＡ序列分析仪分析了上述插     

沙眼衣原体感染的PCR诊断

沙眼衣原体感染的ＰＣＲ诊断武警江苏总队医院妇产科王玉梅王爱华（扬州２２５００３）关键词沙眼衣原体感染生殖道沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒｓａｃｈｏｍａｔｉｓ,ＣＴ）是引起生殖道感染的常见病原体,聚合酶链反应（ＰＣＲ）对诊断ＣＴ感染具有高度的敏感性...     

一种新的分子诊断标准——荧光定量PCR

ＰＣＲ(聚合酶链反应 )技术自 80年代用于临床检验以来 ,广泛应用于肝炎、传染病、遗传病、肿瘤及优生优育等领域 ,以其简便、快速、灵敏的特点一度成为实验诊断学的热点。但其易污染、假阳性及不能定量的问题也日益突出 ,且商品试剂混乱 ,所测结果差异很大 ,给临床造成误导。荧光定量ＰＣＲ技术集ＰＣＲ和ＤＮＡ探针杂交技术的优点为一体 ,直接探测ＰＣＲ过程中的荧光变化 ,获得ＤＮＡ模板的准确定量结果。整个过程在闭管状态下进行 ,避免了因污染而导致的假阳性 ,使结果准确可靠 ,是目前最先进的ＰＣＲ技术。以乙肝病为例 ,荧光定量ＰＣＲ…     

聚合酶链反应在乙型肝炎研究中的应用

聚合酶链反应在乙型肝炎研究中的应用武警湖北总队医院传染科宋仕玲,谭联英,黄团新审校（武汉４３００６１）关键词乙型肝炎病毒核酸,乙型肝炎,聚合酶链反应聚合酶链反应［１］（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ．ＰＣＲ）是近年创建的研究核酸分子生物...     

聚合酶链反应快速检测钩端螺旋体

以四株不同型别的致病性钩端螺旋体ＤＮＡ为模板进行聚合酶链反应(ＰＣＲ),建立了钩端螺旋体快速检测方法。在此基础上,先后对流行期15例早期疑似血清进行ＰＣＲ快速检测,结果7例阳性,与经防疫部门及临床确诊的7例患者完全符合,阳性率为100%。而常规方法(显微镜凝集试验)只检出5例阳性。结果表明,ＰＣＲ用于钩端螺旋体病的早期诊断,快速、准确。聚合酶链反应快速检测钩端螺旋体@范钦@曹东林@刘静宇     

用PCR－F、PCR－SSCP对骨髓移植植入状态的观察

应用ＨＬＡ－ＤＱＡ、ＤＲＢ、ＤＰＢ、ＤＱＢ位点聚合酶链反应一指纹图（ＰＣＲ－Ｆ）和聚合酶链反应一单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法，对５例ＨＬＡ血清学配型一致的异基因骨髓移植病人，分别于移植后３５ｄ左右进行了植入状态的观察。此方法不受供、受体性别和血型的影响，具有灵敏、准确、快速、简便等优点，其中４例以特殊带型为异基因骨髓移植提供了直接的植入证据．     

PCR检测慢性髓细胞白血病bcr／abl mRNA的临床意义

ＰＣＲ检测慢性髓细胞白血病ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ的临床意义５１０５１５广州第一军医大学南方医院孙竞，周淑芸，郑维扬，徐兵关键词白血病，髓细胞性，慢性；聚合酶链反应中国图书资料分类号　Ｒ５５７．３采用我们已报道的常规一次ＲＣＲ、巢式ＰＣＲ方法检测Ｍｂｃ...     

聚合酶链反应快速诊断白色念珠菌菌血症

目的：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术诊断白色念珠菌菌血症。方法：设计的引物特异性扩增编码白色念珠菌细胞色素Ｐ４５０Ｌ１Ａ１的基因，其长度为２４３ｂｐ。ＥＤＴＡ抗凝血用去污剂溶解，用ＤＮａｓｅＩ去除人体白细胞和污染的细菌ＤＮＡ；念珠菌的细胞壁用溶胞酶消化并用ＳＤＳ和蛋白酶Ｋ裂解。用酚／氯仿／异戊醇提取模板ＤＮＡ。用ＰＣＲ技术扩增。结果：与细菌、病毒及人体细胞ＤＮＡ无非特异扩增。检出血中白色葡萄的阈值     

聚合酶链反应检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义

聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术是本世纪分子生物学重大进展之一，在体外可将特异ＤＮＡ序列呈百万倍扩增，具有高灵敏度和高特异性。随着该技术的不断改进和完善，其在ＨＢＶ感染研究中的应用也越来越多，大大丰富和更新了人们对ＨＢＶ感染的认识［１］。本文应用ＰＣＲ技术检测不同ＨＢＶ感染患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，旨在探讨急、慢性乙型肝炎及与ＨＢＶ感染相关的肝硬变和肝癌患者血清ＨＢＶＤＮＡ的存在情况及其与乙型肝炎病毒血清标志物（ＨＢＶＭ）在反映体内病毒复制方面存在的差异，…     

PCR技术诊断结核病41例体会

ＰＣＲ技术诊断结核病４１例体会武警山东总队医院检验科张耀进,韩宝莱（济南２５０１０１）关键词ＰＣＲ,ＤＮＡ,结核菌,凝胶电泳聚合酶链式反应（ＰＣＲ）是近年来开展的一项新技术,应用ＰＣＲ检测结核菌ＤＮＡ具有快速、敏感、特异等优点,克服了传统的涂片法阳性...     

多重PCR同时检测粪便中的志贺菌、侵袭性大肠埃希菌和O－1群霍乱弧菌的致病基因

本研究建立一种快速标本处理和多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法，在一次ＰＣＲ反应中同时扩增志贺菌、侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒（ｉａｌ）基因和Ｏ－１群霍乱弧菌的霍乱毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因。扩增产物经电泳，出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的条带即判断为该标本阳性。对一组经常规培养生化鉴定法诊断为霍乱的２６份腹泻病人粪便标本检测后，ＰＣＲ法有２４例检测到ｃｔｘＡ基因，ＰＣＲ阴性的２例为非Ｏ－１群；对另一组５６例粪标本亦进行了检测。本方法具有简便、快速、特异、经济和不须培养等特点，宜于临床应用。     

聚合酶链反应法与荧光免疫法检测沙眼衣原体的比较研究

为了评价聚合酶链反应法（ＰＣＲ）对泌尿生殖道标本中沙眼衣原体的检测结果，每份临床标本进行了ＰＣＲ法和荧光免疫法（ＤＦＡ）平行检测比较。检测临床标本９３例，ＰＣＲ法阳性率为２５．８％，ＤＦＡ法的阳性率为１７．２％（Ｐ＞０．０５）。结果说明ＰＣＲ是一高度特异和敏感的检测方法。     

具有家族背景大肠癌微卫星不稳定性研究

为了解具有家族背景大肠癌微卫星不稳定性（ＭＩＮ）及其与临床病理表现的关系,应用银染聚合酶链反应－单链构相多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析技术,对４６例大肠癌进行研究。结果：ＭＩＮ在具有家族背景大肠癌中的表达明显高于无家族史的散发性大肠癌（Ｐ〈０．０５）,     

戊型肝炎病人及实验感染猴粪便中戊型肝炎病毒基因的检出

采用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）结合ＤＮＡ杂交技术，直接检测急性戊型肝炎病人和实验感染猴粪便标中的戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）基因，将从粪便标本中提取的ＲＮＡ反转录合成ｃＤＮＡ后，用ＨＥＶ特异引物进行套式ＰＣＲ扩增，并用长臂光敏生物素村记的ＨＥＶＥＴ１．１核酸探针进行杂交，结果显示，直接从６份病人１０％粪悬液标本中提取的ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ，在琼脂糖凝胶电泳上未见任何信号带，点杂交也未见阳性，但     

PCR扩增nuc基因快速检测金黄色葡萄球菌

为快速检测标本中金黄色葡萄球菌（以下简称金葡菌）。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ），扩增金葡菌ｎｕｃ基因，并与培养法进行比较分析。结果只有金葡菌扩增出一条特异的ＤＮＡ条带，平行对照的其它菌株均为阴性。说明用ＰＣＲ检测金葡菌的方法简便、快速、特异、敏感。     

检测人巨细胞病毒的套式PCR法及在妇产科的临床应用

报告了检测人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）法，及其在妇产科临床应用的结果。改进了从临床样品中提取ＤＮＡ的方法，优化了套式ＰＣＲ的条件。测得套式ＰＣＲ的扩增倍数为２．９×１０￣９，套式ＰＣＫ／电泳法的灵敏度为４０个ＨＣＭＶ基因组拷贝。临床应用结果表明，孕妇的ＨＣＭＶ感染率很高，母婴间存在ＨＣＭＶ感染的垂直传播关系。胎盘是传播的主要途径，胎盘的屏障功能随妊娠时间的延长而减弱。宫颈分泌物的感染也是母婴间ＨＣＭＶ感染传播的感染源。ＨＣＭＶ感染对胎儿发育的影响，应引起优生优育工作者们的重视。     

创面异体移植培养表皮细胞后存活的判定

应用４种方法判定烧伤创面异体移植的培养表皮细胞存活情况：１．聚合酶链反应（ＰＣＲ）查Ｙ染色体特异性ＤＮＡ片段；２．ＰＣＲ扩增ＰＭＣＴ１１８长度多态性基因位点；３．ＰＣＲ／ＳＳＯＨＬＡ－ＤＱａ分型；４．ＤＮＡ指纹。共检测１６例病人的２７个活检标本，均证实有供者的ＤＮＡ，最长时间为移植后９２天。初步实验结果表明：培养表皮异体移植后可存活较长时间。     

应用原位聚合酶链反应对肝细胞癌组织中HBVDNA进行再评价

为探讨ＨＢＶ感染与肝细胞癌（ＨＣＣ）发生之间关系，作者应用原位聚合酶链反应（ＰＣＲＩＳ）对２６例肝癌、２３例癌旁肝组织的石蜡切片进行了ＨＢＶＤＮＡ的检测，检出率分别为８４．６％和９１．３％，明显高于原位核酸杂交（ＩＳＨ）的５３．８％（１４／２６）和５６．５％（１３／２３）；亦高于从患者血清和ＨＣＣ组织提取ＤＮＡ后行聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的５７．７％（１５／２６）和５５．６％（５／９）。用ＰＣＲＩＳ方法，ＨＣＣ组织细胞中ＨＢＶＤＮＡ阳性颗粒强度、ＨＢＶＤＮＡ阳性细胞数和组织切片的清晰度均高于ＩＳＨ。ＰＣＲＩＳ既显示了ＰＣＲ技术的高敏性和特异性，又能在细胞内定位。本结果显示我国ＨＣＣ的发生与ＨＢＶ感染密切相关。