以抗血管生成为基础的节律化疗研究进展

除增殖的肿瘤细胞和其它多种正常细胞外,传统细胞毒性化疗药物也影响肿瘤血管内皮细胞的生长。当给予节律化疗,即频繁或持续给予低剂量化疗药物且不伴较长间歇期时,化疗的抗血管生成作用最强,尤其是与特异性抗血管生成药物合用时。现就其抗血管生成作用及其机制、联合用药及临床试验现状作一综述。     

以抗血管生成为基础的节律化疗研究进展

除增殖的肿瘤细胞和其它多种正常细胞外,传统细胞毒性化疗药物也影响肿瘤血管内皮细胞的生长。当给予节律化疗,即频繁或持续给予低剂量化疗药物且不伴较长间歇期时,化疗的抗血管生成作用最强,尤其是与特异性抗血管生成药物合用时。现就其抗血管生成作用及其机制、联合用药及临床试验现状作一综述。     

紫杉醇抗血管生成化疗的研究进展

传统的化疗药物常引起增殖期癌细胞的脱氧核糖核酸损伤并中断其复制,最终杀灭癌细胞.化疗的目的是尽可能多地杀灭癌细胞,因此临床上常采用的是化疗药物的最大耐受剂量.目前实验研究发现,以紫杉醇为代表的部分化疗药物在小剂量、高频率的给药方式下可抗肿瘤新生血管生成.     

紫杉醇抗血管生成作用的实验研究

 目的　探讨紫杉醇的抗血管生成作用。方法　以人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)原代培养模型 ,MTT法测定紫杉醇对HUVEC增殖的影响 ;采用鸡胚尿囊膜血管形成模型 (CAM模型 ) ,观察紫杉醇对鸡胚尿囊膜新生血管的抑制作用。结果　紫杉醇在非细胞毒浓度下可在体外抑制HUVEC的增殖 ,在体内抑制鸡胚尿囊膜新生血管形成。结论　紫杉醇在非细胞毒浓度下具有抗血管生成作用。     

紫杉醇节律化疗联合EGCG抑制胃癌生长和肿瘤血管生成的实验研究

目的:探讨低剂量紫杉醇联合表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对胃癌肿瘤血管生成的影响,并观察其抑瘤效果。方法:建立裸鼠人胃癌移植瘤模型,分别给予0.9%NaCl溶液、最大耐受剂量(MTD)紫杉醇、低剂量紫杉醇、EGCG及低剂量紫杉醇联合EGCG腹腔注射,观察肿瘤生长情况。免疫组化染色,测定CD31和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果:对照组肿瘤生长迅速,其他治疗组肿瘤生长都受到了抑制,联合治疗组抑瘤效果最明显,各组比较差异有统计学意义,P<0.05。与对照组及MTD组相比,低剂量紫杉醇组肿瘤组织内的微血管密度(MVD)及VEGF表达均下降,合用EGCG后,MVD和VEGF表达下降更明显,P<0.05。结论:低剂量紫杉醇化疗能够有效抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长及微血管的形成,与EGCG联合应用时效果增强。     

抗血管生成化疗的研究新动向

近几年发现某些化疗药物在低剂量、长时间接触中可选择性抑制血管内皮细胞的功能，且不受肿瘤细胞耐药状态的影响，从而为以肿瘤血管内皮细胞为靶位的化疗展示了良好的前景。现系统阐述抗血管生成化疗的理论依据、药物筛选标准、研究方法和化疗药物研究现状。     

抗血管生成化疗的研究新动向

近几年发现某些化疗药物在低剂量、长时间接触中可选择性抑制血管内皮细胞的功能,且不受肿瘤细胞耐药状态的影响,从而为以肿瘤血管内皮细胞为靶位的化疗展示了良好的前景.现系统阐述抗血管生成化疗的理论依据、药物筛选标准、研究方法和化疗药物研究现状.     

节律化疗与乳腺癌

血管生成在乳腺癌的发展及转移中起着重要作用.以传统药物为基础的小剂量节律化疗具有抗血管生成作用,从其作用机制及其低毒性、不易产生耐药等优势看,对乳腺癌的治疗具有可行性.其临床前研究及临床试验中均显示出有效性,为乳腺癌的治疗提供了新的策略.     

节律化疗诱导肿瘤休眠的研究进展

肿瘤休眠是恶性肿瘤复发转移的基础,各种微转移病灶及循环中的肿瘤细胞和肿瘤干细胞被认为是休眠状态的肿瘤细胞可能的存在形式。目前认为靶向治疗及内分泌治疗等手段可以诱导肿瘤细胞长期处于休眠状态,抑制肿瘤复发。节律化疗是以小剂量持续给药为特点的化疗方式,可以抑制肿瘤血管生成、恢复宿主抗肿瘤免疫,是一种作用于肿瘤微环境,诱导肿瘤休眠的治疗手段。但因其用药方式、剂量及疗效判定方式尚无统一认识,对肿瘤细胞生物学行为的影响尚未清楚,需要进一步体内、体外实验证实。     

节律化疗抗血管生成效应的研究进展

目的:总结国内外关于节律化疗在抗血管生成效应方面的研究现状。方法:应用Medline和CNKI期刊全文数据库系统,以"节律化疗、肿瘤、血管生成"等为关键词,检索2000-01-2010-10有关节律化疗方面的文献。纳入标准:1)关于节律化疗抗血管生成作用机制的研究。2)关于节律化疗抗血管生成方面的临床前试验。3)关于节律化疗抗血管生成方面的临床试验。根据纳入标准,纳入分析31篇文献。结果:持续低剂量节律化疗可以通过多种机制来抑制肿瘤血管的生成。节律化疗药物与抗血管生成类药物联合或节律化疗药物之间联合应用可以有效提高治疗效果。这种新的策略在临床前模型和临床试验上是有效的,而且可能帮助解决常规高剂量化疗引起的毒副反应和耐药性的难题。结论:节律化疗的抗血管生成疗法为肿瘤治疗提供了新的途径,在实验室中已取得较满意的结果,但具体的临床应用还有许多问题需要解决。     

热疗合并羟基喜树碱对荷Lewis肺癌小鼠的作用

目的 :探讨热疗、羟基喜树碱 (HCPT)及热疗合并羟基喜树碱对荷Lewis肺癌C57BL小鼠的抗肿瘤作用。方法 :采用肿瘤生长延迟 (TGD)分析热疗、化疗对荷Lewis肺癌的C57BL小鼠的疗效。结果 :① 4 1℃、4 2℃、4 3℃热疗的TGD分别为 1 0 7d、1 4 0d、2 5 2d ,只有 4 3℃热疗组明显优于对照组 (P<0 0 0 2 )。②HCPT化疗剂量分别为 1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg的各组TGD分别为 1 87d、4 0 0d、4 5 7d ,均明显优于对照组 (P <0 0 5、P <0 0 0 1、P <0 0 0 1)。③ 4 1℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 2℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 3℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组的TGD分别为 4 86d、5 5 7d、7 14d ,4 2℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 3℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组明显优于单独HCPT (2mg/kg)化疗组 (P <0 0 5、P <0 0 0 2 ) ,4 3℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组明显优于 4 1℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗、4 2℃热疗与HCPT (2mg/kg)化疗组 (P <0 0 2、P <0 0 5 )。结论 :①HCPT对Lewis肺癌的抑制作用随剂量的增加而增高。②热疗对Lewis肺癌的抑制作用随温度的增加而增高。③热疗增加HCPT对Lewis肺癌的抑制作用 ,其作用随温度的增加而增高。热疗与HCPT之间并无温度阈值     

Inhibitory Effect of Oversulfated Fucoidan on Invasion through Reconstituted Basement Membrane by Murine Lewis Lung Carcinoma

We investigated the effects of native, Oversulfated, and desulfated fucoidans and heparin on the invasion of 3LL cells through Matrigel. Of the four polysaccharides tested, Oversulfated fucoidan was the most potent inhibitor of tumor cell invasion and inhibited most potently and specifically the tumor cell adhesion to laminin. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoretic analysis of the binding of elastase-cleaved laminin to fucoidan- and heparin-Sepharoses showed that both polysaccharides bound to the 62 and 56 kDa fragments. Pretreatment of 3LL cells with native or Oversulfated fucoidan reduced their adhesive potency to laminin. The two fucoidans inhibited further the laminin binding of 3 LL cells which had been pretreated with a laminin-based pentapeptide, YIGSR. These results suggest that fucoidan specifically binds to not only the heparin binding domain(s) of laminin but also site(s) other than the cell surface laminin receptor. 3 LL cells secreted a 50 kDa form of urokinase-type plasminogen activator (u-PA). The extracellular level of u-PA activity was increased 1.7 times by addition of laminin but not type IV collagen. Oversulfated fucoidan most potently reduced the increased u-PA levels. Therefore, the reduction in in vitro invasiveness of 3 LL cells in response to either fucoidan or its Oversulfated derivative may result from an inhibition of physical interaction between the tumor cells and the Matrigel (laminin), followed by a suppression of the laminin-induced increase in extracellular u-PA.     

晚期非小细胞肺癌多西紫杉醇节拍化疗的临床研究

  目的  回顾性分析低剂量多西紫杉醇节拍化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效、不良反应, 以及对非小细胞肺癌患者血清血管内皮细胞生长因子浓度的影响。  方法  收集2009年9月至2010年9月姜堰市人民医院呼吸科住院治疗的44例NSCLC患者, 随机数分组法将入选患者分为治疗组和对照组, 治疗组采用多西紫杉醇25mg/m2, 每周给药1次, 连用3周为1周期。对照组多西紫杉醇75mg/m2第1天, 21天为1周期; 顺铂30mg/m2, 第1~3天, 21天为1周期。化疗两周期后按RECIST标准评价疗效, 依据NCI-CTC3.0行不良反应评价。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患者化疗前后血清VEGF浓度。  结果  1例患者失访。治疗组和对照组RR(CR+PR)分别为35%、30.4%, 两组PFS分别为4.40个月、4.62个月; 1年OSR分别为30%、30.43%;两组疗效比较无统计学差异(P > 0.05)。两组主要不良反应为恶性呕吐, 白细胞下降及疲乏, 治疗组不良反应发生率显著低于对照组(P < 0.05)。两组化疗后血清VEGF浓度均有下降, 但治疗组治疗前后血清VEGF差值较对照组更为明显(P < 0.01)。  结论  低剂量多西紫杉醇节拍化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌是一种安全有效的方案, 可显著降低患者血清VEGF, 推断具有抑制肿瘤新生血管形成的作用, 值得临床进一步研究。      

Paclitaxel Combined with Ticagrelor Inhibits B16F10 and Lewis Lung Carcinoma Cell Metastasis

It is widely accepted that tumor metastasis is the dominant factor leading to cancer-related death. Tumor metastasis is mediated by cell invasion, blood circulation and lymphatic circulation. Paclitaxel, as a common anti-tumor drug and a mitotic inhibitor, promotes microtubule assembly and inhibits microtubule depolymerization. In addition, ticagrelor, an anti-platelet drug, is used to treat acute coronary syndrome. Increasing numbers of studies have reported that platelets can facilitate tumor metastasis. Therefore, inhibiting the effects of platelets can serve as a novel therapeutic strategy for cancer. To explore the effect of anti-tumor and anti-platelet drugs on tumor progression, we chose paclitaxel and ticagrelor. Interestingly, the results demonstrated that paclitaxel and ticagrelor could not only suppress the proliferation, migration and invasion of B16F10 and LLC cells, but they could also prevent tumor metastasis to the lungs. Furthermore, the inhibitory effect of paclitaxel and ticagrelor was more apparent when both drugs were used in combination. Collectively, the current study demonstrated that the combination of paclitaxel and ticagrelor could be considered as a potential anti-tumor therapy approach.     

小鼠lewis肺癌原位移植瘤和异位皮下移植瘤模型的对比研究

目的同时建立肺癌原位移植瘤模型和异位皮下移植瘤模型,对比两种模型小鼠,以期发现它们在整体和肿瘤局部的生物学差异。方法将稳定表达虫萤光素酶的鼠Lewis肺腺癌细胞(ll2-luc-m38)与Matrigel胶的混悬液注射于C57 BL/6小鼠左肺建立肺癌原位移植瘤模型,与生理盐水混悬注射于C57 BL/6小鼠右侧腋后线皮下建立异位皮下移植瘤模型,定期利用小动物活体成像系统观察小鼠肿瘤形成及转移情况,记录小鼠生存时间,对小鼠肿瘤组织和肺部组织取材,石蜡包埋,切片,HE染色和免疫组化染色,做出病理学诊断。结果皮下移植瘤和肺原位移植瘤的成瘤率均为100%,肺原位移植瘤转移率为100%,小鼠出现了胸膜转移、心包转移、胸骨柄转移,其中1只小鼠出现了肾脏转移;皮下移植瘤转移率为70%,小鼠出现肺部转移。HE染色证实了两组均为肺腺癌,免疫组化染色结果示,肺原位移植瘤VEGF表达高于异位皮下移植瘤。结论肺癌原位移植瘤模型虽然操作复杂,小鼠生存期较短,但在转移率和肿瘤生物学特征更符合临床实际情况,研究者可根据不同实验需求选择合适的动物模型。     

节拍化疗联合放疗治疗局部晚期非小细胞肺癌

摘 要：［目的］ 探索节拍化疗联合放疗对局部晚期非小细胞肺癌的近期疗效、抑制肿瘤血管新生作用,并评价其毒副作用。［方法］ 2015年8月至2016年8月住院治疗的57例非小细胞肺癌患者,随机分为治疗组和对照组。治疗组以紫杉醇8mg/m2+卡铂AUC=0.25mg/ml.min（每周二次）的节拍化疗联合放疗;对照组以紫杉醇45~50mg/m2+卡铂AUC=2mg/ml.min（每周一次）与放疗行同步放化疗。治疗前后行CT扫描及血流灌注分析,并评价其毒副作用。［结果］ 对照组与治疗组比较总有效率略有优势,但无统计学差异（P>0.05）。两组之间Ⅲ～Ⅳ度不良反应发生率有显著性差异(P<0.05);两组患者经治疗后血流灌注得到改善,节拍化放疗组稍显著,其中治疗后BV、PS改善差异达统计学意义。［结论］ 节拍化疗联合放疗毒副作用小,耐受性好,并且具有更好的抗肿瘤血管效应。     

血管生成在Lewis肺癌生长转移过程中的作用

目的建立能够模拟肿瘤生长、侵袭转移动态全过程的动物模型,利用该模型探讨血管生成与肿瘤生长、转移的关系。方法Lewis肺癌(LLC)在C57BL/6小鼠体内连续传代,观察第2代（早期组）、第8代（中期组）和第15代（晚期组）荷瘤小鼠肿瘤生长和肺转移的情况,采用免疫组织化学法检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α）和微血管密度（MVD）的表达。结果(1)早、中、晚期三组小鼠肿瘤随传代次数的增加生长速度加快、侵袭力增强,肺转移率升高。(2) VEGF、 HIF-1α和MVD在早、中、晚期三组小鼠瘤组织中的阳性表达均呈升高趋势,差别有统计学意义（P<0.05）,且HIF-1α与VEGF、VEGF与MVD的表达均呈正相关。结论Lewis肺癌在小鼠体内连续传代过程中生长速度加快,转移潜能增强,而血管生成在这个动态过程中发挥了重要作用,使肿瘤得以持续生长和扩散转移。     

Impact of Metronomic UFT/Cyclophosphamide Chemotherapy and Antiangiogenic Drug Assessed in a New Preclinical Model of Locally Advanced Orthotopic Hepatocellular Carcinoma

Hepatocellular carcinoma (HCC) is an intrinsically chemotherapy refractory malignancy. Development of effective therapeutic regimens would be facilitated by improved preclinical HCC models. Currently, most models consist of subcutaneous human tumor transplants in immunodeficient mice; however, these do not reproduce the extensive liver disease associated with HCC or metastasize. To address this deficiency, we developed an orthotopic model. Human HCC cells were transfected with the gene encoding secretable β-subunit human choriogonadotropin (β-hCG), which was used as a surrogate marker of tumor burden. The HCC cells were implanted into the left liver lobe of severe combined immunodeficient (SCID) mice, after which the efficacy of different therapies was evaluated on established, but liver-confined human Hep3B cell line HCC. Treatments included sorafenib or metronomic chemotherapy using cyclophosphamide (CTX), UFT, an oral 5-fluorouracil prodrug, or doxorubicin either alone or in various combinations, with or without an antiangiogenic agent, DC101, an anti-vascular endothelial growth factor receptor-2 antibody. Sorafenib inhibited tumor growth in a dose-dependent manner but caused severe weight loss in SCID mice, thus necessitating use of DC101 in subsequent experiments. Although less toxicity was observed using either single or doublet metronomic chemotherapy without any added antiangiogenic agent, none, provided survival benefit. In contrast, significantly improved overall survival was observed using various combinations of metronomic chemotherapy regimens such as UFT + CTX with DC101. In conclusion, using this model of liver-confined but advanced HCC suggests that the efficacy of a targeted antiangiogenic drug or metronomic chemotherapy can be mutually enhanced by concurrent combination treatment.     

节拍器化疗对鼻咽癌CNE-1细胞周期和凋亡的影响

目的探讨顺铂节拍器化疗对人鼻咽癌细胞CNE-1细胞周期和细胞凋亡的影响。方法采用MTT方法,检测顺铂对鼻咽癌细胞株CNE-1的半抑制浓度（IC50）,相当于临床中采用6 mg/m^2顺铂小剂量连续化疗的血浆浓度。以低于此浓度的0.10μg/ml作为顺铂节拍器体外化疗参考剂量,采用流式细胞术检测0.10μg/ml顺铂连续作用12 h和96 h细胞周期和细胞凋亡的变化情况。结果MTT法检测顺铂半抑制浓度IC50为0.19μg/ml,0.10μg/ml顺铂作用12 h后检测细胞周期变化,与对照组比较无显著变化;而作用96 h后与对照组相比进入G2/M期细胞比例显著增多,两者差异有统计学意义（P〈0.05）,但作用12 h和96 h后均未检测到明显细胞凋亡现象。结论采用小剂量顺铂作用足够长时间,可以诱导鼻咽癌CNE-1细胞周期发生变化,但是并不能诱导细胞凋亡。细胞周期同步化于G2/M期,为节拍器化疗与放疗的联用提供了可能。     

血管内皮抑素对小鼠体内Lewis肺癌血管生成及转移影响的研究

目的：观察血管内皮抑素（Endostatin）对C57小鼠体内Lewis肺癌生长、血管生成及转移的影响。方法：将荷Lewis肺癌的C57鼠进行不同剂量组的内皮抑素和顺铂干预，观察肿瘤生长、移植瘤及转移瘤体内的血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的表达及转移发生率，并作统计学分析。结果：内皮抑素对鼠Lewis肺癌的生长有明显的抑制作用。内皮抑素处理组（内含400μg、300μg、200μg和200μg＋DDP组）和模型组转移率间的差异有统计学意义（P=0．0303）。内皮抑素能显著下调移植瘤及转移瘤内的VEGF。移植瘤中模型组与其余各组之间均存在显著差异（P〈0．01）；400μg组与200μg组、DDP组、联合用药组之间均存在统计学差异（P〈0．05）；300μg组与200组之间存在统计学差异（P〈0．05）；转移瘤中模型组与其余各组之间均存在统计学差异（P〈0．05）。300μg与200μg之间有统计学差异（P〈0．05），200μg与DDP组和200μg＋DDP组之间有统计学差异（P〈0．05）。原位移植瘤与肺转移肿瘤组织中VEGF表达呈正相关（r=0．977，P=0．001）。内皮抑素能显著下调移植瘤及转移瘤内和MVD。在移植瘤中400μg和300μg组肿瘤微血管密度最小，彼此无差异；200μg加DDP组肿瘤微血管密度次之，200μg组肿瘤微血管密度再次，DDP组肿瘤微血管密度在各实验组中最多，模型组肿瘤微血管密度最大。在转移瘤中400μg、300μg和200μg组微血管密度最小，这三组彼此无差异。200μg加DDP组肺转移瘤组织微血管密度次之，DDP组肺转移瘤组织微血管密度在各实验组中最多；模型组肿瘤微血管密度最大。内皮抑素可以减少肿瘤肺转移，作用程度在一定范围内与内皮抑素剂量呈正相关。结论：血管内皮抑素可以通过下调瘤组织中的VEGF和MVD抑制肿瘤生长及转移。