小鼠结肠癌CT26细胞PARP抑制后肝转移变化的影响

目的:探讨小鼠大肠癌CT26细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]抑制后肝转移变化及其可能的机制.方法:采用小鼠结肠癌CT26细胞肝转移模型,5-氨基异喹啉酮(5-AIQ)为PARP抑制剂.实验组分为两组,分别腹腔注射5-AIQ 3 mg/(kg·d)和5-AIQ 10 mg/(kg·d),对照组给予相应体积双蒸水.14 d后,观察各组小鼠脾脏原发肿瘤和肝脏转移肿瘤体积、数目的变化.WesternBlot检测PARP,NF-κB,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白在各组脾脏原发瘤组织中的表达.结果:5-AIQ 3 ms/(kg·d)浓度组和5-AIQ 10 mg/(kg·d)浓度组脾脏肿瘤体积分别为(0.92±0.23)cm3和(0.88±0.43)cm3,与对照组(2.64±0.72)cm3相比较明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.05);肝脏转移结节数目5-AIQ3 mg/(kg·d)浓度组和5-AIQ 10 ms/(kg·d)浓度组分别为(4.20±2.95)个,(5.40±3.31)个,两组间差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组(47.18±9.81)个相比较,差异均具有统计学意义(P<0.05).5-AIQ 3 ms/(kg·d)浓度组小鼠脾脏原发瘤组织PARP,NF-κB,MMP-2和MMP-9表达分别为(1.00±0.09),(0.55±0.03),(0.58±0.05),(0.48±0.06),与对照组(1.56±0.14),(0.84±0.07),(0.91±0.08)和(0.74±0.10)相比较明显降低,差异具统计学意义(P<0.05).结论:小鼠结肠癌CT26细胞PARP抑制町抑制肿瘤的生长及肝转移,可能与PAILP通过NF-κB调节MMP-2,MMP-9蛋白表达有关.     

PARP抑制与小鼠结肠癌CT26细胞生长活性的关系

目的:探讨PARP抑制与结肠癌CT26细胞生长活性的关系.方法:采用PARP抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-aminoisoquinolinone,5-AIQ)处理小鼠结肠癌CT26细胞,MTT法检测CT26细胞离体生长,免疫荧光双标、激光共聚焦检测结肠癌CT26细胞核内PARP与NF-кB p65的表达.结果:不同浓度的5-AIQ处理组(0.1mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L)结肠癌CT26细胞生长抑制率分别为17.52%、27.63%和39.93%,抑制率随5-AIQ浓度的增加而增加,差异具显著性(P<0.05).PARP与NF-кB p65在CT26细胞核内存在共表达,且呈正相关(P<0.05).5-AIQ处理组与5-AIQ未处理组相比,PARP与NF-кB p65的表达均减弱,差异具显著性(P<0.05),PARP与NF-кB p65亦呈正相关(P<0.05).结论:PARP抑制剂5-AIQ可以抑制结肠癌CT26细胞生长活性.其可能与PARP抑制,使NF-кB活性降低有关.PARP在结肠癌生长过程中可能具有重要作用.     

PARP抑制剂5-AIQ对CT26细胞侵袭及转移的影响

目的探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerases,PARPs]抑制剂5-氨基异喹啉酮[5-Aminoisoquinolinone.HCl,5-AIQ]对小鼠结肠腺癌CT26细胞基质黏附、运动、侵袭能力的影响。方法应用Westernblot检测5-AIQ对PARP表达的影响,细胞-基质黏附实验、细胞运动及侵袭实验观察5-AIQ抑制CT26细胞PARP后,其基质黏附、运动及侵袭能力的变化。结果5-AIQ处理组PARP表达明显弱于未处理组(P<0.05);黏附实验结果显示,与5-AIQ未处理组比较,5-AIQ100、500μmol/L处理组的吸光度值明显降低(P<0.01),其黏附抑制率分别是14.54%、21.69%;运动及侵袭实验中,5-AIQ500μmol/L处理组与未处理组的细胞数差别显著(P<0.05),其运动及侵袭抑制率分别是30.09%、37.47%。结论5-AIQ可抑制CT26细胞PARP的表达,并可降低CT26细胞基质黏附、运动及侵袭能力,5-AIQ在抗肿瘤侵袭转移中可能发挥作用。     

Effect of silencing PARG on proliferation and differentiation of local B220 + DEC205 + DC

目的:探讨聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶[ Poly( ADP-ribose) glycohydrolase,PARG]基因沉默对肿瘤局部B220+DEC205+DC增殖分化的影响及其在大肠癌转移中的作用.方法:以PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞为实验组,未转染CT26细胞和空载体CT26细胞为对照组,分别在小鼠脾包膜下接种形成肝转移模型;Western blot法检测脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达;免疫荧光双标法检测脾脏中B220+ DEC205+ DC的表达;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-10、TGF-β的表达.结果:PARG基因沉默后,脾脏移植瘤体积缩小,肝脏转移癌结节数目减少,差异有统计学意义(P＜0.05);脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达量明显较对照组降低,差异有统计学意义(P＜0.05);脾脏组织中的B220+DEC205+ DC较对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);血清中IL-10、TGF-β的表达较对照组显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:PARG基因沉默可抑制小鼠结肠癌CT26细胞肝转移,可能与PARG沉默后下调PARP,并下调NF-κB的活性,从而影响NF-κB依赖性因子IL-10、TGF-β的表达,进而影响B220+ DEC205+ DC的增殖分化有关.     

PARG基因沉默对肿瘤局部B220~+DEC205~+DC的影响

目的:探讨聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶[Poly(ADP-ribose)glycohydrolase,PARG]基因沉默对肿瘤局部B220+DEC205+DC增殖分化的影响及其在大肠癌转移中的作用。方法:以PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞为实验组,未转染CT26细胞和空载体CT26细胞为对照组,分别在小鼠脾包膜下接种形成肝转移模型;Western blot法检测脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达;免疫荧光双标法检测脾脏中B220+DEC205+DC的表达;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-10、TGF-β的表达。结果:PARG基因沉默后,脾脏移植瘤体积缩小,肝脏转移癌结节数目减少,差异有统计学意义(P<0.05);脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达量明显较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);脾脏组织中的B220+DEC205+DC较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);血清中IL-10、TGF-β的表达较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PARG基因沉默可抑制小鼠结肠癌CT26细胞肝转移,可能与PARG沉默后下调PARP,并下调NF-κB的活性,从而影响NF-κB依赖性因子IL-10、TGF-β的表达,进而影响B220+DEC205+DC的增殖分化有关。     

PARG基因沉默对肿瘤局部B220+ DEC205+ DC的影响

目的： 探讨聚（腺苷二磷酸核糖）水解酶［Poly(ADP-ribose)glycohydrolase,PARG］基因沉默对肿瘤局部B220+ DEC205+ DC增殖分化的影响及其在大肠癌转移中的作用。方法：以PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞为实验组,未转染CT26细胞和空载体CT26细胞为对照组,分别在小鼠脾包膜下接种形成肝转移模型;Western blot法检测脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达;免疫荧光双标法检测脾脏中B220+DEC205+DC的表达;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-10、TGF-β的表达。结果：PARG基因沉默后,脾脏移植瘤体积缩小,肝脏转移癌结节数目减少,差异有统计学意义(P<0.05);脾脏移植瘤中PARG、PARP、NF-κB蛋白的表达量明显较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);脾脏组织中的B220+ DEC205+ DC较对照组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;血清中IL-10、TGF-β的表达较对照组显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论： PARG基因沉默可抑制小鼠结肠癌CT26细胞肝转移,可能与PARG沉默后下调PARP,并下调NF-κB的活性,从而影响NF-κB依赖性因子IL-10、TGF-β的表达,进而影响B220+DEC205+DC的增殖分化有关。     

COX-2活化PI3K/Akt信号通路促结直肠癌肝转移的实验研究

目的:探讨COX-2促进结直肠癌肝转移效果及其机制,从而为结直肠癌肝转移防治提供依据。方法:建立COX-2低表达和高表达CT26结肠癌细胞株,通过注射0.2 m L的对数生长期细胞浓度为1×10~6个/mL的正常CT26结肠癌细胞悬液(A组,n=20)、COX-2高表达的CT26结肠癌细胞悬液(B组,n=20)以及COX-2低表达的结肠癌细胞悬液(C组,n=20)至脾脏制作小鼠结肠癌肝转移模型,检测比较三组小鼠移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt表达、移植瘤体积、肝脏肿瘤大小和数量以及生存期,并分析结直肠癌肝转移小鼠COX-2、PI3K、p-Akt表达的相互关系以及三者与其移植瘤体积、肝脏肿瘤大小和数量以及生存期的关系。结果:与A组比较,B组和C组移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt蛋白检测阳性率均升高,移植瘤体积降低,肝脏肿瘤大小和数量降低,生存期延长(P0.05)。与B组比较,C组移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt蛋白检测阳性率均升高,移植瘤体积降低,肝脏肿瘤大小和数量降低,生存期延长(P0.05)。Spearman相关分析结果显示,结直肠癌肝转移小鼠移植瘤COX-2蛋白表达与其PI3K、p-Akt蛋白表达呈正相关(P0.05),且其移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt与其移植瘤体积、肝脏肿瘤大小和数量均呈正相关(P0.05),与其生存期均呈负相关(P0.05)。结论:COX-2可促结直肠癌肝转移和影响其预后,在此过程中可能涉及其活化PI3K/Akt信号通路作用。     

PARG基因沉默对大肠癌CT26细胞移植瘤生长与转移的影响

 目的 探讨聚腺苷二磷酸核糖水解酶［poly (ADP ribose) glycohydrolase,PARG］基因沉默经AKT途径对大肠癌细胞肝转移的影响及其可能机制。方法 用未转染的CT26细胞、慢病毒空载体转染的CT26细胞和PARG shRNA慢病毒载体转染的CT26细胞接种至BALB/c小鼠脾包膜下,建立相应的肝转移模型,比较各组脾脏移植瘤及肝脏转移瘤结节的差异。进一步用Western blot法检测各组脾脏移植瘤PARG、聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶 1［poly (ADP ribose) polymerase 1,PARP 1］、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,即AKT)、P AKT473、核转录因子 κB p65(nuclear factor kappaB p65,NF κB p65)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF,即FGF 2)的表达。 结果 与对照组相比,PARG沉默组脾脏移植瘤体积较小(P＜0.05),肝转移瘤结节数量减少(P＜0.05);脾脏移植瘤的PARG、PARP 1、NF κB p65、VEGF、FGF 2蛋白表达显著减弱(P均＜0.05),P AKT473的表达明显增强(P＜0.05)。结论 CT26细胞系的PARG表达抑制后,可以抑制大肠癌CT26细胞移植瘤的生长与转移,这可能与PARG抑制使AKT磷酸化增强,从而降低了VEGF、FGF 2等血管生成相关因子的表达有关。     

半乳糖凝素-3在结肠癌肝转移中的表达及改良柑橘果胶对其抑制作用

目的 探讨半乳糖凝素-3(galectin-3,Gal-3)在小鼠结肠癌肝转移中的表达及改良柑橘果胶(MCP)对它的抑制作用.方法 75只Balb/c小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和低、中、高浓度MCP组.阳性对照组和各MCP治疗组小鼠经脾脏下极包膜注入CT26结肠癌细胞建立结肠癌肝转移模型.MCP加入饮用水,浓度分别为0、0、0.01、0.025、0.05mg/ml.3周后观察各组小鼠肝转移情况.采用ELISA方法检测小鼠血清Gal-3浓度;制作肝转移瘤组织芯片,用免疫组化方法检测肝转移瘤组织中Gal-3的表达.结果 (1)除阴性对照组外各组肝转移率分别为100%、80%、73.3%和60%.高浓度MCP组肝转移灶数目明显低于对照组(P＜0.05).(2)除阴性对照组外各组脾脏原发瘤体积中位数分别为1.51、0.93、0.77和0.70 cm3.高浓度MCP组肿瘤体积较对照组明显缩小(P＜0.05).(3)阳性对照组和各治疗组血荊al-3浓度均明显高于阴性对照组(P＜0.01);阳性对照组与各治疗组比较无明显差异(P＞0.05).(4)除阴性对照组外各组肝转移瘤组织中Gal-3表达相互间比较无明显差异(P＞0.05).结论 Gal-3在结肠癌肝转移中呈高水平表达,MCP能明显抑制结肠癌肝转移.     

大肠癌肝转移动物模型建立方法的改进及评价

目的 对鼠源大肠癌细胞肝转移动物模型的建立方法进行改良,为研究大肠癌肝转移机制及生物学行为提供稳定平台.方法 选取鼠大肠癌细胞株CT26经皮下传3代后制成细胞悬液与CT26细胞悬液分别接种于BALB/ c小鼠脾脏内,实验组为经皮下传3代后脾脏接种,对照组为CT26细胞悬液直接脾脏接种.5 min后切除脾脏.观察其成瘤情况、肝脏转移率、淋巴转移率、肺转移率及生存期,并对2种模型进行初步比较.结果 术后第12天实验组肝脏转移率(75.0%)高于对照组(28.6%)(P<0.05);术后第15天及21天后实验组肝脏转移率(93.7%、100.0%)也明显高于对照组(50.0%、66.7%)(P<0.05),但肺脏转移率及淋巴转移率(12.5%、25.0%;26.7% 、53.3%)与对照组(0、6.25%;0%、16.7%)相比无明显差异(P>0.05).实验组平均生存期为(23.56±3.17) d,对照组为(28.14±4.19) d.病理结果证实肝转移肿瘤符合典型的低分化腺癌特征.结论 CT26 细胞在免疫功能完整的BALB/c小鼠体内,仍具有良好的成瘤性和转移率,并且经传代后的悬液成瘤时间更短,转移率更高.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …