通用引物巢式PCR法对哈萨克族食管鳞癌HPV感染的检测

目的:应用通用引物巢式PCR技术检测新疆哈萨克族食管鳞癌人乳头瘤病毒(HPV)的感染率,并探讨HPV与新疆哈萨克族食管鳞癌的关系.方法:提取新疆哈萨克族食管鳞癌及正常食管组织的DNA,应用通用引物HPV MY09/11及HPV G5+/6+进行巢式PCR,检测新疆哈萨克族食管鳞癌中HPV的感染率.结果:巢式PCR法扩增后检测到食管鳞癌中HPV感染率为66.67%,正常对照组为12.12%,两者差异有统计学意义(P<0.05).结论:本实验结果表明HPV可能是新疆哈萨克族食管癌发生的一个重要病因学因素,结合通用引物巢式PCR法可以更加方便可靠的检测HPV-DNA.     

宫颈上皮内瘤变组织中高危型HPV DNA的检测及意义

目的探讨宫颈上皮内瘤变（CIN）患者高危型人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况。方法采用PCR技术检测CIN患者病变组织中高危型HPVDNA。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级CIN组织中HPVDNA检出率分别为53．85％、72．73％、96．97％,χ^2=25．762,P〈0．01。CIN患者存在多重HPV感染的情况,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级CIN多重HPVDNA感染率不同。结论不同级别CIN的高危型HPV感染率不同,同时存在多重感染的情况。     

高危型HPV检测在宫颈病变诊断中的价值

目的探讨高危型HPV检测在宫颈病变诊断中的价值。方法720例宫颈病变患者先进行HPV DNA的杂交捕获法二代（HPV—HCⅡ）和液基细胞学（TCT）的检测,其中224例因细胞学异常（意义未明的非典型鳞状细胞以及以上的病变）行阴道镜下活检。结果720例患者HPV阳性者264例（36．7％）,阴性者456例（63．3％）。HPV阳性组患者年龄（37．77&#177;8．48）岁,HPV阴性组年龄（39．25&#177;8．83）岁,两组比较P〈0．05。224例细胞学异常患者HPV感染率分别为炎症和复鳞上皮乳头瘤样增生64．9％（61／94）、宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ82．8％（24／29）、CINⅡ89．7％（26／29）、CINⅢ93．5％（58／62）、浸润癌100％（10／10）,随病理级别的升高HPV感染率显著升高（P〈0．05）。57例细胞学检测为ASC-US的患者中宫颈高度病变（≥CINⅡ）检出率为24．6％（14／57）,HPV阳性组检出率为33．3％（12／36）,阴性组为9．5％（2／21）,两组比较,P〈0．05,阴性组无浸润癌和CINⅢ的检出。87例细胞学为LSIL的患者中宫颈高度病变检出率为34．5％（30／87）,HPV阳性组检出率为39．5％（30／76）,阴性组为0,两组比较P〈0．01,阴性组无高度病变的检出。结论高危型HPV检测可以明显提高宫颈高度病变在细胞学为ASC-US及LSIL中的检出率。     

宫颈上皮内瘤变与高危型HPV感染的研究进展

宫颈上皮内瘤变(CIN)是与子宫颈癌密切相关的一组宫颈病变,高危型人乳头瘤病毒(HRHPV)感染是CIN的发病原因之一,因此有关HR-HPV的研究对于CIN的早期诊断、治疗以及评估治疗疗效有重要的意义。该文就CIN与HR-HPV感染的研究进展进行综述。     

新型Cervista酶切信号扩大法检测高危型HPV用于宫颈癌筛查结果分析

目的：评价新型Cervista酶切信号扩大法检测高危型人乳头瘤病毒（ HR-HPV） DNA在宫颈癌筛查中的作用。方法采用液基薄层细胞学检查（TCT）对3206例妇女行宫颈脱落细胞学检测分级,并用Cervista 技术检测HR-HPV;对其中95例经活检证实的宫颈上皮内病变以上级别者的HR-HPV检测结果进行分析。评价宫颈病变级别与HR-HPV感染的相关性。结果未见上皮内病变细胞或恶性细胞（ NILM）、不能明确意义的非典型鳞状细胞（ASC-US）、非典型鳞状细胞不能除外高级别上皮内病变（ASC-H）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）和高级别鳞状上皮内病变（HISL）者HR-HPV感染率分别为17．95％、56．99％、70．00％、76．75％和96．55％（P＜0．05）,HR-HPV A9组构成比均为最高。宫颈活检证实的LSIL、HISL 和鳞状细胞癌者HR-HPV 感染率分别为72．72％、90．00％和100．00％（P＜0．05）,HR-HPV A9组构成比均为最高。结论随细胞学和病理组织学病变分级升高,HR-HPV感染率逐渐上升,A9组感染率最高,说明HSIL和鳞状细胞癌与HR-HPV感染关系最密切,A9组HR-HPV感染是引起宫颈病变的最主要因素。 TCT联合Cervista技术检测 HR-HPV可作为宫颈癌普查和ASC-US分流筛检的有效方法。     

南京地区2387例有性生活女性的宫颈脱落细胞高危 HPV 检测分析

目的：观察南京地区妇女宫颈高危型人乳头瘤病毒（ HR-HPV）感染情况。方法采用4800 HR-HPV技术检测2387例有性生活女性的宫颈脱落细胞,进行HPV基因型检测,计算HR-HPV感染的阳性率和年龄段的关系及亚型感染分布特点。结果 HR-HPV阳性者446例,阳性率18．68％, HPV16感染105例（4．40％）,HPV18感染25例（1．05％）,其他12种高危型感染316例（13．24％）。20～29岁、30～39岁、40～49岁、50～59岁、≥60岁年龄段 HR-HPV 的感染率分别为17．25％（113/655）、22．67％（182/803）、15．59％（94/603）、19．58％（47/240）、11．6％（10/86）,各年龄组的HPV阳性检出率比较P＜0．05。446例HR-HPV感染的女性中, HPV16在20～29岁感染率最高,为5．34％;HPV18在50～59岁感染率最高,为2．08％;其他12种HR-HPV在30～39岁感染率最高,为16．44％。结论南京地区HR-HPV感染率较高,感染高峰在30～39岁和50～59岁,以HPV 16、18型为主。     

用核酸荧光定量PCR技术检测尖锐湿疣HPV的研究

对５０例病理诊断为尖锐湿疣（ＣＡ）的标本进行了核酸荧光定量ＰＣＲ检测,检出率为９６％。结果表明：核酸荧光定量ＰＣＲ可一次性完成对尖锐湿疣ＨＰＶ感染的检测,检测覆盖面宽,漏检率低,对尖锐湿疣的诊断有较好的应用价值。     

应用广谱引物PCR法检测立克次体的研究

本文选用普氏立克次体柠檬酸合成酶基因做为靶序列合成一对引物（ＲＰＣＳ８７７ｐ和ＲＰＣＳ１２５８ｎ）。用该对引物对不同种类立克次体（包括：加拿大；普氏；莫氏；Ｑ热；恙虫病Ｇｉｌｌｉａｍ株、Ｋａｔｏ株、Ｋａｒｐ株；澳大利亚；立氏；康氏；小蛛；西伯利亚２４６、西伯利亚２３２；精河；内０１；内Ｗ８８；黑８４；黑０５４）及大肠杆菌ＨＢ１０１，ＤＮＡ进行扩增。同时，选用三种不同方法处理模板进行扩增结果的比较。结果表明：该引物可扩增除恙虫病以外的所有立克次体，而大肠杆菌、λＤＮＡ不能被扩增。采用简单煮沸法处理模板，对含立克次体的材料进行扩增是可行的。     

尖锐湿疣患者合并宫颈高危型HPV感染的光动力治疗

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力(ALA-PDT)治疗女性外阴尖锐湿疣合并宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的有效性和安全性。方法将入组的合并宫颈HR-HPV感染患者,随机分为ALA-PDT治疗组和无治疗的对照组(年龄和性别相匹配)。治疗组给予20%ALA凝胶外敷于宫颈3小时后进行635nm红光照射,每周治疗1次,共计2次,治疗结束后随访3个月。对照组无任何治疗,直接进入3个月随访期。两组患者均在初诊及第3个月时,应用宫颈脱落细胞杂交捕获二代法(HC-Ⅱ)检测HR-HPV,比较两组的检测结果和不良反应情况。采用SPSS 17.0软件对实验结果进行统计学分析。结果入组的合并宫颈HR-HPV感染患者77人,治疗组38人,对照组39人。治疗结束后,治疗组HC-Ⅱ检测发现25人(65.8%)HR-HPV转阴,对照组仅4人(10.3%)转阴,治疗组转阴率明显高于对照组(χ2=25.282,P0.001)。治疗组中的不良反应包括:轻度到中度的疼痛、水肿、糜烂,没有发生治疗部位的感染、溃疡、瘢痕和畸形。结论 ALA-PDT是一种相对安全、有效的治疗宫颈HRHPV感染的方法。     

高危型HPV阳性患者解脲支原体感染与宫颈癌发生的相关性

目的 探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)阳性患者解脲支原体(UU)感染与宫颈癌发生的相关性.方法 采用PCR-荧光探针法检测HR-HPV阳性的58宫颈癌(宫颈癌组)、64例宫颈上皮内瘤变(CIN组)、60例体检健康者(对照组)宫颈脱落细胞UU感染及负荷量情况.结果 宫颈癌组UU阳性41例(70.68％),CIN组为64例(78.12％),对照组为25例(41.67％);宫颈癌组、CIN组与对照组比较,P均＜0.05;宫颈癌组、CIN组比较,P＞0.05.宫颈癌组UU DNA＞ 106 copies/g 27例(65.85％),CIN组为34例(68.00％),对照组为6例(24.00％);宫颈癌组、CIN组与对照组比较,P均＜0.05;宫颈癌组、CIN组比较,P＞0.05.结论 在HR-HPV阳性的情况下,UU感染可能与宫颈癌的发生相关.     

高危型人乳头瘤病毒感染率及亚型分布与宫颈病变程度的相关性分析

目的 探讨妇女高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染率及亚型分布与宫颈病变程度的相关性.方法 回顾性分析2018年1月至2019年12月绍兴市3 307例妇女细胞学检查和HPV筛查结果.细胞学检查采用液基薄层细胞检测(TCT),HPV筛查采用聚合酶链式反应(PCR)-反向点杂交法,采用SPSS 18.0软件进行统计学分...     

年轻宫颈癌患者癌组织HPV16检测结果分析

采用PCR技术对31例年龄≤35岁的宫颈癌患者（年轻组）和54例年龄〉35岁的宫颈癌患者（对照组）的癌组织进行人乳头瘤病毒（HPV）16检测。结果显示,年轻组HPV16阳性者17例（54.8％）,对照组阳性者13例（24.1％）,两组相比,P〈0．05。提示宫颈癌发病年轻化与HPV16感染有关。     

高危型人乳头瘤病毒E7 mRNA与喉病变的关系

目的检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)E7 mRNA表达量并分析其与喉病变的关系。方法经临床明确诊断的喉癌50例、喉癌前病变22例、声带息肉16例共计88例患者,分为喉癌组、病变组、息肉组,分别进行HPV DNA检测及HPV mRNA反转录实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测。结果各组均有HPV-16及HPV-18型特异的E6、E7阳性表达。喉癌组HPV-16和HPV-18的E6及E7的相对表达量均明显高于病变组和息肉组(P<0.05);喉癌组HPV-16和HPV-18的E6及E7检出率明显高于病变组和息肉组(P<0.05);喉癌组HPV mRNA拷贝数明显高于病变组和息肉组(P<0.05),HPV mRNA的表达水平随喉病变的发展而提高。结论 HPV mRNA的表达率随喉病变的发展而增加,其表达量也随之增强,其表达水平与喉病变发展具有一定相关性。检测HPV E7 mRNA可以为喉癌的预防、发展监测提供重要的临床指导。     

60例高危型HPV感染藏族妇女阴道菌群分析

目的 分析60例高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染藏族妇女阴道菌群变化。方法 选择藏族妇女209例,根据高危型HPV检测结果分为宫颈高危型HPV阳性60例（观察组）、宫颈高危型HPV阴性149例（对照组）。收集宫颈口及宫颈管脱落的上皮细胞,行宫颈液基细胞学（TCT）检查,对宫颈病变进行细胞学分类诊断。采集并提取阴道分泌物DNA,使用带Barcode的特异引物806R和338F进行高效、高保真PCR扩增,构建DNA文库,利用Illumina MiSeq测序技术对PCR扩增产物进行测序;采用Uparse软件进行物种分类,以Mothur方法进行物种注释,采用Alpha多样性分析阴道菌群多样性（Chao指数）和丰富度（Shannon指数）;按照rRNA基因数据库进行门与属水平的物种分类,计算菌群相对丰度;采用线性判别分析效应量软件分析组间相对丰度比较有统计学差异的菌群。采集阴道分泌物,离心留取上清液,采用ELISA法检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α。结果 对照组TCT检查未见宫颈病变,观察组存在11种高危型HPV亚型,TCT检查均存在宫颈病变,其中无明确诊断意义的不典型鳞状...     

人乳头瘤病毒基因分型检测在绝经后妇女HPV感染中的应用价值

目前筛查是预防和控制宫颈癌的主要手段.随着人乳头瘤病毒(HPV)-DNA检查的普及,年轻患者已逐步实现早期发现,早期治疗[1].本研究对绝经期妇女进行脱落细胞学及人乳头瘤病毒基因型别进行分析,探讨绝经期妇女HPV感染情况及与宫颈病变的相关性.     

安徽省铜陵地区195例宫颈癌患者宫颈癌组织15种高危人乳头瘤病毒基因检测分析

目的 分析安徽省铜陵地区195例宫颈癌（CC）患者宫颈癌组织15种高危人乳头瘤病毒（HR-HPV）的基因检测结果。方法 选取2020年2月—2022年12月铜陵市人民医院就诊并经病理科确诊的195例CC患者的宫颈癌石蜡组织标本,采用磁珠法提取石蜡切片中的DNA,用基因扩增芯片技术对其进行15种HR-HPV基因分型的检测,并分析亚型、模式及年龄分布。结果 195例CC患者中,感染HR-HPV 186例（阳性率95.38%）,其中单一感染率为41.40%、混合感染率为58.60%;164例颈鳞状细胞癌患者中,单一感染率和混合感染率分别为43.40%、56.60%;24例宫颈腺癌患者中,单一感染率和混合感染率分别为27.27%、77.27%;7例宫颈未分化癌患者中,单一感染率和混合感染率分别为40.00%、60.00%。186例感染HR-HPV的CC患者中,感染亚型位于前四位的分别是HPV16、HPV18、HPV66、HPV39,单一感染率分别为34.94%、9.30%、2.78%、5.88%,混合感染率分别为65.06%、90.70%、97.22%、94.12%。CC患者年龄均>25...     

HPV16地方分离株E6基因的克隆与原核表达研究

目的克隆人乳头瘤病毒（HPV16E6）基因并在大肠埃希菌中表达，对表达产物进行鉴定。方法用PCR方法从克隆质粒pUC19-HPV16E6E7中扩增HPV16E6基因，采用定向克隆构建pQE30-HPV16E6原核表达质粒．利用酶切和序列测定鉴定重组质粒。将pQE30-HPV16E6转化大肠埃希菌BL21（DE3），建立重组工程菌pQE30-HPV16E6／BL21（DE3）。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，SDS—PAGE分析蛋白表达情况，利用Western blot鉴定抗原特异性。结果PCR产物470bp，重组质粒经酶切和序列测定证实构建正确。SDS—PAGE分析在18×10^3处有蛋白条带出现，与预期一致。Western blot分析证实目的条带与HPV16E6抗体有特异性反应。结论成功构建了HPV16E6基因的基因工程菌株，能高效表达E6蛋白，表达蛋白具有良好的免疫反应性。     

携带HPV11型基因组细胞三维培养模型的建立及其衣壳蛋白L1的表达

目的用携带人乳头瘤病毒11型(HPV11)基因组的角质形成细胞(HPV11.HaCaT细胞),在体外建立皮肤类似培养物三维模型,观察HPV11衣壳蛋白L1是否表达,为进一步建立体外病毒复制系统和药效筛选模型奠定基础。方法用人成纤维细胞和I型鼠尾胶原制备真皮类似物凝胶,接种HPV11.HaCaT细胞进行三维培养。同时以正常HaCaT细胞作对照。15天时取皮肤类似物进行冰冻切片,HE染色进行组织结构检查,免疫组化法检查角蛋白10、泛角蛋白以及HPV11L1蛋白表达。结果HE染色显示,HPV11.HaCaT细胞和正常HaCaT细胞的层数明显增多。免疫组化显示,两种细胞的皮肤类似物角蛋白10、泛角蛋白表达全部阳性。HPV11.HaCaT细胞表达L1蛋白阳性,而正常HaCaT表达L1蛋白阴性。结论三维培养方式可诱导HPV11.HaCaT细胞分化,皮肤类似培养物出现细胞分化标志,并且表达HPV11型衣壳蛋白L1。     

中国部分HIV高危人群HPV感染现状及影响因素的Meta分析

目的了解我国男男性行为人群（MSM）和女性性工作者（FSW）人乳头瘤病毒（HPV）的感染特征及影响因素。方法通过互联网检索Pubmed、中国知网、万方等数据库,收集在我国MSM和FSW人群中开展的HPV研究,采用Meta分析的方法计算合并HPV感染率。结果分别有6篇关于MSM和FSW人群HPV感染情况的文献纳入分析。1956名MSM的HPV感染率为59.2%[95%可信区间（CI）：46.2%-70.7%],高危型HPV感染率为38.6%（95%CI：22.7%-48.4%）;749名感染HIV的MSM的HPV感染率为65.6%（95%CI：54.4%-92.5%）,高危型HPV感染率为46.6%（95%CI：35.0%-70.0%）。1797名FSW人群的HPV感染率为42.8%（95%CI：30.2%-53.3%）,高危型HPV感染率为33.5%（95%CI：24.6%-42.7%）。结论我国部分HIV感染高危人群的HPV感染率较高,成为严重的公共卫生隐患,亟须在MSM和FSW这两类HIV高危人群中开展艾滋病干预,并在过程中普及HPV知识,以期降低HPV的疾病负担。     

病灶组织HPV、PCNA和nm23检测在宫颈癌分型中的价值

目的 探讨病灶组织人乳头瘤病毒(HPV)、增殖细胞核抗原(PCNA)和nm23检测用于宫颈癌分型的应用研究.方法 用免疫组织化学法对正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织、宫颈腺癌组织和其他宫颈癌分别检测HPV、PCNA和nm23阳性表达率.结果 HPV在宫颈癌患者阳性表达率达90％以上;PCNA在宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率达80％以上,明显与正常宫颈组织、腺癌和其他宫颈癌有明显差异(P＜0.05);nm23在宫颈癌组织中的阳性表达率明显比正常宫颈组织低,该差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 HPV检测数据可用于确诊患者是否患有宫颈癌,而PC-NA检测数据可用于确诊是否患有宫颈癌常见的类型鳞状细胞癌,nm23检测数据则可作为宫颈组织恶变的信号.