人胎儿外周血T淋巴细胞表型分析

应用单克隆抗体，采用间接免疫荧光法对计划生育引产的16～32周胎龄胎儿之外周血T淋巴细胞表型进行测定并与成人外周血相比较，结果显示：①16～32周胎儿外用血中cd3+细胞、cd4+细胞和cd8+细胞明显低于成人外周血，cd4+细胞与CD8+之和明显高于CD3+细胞比率，③16～20周胎儿CD8+细胞明显高于CD4+细胞，CD4+细胞／CD8+细胞比值少于1，20～32周胎儿之CD4+细胞与CD8+细胞比率比较接近，CD4+细胞／CD8+细胞比值约为1，与胎龄无明显相关，④16～32周胎儿外周血T淋巴细胞表达高比率的cd38抗原。同时本文并对T淋巴细胞发育的有关问题进行了讨论。     

人外周血T淋巴细胞集落（TL—CFU）培养的研究

本文报道用ＰＨＡ作为刺激物，采用简化的一步法在甲基纤维素培养基上培养人外周血Ｔ淋巴细胞集落（ＴＬ－ＣＦＵ）获得成功，并对ＴＬ－ＣＦＵ培养的适宜条件进行了探讨；同时，对集落组成细胞进行了Ｔ淋巴细胞表型分析；在此适宜条件下，对健康成人外周血ＴＬ－ＣＦＵ产率进行了测定。结果显示：（１）培养体系中ＰＨＡ２ｕｌ／ｍｌ、２０％小牛血清（ＦＣＳ）、５×１０＾－５Ｍ２－巯基乙醇、０．８％甲基纤维素、６０％ＲＰＭＩ     

人外周血T淋巴细胞集落(TL—CFU)培养的研究

本文报道用PHA作为刺激物，采用简化的一步法在甲基纤维素培养基上培养人外周血T淋巴细胞集落（TL一CFU）获得成功，并对TL一CFU培养的适宜条件进行了探讨；同时，对集落组成细胞进行了T淋巴细胞表型分析；在此适宜条件下，对健康成人外周血TL—CFU产率进行了测定。结果显示：（1）培养体系中PHA2ul／ml、20％小牛血清（FCS）、5×10（－5）M2一巯基乙醇、0．8％甲基纤维素、60％RPMI1640、2×105MNC／ml、培养时间七天为TL—CFU培养的适宜条件；（2）集落组成细胞中CD3+细胞占92．5±4．59％、CD4+、CD8+细胞分别为57．83±7．85％及46．66±4．76％、CD4／CD8之比为1．24±0．17；（3）健康成人外周血TL一CFU产率为351．58±21.97／2×105MN。基于上述结果认为，该培养方法操作简便、集落产率高，为研究T淋巴细胞及其亚群提供了条件。     

再生障碍性贫血患儿外周血淋巴细胞表型分析

目的　探讨再生障碍性贫血 (再障 )患儿外周血淋巴细胞表型的变化 ,了解其在发病中的作用及临床意义。方法　将 1 1 5名确诊为再障的患儿取外周血作淋巴细胞表型分析并与正常组比较。结果　再障组CD4 % ,CD8 % ,CD4/CD8分别为 2 9.53± 8.94,34 .2 5± 1 0 .38,0 .96± 0 .53 ,对照组为 35 .2 5± 5 .1 6 ,2 5 .0 8± 4 .34 ,1 .48± 0 .46 ,两者比较有显著差异 (P <0 .0 0 5) ,而重型再障的细胞表型CD4/CD8、γδT细胞百分率、HLA DR %则更高于慢性再障 ,两者有显著差异。CD3 %两组分别为 69.53± 2 4 .35和 69.98± 5 .79,两者比较无显著差异 (P <0 .0 5)。结论　再障患儿存在严重的免疫异常 ,且与疾病严重程度呈正相关 ,临床可行免疫抑制治疗。     

慢性扁桃腺炎患儿T淋巴细胞表型及功能分析

目的　探讨慢性扁桃腺炎患儿T淋巴细胞表型和功能障碍情况,为分析其病因和发病机制提供临 床和理论依据。方法　采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测了27例慢性扁桃腺炎患儿和21例健康儿童外 周血T细胞亚群、B细胞及NK细胞的表面标记和T细胞活化后表面分子(CD3+/HLA DR+T和CD3+/CD25+)的 表达;同时采用ELISA方法检测了患儿和对照组血清中Th1型细胞因子IL 2和IFN γ的水平。结果　与对照组比 较,慢性扁桃腺炎患儿CD4+T细胞和CD3+/HLA DR+T活化细胞的阳性率显著降低(28.6%±4.4%vs25.4% ±4.5%,P<0.05;5.7%±1.9%vs3.9%±1.6%,P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(1.17±0.30vs0.92± 0.18,P<0.01);但患儿CD3+T细胞、CD8+T细胞和CD3+/CD25+阳性的T细胞与对照组比较差异均无显著意 义。患儿CD19+B细胞阳性率、与Th1细胞功能有关的IL 2和IFN γ表达水平也较对照组显著降低(P<0.05或 P<0.05);而两组CD3 /CD(16+56)+NK细胞的阳性率无显著差异。结论　慢性扁桃腺炎患儿存在CD4+T细 胞减少,T细胞活化障碍,Th1细胞功能异常及B细胞减少,这可能是患儿反复感染和病程迁延的主要原因之一。     

急性B淋巴细胞性白血病患儿外周血T淋巴细胞克隆谱系分析

目的　观察儿童急性B淋巴细胞性白血病化疗前后T淋巴细胞克隆谱系的异常。方法　逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)及高压变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测 8例正常对照组小儿及 12例急性B淋巴细胞性白血病患儿化疗前外周血T细胞受体 (TCR) β链可变区 (BV)第三互补决定区(CDR3)的克隆谱系 ,4例患儿化疗后重新取材。结果　 (1) 12例患儿化疗前BV2和BV3表达较正常对照组增高 (P均 <0 0 5 ) ,BV17和BV18表达降低 (P均 <0 0 5 )。 4例患儿治疗前BV2 1家族低表达 ,缓解后表达进一步降低 (P <0 0 5 )。 (2 )正常对照组TCRBV多数家族CDR3谱型为正态分布 ,12例患儿TCRBVCDR3谱型异常发生率为 14 % ,高于正常对照组的 5 5 % (P <0 0 5 ) ,发生谱型异常较多的家族依次是BV14、BV1、BV16、BV2 0、BV13 1、BV13 2和BV6。 4例患儿第 1次化疗缓解后 3个月谱型异常的家族均恢复正态分布。结论　急性B淋巴细胞性白血病患儿部分T细胞克隆发生异常增生或缺失 ,提示白血病患儿细胞免疫功能异常 ,化疗初次缓解后 3个月T细胞克隆谱系基本恢复正常的正态分布 ,已基本完成T细胞克隆谱系的重建     

小儿支气管哮喘外周血T淋巴细胞周期动力学的探讨

本研究对哮喘发作期患儿20名、缓解期患儿20名及对照者18名,采用姐妹染色单体互换(SCE)技术,测定植物血凝素(PHA)诱导的T淋巴细胞增殖指数(PRI),并就增殖指数与年龄作相关分析,以探讨其意义。结果表明:哮喘发作组PRI(2.056±0.293)显著低于缓解组(2.264±0.234)和对照组(2.250±0.274),P<0.05,后两组间差别不显著(P>0.05);三组PRI与年龄无直线相关。研究提示:哮喘发作时,外周血经PHA诱导的T淋巴细胞增殖周期延长。     

人脐血T、B淋巴细胞和NK细胞的免疫学表达特性

目的 探讨人脐血T、B淋巴细胞和NK细胞，以及T／NK细胞杀伤性抑制性受体（KIR）表达的免疫学特性及其意义。方法 应用流式细胞仪检测26例正常新生儿脐血的T、B淋巴细胞和NK细胞抗原标记，包括CD45RA、CD45RO、CD69、CD25、CD40L、CD40、CD10、CD20和CD16等抗原的表达，以及脐血T／NK细胞上KIR分子（CD158a和CD158b抗原）的表达，并与正常儿童外周血比较。结果 脐血T淋巴细胞中CD45RA^ 细胞表达高于外周血（P＜0．01），CD45RO^ 则明显低于外周血（P＜0．01）；脐血T细胞CD69表达极低；CD25在CD8^ 细胞亚群中几乎不表达；CD40L在脐血T细胞中表达低于外周血（P＜0．05）。脐血B淋巴细胞中不成熟亚群CD10^ ／CD19^ 比例增高，成熟B细胞表型CD19、CD20、CD40等抗原均明显高于正常外周血（P＜0．01）。脐血中T淋巴细胞和NK细胞均存在KIR分子表达；脐血和外周血中T淋巴细胞CD158分子表达低于NK细胞（P＜0．01），脐血T淋巴细胞亚群中CD158分子表达低于正常外周血；CD158几乎不表达于CD4^ T细胞，主要表达于CD8^ T细胞，且以CD158a^ 为主；脐血中NK细胞CD158分子表达高于T淋巴细胞（P＜0．05），但明显低于外周血NK细胞KIR的表达（P＜0．01）。结论 脐血T淋巴细胞包括原始和早期T细胞以及T细胞受体表达障碍，导致脐血T淋巴细胞免疫功能不成熟，可能是脐血移植（UCBT）后移植物抗宿主病（GVHD）发生率低和程度轻的重要原因之一。脐血B淋巴细胞免疫应答障碍可能缘于T淋巴细胞表型或功能的障碍。脐血T／NK细胞KIR的表达特性提示，KIR可能与UCBT中GVHD和移植物抗白血病（GVL）效应有关。     

T型急性淋巴细胞白血病患儿的免疫表型分析

目的　应用流式细胞术分析 17例儿童T型急性淋巴细胞白血病 (T ALL)的免疫表型特点。方法　用三色荧光标记法置于流式细胞仪检测 17例T ALL ,并随机抽取B ALL 17例进行比较分析。结果　T ALL占急性淋巴细胞白血病 13% ,其髓系抗原表达占 2 3.5 % ,B系抗原表达占 4 1.0 % ;CD2表达率显著低于CD5、CD7、cyCD3(P <0 .0 0 1) ;在CD45散点图中 ,T ALL幼稚细胞群在CD45(y轴 )均值明显高于B ALL(P <0 .0 5 )。结论　T ALL时CD5、CD7、cyCD3特异性高 ;在CD4 5 vsSSC散点图中T ALL分布特性亦不同于B ALL。     

T淋巴细胞单克隆抗体治疗小儿再生障碍性贫血的疗效与细胞免？…

为了探讨抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体（简称单抗、ＳＭＵ３、ＳＭＵ８）治疗小儿再生障碍性贫血（ＡＡ）的关系，我科１９９３年１１月至１９９６年６月对３８例再障患儿进行了Ｔ细胞亚群测定，并在应用单抗治疗前后与病情转化进行对照。结果表明：患儿Ｔ细胞亚群比值失衡，主要表现为Ｔ４细胞减少，Ｔ８细胞增多，Ｔ４／Ｔ８比值倒置。患者Ｔ细胞处于激活状态。外周ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达明显高于正常。单抗治疗近期有效率为７１．１０     

支气管哮喘患儿外周血自然杀伤T淋巴细胞的变化及临床意义

目的 探讨支气管哮喘(哮喘)患儿外周血自然杀伤T淋巴细胞(NKT细胞)数量及体外扩增活化后产生细胞因子水平的变化.方法 选取2009年2月至2012年3月在上海交通大学医学院附属仁济医院儿科门诊确诊的哮喘患儿52例(哮喘组),其中轻度间歇26例,轻度持续14例,中度持续12例.另选20例体检健康儿童作为健康对照组.收集所有研究对象外周静脉血标本,采用密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞,应用免疫荧光标记和流式细胞术检测哮喘组和健康对照组儿童外周血NKT细胞和CD4+ NKT细胞的比例,观察NKT细胞和CD4+ NKT细胞与过敏指标总IgE、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)的相关性.经α-半乳糖神经鞘胺醇扩增培养活化后用ELISA法检测外周血细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10水平.比较哮喘组和健康对照组之间的差异.结果 哮喘组患儿的NKT细胞和CD4+ NKT细胞比例均较健康对照组显著下降(P均＜0.01);在不同病情哮喘患儿中,NKT细胞和CD4+ NKT细胞的比例无明显变化(P＞0.05).NKT细胞、CD4+NKT细胞的比例与总IgE、ECP均无明显相关性(P均＞0.05).扩增培养活化后,哮喘组患儿NKT细胞分泌的IL-4水平较健康对照组明显升高(P＜0.01),IL-10水平显著下降(P＜0.01),而IFN-γ水平与健康对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论 哮喘发病可能与NKT细胞和CD4+ NKT细胞数量的低下及功能严重失调相关.     

抗T淋巴细胞单克隆抗体治疗小儿再生障碍性贫血与细胞免疫关系的研究

为了探讨抗T淋巴细胞单克隆抗体（简称单抗、SMU3、SMU8）治疗小儿再生障碍性贫血（以下简称再障AA）的关系，本研究对20例再障患儿进行了T细胞亚群测定，并在应用单抗治疗前后与病情转化进行对照。结果表明：患儿T细胞亚群比值失衡，主要表现为T4细胞减少，T8细胞增多，T4／T8比值倒置，患者T8细胞处于激活状态。外周HLA－DR抗原的表达明显高于正常。单抗治疗有效率为68．5％，有效组病儿细胞免疫功能紊乱得到纠正。治疗有效以后病情恶化，T细胞亚群又紊乱。     

T淋巴细胞单克隆抗体治疗小儿再生障碍性贫血的疗效与细胞免疫关系的研究

为了探讨抗T淋巴细胞单克隆抗体（简称单抗、SMU3、SMU8）治疗小儿再生障碍性贫血（AA）的关系，我科1993年11月至1996年6月对38例再障患儿进行了T细胞亚群测定，并在应用单抗治疗前后与病情转化进行对照。结果表明：患儿T细胞亚群比值失衡，主要表现为T4细胞减少，T8细胞增多，T4／T8比值倒置。患者T细胞处于激活状态。外周HLA－DR抗原的表达明显高于正常。单抗治疗近期有效率为71．10％。有效病儿细胞免疫功能紊乱得纠正。治疗有效后病情又恶化，T细胞亚群又紊乱。     

儿童单纯性肾病外周血T淋巴细胞亚群变化：附50例报告

本文应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）酶免疫染色法检测了５０例单纯性肾病患儿外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化，并与健康儿童对照。结果显示：肾病发作期患儿ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８值明显低于对照组（Ｐ〈０．０５）。缓解停药期患儿上述各值有所恢复，但未达正常水平。提示肾病发作期患儿免疫功能处于低下状态，病情缓解后恢复时间较长。     

食物过敏动物模型中辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2相关细胞因子变化

目的观察食物过敏动物模型辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2型细胞因子变化,探讨其在食物过敏发生中作用。方法选取110只Balb/c小鼠,用卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立食物过敏实验性小鼠模型,设立对照组及致敏组,进行食物过敏原皮肤点刺及小肠病理组织学检测,ELISA检测其血清特异性IgE、IL-4、IFN-γ水平,real-tim e PCR检测其小肠IL-10、TGF-βmRNA表达。结果致敏组小鼠IL-4水平较对照组升高、IFN-γ水平较对照组降低,均有统计学意义(Pa<0.05);其小肠IL-10、TGF-βmRNA表达较对照组降低,有统计学意义(Pa<0.05)。结论食物过敏是以Th2型淋巴细胞占优势的过敏性疾病;Th1/Th2细胞因子失平衡可能参与食物过敏发生,并可能在其中发挥重要作用。     

支气管哮喘患儿外周血自然杀伤T淋巴细胞的变化及临床意义北大核心CSCD

目的探讨支气管哮喘（哮喘）患儿外周血自然杀伤T淋巴细胞（NKT细胞）数量及体外扩增活化后产生细胞因子水平的变化。方法选取2009年2月至2012年3月在上海交通大学医学院附属仁济医院儿科门诊确诊的哮喘患儿52例（哮喘组）,其中轻度间歇26例,轻度持续14例,中度持续12例。另选20例体检健康儿童作为健康对照组。收集所有研究对象外周静脉血标本,采用密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞,应用免疫荧光标记和流式细胞术检测哮喘组和健康对照组儿童外周血NKT细胞和CD4＋NKT细胞的比例,观察NKT细胞和CIM＋NKT细胞与过敏指标总IgE、嗜酸性细胞阳离子蛋白（ECP）的相关性。经α-半乳糖神经鞘胺醇扩增培养活化后用ELISA法检测外周血细胞因子IFN-γ、IL4、IL-10水平。比较哮喘组和健康对照组之间的差异。结果哮喘组患儿的NKT细胞和CD4＋NKT细胞比例均较健康对照组显著下降（P均〈0．01）;在不同病情哮喘患儿中,NKT细胞和CD4＋NKT细胞的比例无明显变化（P〉0．05）。NKT细胞、CD4＋NKT细胞的比例与总IgE、ECP均无明显相关性（P均〉0．05）。扩增培养活化后,哮喘组患儿NKT细胞分泌的IL-4水平较健康对照组明显升高（P〈0．01）,IL-10水平显著下降（P〈0．01）,而IFN-γ水平与健康对照组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论哮喘发病可能与NKT细胞和CD4＋NKT细胞数量的低下及功能严重失调相关。     

急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平测定及临床意义

为探讨急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平及意义 ,采用流式细胞技术测定 90例急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平。结果 ,急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群中CD3+ 、CD4+ 、CD4+ CD8+ 均明显低于对照组水平 (P <0 0 1) ,CD8+ 高于对照组水平 (P <0 0 1) ,NK细胞 (CD1 6+ 56+ )明显低于对照组水平 (P <0 0 1) ,经治疗缓解者T淋巴细胞亚群和NK细胞达正常水平。结果表明 ,T淋巴细胞亚群和NK细胞可作为急性白血病辅助诊断指标 ,为临床治疗提供实验依据     

手足口病患儿外周血T细胞亚群分析

目的 探讨手足口病患儿细胞免疫功能的变化.方法 以1375例手足口病患儿和150例同期健康儿童为研究对象,手足口病患儿根据病情分为普通病例组、重症组、危重症组.采用流式细胞术进行CD3+T细胞(CD3+)、CD4+T细胞(CD3+ CD4+)、CD8+T细胞(CD3+ CD8+)的相对计数的检测,计算CD4+ T/CD8+T细胞比值,分析各组之间T细胞亚群水平差异.结果 病例组CD3 +T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞相对计数及CD4+ T/CD8+T细胞比值均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).危重症组CD3+T细胞相对计数为(55.98±12.15)％,显著低于普通病例组[(60.47±11.03)％]及重症组[(58.83±10.97)％],差异具有统计学意义(P＜0.05).～3岁年龄组患儿CD3+T细胞相对计数[(58.88±11.35)低于～6岁年龄组(62.27±9.95)％],差异具有统计学意义(P＜0.05).男性患儿CD8+T细胞[(23.61±13.27)％]高于女性患儿[(22.13±7.76)％],CD4+T/CD8+ T细胞比值(1.45±0.75)低于女性患儿(1.60±1.02),差异具有统计学意义(P＜0.05);病原学组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 重症手足口病患儿细胞免疫功能减低,随病情加重免疫功能下降明显.早期监测手足口病患儿T细胞亚群,结合年龄、性别之间的差异,对判断手足口病患儿病情及预后、指导重症手足口病治疗具有重要作用.