扎鲁司特对哮喘模型肺组织金属蛋白酶抑制剂1表达的影响

目的 观察白三烯受体拮抗剂扎鲁司特对肺组织组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）表达水平的影响。方法 108只健康雄性豚鼠随机分为3组：哮喘发作组（A组）,哮喘发作＋扎鲁司特治疗组（B组）,生理盐水对照组（C）组,每组36只。每组均分为24h和1、2、4、8、12周6个小组。免疫组化标记分析肺组织中TIMP-1表达水平。结果 C组肺组织中TIMP-1的表达无明显改变。卵蛋白激发后,A组TIMP-1的表达C组稍增高,但各个时期无明显差异。B组随时间的推移,TIMP-1的表达逐渐增加,8周起B组TIMP-1表达较A组、C组明显增多,激发后12周3组之间两两比较有显著性差异（P〈0．05）。结论 扎鲁司特可以增加哮喘豚鼠肺组织TIMP-1的表达水平,白三烯受体拮抗剂对预防和减轻哮喘气道重塑有积极意义。     

白三烯受体拮抗剂对哮喘模型肺组织VEGF表达水平的影响

目的　探讨白三烯受体拮抗剂对哮喘模型肺组织血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响及其对哮喘模型气道重塑的预防和治疗作用 ,提供哮喘防治新途径的可靠实验依据。方法　 10 8只健康雄性豚鼠随机分为 3组 :哮喘发作组、治疗组、对照组 ,每组 36只。以卵蛋白 (OVA)致敏和激发建立豚鼠哮喘模型。肺组织病理切片以SP法免疫组化标记VEGF ,图像分析VEGF表达水平。结果　OVA激发后 4周 ,哮喘发作组肺组织VEGF表达水平显著高于治疗组及对照组 (P <0 0 5 ) ,白三烯受体拮抗剂治疗哮喘使肺组织VEGF的表达水平降低。结论　白三烯受体拮抗剂可以降低哮喘豚鼠肺组织VEGF表达水平 ,从而减少血管增生 ,延缓哮喘气道重塑的发生。     

热休克蛋白70在哮喘小鼠气道炎症模型中的表达及意义

目的 观察哮喘小鼠肺组织中热休克蛋白70(HSP70)的表达及其在哮喘中的作用.方法 将32只BALB/c小鼠随机分为N(正常对照组)、A(急性哮喘组I)、B(急性哮喘组II)和C(慢性哮喘组)4组,每组8只;卵蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠模型;支气管肺泡灌洗液(BALF)分析和HE染色鉴定哮喘模型;免疫组化及Western blot法测定各组小鼠肺组织中HSP70的表达和定位.结果 哮喘组BALF嗜酸性粒细胞绝对计数及分类计数较N组皆有显著增高(P＜0.05),HE染色提示哮喘组与N组相比出现嗜酸性粒细胞浸润增多、纤毛脱失、平滑肌细胞层增厚等改变.HSP70在哮喘各组小鼠中主要定位在支气管上皮细胞、部分肺泡上皮细胞和炎症细胞中,而在N组中表达呈阴性结果;HSP70在哮喘组表达量较N组为高(P＜0.05),B组表达量显著高于A组(P＜0.05).结论 哮喘小鼠肺组织中HSP70主要表达于支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和炎症细胞中,参与哮喘发病.     

吸入性糖皮质激素及白三烯受体拮抗剂对哮喘小鼠肺组织IL-6表达的影响

目的 探讨白细胞介素6 (IL-6)在小鼠哮喘模型肺组织表达及吸入性糖皮质激素(ICS)、白三烯受体拮抗剂对其影响.方法 96只雄性Balb/c小鼠随机分为哮喘组、布地奈德组、孟鲁斯特组和对照组,每组24只.每组又分为第1周、第2周、第3周、第4周4个亚组,每亚组6只.免疫组化标记IL-6在肺组织的分布,Image-Pro Plus图像分析系统分析IL-6的灰度值.结果 成功制作哮喘小鼠模型.与对照组相比,哮喘组、布地奈德组、孟鲁斯特组IL-6表达在第1～4周时差异有统计学意义(P＜0.05);孟鲁斯特组IL-6表达在第3周时较布地奈德组增多(P＜0.05);哮喘组、布地奈德组、孟鲁斯特组在不同时间点组内差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-6参与哮喘气道炎症.布地奈德、孟鲁斯特可减少哮喘小鼠肺组织IL-6的表达,布地奈德作用优于孟鲁斯特.     

转录因子GATA-3靶向寡核苷酸“圈套”策略对哮喘小鼠的治疗作用

目的 探讨转录因子GATA-3靶向寡核苷酸(ODN)“圈套”策略对哮喘小鼠气道炎症的治疗作用.方法 32只小鼠随机均分为四组:正常对照(A)组、哮喘模型(B)组、“圈套”ODN治疗(C)组和变异“圈套”(D)组.通过气道给药的方式,将GATA-3靶向ODN及突变的ODN转染至哮喘小鼠肺部,应用流式细胞术检测哮喘小鼠脾CD4+T细胞白细胞介素(IL)4、γ干扰素(IFN-γ)水平,ELISA法检测肺组织IL-5、IL-13表达,Western blot法检测肺组织GATA-3蛋白表达,HE染色评价肺组织病理变化.结果 B组小鼠肺组织GATA-3蛋白表达、IL-5和IL-13水平均较A组增加(P＜0.01或P＜0.05);与B组相比,C组IL-4、IL-5及IL-13水平减少,IFN-γ/IL-4比值增高(P＜0.05),小鼠气道炎症明显减轻;而D组上述各指标与B组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 GATA-3靶向ODN“圈套”通过特异性阻断GATA-3活性,有效地抑制Th2型细胞因子的产生,从而减轻哮喘小鼠气道炎症反应.     

罗格列酮对哮喘小鼠气道重塑模型气道转化生长因子-1的影响

目的探讨过氧化物酶增殖活化受体激动剂对哮喘气道重塑模型气道转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法32只BALB/C小鼠随机分为对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、哮喘模型地塞米松干预组（C组）、哮喘模型罗格列酮干预组（D组）,每组8只。采用RT-PCR法测定肺组织TGF-β1的浓度,HE染色观察肺组织病理改变。结果C、D2组小鼠的TGF-β1表达、气道平滑肌（ASM）和上皮厚度明显低于B组差异有统计学意义（P〈0.05）,而高于A组差异有统计学意义（P〈0.05）。C、D2组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论过氧化物酶增殖活化受体激动剂可能通过抑制TGF-β1的表达,从而抑制平滑肌增生肥大,减少胶原沉积。     

阿魏酸钠对哮喘大鼠肺组织核因子-κB、抑制蛋白α和ICAM-1表达的影响

目的观察哮喘大鼠气道炎症、气道反应性及肺组织中核因子-κB(NF-κB)、抑制蛋白α(IκBα)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,探讨用阿魏酸钠干预后对其的影响及作用机制。方法18只健康雄性SPF级Wistar大鼠随机分为哮喘组(A组),阿魏酸钠干预组(Fe组)和正常对照组(C组),每组6只。A组和Fe组用卵清蛋白(OVA)致敏激发复制哮喘模型,Fe组每次激发前用阿魏酸钠干预,C组用生理盐水作为对照。测定哮喘大鼠的气道高反应性及支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞数量,免疫组化方法观察NF-κB、IκBα和ICAM-1在哮喘大鼠肺组织的表达。结果阿魏酸钠能降低哮喘大鼠的气道高反应,减少气道嗜酸性粒细胞的募集。A组支气管肺组织NF-κB[(38.03±2.89)%]和ICAM-1[(14.59±0.56)%]的蛋白表达显著高于对照C组[分别为(5.26±0.41)%,(1.89±0.26)%],IκBα蛋白的表达[(1.58±0.34)%]低于C组[(15.49±1.32)%],有统计学差异(P<0.01)。Fe组NF-κB[(18.65±2.25)%]和ICAM-1[(6.75±0.61)%]的蛋白表达与A组相比显著降低(P<0.01),IκBα[(5.58±0.27)%]则增高(P<0.01)。哮喘大鼠肺组织NF-κB与ICAM-1蛋白表达呈正相关(r=0.878,P=0.022),与IκBα呈负相关(r=-0.824,P=0.044)。结论阿魏酸钠能够抑制哮喘大鼠肺组织IκBα的降解和NF-κB的激活,进而抑制ICAM-1的表达,最终抑制气道炎症和气道高反应性。     

小鼠放射性肺损伤模型的建立与鉴定

目的 建立小鼠放射性肺损伤模型.方法 80只雌性C57BL/6小鼠随机分为四组:A、B和C三组每组24只小鼠,分别单次X线照射12、20和30 Gy;D组8只小鼠作为空白对照.照射后1、3d和1、2、4、8、16、24周8个时点取出肺组织,行HE、VG染色,观察肺纤维化形成,RT-PCR 测定肺组织转化生长因子(TGF)-β1的表达.结果 A、B、C组均出现典型放射性肺损伤及肺纤维化表现,随着照射剂量的增加,肺部病变加重,且肺部纤维化出现提前.与D组相比,A、B、C组8个时点肺组织TGF-β1含量均显著增高(P＜0.01).结论 成功建立了放射性肺损伤小鼠动物模型.     

舒利迭雾化吸入对哮喘小鼠气道炎症及气道重构的影响

目的 研究舒利迭雾化吸入对哮喘小鼠炎症及气道重构的影响.方法 将30只雄性小鼠随机分成卵白蛋自(OVA)致敏致哮喘组(A组)、舒利迭干预组(B组)、正常对照组(C组).用OVA进行致敏和激发,建立哮喘模型.收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)行白细胞和嗜酸粒细胞(EOS)计数,采用医学图像分析软件测定支气管各项指标;HE染色观察组织形态学变化.结果 正常对照组、哮喘组、舒利迭干预组的EOS分别是(0.54±0.16)、(6.82±0.5 7)、(3.19±0.66)×10<'5>/m1,A组气道壁炎性细胞计数、气道平滑肌面积、气道内壁面积均明显高于C组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),B组各项指标均明显低于A组,差异有统计学意义(P<0.01),B组与C组比较各项均有升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05).结论 舒利迭雾化吸入不仅可明显抑制哮喘小鼠的气道炎症反应,还可明显减轻气道重构的程度.     

麻芩消咳颗粒对烟熏所致慢性支气管炎小鼠的止咳作用

目的 探讨麻芩消咳颗粒对烟熏所致慢性支气管炎模型小鼠的止咳作用及其可能机制.方法 60只ICR小鼠建立慢性支气管炎模型后随机分为模型组(B组)、肺宁颗粒3.8 g/kg给药组(C组)以及不同剂量麻芩消咳颗粒0.75、1.50、3.00 g/kg给药组(D1、D2、D3组);另设12只小鼠为对照组(A组).记录小鼠咳嗽次数和潜伏期,采用ELISA法检测小鼠血清炎症因子含量,HE染色观察肺组织形态学变化,免疫组化检测肺组织Toll样受体4(TLR4)和NF-κB蛋白表达,Western blot法检测核因子相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达.结果 与B组相比,C、D1、D2、D3组小鼠咳嗽次数减少(P＜0.05或P＜0.01);C组和D3组小鼠咳嗽潜伏期较B组延长(P＜0.05).与A组相比,B组IL-1β和TNF-α含量以及TLR4、NF-κB、H01蛋白表达均增加,Nrf2蛋白表达降低(P＜0.01);而C、D1、D2、D3组给药后能有效逆转上述各指标的变化过程(P＜0.05或P＜0.01).结论 麻芩消咳颗粒对烟熏所致慢性支气管炎模型小鼠有良好的止咳作用,其机制可能与下调TLR4/NF-κB信号通路以及上调Nrf2/HO-1信号通路有关.     

牛蒡子苷元通过SIRT1/NLRP3途径减轻哮喘小鼠气道炎症

目的探讨牛蒡子苷元对哮喘小鼠模型中对气道炎症的疗效以及其机制是否与SIRT1/NLRP3信号通路有关。方法选取40只♀清洁级BALB/c小鼠,分为control组,OVA模型组,ATG组(5、10和20 mg·kg^-1)。HE及PAS染色法观察肺组织病理改变;Diff-Quick染色法对小鼠BALF中细胞分类及计数;流式细胞术测定小鼠肺组织中细胞因子在CD4阳性细胞群中的阳性比例;Western blot测定肺组织SIRT1、NLRP3、caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白表达;免疫荧光法检测小鼠肺组织中NLRP3荧光强度。结果牛蒡子苷元能抑制OVA诱导的炎症细胞的渗出及杯状细胞增生;牛蒡子苷元抑制小鼠肺泡灌洗液中总细胞数及NEU、EOS、LYM的生成,并升高肺组织中IFN-γ水平的同时降低IL-4的水平;Western blot结果显示,牛蒡子苷元增加SIRT1蛋白表达同时抑制NLRP3、caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白表达;免疫荧光结果显示,牛蒡子苷元可以减弱肺组织NLRP3的荧光强度。结论牛蒡子苷元通过SIRT1/NLRP3途径减轻哮喘小鼠气道炎症。     

甘草酸对慢性肾脏病大鼠心肌HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α信号通路的影响

目的 探讨应用甘草酸（Gly）治疗时对慢性肾脏病（CKD）大鼠心室肌高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子κB/缺氧诱导因子1α(HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α)信号通路的影响。方法 将38只Wistar大鼠按随机数字表法分为4组：假手术（Sham）组、Sham+Gly组、CKD组、CKD+Gly组，5/6肾切除制备CKD模型，Gly腹腔注射给药（80 mg/kg）。4周后行血流动力学及心脏彩超观察各组大鼠心脏功能；心室取血检测生化指标；心肌组织取材检测HMGB1、TLR4、NF-κB、HIF-1α蛋白表达的变化。结果 与Sham组相比，CKD组肌酐、尿酸、尿素氮和血清镁水平增高（P<0.05），血压升高，舒张期室间隔厚度、收缩期左心室内径增加，左心室射血分数降低，E/A比值降低，肺动脉血流加速时间延长（P<0.05）;HE染色可见心肌细胞肥大，Masson染色见心肌纤维化程度增加（P<0.05），心肌组织HMGB1、NF-κB、HIF-1α蛋白表达水平上调（P<0.05）。与CKD组相比，CKD+Gly组收缩期室间隔厚度增加，左心室射血分...     

血红素氧合酶-1对哮喘小鼠模型IL-25和MUC5AC表达的影响

摘要：目的　探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对哮喘小鼠气道炎症的调节作用及其机制。方法　将28只健康雌性Balb/c小鼠根据随机数字表法分为4组：对照组、哮喘组、血晶素组、福多司坦组,每组7只。哮喘组、血晶素组和福多司坦组小鼠于第1天和第14天腹腔注射20 μg卵清蛋白（OVA）+500 μg Al（OH）3+0.2 mL PBS致敏,于第25~28天每天雾化吸入1次OVA激发气道高反应制备小鼠哮喘模型,对照组以等量生理盐水替代,血晶素组致敏前1、2 d,致敏后12、13、23、24、27 d腹腔注射血晶素75 μmol/kg,福多司坦组分别于致敏前25、26、27 d灌胃给药福多司坦（200 mg/kg）,末次激发后24 h内处死小鼠并收集血液、肺组织。HE染色观察肺组织形态学改变,免疫组化检测肺组织黏蛋白5AC（MUC5AC）的表达,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺组织中MUC5AC和血清中白细胞介素（IL）-25的水平,并对MUC5AC和IL-25进行相关性分析。结果　哮喘组肺组织可见大量炎症细胞浸润、气管黏膜增厚、黏膜下水肿,血晶素组和福多司坦组可见少量炎症细胞浸润及渗出,病理改变较哮喘组轻。与对照组相比,哮喘组、血晶素组、福多司坦组MUC5AC和IL-25的表达水平明显升高（P＜0.05）;与哮喘组相比,血晶素组和福多司坦组MUC5AC和IL-25降低（P＜0.05）,且血晶素组较福多司坦组降低更明显（P＜0.05）。MUC5AC与IL-25的表达水平呈正相关（r=0.932,P＜0.01）。结论　HO-1可下调哮喘小鼠MUC5AC和IL-25的表达,减轻气道炎症和黏液高分泌。     

糖皮质激素对哮喘大鼠血单个核细胞及肺组织ICAM-1表达的影响

目的　探讨细胞间粘附分子 1(ICAM 1)在哮喘气道炎症粘附机制中的作用及糖皮质激素对哮喘大鼠血单个核细胞及肺组织ICAM 1表达的影响。方法　将SD大鼠随机分成哮喘组、地塞米松治疗组和正常对照组 ,采用免疫细胞化学和免疫组织化学研究各组大鼠血单个核细胞和肺组织ICAM 1表达情况。结果　 (1)ICAM 1主要表达在肺小血管、毛细血管内皮细胞、支气管、肺泡上皮细胞、粘膜下基底膜及浸润的炎细胞上 ,哮喘组大鼠肺组织ICAM 1表达显著高于地塞米松治疗组和正常对照组 (P <0 0 5 )。 (2 )地塞米松组大鼠单个核细胞ICAM 1表达较哮喘组减轻 (P <0 0 5 )。 (3)治疗组大鼠肺组织和气管炎症反应以及气道反应性较哮喘组减轻。结论　证实了I CAM 1在哮喘炎性反应中的作用 ,地塞米松抑制ICAM 1表达。     

FTY-720通过TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路对小鼠肺纤维化模型的影响

目的探讨FTY-720对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法将40只无特定病原体级健康雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、博来霉素组、生理盐水+FTY-720对照组、博来霉素+FTY-720组,每组各5只,在7天、14天处死小鼠,共8组。应用HE染色和Masson染色观察肺组织炎症及肺纤维化情况;通过瑞士-吉姆萨染色计数支气管肺泡灌洗液细胞;BCA法测定BALF蛋白含量;ELISA方法检测BALF上清液中炎症因子IL-1β、TNF-α的表达水平;免疫组织化学法检测肺组织中COL1A1的表达水平;Western blot方法检测TGF-β1、p-P38 MAPK和NF-κB表达水平的变化。结果FTY-720显著降低BLM诱导增加的小鼠肺组织细胞外胶原沉积;减少小鼠肺组织BALF中IL-1β和TNF-α表达水平,和蛋白质含量、细胞数;FTY-720抑制TGF-β1活性与P38 MAPK的磷酸化,进而抑制NF-κB的表达与活化。结论FTY-720通过抑制TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路,进而抑制博来霉素诱导小鼠的肺纤维化。     

雷公藤对豚鼠哮喘模型核因子-κB表达的作用

目的　探讨雷公藤对核因子 κB(NF κB)在豚鼠哮喘模型中表达的影响。方法　豚鼠用 10 %卵白蛋白 (OA)溶液1ml腹腔注射致敏 ,2wk后用 1%OA溶液超声雾化吸入致其哮喘发作 ,每日 1次 ,共 1wk ;测定肺功能并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润情况 ;用免疫组织化学染色方法观察NF κB在豚鼠肺组织中的表达变化。结果　NF κB主要表达在气道壁内的细胞 ,对照组、模型组、雷公藤内酯醇 ( 10 0mg·kg-1ip)组的胞核阳性的细胞数占气道上皮细胞数百分比分别为 14 3 %± 2 6%、3 2 5 %± 5 8%和 19 7%±2 1%。结论　雷公藤内酯醇能显著抑制哮喘豚鼠气道壁内细胞NF κB的表达 ,可能是雷公藤治疗哮喘的作用机制之一。     

ERK1/2通路在哮喘大鼠的表达和作用

目的：探讨哮喘大鼠肺组织中磷酸化的ERK1/2（p-ERK1/2）的表达情况，以及其与肺组织炎性评分之间的相关性。方法清洁级雄性SD大鼠20只，随机分为正常对照组和哮喘组，每组10只。 HE染色，半定量评定大鼠肺组织炎症程度；用免疫组织化学染色法观察p-ERK1/2在哮喘大鼠肺组织的表达。结果哮喘组大鼠肺组织炎性评分及p-ERK1/2表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01），p-ERK1/2主要表达于气道周围，两者呈显著正相关（r=0.779，P＜0.01）。结论哮喘大鼠的肺组织 p-ERK1/2表达水平显著增加，提示p-ERK1/2可能参与了哮喘的发病过程，且与肺部炎症有一定关系。     

钩藤碱固体脂质纳米粒对哮喘小鼠miR-155/p38 MAPK轴的影响

目的　观察钩藤碱固体脂质纳米粒（Rhy-SLN）对支气管哮喘模型小鼠微小RNA-155（miR-155）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）轴的影响。方法　15只BALB/c小鼠随机均分为正常对照组、模型组和Rhy-SLN组。Rhy-SLN组小鼠行鼻内氢氧化铝致敏操作前以Rhy-SLN（50 mg/kg）灌胃;正常对照组和模型组给予等量生理盐水。干预结束后,肺泡灌洗液涂片观察嗜酸粒细胞的数量;HE染色观察小鼠肺组织病理改变情况;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测小鼠免疫球蛋白E（IgE）、白细胞介素（IL）-13水平;羟脯氨酸测试盒检测小鼠肺组织中羟脯氨酸水平;Werstern blot检测小鼠肺组织（α-SMA）、胶原蛋白Ⅰ（collagen Ⅰ）、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平;荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测小鼠肺组织miR-155 mRNA表达水平。结果　与模型组比较,Rhy-SLN组可以降低哮喘小鼠肺泡灌洗液中嗜酸粒细胞的数目、血清中IgE和肺泡灌洗液中IL-13的水平（P＜0.05）;减轻肺组织炎性细胞浸润;降低肺组织中α-SMA、collagenⅠ、羟脯氨酸和p-p38 MAPK的表达（P＜0.05）;上调小鼠肺组织中miR-155的表达水平（P＜0.05）。结论　Rhy-SLN可缓解小鼠哮喘,其机制可能与调节miR-155/p38 MAPK轴,降低气道的炎症反应有关。