冬凌草甲素对MCF-7细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用的实验研究

目的探讨冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MCF-7细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的MCF-7细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用Hoechst 33258荧光染色法以及流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果冬凌草甲素可显著抑制MCF-7细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,并呈现出一定的剂量-效应与时间-效应关系。Hoechst 33258荧光染色观察到典型的核浓缩、核碎裂等细胞凋亡的形态学变化。结论冬凌草甲素能显著抑制MCF-7细胞的生长,诱导细胞发生凋亡是其重要作用方式。     

异硫氰酸苯乙酯对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用及机制研究

目的探讨异硫氰酸苯乙酯诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法以不同浓度异硫氰酸苯乙酯处理人乳腺癌MCF-7细胞,应用MTS法观察异硫氰酸苯乙酯对MCF-7细胞的抑制率,流式细胞术检测异硫氰酸苯乙酯对细胞凋亡、细胞周期以及活性氧表达的影响。结果将不同浓度的异硫氰酸苯乙酯作用于MCF-7细胞72h后,抑制了MCF-7细胞的增殖,其IC50为15.2μmol.L-1;以10和20μmol.L-1的异硫氰酸苯乙酯作用MCF-7细胞24h后,细胞出现凋亡现象,细胞周期阻滞在G2/M期,并造成细胞氧化损伤。结论异硫氰酸苯乙酯能够促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,影响细胞周期,其作用机制可能与异硫氰酸苯乙酯可造成肿瘤细胞氧化损伤有关。     

冬凌草甲素抑制人胃腺癌细胞生长和诱导凋亡作用研究

目的:研究冬凌草甲素对人胃腺癌BGC-823细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT、透射电镜、流式细胞仪等方法对经冬凌草甲素体外作用的BGC-823细胞进行观察和检测。结果:16、32、64μg·mL-1冬凌草甲素能显著抑制BGC-823细胞的生长,并呈浓度-时间依赖性。64μg·mL-1的冬凌草甲素作用24、48、72h的抑制率分别为68·5%、90·8%、94·7%。32μg·mL-1冬凌草甲素作用2h后,电镜下BGC-823细胞的线粒体和内质网增殖肿胀;作用8h后,线粒体和内质网空泡化,内部结构消失,细胞核染色质边集呈凋亡的典型改变;作用24h后,流式细胞仪检测BGC-823细胞G2/M期阻滞,凋亡率为37·8%。结论:冬凌草甲素对人胃腺癌BGC-823细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用,生长抑制可能与G2/M细胞周期阻滞有关,诱导凋亡可能通过线粒体和(或)内质网途径起作用。     

桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显徽镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法(ICC)检测细胞增殖、凋亡相关调控蛋白的表达。结果:桃儿七根醇提物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg．L~(-1)桃儿七根醇提物作用72h后,细胞生长抑制率分别为43．0%,54．9%,78．5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现桃儿七根醇提物阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G_2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性。免疫细胞化学结果显示,2mg·L~(-1)桃儿七根醇提物作用48h后,PCNA,Bcl-2蛋白表达较对照组显著下降;而p21~(WAFI-CIP1)和c-Myc蛋白显著增加(P＜0．01)。结论:桃儿七根醇提物可能通过增加p21~(WAFI-CIP1)蛋白表达及降低PCNA蛋白表达而抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并可能下调Bcl-2蛋白表达和上调c-Myc蛋白表达来促进MCF-7细胞凋亡。     

Desmosdumotin-CB环衍生物抑制MCF-7细胞增殖及其作用机制研究

目的 研究desmosdumotin-C（Des-C）B环对位氟修饰衍生物TPP对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测质量浓度为1.0、2.5、5.0、10.0、20.0 μg/mL的TPP作用48 h后,对MCF-7细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测20.0 μg/mL TPP作用0、24、48 h诱导MCF-7细胞的凋亡程度;流式细胞术检测20.0 μg/mL TPP作用0、24、48 h对MCF-7细胞中NF-κB P65阳性细胞表达率的影响。结果 作用48 h后,2.5、5.0、10.0、20.0 μg/mL的TPP对MCF-7细胞增殖均有显著抑制作用,且抑制率随着浓度的升高而增大;20 μg/mL TPP作用24、48 h均可诱导细胞凋亡;作用48 h后,20 μg/mL TPP可显著减少MCF-7中NF-κB P65阳性细胞率。结论 TPP显著抑制MCF-7细胞增殖,诱导MCF-7细胞凋亡,作用机制可能与下调NF-κB表达有关。     

冬凌草甲素对胰腺癌SW1990细胞的抑制作用及机制

目的探讨冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法以10、20、40μmol/L不同浓度冬凌草甲素(Ori)作用于胰腺癌SW1990细胞,采用CCK-8检测胰腺癌SW1990细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况;RT-PCR法检测Survivin、p21基因mRNA表达水平。结果不同浓度的Ori作用于胰腺癌SW1990细胞1、2、3 d后,胰腺癌SW1990细胞增殖抑制程度不等,药物浓度越高,抑制程度越高,两者间具有明显剂量与时间依赖性。0、10、20、40μmol/L的冬凌草甲素作用于胰腺癌SW1990细胞24 h后,凋亡率分别为0.87%±0.65%、1.85%±1.02%、5.38%±0.15%和16.60%±0.50%,出现明显的G2/M期周期阻滞。与对照组相比,10、20、40μmol/L的Ori作用于SW1990细胞24 h后,p21 mRNA表达增加,而Survivin mRNA表达下降。结论冬凌草甲素通过诱导凋亡和G2/M期周期阻滞来实现对胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用,其机制可能与Survivin和p21调节信号有关。     

丙戊酸钠对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及其量效关系研究

目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对乳腺癌细胞系MCF-7的增殖抑制作用及其量效关系。方法:MCF-7细胞用0.75～4.0mmol·L-1VPA处理48h,同时设不加药对照组。MTT法分析细胞生长抑制、AnnexinⅤ/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡、碘化丙啶法观察细胞增殖周期的变化。结果:与对照组比较,VPA组细胞生长抑制率由17%～54%递增,细胞凋亡率中位数分别为8.32%、9.6%、11.8%、13.7%、16.6%,与对照组比较均有不同程度的增加;细胞增殖周期分析可见对照组顺序出现G1、S、M期,而VPA组随药物浓度的升高而出现逐渐递增的G1期阻滞。结论:VPA可明显抑制MCF-7的生长,诱导凋亡和细胞周期G1期阻滞作用,且呈剂量依赖趋势,在乳腺癌治疗方面有重要价值。     

丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用

目的 初步研究丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用.方法 常规培养乳腺癌细胞MCF-7至对数生长期,观察用丁酸钠处理后细胞生长速度、倍增时间、克隆形成率、细胞周期分布和细胞凋亡的变化.结果 与MCF-7亲本细胞相比,用丁酸钠处理的MCF-7细胞:①生长速度减慢.倍增时间延长(MCF-7亲本细胞、2.5mmol/L、5mmol/L和10mmol/L丁酸钠处理的MCF-7细胞倍增时间分别为29.9h、62.3h、164.2h和301.0h,P<0.05);②克隆形成率显著降低(MCF-7亲本细胞和丁酸钠(5mmol/L)处理24h的MCF-7细胞平均克隆形成率分别为72%和16.7%,P<0.05);③出现明显的G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例显著减少(P<0.05);④凋亡细胞数量明显增加(P<0.05);⑤出现明显的DNA"梯子"样断裂变化.结论 初步揭示了丁酸钠可以逆转乳腺癌细胞MCF-7的恶性生物学行为,其该作用可能与诱导MCF-7细胞凋亡有关,为丁酸钠在乳腺癌治疗中应用的可能性提供了初步的理论和实验依据.     

ERK抑制剂U0126通过下调cyclin D1与survivin蛋白表达抑制乳腺癌细胞增殖

目的研究ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其调控机制。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB231,将细胞分组干预,MTT法检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡; Western blot检测细胞中p-ERK/ERK、cyclin D1、survivin及cleaved caspase-3蛋白表达。结果MTT结果显示,U0126干预24、48 h后,MCF-7、MDA-MB231细胞抑制率明显增加(P <0. 01); MCF-7、MDA-MB231细胞经U0126干预24 h后,检测细胞周期及细胞凋亡,G_0/G_1期细胞比例较对照组明显增加,S及G_2期细胞比例下降(P <0. 05);而干预组细胞凋亡率较未干预组明显增多(P <0. 01); U0126处理人乳腺癌细胞2 h后,可阻断ERK的磷酸化,减少cyclin D1的蛋白表达,抑制survivin而上调cleaved caspase-3的表达,与对照组相比差异有显著性(P <0. 01)。结论 U0126通过阻断MCF-7、MDA-MB231细胞中ERK信号通路,调控cyclin D1,将细胞周期阻断在G_0/G_1期,抑制survivin而增加cleaved caspase-3表达,增加细胞凋亡,继而使乳腺癌细胞MDA-MB231、MCF-7的增殖受到抑制。     

天花粉对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的研究天花粉对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞以30,60,90,120μg·m L^-1的天花粉蛋白处理,作为实验组,对照组用等量的0.9%Na Cl处理,继续培养24,48,72h。观察并比较各组细胞形态学及细胞核凋亡形态学变化,以噻唑蓝(MTT)比色法检测各组人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制情况,分光光度法检测天花粉蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞胱天蛋白酶(caspase)-3和caspase-8表达的影响。结果实验组人乳腺癌MCF-7细胞呈现明显的细胞凋亡及核凋亡现象,且随天花粉蛋白质量浓度的增加,其细胞核凋亡现象越明显;干预24 h后,30,60,90,120μg·mL^-1实验组增殖抑制率分别为(1.61±0.94)%,(2.81±1.01)%,(7.05±1.03)%和(9.59±1.12)%;干预48 h后增殖抑制率分别为(2.13±1.01)%,(6.14±1.12)%,(9.05±1.09)%和(19.60±1.15)%;干预72 h后增殖抑制率分别为(3.28±1.07)%,(7.18±1.51)%,(18.39±1.81)%和(29.59±1.63)%。实验组人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制率随作用时间的延长及天花粉蛋白质量浓度的增大而逐渐升高(均P<0.01);90μg·m L^-1实验组24,48,72 h caspase-3分别为1.49±0.15,2.36±0.25,2.15±0.23;caspase-8分别为1.94±0.26,1.56±0.19,1.39±0.20。对照组人乳腺癌MCF-7细胞caspase-3及caspase-8随作用时间的延长无显著变化(均P>0.05),而90μg·mL^-1实验组caspase-3先升高后降低(P<0.05或P<0.01),以48 h时最高;caspase-8则逐渐降低(P<0.01);且各时间点90μg·m L^-1实验组caspase-3及caspase-8均显著高于对照组(均P<0.01)。结论天花粉蛋白可有效促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,抑制其增殖,且增殖抑制作用呈时间-剂量依赖性,其作用机制可能与上调人乳腺癌MCF-7细胞caspase-3及caspase-8表达相关。